PAGE15-整合訓練(十七)生物技術實踐[全員必做題]1．[2024·重慶南開中學考試]焦化廠活性污泥中富含難降解的有機物苯甲酰肼，是當前焦化行業環保治理的難點。某同學通過查閱資料發覺可通過細菌生物降解方法處理焦化廠污染物。請回答下列有關問題：(1)目的菌的篩選：選擇目的菌應當從________________中篩選，在配制培育基時僅加入________作為碳源，從功能上講該培育基屬于________培育基，所選目的菌的同化作用類型是________。(2)優質菌株的馴化：欲要選出高效降解污染物的優質菌株，需采納逐步提高________的方法馴化目的菌，培育出的目的菌株經稀釋涂布分別后得到________以備鑒定和運用。(3)優質菌株降解污染物實力的測定：將分別得到的優質菌株________到經過________處理的污染物液體培育基中，在相宜條件下培育，肯定時間后，測定殘余污染物的濃度。解析：(1)能降解焦化廠污染物的細菌生物應生活在有焦化廠污染物的環境四周，故應從焦化廠活性污泥(焦化廠污染物)中篩選，培育基中應用苯甲酰肼為唯一的碳源，作為選擇培育基，由于該菌能分解現成的有機物，故為異養型生物。(2)若要選出高效降解污染物的優質菌株，可采納逐步提高苯甲酰肼濃度逐步篩選，培育出的目的菌經稀釋涂布分別后得到單一菌落為純化的細菌，可用做鑒定。(3)測定優質菌株降解污染物實力時，可用將分別得到的優質菌株接種到經滅菌后的含污染物液體培育基中，培育肯定時間后，測定殘余污染物的濃度。答案：(1)焦化廠活性污泥(焦化廠污染物)苯甲酰肼選擇異養型(2)苯甲酰肼濃度單一菌落(3)接種滅菌2．[2024·四川成都試驗外國語學校二診]酵母菌與人們的日常生活親密相關，也是現代生物技術探討常用的生物。(1)制作固定化酵母細胞時，充分混合勻稱的酵母細胞溶液可以在飽和的________溶液中形成凝膠珠，若形成凝膠珠顏色過淺，則說明________________________________。酵母細胞的固定化技術是包埋法，而制備固定化酶則不宜用此方法，緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)利用固定的酵母細胞發酵產生酒精，可視察到的現象為________________________________，同時會聞到酒味，利用酵母菌發酵產生酒精時要限制的必要條件是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)利用玉米秸稈生產酒精時，水解秸稈所用的纖維素酶可來自微生物，分別產生該酶的微生物時，所須要的培育基為______________(按功能分)，培育基中的碳源為________。微生物培育時對培育基常用________滅菌。解析：(1)制作固定化酵母細胞時，凝膠珠是將海藻酸鈉和酵母細胞的混合液滴加到CaCl2溶液中制成的。若形成凝膠珠顏色過淺，則說明固定化酵母細胞數目較少。酵母細胞的固定化技術是包埋法，而制備固定化酶則不宜用此方法，緣由是酶分子很小，簡單從包埋材料中漏出。(2)酵母菌無氧呼吸產生酒精和二氧化碳，故利用固定的酵母細胞發酵產生酒精，可視察到的現象為產生許多氣泡，同時會聞到酒味，利用酵母菌發酵產生酒精時要限制的必要條件是無氧。(3)利用分別產生纖維素酶的微生物時，應用選擇培育基，即培育基中的碳源為纖維素，只有能分解纖維素的微生物能在培育基上生存，微生物培育時對培育基常用高壓蒸汽滅菌。答案：(1)CaCl2固定化酵母細胞數目較少酶分子很小，簡單從包埋材料中漏出(2)產生許多氣泡無氧(3)選擇培育基纖維素高壓蒸汽3．[2024·山東淄博高三一模]以下是在推動生態文明建設過程中，合理利用微生物的實例。①農作物秸稈可用于還田、造紙、養殖蘑菇、生產乙醇等，既能解決集中焚燒污染環境問題，又能變廢為寶。②農業生產上廣泛運用的除草劑在土壤中不易被降解，長期運用會污染土壤，可選育降解該除草劑的細菌修復被污染的土壤。請回答：(1)用于生物工程的目的菌大多是從自然環境中篩選純化出來的。在選育能分解除草劑(一類含氮有機物)的目的菌時，應將土壤浸出液接種在以________為唯一氮源的固體培育基上。對固體培育基進行滅菌處理常用的方法是________，為檢測滅菌效果可對培育基進行________________________________________________________________________。(2)稻稈還田以及利用秸稈生產乙醇的過程都須要以纖維素為__________的微生物。分別該類微生物時應用含纖維素的培育基進行培育，并加入________形成紅色復合物進行篩選，目的菌應從四周有________的菌落中選取。