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文檔簡介

母兔的同期發情與陰道涂片檢查及超排反應與抽吸法采卵技術

實驗目的通過本實驗，掌握雌性動物發情周期的調控機理、同期發情與超數排卵的基本原理、雌性動物陰道涂片技術和抽取法采卵技術，為今后胚胎生物技術的學習打下基礎。實驗動物：成年母兔實驗藥品：

PMSG、FSH、HCG、氯前列烯醇；緩釋劑PVP；PBS緩沖液、CCM抽卵液；瑞氏染液、吉姆薩染液實驗器材：動物（兔）保定臺、解剖器械、細胞培養皿、實體顯微鏡、電光顯微鏡、恒溫水浴鍋、超凈生物工作臺等實驗技術路線實驗內容與方法1、成年母兔的空孕檢查和預備飼喂（5-7天）。2、母兔同期發情及陰道涂片檢查：用氯前列烯醇對母兔進行同期發情處理后，然后對未作激素處理前和處理后的各個階段，用生理鹽水棉棒進行母兔陰道涂片，觀察涂片上母兔生殖道黏液及細胞類型，并分析原因。未發情發情母兔外陰變化發情前期（proestrum）發情期（oestrum）發情后期（metaestrum）間情期（diestrum）3、成年母兔的超排處理：采用PMSG+HCG、FSH+HCG、FSH+PVP+HCG不同激素組合處理及不同劑量水平處理兩個因素進行母兔卵巢的卵泡發育調控（3天）。

時間流程安排第1天第2天第3天第4天第5天第6天上午外陰觀察陰道涂片①FSH注射②PMSG注射③FSH+PVP注射①FSH注射①FSH注射HCG注射下午外陰觀察陰道涂片PG注射外陰觀察陰道涂片①FSH注射①FSH注射①FSH注射解剖注意：上午下午的注射時間請要間隔12h氯前列烯醇：0.02mg/只FSH：10、30、50IU/只·次，2次/天，連續3天PMSG：80、100、120IU/只HCG：120IU/只（耳靜注）4、母兔解剖：觀察母兔子宮變化（質地、顏色、大小）、卵巢變化（大小、顏色、排卵點、可見未成熟卵泡數等），并做好記錄統計。母兔子宮變化卵泡血體5、輸卵管沖卵：用CCM液在母兔輸卵管內沖洗出排出的成熟卵母細胞，在實體顯微鏡觀察、記錄并統計。6、抽取法采卵：摘取母兔卵巢，用PBS液洗凈后，再用滅菌注射器吸取CCM液后穿刺卵巢上的卵泡，快速抽取卵母細胞，然后在實體顯微鏡下觀察、記錄并統計。抽吸法采卵操作實驗記錄1、同期發情效果母兔外陰特征陰道涂片結果PG處理前PG處理后PG處理前PG處理后1組2組3組4組5組2、母兔解剖結果子宮卵巢質地顏色大小顏色排卵點未成熟卵泡數左側右側左側右側1組2組3組4組5組3、沖卵結果左側卵巢右側卵巢排卵點沖出卵子數A級卵子B/C級卵子排卵點沖出卵子數A級卵子B/C級卵子1組2組3組4組5組作業根據你的實驗結果，請作出以下分析：1、母兔發情后

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