遺傳病的診斷

DiagnosisofGeneticDisease

遺傳病的診斷

前言遺傳病的常規(guī)診斷產前診斷基因診斷

第一節(jié)遺傳病的常規(guī)診斷

一、遺傳疾病診斷的主要內容病史采集癥狀與體征家系分析細胞遺傳學檢查生化檢查基因診斷染色體檢查的指征①有明顯的智力發(fā)育不全、生長遲緩或伴有其他先天畸形者;②夫婦之一有染色體異常，如平衡結構重排、嵌合體等;③家族中已有染色體或先天畸形的個體;④多發(fā)性流產婦女及其丈夫;⑤原發(fā)性閉經和女性不育癥;⑥無精子癥男子和男性不育癥;⑦兩性內外生殖畸形者;⑧疑為先天愚型的患兒及其父母;⑨原因不明的智力低下伴有大耳、大睪丸和(或)多動癥者;⑩30歲以上的高齡孕婦。Multi-colorFISH/

SpectralKaryotypingFISHforSRYNormalMaleXXSRY+Red=XRYGreen=centromereofX第二節(jié)產前診斷遺傳學檢查

細胞培養(yǎng)、染色體檢查、分子診斷等；生化檢查

特殊蛋白質、酶、代謝底物、中間產物和終產物等；物理診斷

B超、X線、胎兒鏡、電子監(jiān)護等。需產前診斷的對象：夫婦之一有染色體畸變，特別是平衡易位攜帶者，或者夫婦染色體正常，但出生過染色體異常的患兒的夫婦；35歲以上的高齡孕婦；夫婦之一有開放性神經管畸形，或出生過這種畸形患兒的夫婦；夫婦之一有先天性代謝缺陷，或出生過這種患兒的夫婦；X連鎖遺傳病基因攜帶者孕婦；原因不明的習慣性流產的孕婦；羊水過多的孕婦；夫婦之一有致畸因素接觸史的孕婦；具有遺傳病家族史，又系近親婚配的孕婦。

雖然具備了上述條件，但如果出現先兆流產、妊娠時間過長、有出血傾向者，則不宜做產前診斷，另外應拒絕僅要求僅做胎兒性別的檢查。取胎兒細胞方法有：羊膜穿刺法（15-17w）絨毛取樣法（10-11w）臍帶穿刺（>18w）胎兒鏡檢查B超孕婦外周血胎兒細胞富集PGD第三節(jié)基因診斷一、分子診斷學的發(fā)展從第一代遺傳標志（RFLP）第二代遺傳標志（STR）第三代遺傳標志（SNP）二、分子診斷的策略和常用技術基因診斷的策略基因突變的檢測mRNA檢測基因連鎖檢測基因診斷的基本技術核酸雜交聚合酶鏈反應DNA測序基因芯片技術其它常用的技術

PCR-RFLPPCR利用一對或數對特異性引物，將目標DNA擴增；酶切利用某些限制性內切酶消化PCR產物，如PCR產物中含有相應的酶切位點序列，DNA鏈則被切開；電泳利用瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠分離酶切后的PCR產物，根據電泳圖譜判斷結果。PCR-ASO：使用只有幾十個核苷酸的探針，檢測被檢DNA中的同源序列。由于探針比較短，當被檢DNA序列與探針不完全互補，甚至只要有一個堿基的差異，雜交分子就不能穩(wěn)定形成，因此該方法的靈敏度非常高，特異性也非常好。PCR-ASOPCR-SSCP

當雙鏈DNA變性為兩條單鏈后，各自會在中性條件下形成各自特定的空間構象，因而在電泳時將在不同的位置上出現各自電泳條帶。如果DNA序列發(fā)生變化，甚至只有一個堿基變化，空間構象也有可能發(fā)生變化，電泳條帶也隨之變化。PCR-SSCP三、分子診斷技術的應用基因診斷在遺傳病中的應用例如：鐮狀細胞貧血的基因診斷酶解正常人DNA和患者DNA，用標記的

珠蛋白基因為探針作Southern雜交

鐮狀細胞貧血的基因診斷限制性內切酶MstⅡ切割的序列是CCTNAGG（其中N是任何一種核苷酸），切割正常DNA產生1.1kb

珠蛋白的DNA片段；若切割患者DNA時，由于A

T破壞了MstⅡ的位點，便形成1.3kb

珠蛋白的DNA片段。基因診斷在腫瘤中的作用肺癌乳腺癌結腸癌四、疾病分子診斷的展望

未來的分子診斷主要發(fā)展方向胚胎著床前診斷—在囊胚8個細胞期，通過對其中一個細胞的染色體核型分折和原位雜交，從而將人類的遺傳缺陷控制在最早期階段。母體