(3)生產乙醇過程中常用的微生物是________，發酵過程中檢測該微生物數量可采納的方法有顯微干脆計數(或血球計數板)法和__________________________，后者統計得到的菌落數目往往比活菌的實際數目________。解析：(1)依據題意分析，試驗的目的是選育分解除草劑(一類含氮有機物)的目的菌，因此應當將土壤浸出液接種在以除草劑為唯一氮源的固體培育基上；固體培育基常用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，以不接種培育(或空白培育)為比照，檢測滅菌效果。(2)稻稈還田提高土壤肥力以及利用秸稈生產乙醇的過程的原理主要是土壤中微生物以纖維素等有機物為碳源，合成自己須要的有機物；剛果紅是一種染料，它可以與纖維素形成紅色復合物，但并不和纖維二糖、葡萄糖發生這種反應。當纖維素被纖維素酶分解后剛果紅—纖維素的復合物就無法形成，培育基中就會出現以纖維素分解菌為中心的透亮圈，進而可以通過是否產生透亮圈來篩選纖維素分解菌。(3)乙醇是酵母菌無氧呼吸的產物；酵母菌的計數方法有顯微干脆計數(或血球計數板)法和稀釋涂布平板法，后者視察到的菌落往往有重疊現象，因此得到的值一般偏小。答案：(1)除草劑高壓蒸汽滅菌法不接種培育(或空白培育)(2)碳源剛果紅(CR)較大透亮圈(3)酵母菌稀釋涂布平板法少4．[2024·山東濟南高三模擬]目前，β－胡蘿卜素既可以從巖藻中提取，又可以利用微生物的發酵生產。請回答以下問題。(1)從巖藻中提取β－胡蘿卜素常用________法，在加熱瓶口安裝冷凝回流裝置的目的是________________，提取的β－胡蘿卜素粗品可通過________進行鑒定。(2)利用紅酵母菌發酵生產β－胡蘿卜素時，首先要對操作儀器進行無菌處理，其中對培育皿進行________滅菌。培育基滅菌后，須要冷卻到50℃左右才能倒平板，估計培育基溫度的方法是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)微生物接種常采納________________法進行微生物的分別和計數，這種操作的核心是________________。通過視察菌落的________________、大小、顏色、隆起程度等特征對微生物進行鑒定。解析：(1)從巖藻中提取β－胡蘿卜素常用萃取法，在加熱瓶口安裝冷凝回流裝置的目的是防止加熱時有機溶劑揮發，提取的β－胡蘿卜素粗品可通過紙層析法進行鑒定。(2)利用紅酵母菌發酵生產β－胡蘿卜素時，首先要對操作儀器進行無菌處理，其中對培育皿進行干熱滅菌。培育基滅菌后，須要冷卻到50℃左右才能倒平板，估計培育基溫度的方法是觸摸錐形瓶不燙手。(3)常采納稀釋涂布平板法進行微生物的分別和計數，這種操作的核心是防止雜菌的污染，保證培育物的純度。通過視察菌落的形態、大小、顏色、隆起程度等特征對微生物進行鑒定。答案：(1)萃取防止加熱時有機溶劑揮發紙層析法(2)干熱觸摸錐形瓶不燙手(3)稀釋涂布平板防止雜菌的污染，保證培育物的純度形態5．[2024·山東濟南章丘區高三模擬]請回答下列問題：(1)制作果醋和葡萄酒運用的微生物在結構上有所不同，主要表現在前者________________。果酒發酵后是否有酒精產生，可以用重鉻酸鉀溶液進行檢驗，酒精與重鉻酸鉀在酸性條件下反應呈________________色。(2)腐乳制作過程中，豆腐發酵主要利用微生物產生的________等，將豆腐中的養分物質分解成易于消化和汲取的小分子物質。(3)測定泡菜中亞硝酸鹽含量的原理是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發生________________________________________________________________________反應后，再與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成______________染料。(4)從土壤中分別及篩選高效分解尿素的細菌時，首先要將選取的肯定量的土壤溶解在無菌水中進行________后，才能夠接種到培育基表面。(5)生姜精油是傳統的保健良方，調和在洗發露中，可去頭風、止頭痛。提取生姜精油的流程如下：植物體→生姜→油水混合物→初級精油→除水、過濾→生姜精油。提取生姜精油時，采納________________________________________________________________________法獲得油水混合物，然后在其中加入________試劑，分層后可獲得初級精油。