學必求其心得，業必貴于專精學必求其心得，業必貴于專精學必求其心得，業必貴于專精課后集訓基礎達標1.不屬于目的基因與運載體結合過程的是(）A。用一定的限制酶切割質粒露出黏性末端B.用同種限制酶切割目的基因露出黏性末端C。將切下的目的基因的片段插入到質粒切口處D.將重組DNA導入受體細胞中進行擴增解析:在基因工程操作步驟中，“將重組DNA導入受體細胞”是“將目的基因與運載體結合”之后的一個步驟。答案:D2.下列黏性末端屬于同一種限制酶切割而成的是……（）A。①②B.①③C.①④D.②③解析：①③末端堿基序列是相同的。答案：B3。用“鳥槍法”提取目的基因的步驟為（）①用特定的限制酶切取特定的DNA片段②用限制酶將供體細胞DNA切成許多片段③將許多DNA片段分別載入運載體④選取目的基因片段載入運載體⑤通過運載體分別轉入不同的受體細胞⑥讓供體DNA片段在受體細胞內大量繁殖⑦找出帶有目的基因的細胞，并分離出目的基因A.①②③④⑤⑥⑦B.①③④⑤⑥⑦C。②③⑤⑥⑦D。②④⑤⑥⑦解析:鳥槍法是取得人們所需要的特定基因,直接分離酶的基因。答案：C4.基因工程常用的受體細胞有（)①大腸桿菌②枯草桿菌③支原體④動植物細胞A.①②③④B。①②③C。②③④D.①②④解析：將目的基因導入受體細胞，主要是借鑒細菌或病毒侵染細胞的方法。受體細胞可以是菌類，也可以是動植物細胞。答案：D5.實施基因工程第一步的第一種方法是把所需的基因從供體細胞內分離出來，這要利用限制性內切酶.從大腸桿菌中提取的一種限制性內切酶EcoRI，能識別DNA分子中的GAATTC序列,切點在G與A之間。這是應用了酶的（）A。高效性B。專一性C.多樣性D。催化活性受外界條件影響解析：這種酶只能識別DNA分子中的GAATTC序列，體現了酶的專一性。答案:B6.在人類染色體DNA不表達的堿基對中,有一部分是串聯重復的短序列，它們在個體之間具有顯著的差異性，這種短序列可用于(）A。生產基因工程藥物B。偵查罪犯C。遺傳病的產前診斷D.基因治療解析：注意它們在個體之間具有顯著的差異性。答案:B7。下列基因工程操作的步驟中未發生堿基互補配對的是（）A。用“鳥槍法"分離出抗蟲基因B.將人的胰島素基因與大腸桿菌質粒DNA分子結合,形成重組DNA分子C。將重組質粒導入受體細胞D.抗蟲基因在棉花體內表達的過程解析：在基因工程中涉及堿基互補配對的過程有目的基因的提取，重組DNA分子的形成過程和目的基因的表達,只有將重組DNA分子導入到受體細胞的過程不涉及堿基配對。答案:C8.兩種來源不同的DNA分子重組需（）A.用兩種限制酶分別切割B.用同一種限制酶切割C。兩者配對后直接連接D。只用連接酶連接解析:用同一種限制性內切酶切割兩種來源不同的DNA分子，從而使其黏性末端相同。答案：B9.科學家將含人的α抗胰蛋白酶基因的DNA片段，注射到羊的受精卵中,該受精卵發育成的羊能分泌含α抗胰蛋白酶的奶.這一過程涉及(）①DNA按照堿基互補配對原則自我復制②DNA以其一條鏈為模板合成RNA③RNA以自身為模板自我復制④按照RNA密碼子的排列順序合成蛋白質A.①②B。③④C。①②③D.①②④解析：此項研究遵循的原理是：無RNA的自我復制。答案:D10.切取某動物合成生長激素的基因，用某方法將此基因轉移到鲇魚的受精卵中，從而使鲇魚比同類個體大了3～4倍，此項研究遵循的原理是（）A。基因突變DNA→RNA→蛋白質B。基因工程DNA→RNA→蛋白質C.細胞工程D。基因工程解析：此項工程屬于基因工程。轉基因進入鲇魚體內通過DNA復制、RNA轉錄、翻譯并合成蛋白質，表現出了一定的性狀.答案：D11.下列哪種情況說明目的基因完成了表達（)A。棉株中含有抗蟲基因B.大腸桿菌中具有胰島素基因C.土豆含有抗病毒的基因D。