動物細胞工程動物細胞工程動物細胞培養核移植動物細胞融合單克隆抗體的制備基礎植物細胞工程包括哪幾種技術？動物細胞工程又包括有哪幾種技術？思考

？一、動物細胞培養（閱讀課本第44-46頁）請用簡圖描述動物細胞培養的過程？培養條件如何，與植物組織培養相同嗎？為什么取幼齡動物器官組織或動物胚胎進行培養？為什么要使細胞分散成單個細胞呢？原代培養和傳代培養如何劃分？和植物組織培養的原理相同嗎？細胞增殖什么叫動物細胞培養？見課本44頁1.動物細胞培養過程胚胎或幼齡動物的組織器官細胞懸浮液傳至10代~50代無限傳代剪碎胰蛋白酶原代培養胃蛋白酶適宜PH為強酸性，時間久會把細胞消化了分散成單個細胞避免接觸抑制同時使其與培養液成分混合無法發揮細胞的全能性傳代培養分裂能力強細胞貼壁生長、接觸抑制胰蛋白酶分裝少量細胞獲得不死特性(核型變化)合成培養基2.培養條件：1.無菌、無毒的環境培養液及培養器具均要滅菌培養液中添加抗生素及時更換培養液清除代謝產物。2.營養動物血清3.適宜的溫度和PH：葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等4.氣體環境:95%空氣+5%CO2原代培養與傳代培養的區別？分裝原代培養傳代培養動物細胞培養總結圖解細胞株和細胞系的區別：細胞系的遺傳物質改變，具有癌細胞的特點，失去接觸抑制，容易傳代培養。細胞株：原代細胞一般傳至10代左右細胞生長停滯，大部分細胞衰老死亡，少數細胞存活到40~50代，這種傳代細胞為細胞株。細胞系：細胞株傳代至50代后又出現細胞生長停滯狀態，只有部分細胞由于遺傳物質的改變，使其在培養條件下可以無限制傳代，這種傳代細胞為細胞系。動物細胞培養與植物組織培養的比較項目動物細胞培養植物組織培養相同點都需無菌條件;都進行有絲分裂不同點原理細胞的增殖細胞的全能性培養基液體培養基,動物血清及其他營養物質（葡萄糖）固體培養基,激素及其他營養物質（蔗糖）目的獲得細胞或細胞產物等快速繁殖、培育無病毒植株等例.下列關于動物細胞培養的有關敘述中正確的是A.細胞的癌變發生于原代培養向傳代培養的過渡過程中B.動物細胞培養液中通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、生長素和動物血清等C.動物細胞培養的目的僅是獲得大量的細胞分泌蛋白D.動物細胞培養前和培養過程中都要用胰蛋白酶處理D對應訓練卵母細胞體外培養至MII中期高產奶牛（供體）體細胞培養細胞質細胞核早期胚胎卵裂代孕母牛子宮胚胎移植與供體遺傳物質基本相同的犢牛分娩妊娠電刺激,激活受體細胞去核與第一極體細胞核移植二、動物體細胞核移植技術和克隆動物問題：1.原理2.過程3.遺傳物質來源4.存在的問題動物核移植是將動物的一個細胞的細胞核，移入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發育為動物個體。二、動物體細胞核移植技術和克隆動物克隆組織培養試管動物(嬰兒)生殖方式無性無性有性遺傳物質來源2個親本1個親本2個親本性別決定提供核親本一般沒有精子類型用途優良種畜快速繁育,可選擇性別快速繁殖無病毒植株解決不孕不育對克隆與組織培養、試管動物(嬰兒)區分不清易錯點分析花藥離體培養屬于什么生殖方式？例：下列有關體細胞核移植技術的說法，不正確的是（）A.體細胞核移植技術在多種動物中獲得了成功，成功率非常高B.克隆技術的各個環節有待于進一步改進C.大多數克隆動物還存在一些遺傳和生理缺陷類的健康問題D.克隆動物食品的安全性問題仍然存在爭議A對應訓練3.動物細胞工程單克隆抗體制備基本過程（P53）

植物體細胞雜交和單克隆抗體的制備的比較PEG、滅活的病毒、電激抗原抗體雜交篩選能迅速繁殖、產生單一抗體特點：特異性強、靈敏度高、可大量制備應用：體外診斷（可同位素標記）生物導彈（運載藥物、毒素、同位素）例：利用細胞工程方法，以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。下列相關敘述正確的是（）

A.用純化的核衣殼蛋白反復注射到小鼠體內，產生的血清抗體為單克隆抗體

B.體外培養單個B淋巴細胞可以獲得大量針對SARS病毒的單克隆抗體

C.將等量B淋巴細胞和骨髓瘤細胞混合，經PEG誘導融合后的細胞均為雜交瘤細胞

D.利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結合的方法可診斷出病毒感染者D對應訓練1．如圖是動物細胞培養的基本過程示意圖，請據圖回答。(1)容器A中放置的是動物器官或組織。它一般取___________。(2)容器A中的動物器官或組織首先要進行的處理是______________，然后用__________酶處理，這是為了使細胞分散開來。這樣做的目的是__________________。(3)培養首先在B瓶中進行。瓶中的培養基成分有________________等。在此瓶中培養一段時間后，有許多細胞衰老死亡，這時培養到第__________代，到這時的培養稱為______________。(4)為了把B瓶中的細胞分裝到C瓶中，用__________處理，然后配制成__________，再分裝。(5)在C瓶中正常培養了一段時間后，發現細胞全部死亡，原因是______________________________。答案1.(1)動物胚胎或幼齡動物的器官、組織(2)剪碎組織胰蛋白使細胞與培養液充分接觸(3)葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清10原代培養(4)胰蛋白酶細胞懸浮液(5)細胞沒有發生癌變6．2008年2月26日，廣西水牛研究所科研人員利用克隆胚胎冷凍技術，使一頭雜交母水牛順利產下一頭冷凍胚胎移植的體細胞克隆雌性水牛犢，取名“盼盼”。(1)當克隆牛“盼盼”性成熟后進行減數分裂時，其初級卵母細胞內可以形成________個四分體。(2)①、④過程主要采取________________技術才能獲得細胞群或囊胚，此時在培養液中常加入的物質有葡萄糖、氨基酸、維生素、________和________等。(3)③過程中，誘導形成重組細胞常見的方法，除電激融合外，常見的