解析：(1)制作果醋和葡萄酒運用的菌種分別是醋酸菌和酵母菌，分別是原核生物和真核生物，兩者的主要區分是前者沒有核膜包被的成形的細胞核；橙色的重鉻酸鉀溶液，在酸性條件下與乙醇(酒精)發生化學反應，變成灰綠色。(2)腐乳發酵主要利用微生物產生的蛋白酶和脂肪酶等，其中蛋白酶能將蛋白質水解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶能將脂肪水解成甘油和脂肪酸。(3)制作泡菜時常用比色法測定其中的亞硝酸鹽含量，該方法的原理是在鹽酸酸化的條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發生重氮化反應后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料，將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準液目測比較，可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。(4)從土壤中分別及篩選高效分解尿素的細菌時，為防止土壤浸出液濃度過高，不能獲得單菌落，應先將土壤用無菌水進行一系列的梯度稀釋。(5)提取生姜精油時，采納水蒸氣蒸餾法獲得油水混合物，然后在其中加入氯化鈉試劑，增加鹽的濃度，就會出現明顯的分層，分層后可獲得初級精油，再加入無水硫酸鈉吸水，靜置過夜，再過濾除去固體硫酸鈉就可以得到生姜精油。答案：(1)無成形的細胞核灰綠(2)蛋白酶和脂肪酶(3)重氮化玫瑰紅色(4)梯度稀釋(5)水蒸氣蒸餾氯化鈉6．[2024·四川達州一診]三孢布拉霉能用來生產胡蘿卜素，但受核基因限制的高產性狀簡單退化，須要定期篩選出高產菌株。探討表明菌體細胞內的[H]可將無色的TTC還原為紅色復合物，且菌體細胞內[H]含量越高，還原實力越強，胡蘿卜素合成實力也越強。請結合流程圖回答問題：(1)三孢布拉霉菌體細胞內產生[H]的場所是________________________________________________________________________。(2)萃取的效率主要取決于萃取劑的________，萃取的最佳溫度和時間可以通過設置________來摸索。(3)將菌液涂布到含TTC的培育基上，發覺培育基上的菌落連成一片，為避開該現象應當實行的措施是________________。挑取單菌落時，若菌落四周________越深，則菌株合成胡蘿卜素的實力較強。(4)從該微生物中提取胡蘿卜素時，擴大培育后要收集菌絲進行的處理是粉碎和________，以提高萃取效率。因試驗室無標準胡蘿卜素，該同學想通過以下試驗來驗證萃取物是否含有胡蘿卜素，甲中1和4為葉綠體中的光合色素，2和3為萃取物，經分別，濾紙上各色素帶的位置為________(填代碼)時，說明萃取物是胡蘿卜素。解析：(1)三孢布拉霉菌體細胞通過細胞呼吸產生[H]，有氧呼吸產生[H]的場所是細胞質基質和線粒體基質，無氧呼吸產生[H]的場所是細胞質基質。(2)萃取的效率主要取決于萃取劑的性質和運用量；萃取的最佳溫度和時間可以通過設置比照試驗來摸索。(3)將菌液涂布到含TTC的培育基上，發覺培育基上的菌落連成一片，為避開該現象應適當增大稀釋倍數。菌體細胞內的[H]可將無色的TTC還原為紅色復合物，且菌體細胞內[H]含量越高，還原實力越強，胡蘿卜素合成實力也越強。因此，挑取單菌落時，若菌落四周紅色越深，則菌株合成胡蘿卜素的實力較強。(4)從該微生物中提取胡蘿卜素時，擴大培育后要收集菌絲進行的處理是粉碎和干燥，以提高萃取效率。甲中1和4為葉綠體中的光合色素，2和3為萃取物，經分別，從上到下依次是胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a、葉綠體b，因此濾紙上各色素帶的位置為Ⅳ時，說明萃取物是胡蘿卜素。答案：(1)細胞質基質和線粒體基質(2)性質和運用量比照試驗(3)適當增大稀釋倍數紅色(4)干燥Ⅳ7．[2024·四川瀘州高考二診]從香辛料中提取有效成分作為食品的自然防腐劑具有廣袤的前景。某試驗小組分別從五種香辛料中提取精油(編號為A、B、C、D、E)，并用這些精油對四種微生物進行了抑菌實力的試驗探討，所得數據如表所示。請回答：精油種類抑菌圈直徑(mm)菌種ABCDE大腸桿菌21.126.015.124.023.2白葡萄球菌14.722.019.112.029.1黑曲霉24.633.026.024.549.6青霉25.338.224.325.142.8(1)上表中，與制作泡菜的主要微生物結構相像的微生物是________________________________________________________________________。