從酵母菌中提取到了干擾素解析：干擾素是干擾素基因表達的產物。答案：C12。以下關于生物變異的敘述，正確的是（)A.基因突變都會遺傳給后代B。染色體變異產生的后代都是不育的C。基因堿基序列發生改變，不一定導致性狀改變D.基因重組只發生在生殖細胞形成過程中解析:選項A，基因突變能否遺傳給后代主要看突變發生在什么細胞，體細胞基因突變不能遺傳給后代；選項B，明顯不對；選項D，基因工程技術也可導致基因重組；選項C，基因堿基序列改變不一定導致性狀改變.答案:C13。獲取真核生物目的基因常用的方法是（）A.散彈射擊法B。DNA擴增技術C。人工合成基因的方法D。用限制性內切酶切割DNA片段解析：真核生物的基因含有不表達的DNA片段，不能直接用于基因的擴增和表達,因此在獲取真核細胞的目的基因時,一般用人工合成的方法。散彈射擊法優點是操作簡單，缺點是工作量大，具有一定的盲目性，不利于真核細胞基因的獲取。DNA擴增技術是已獲取的目的基因在受體細胞中大量復制的過程，以獲得含有目的基因的細胞，用散彈射擊法獲取目的基因的“子彈”是DNA限制性內切酶.這種方法一般適用于真核細胞目的基因的獲取.答案：C14。下圖表示限制酶切割某DNA分子的過程，從圖中可知,該限制酶能識別的堿基序列及切點是…（）A.CTTAAG，切點在C和T之間B。CTTAAG,切點在G和A之間C.GAATTC，切點在G和A之間D。GAATTC，切點在C和T之間解析：由題意知該限制酶識別的核苷酸序列是GAATTC，專一切口是G和A.切出的兩個完全相同的黏性末端是AATT和AATT，兩個黏性末端的關系是堿基互補配對。答案：C綜合運用15.如下圖是將人的生長激素基因導入細菌B細胞內制造“工程菌”的示意圖，所用載體為質粒A。已知細菌B細胞內不含質粒A，也不含質粒A上的基因，質粒A導入細菌B后，其上的基因能得到表達。請完成下列問題：（1）人工合成目的基因的途徑一般有哪兩條？(2)如何將目的基因和質粒結合成重組質粒(重組DNA分子）？（3)目前把重組質粒導入細菌細胞時，效率還不高,導入完成后得到的細菌，實際上有的根本沒有導入質粒，有的導入的是普通質粒A，只有少數導入的是重組質粒。以下步驟可鑒別得到的細菌是否導入了質粒A或重組質粒：將得到的細菌涂布在一個含有氨芐青霉素的培養基上，能夠生長的就導入了質粒A或重組質粒；反之則沒有。使用這種方法鑒別的原因是__________________________________.（4)若把通過鑒定證明導入了普通質粒A或重組質粒的細菌放在含有四環素的培養基上培養，會發生的現象是__________________________________，原因是__________________________________。（5）導入細菌B細胞中的目的基因成功表達的標志是什么?解析：此題是對基因操作“四步曲”比較全面的考查，而且注意聯系實際。(1)人工合成目的基因的兩條途徑是：①將從細胞中提取分離出的目的基因作為模板,轉錄成mRNA單鏈DNA雙鏈DNA；②根據蛋白質中氨基酸序列mRNA中堿基序列DNA堿基序列目的基因。（2）將目的基因和質粒結合形成重組質粒的過程是：①用一定的限制酶切割質粒，使其出現一個有黏性末端的切口;②用同種限制酶切割目的基因,產生相同的黏性末端;③將切下的目的基因片段插入到質粒的切口處，再加入適量的DNA連接酶,使質粒與目的基因結合成重組質粒.（3）檢測質粒或重組質粒是否導入受體細胞，均需利用質粒上某些標記基因的特性，即對已經做了導入處理的本身無相應特性的受體細胞進行檢測，根據受體細胞是否具有相應的特性來確定；抗氨芐青霉素基因在質粒A和重組質粒上都有，且它與目的基因是否插入無關，所以，用含氨芐青霉素的選擇培養基培養經質粒處理的受體細胞，凡能生長的表明有質粒導入；不能生長的則無質粒導入。