(2)在探究精油對微生物的抑菌實力時，試驗用的培育基中________(填“須要”或“不須要”)加入瓊脂，應采納________________法進行接種，推斷精油的抑菌實力大小的指標是________________。(3)試驗結果表明，精油E對細菌的殺傷作用________(填“大于”或“小于”)對真菌的殺傷作用。(4)從香辛料中提取精油常用萃取法，萃取的效率主要取決于萃取劑的________，同時還受溫度和時間長短等條件的影響。若要探究精油含量最高時的最佳萃取時間，請寫出簡要思路________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析：(1)大腸桿菌和白葡萄球菌為細菌，黑曲霉和青霉為真菌。制作泡菜的主要微生物是乳酸菌，屬于細菌，所以與制作泡菜的主要微生物結構相像的是大腸桿菌和白葡萄球菌。(2)在探究精油對微生物的抑菌實力時，試驗用的培育基中須要加入瓊脂，使液體培育基轉化成固體培育基，便利測量抑菌圈直徑，應采納稀釋平板涂布法進行接種，推斷精油的抑菌實力大小的指標是抑菌圈直徑大小，抑菌圈直徑大則說明精油的殺傷作用大。(3)表中結果數據表明，精油E對細菌形成的抑菌圈直徑小于對真菌形成的抑菌圈直徑，說明精油E對細菌的殺傷作用小于對真菌的殺傷作用。(4)從香辛料中提取精油常用萃取法，萃取的效率主要取決于萃取劑的性質和運用量，同時還受溫度和時間長短等條件的影響。若要探究精油含量最高時的最佳萃取時間，簡要思路是將萃取材料平均分成多組，在其他條件相同且相宜的狀況下，分別進行不同時間萃取，測定精油含量，達到最大精油含量所用的最短時間即為最佳萃取時間。答案：(1)大腸桿菌和白葡萄球菌(2)須要稀釋平板涂布抑菌圈直徑大小(3)小于(4)性質和運用量將萃取材料平均分成多組，在其他條件相同且相宜的狀況下，分別進行不同時間萃取，測定精油含量，達到最大精油含量所用的最短時間即為最佳萃取時間(答案合理即可)[重點選做題]1．[2024·衡陽市聯考]請回答下列相關問題：(1)在提取胡蘿卜素的試驗中，須要濃縮，濃縮的原理是________________________________________________________________________。(2)在涂布平板時，滴加到培育基表面的菌液量不宜過多的緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________；純化之后的菌株須要用________(選填“液體”或“固體”)培育基進行大量繁殖。(3)某小組采納稀釋涂布平板法檢測水樣中細菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培育了一段時間，這樣做的目的是________________________________________________________________________。(4)在凝膠色譜法制作過程中，裝填凝膠柱時，不得有氣泡存在，緣由是________________________________________________________________________。(5)發酵過程中應定期測定亞硝酸鹽的含量，緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析：(1)胡蘿卜素的提取流程為：胡蘿卜→粉碎→干燥→萃取→過濾→濃縮→胡蘿卜素。濃縮的原理是：胡蘿卜素和萃取劑(有機溶劑或石油醚)的沸點不同。(2)在涂布平板時，滴加到培育基表面的菌液量不宜過多，因為過多會導致培育基表面的菌懸液會出現積液，導致菌體積累，影響分別效果。純化之后的菌株須要用液體培育基進行大量繁殖。(3)微生物培育過程應當進行無菌操作，配制的培育基要進行高壓蒸汽滅菌，可以將滅菌后的空白平板進行培育以檢測培育基滅菌是否徹底。(4)裝填凝膠色譜柱時，色譜柱內不能有氣泡存在，因為氣泡會擾亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序，使得到的紅色帶區歪曲、散亂，降低分別效果。(5)發酵過程中應定期測定亞硝酸鹽的含量，緣由是發酵不同時期亞硝酸鹽的含量會發生改變，剛好檢測是為了把握取食泡菜的最佳時機。答案：(1)胡蘿卜素和萃取劑(有機溶劑或石油醚)的沸點不同(2)培育基表面的菌懸液會出現積液，導致菌體積累，影響分別效果液體(3)檢測培育基平板滅菌是否合格(4)氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序，降低分別效果(5)發酵不同時期亞硝酸鹽的含量會發生改變，剛好檢測是為了把握取食泡菜的最佳時機2．[2024·廣東汕頭高三模擬]塑料的生物降解，是一個世界性的難題。北京航天航空高校趙軍教授帶領的團隊所進行的探討，引人矚目。他們從一種吃塑料(聚乙烯)的蠟蟲腸道內容物中分別出8個菌株，并對其中的2個菌株進行了深化探討。蠟蟲→腸道內容物→接種、培育、分別→菌種鑒定→菌種保藏(1)塑料的生物降解，主要是利用某些生物分泌特定的________的作用。(2)上述步驟中“培育”是為了________，其培育基應以聚乙烯為________、并加入水和________等制作而成。培育肯定時間后，依據________對菌種進行初步分別。(3)探討人員將其中兩個菌株YT1、YP1分別接種到含有聚乙烯膜的培育基中連續培育，部分結果如下圖一、二所示。①圖一顯示，兩個菌株在試驗條件下，增殖實力更強的是______________。圖中缺少比照組的數據，依據試驗設計的意圖，比照組的細胞密度應當為________________________________________________________________________。②圖二是對兩個菌株進行聚乙烯減重分析的試驗結果，可以得出的主要結論是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析：(1)某些生物分泌特定的酶，能夠降解塑料。(2)接種、培育、分別中的培育，是為了增加目的菌株數量。本操作是為了篩選能分解聚乙烯的菌種，其培育基應以聚乙烯為唯一碳源、并加入水和無機鹽等制作而成。培育肯定時間后，依據菌落特征(菌落的形態、菌落的顏色)對菌種進行初步分別。(3)①由于在同一時間范圍內，YT1組的細胞密度較YP1更大，說明增殖實力更強的是YT1。比照組為未加入菌株的含有聚乙烯膜的培育基，其細胞密度應當為0。②與比照組相比，YT1和YP1的聚乙烯減重較大，且YP1的聚乙烯減重較YT1大，說明YT1和YP1都能降解聚乙烯，其中YP1的降解實力更強。答案：(1)酶(2)增加目的菌株數量唯一碳源無機鹽(和氮源)菌落特征(菌落的形態、菌落的顏色)(3)YT10YT1和YP1都能降解聚乙烯，其中YP1的降解實力更強3．[2024·欽州市綜合實力測試]葡萄糖異構酶經固定化后，可用于工業化生產高果糖漿。請回答下列問題。(1)篩選產乳糖酶的微生物時，宜用________作為培育基中的唯一碳源。培育基中瓊脂的作用是作為________劑。從功能上講這種培育基屬于________。培育產乳糖酶的微生物前對培育皿進行滅菌宜采納________方法。(2)戊二醛是一種化學交聯劑，能與葡萄糖異構酶通過化學鍵交聯。將酶液、戊二醛溶液先后加入到海藻酸鈉溶液中攪拌勻稱，用注射器將混合液注入到________溶液中可得到凝膠珠粒，此過程所用的固化酶方法為________________________________________________________________________。(3)1個葡萄糖異構酶活力單位常定義為每分鐘產生1μmol________所需的酶量。下圖是溫度對葡萄糖異構酶的固化酶和游離酶活力的影響曲線，該曲線表明固化酶和游離酶的最適溫度________(從“相同”或“不同”選填)；低于或高于最適溫度時，固化酶的酶活力________(從“低于”、“等于”或“高于”選填)游離酶。(4)在用葡萄糖異構酶凝膠反應柱生產高果糖漿時，若糖液在1次流經反應柱后果糖的濃度低于產品標準，對此你提出的改進方案是________________________________________________________________________________________________________________________________________________(答出2點)。解析：(1)產乳糖酶的微生物能夠水解乳糖為葡萄糖和半乳糖，為自身代謝供應能源，因此要篩選產乳糖酶的微生物，應運用乳糖為唯一的碳源。制作培育基時運用瓊脂作為凝固劑，制作液體培育基時不須要添加瓊脂。能夠篩選微生物細胞的培育基屬于選擇培育基，培育產乳糖酶的微生物前對培育皿進行滅菌宜采納干熱滅菌。(2)戊二醛是一種化學交聯劑，能與葡萄糖異構酶通過化學鍵交聯。