（4)抗四環素基因在質粒A上，而且它的位置正是目的基因插入之處。因此當目的基因插入質粒A形成重組質粒,此處的抗四環素基因的結構和功能就會被破壞，含重組質粒的受體細胞就不能在含四環素的培養基上生長，而質粒A上無目的基因插入，四環素基因結構是完整的，這種受體細胞就能在含四環素的培養基上生長。(5)基因成功表達的標志是受體細胞通過轉錄、翻譯合成相應的蛋白質,即人的生長激素。答案：(1）人工合成目的基因的兩條途徑是：①將從細胞中提取分離出的目的基因作為模板，轉錄成mRNA單鏈DNA雙鏈DNA；②根據蛋白質中氨基酸序列mRNA中堿基序列DNA堿基序列目的基因。(2）將目的基因和質粒結合形成重組質粒的過程是:①用一定的限制酶切割質粒，使其出現一個有黏性末端的切口；②用同種限制酶切割目的基因，產生相同的黏性末端；③將切下的目的基因片段插入到質粒的切口處，再加入適量的DNA連接酶，使質粒與目的基因結合成重組質粒。(3)普通質粒A和重組質粒都含有抗氨芐青霉素基因(4)有的能生長,有的不能生長導入普通質粒A的細菌能生長，因為普通質粒A上有抗四環素基因；導入重組質粒的細菌不能生長，因為目的基因插在抗四環素基因中，抗四環素基因的結構被破壞（5)基因成功表達的標志是受體細胞通過轉錄、翻譯合成相應的蛋白質，即人的生長激素.16。在植物基因工程中，用土壤農桿菌中的Ti質粒作為運載體，把目的基因重組入Ti質粒上的TDNA片段中,再將重組的TDNA插入植物細胞的染色體DNA中。（1）科學家在進行上述基因操作時，要用同一種__________分別切割質粒和目的基因，質粒的黏性末端與目的基因DNA片段的黏性末端就可通過__________而黏合。(2）將攜帶抗除草劑基因的重組Ti質粒導入二倍體油菜細胞，經培養、篩選獲得一株有抗除草劑特性的轉基因植株。經分析,該植株含有一個攜帶目的基因的TDNA片段，因此可以把它看作是雜合子。理論上,在該轉基因植株自交F1代中，仍具有抗除草劑特性的植株占總數的__________，原因是________________________________________.（3）種植上述轉基因油菜，它所攜帶的目的基因可以通過花粉傳遞給近緣物種,造成“基因污染”.如果把目的基因導入葉綠體DNA中，就可以避免“基因污染”，原因是______________________________。解析：本題考查基因工程與分離定律。（1）同一種限制性內切酶能在相應基因上切出相同的黏性末端,再通過堿基互補配對而黏合.（2）該性狀是顯性性狀,母本又是雜合子，因此在自交后代中,具有抗除草劑特性的植株占總數的3/4，這是因為減數分裂形成生殖細胞時，產生兩種雌雄配子且雌雄配子隨機結合。（3）葉綠體遺傳是細胞質遺傳,其特點之一是母系遺傳,目的基因不會通過花粉傳遞而在下一代中顯現出來。答案：（1)限制性內切酶堿基互補配對（2)3/4雌雄配子各有1/2含抗除草劑基因;受精時,雌雄配子隨機結合（3）葉綠體遺傳表現為母系遺傳，目的基因不會通過花粉傳遞而在下一代顯現出來探究創新17。根據下面的實驗原理和材料用具，設計實驗選擇運載體——質粒,探究質粒所含的抗菌素基因的類別。實驗原理：作為運載體的質粒,須有標記基因,這一標記基因是抗菌素抗性基因。故凡有抗菌素抗性基因的細菌，其質粒才可能用作運載體。材料用具：青霉素、四環素的10萬單位溶液、菌種試管、滅菌的含細菌培養基的培養皿、酒精燈、接種環、一次性注射器、蒸餾水、恒溫箱.方法步驟:第一步:取三個含細菌培養基的培養皿并分別標注1、2、3號，在酒精燈旁，用三支注射器，分別注入1mL蒸餾水、青霉素、四環素溶液，并使之分布在整個培養基表面。第二步:將接種環__________，并在