將酶液、戊二醛溶液先后加入到海藻酸鈉溶液中攪拌勻稱，用注射器將混合液注入到CaCl2溶液中可得到凝膠珠粒，此過程所用的固化酶方法為包埋法、化學結合法。(3)高果糖漿生產須要的酶是葡萄糖異構酶，1個葡萄糖異構酶活力單位常定義為每分鐘產生1μmol果糖所需的酶量。通過分析溫度對相對酶活力影響的曲線圖，固化酶和游離酶的最適溫度相同，均對應橫坐標上同一點。低于或高于最適溫度時，固化酶的酶活力高于游離酶。(4)在用葡萄糖異構酶凝膠反應柱生產高果糖漿時，若糖液在1次流經反應柱后果糖的濃度低于產品標準，對此改進方案是增加葡萄糖異構酶凝膠的裝載量(或凝膠柱高)；降低糖液流速；將流出液再次加入反應柱；更換直徑較細的柱筒等。答案：(1)乳糖凝固選擇培育基干熱滅菌(2)CaCl2包埋法、化學結合法(3)果糖相同高于(4)增加葡萄糖異構酶凝膠的裝載量(或凝膠柱高)；降低糖液流速；將流出液再次加入反應柱；更換直徑較細的柱筒等4．[2024·山東省聊城市高三一模]以下是柿子醋制作的流程：柿果→選擇→清洗→去皮→去核→脫澀處理→切塊→壓榨→柿汁→滅菌→酒精發酵→醋酸發酵→滅菌→陳釀→淋醋→過濾→成品。請回答下列問題：(1)脫澀過程可以用成熟的蘋果、梨等水果釋放的________氣體促進柿子成熟。(2)將壓榨后的柿汁加熱到80℃保持10～20分鐘的目的是________。酒精發酵時可添加活性干酵母進行，發酵的原理是________________________________________________________________________(寫反應式)。(3)若醋酸發酵時需擴大培育醋酸菌種，試驗室常用的接種方法是________和________；接種前應對培育皿、接種環和培育基進行滅菌，方法分別是____________________________；接種后培育時須要設置空白培育基，目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析：(1)成熟的蘋果、梨等水果釋放的乙烯可促進果實的成熟。(2)將壓榨后的柿汁加熱到80℃保持10～20分鐘的目的是滅菌，防止雜菌污染。果酒發酵是利用酵母菌進行無氧呼吸產生酒精的原理，其反應式是C6H12O6eq\o(→,\s\up7(酶))2C2H5OH(酒精)＋2CO2＋少量能量。(3)純化培育微生物時常用的接種方法是：平板劃線法和稀釋涂布平板法；接種前對培育皿、接種環和培育基進行滅菌時所采納的方法分別是干熱滅菌、灼燒滅菌、高壓蒸汽滅菌；接種后培育時須要設置空白培育基，其目的是：檢測培育基是否合格(檢測培育基是否被污染)。答案：(1)乙烯(2)防止雜菌污染C6H12O6eq\o(→,\s\up7(酶))2C2H5OH(酒精)＋2CO2＋能量(3)平板劃線法稀釋涂布平板法干熱滅菌、灼燒滅菌、高壓蒸汽滅菌檢測培育基是否合格(檢測培育基是否被污染)5．[2024·廣西省桂林市、賀州市、崇左市聯考]蘋果干腐病是由一種名為茶藤子葡萄座腔菌的真菌引起的疾病，病菌通常由枝條傷口入侵感染，在傷口處形成潰瘍。某中學的科研小組安排分別出該真菌，并進行藥物防治試驗，為蘋果干腐病的防治供應合理的建議。經過查閱資料，確定了分別時所用的PDA培育基配方，如下表所示：物質馬鈴薯葡萄糖自來水氯霉素含量200g20g1000mL0.3g該真菌在上述PDA培育基上生長時有特定的形態特征：輻射狀白色匍匐菌絲，絨毛狀。(1)要獲得菌落，則上表中還應添加的成分是________。氯霉素在PDA培育基中的作用是________________________。培育基的制備步驟包括計算、稱量、溶化、________________、倒平板。等平板冷卻凝固后，應將平板倒置，這樣做的目的是________________________________________________________________________。(2)用剪刀從染病枝條潰瘍處剪取1×1cm2的患病組織，并用0.1%的升汞進行________，置于培育基中心，在合適條件下進行培育，共培育五組。待菌落形態特征穩定后，用________法將該致病菌分別轉移至含有等量0.5%苦水堿劑、40%福美砷、清水的上述PDA培育基中進行抗藥性試驗，并每隔24h記錄一次最終劃線區域的菌落數目。①選取菌落數目穩定的記錄作為結果，這樣做的目的是________________________________________________________________________。②記錄結果如下：小組0.5%苦水堿劑40%福美砷清水菌落數目2817從結果分析可知，____________能很好地抑制該真菌的生長，適合防治蘋果干腐病。解析：(1)培育菌落須要用固體培育基，而固體培育基須要加入瓊脂(或凝固劑)進行凝固。分析表格物質，氯霉素能夠抑制細菌等雜菌的生長，而真菌可以生存。培育基的制備步驟包括計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。等平板冷卻凝固后，要將平板倒置，以防止冷凝水污染培育基。(2)0.1%的升汞的作用是消毒，題中給出“每隔24h記錄一次最終劃線區域的菌落數目”，因此可以確定分別微生物用的方法是平板劃線法。①為了避開因培育時間不足而導致遺漏的菌落數目，因此要選取菌落數目穩定的記錄作為結果。②通過表格數據可知，不同條件下菌落數相比較，0.5%苦水堿劑作用后菌落數最少，因此0.5%苦水堿劑能很好的抑制該真菌的生長，適合防治蘋果干腐病。答案：(1)瓊脂(或凝固劑)抑制細菌等雜菌的生長滅菌以防止冷凝水污染培育基(2)消毒平板劃線可以防止因培育時間不足而導致遺漏菌落數目0.5%苦水堿劑6．[2024·廣州市一般中學畢業班綜合測試]淀粉填充聚乙烯類塑料(淀粉—PE)是一種聚乙烯類塑料替代材料，科研人員開展相關探討，從垃圾堆埋場中篩選到能夠更高效降解淀粉—PE的菌株。回答下列問題：(1)科研人員從垃圾堆埋場的土樣中篩選分別該菌株的緣由是________________________________________________________________________。(2)在進行該菌株的分別篩選時，需將相宜稀釋倍數的土壤溶液接種在以________________為碳源的液體培育基上，進行為期5天的富集培育；進一步分別純化該微生物應采納的接種方法是________________________________________________________________________。(3)探討發覺，該菌株能降解淀粉—PE可能是分泌了________酶和________酶。探討人員提純相應的酶需用到凝膠色譜法，該方法是依據________________________________分別蛋白質。(4)若要了解相應的酶的最適溫度，請設計試驗加以探究________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________(針對一種酶寫出試驗思路即可)。解析：(1)由題干信息可知，淀粉填充聚乙烯類塑料(淀粉—PE)是一種聚乙烯類塑料替代材料，而該菌株高效降解淀粉—PE的菌株，垃圾堆埋場里富含淀粉—PE，故可從垃圾堆埋場的土樣中篩選分別該菌株。(2)該菌株是能高效降解淀粉—PE的菌株，故在進行該菌株的分別篩選時，需將相宜稀釋倍數的土壤溶液接種在以淀粉－PE為碳源的液體培育基上；分別純化該微生物應采納的接種方法是稀釋涂布平板法或平板劃線法。(3)依據酶的專一性特點及降解物的組成成分可推知，該菌株能降解淀粉—PE可能是分泌了淀粉酶和降解淀粉—PE的酶；凝膠色譜法是依據相對分子質量的大小分別蛋白質。(4)若要探究酶的最適溫度，應設置一系列的溫度梯度，其他條件相同且相宜，將淀粉(降解PE的)酶和淀粉液(PE)分組，在各溫度下分別保溫，將相同溫度條件下的進行混合，一段時間后，用肯定方法檢測各組中底物的消耗量或產物的生成量。答案：(1)該菌分布在富含淀粉－PE的環境中的可能性較高，而垃圾堆埋場里存在相應環境(2)淀粉－PE稀釋涂布平板法(平板劃線法)(3)淀粉降解PE的相對分子質量的大小(4)設置一系列的溫度梯度，其他條件相同且相宜，將淀粉(降解PE的)酶和淀粉液(PE)分組，在各溫度下分別保溫，將相同溫度條件下的進行混合，一段時間后，用肯定方法檢測各組中底物的消耗量或產物的生成量7．[2024·福建高三畢業班質檢]秸稈還田的過程中，配施適量的高效纖維素分解菌，能有效促進秸稈分解，提高秸稈還田效率，且不會造成環境污染。回答下列問題：(1)篩選纖維素分解菌時，可到腐爛稻草等環境中采集土樣，緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)有許多類群微生物都能有效降解纖維素，為了避開不同微生物之間的生長相互影響，應當用________培育基進行培育，獲得純化菌株。(3)用剛果紅染色法初步鑒定纖維素分解菌后，進一步用液體濾紙培育基分組復篩，其中濾紙的作用是____________。培育一段時間后，將殘留的濾紙烘干稱重，殘留的濾紙越少，則說明________________________________________________________________________。(4)采納________技術，將篩選到的高效纖維素分解菌固定，能夠阻隔其受到外界不利因素的毒害作用，增加運用壽命。(5)為了長期保存高效纖維素分解菌菌種，可以采納________的方法。(6)現有高效分解纖維素的細菌，為探究其最適pH，某同學設計如下試驗：取錐形瓶若干分為4組，加入等量秸稈及其他必需養分物質，分別設置pH為1、3、6、7，接種等量纖維素分解細菌，培育一段時間后，測定各組錐形瓶中秸稈削減量的平均值。該pH設置的不足之處有________________和________________。解析：(1)篩選纖維素分解菌時，可到腐爛稻草等環境中采集土樣，緣由是腐爛稻草的土壤富含纖維素分解菌。(2)有許多類群微生物都能有效降解纖維素，為了避開不同微生物之間的生長相互影響，應當用選擇培育基進行培育，獲得純化菌株。(3)要篩選到能產生纖維素酶的微生物，應運用選擇培育基，在培育基中加入纖維素作為唯一的碳源，能在此培育基中存活的微生物就是能產生纖維素酶的微生物，故濾紙的作用是供應纖維素。培育一段時間后，將殘留的濾紙烘干稱重，殘留的濾紙越少，則說明纖維素分解菌的分解實力越強。(4)采納固定化細胞技術，將篩選到的高效纖維素分解菌固定，能夠阻隔其受到外界不利因素的毒害作用，增加運用壽命。(5)為了長期保存高效纖維素分解菌菌種，可以采納甘油管藏的方法。(6)現有高效分解纖維素的細菌，為探究其最適pH，某同學設計如下試驗：取錐形瓶若干分為4組，加入等量秸稈及其他必需養分物質，分別設置pH為1、3、6、7，接種等量纖維素分解細菌，培育一段時間后，測定各組錐形瓶中秸稈削減量的平均值，該pH設置的不足之處有pH范圍設置不合適、pH梯度設置不合適。答案：(1)腐爛稻草的土壤富含纖維素分解菌(2)選擇(3)供應纖維素纖維素分解菌的分解實力越強(4)固定化細胞(5)甘油管藏(6)pH范圍設置不合適pH梯度設置不合適8．[2024·廣東湛江一模]目前凈水器已家喻戶曉。某商家廣告宣稱他們所生產的凈水器能夠去除水中全部細菌，欲檢驗該商家的廣告是否與產品性能相符，試驗小組用凈水器過濾的水進行試驗，試驗流程是：采集水樣→配制培育基→倒平板→接種→培育→視察。請回答下列問題：(1)細菌生長繁殖所需的主要養分物質有________和無機鹽四類，其中無機鹽的作用是________________________________________________________________________。(2)倒平板前用________法對培育基滅菌，倒平板時應在________________旁進行。要檢測所倒平板是否合格，設計思路是________________________。(3)要對試驗所用水樣中的細菌進行計數常用________________法接種。(4)若視察到________________，則說明商家的廣告與產品性能不相符。解析：(1)細菌生長繁殖所需的主要養分物質有碳源、氮源、水和無機鹽四類，其中無機鹽的作用：構成生物體的化合物、調整細胞滲透壓、調整酸堿平衡等。(2)對培育基進行滅菌常用高壓蒸汽滅菌法；為了防止雜菌污染，倒平板時應在酒精燈火焰旁進行。要檢測所倒平板是否合格，可將未接種的平板進行培育后，視察是否有菌落形成。(3)接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中稀釋涂布平板法可對微生物進行計數，因此對試驗所用水樣中的細菌進行計數常用稀釋涂布平板法接種。(4)若視察到平板上有菌落形成，則說明商家的廣告與產品性能不相符。答案：(1)碳源、氮源、水構成生物體的化合物、調整細胞滲透壓、調整酸堿平衡等(2)高壓蒸汽滅菌酒精燈火焰將未接種的平板進行培育后，視察是否有菌落形成(3)稀釋涂布平板(4)平板上有菌落形成9．[2024·咸陽模擬]“手機上的細菌比馬桶上的還多？”央視和北京衛視的記者都做試驗對手機和馬桶上的細菌數量進行了調查，調查結果如下。請回答下列問題：(1)該試驗需制備培育基，制備培育基的操作依次是________。(用下列字母和箭頭排序)a．倒平板b．計算c．溶化d．稱量e．滅菌(2)依據圖中結果可知，兩電視臺展示的試驗均采納________________法進行接種，該方法運用的接種工具是________。(3)通過視察菌落的________________________等(至少兩項)，可知手機和馬桶上都存在多種微生物。(4)兩電視臺試驗操作無誤且完全一樣，但報道結果迥然不同，你認為緣由可能是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(5)試驗員按圖中方法取樣，測定某手機屏幕的細菌數量，從10mL菌懸液中