干貨分享|超全重組蛋白使用指南關鍵詞：重組蛋白、細胞因子、溶解方式、儲存條件、常見問答近期Abbkine上新一批經過嚴格驗證的活性細胞因子重組蛋白，很多小伙伴在咨詢重組蛋白的使用注意事項和保存方法。這不，它來咯~Abbkine重組蛋白均為凍干粉形式，-20℃或-80℃可以保存數年。蛋白凍干粉在使用前需溶解，部分重組蛋白產品帶有復溶buffer，優先推薦使用配套的復溶buffer。不同重組蛋白復溶及儲存條件可能會存在差異，詳細參考說明書推薦方法。溶解方式打開試管前務必對產品進行離心。10000-12000rpm離心30s或3000-3500rpm離心5min。建議將凍干后的蛋白在無菌無內毒素的ddH2O中復溶至0.1-1mg/mL，期間可用槍輕輕吹打混勻，室溫靜置至少20min，使其完全溶解。注意避免劇烈渦旋。如何使用建議首先按照說明書指導對凍干粉按照一定的濃度進行復溶，完全復溶后，再根據實際實驗所需濃度，使用特定的稀釋液進行稀釋。如何保存凍干粉形式：凍干粉形式的重組蛋白通常較為穩定，-20℃或-80℃可以長期保存。復溶后液體形式：復溶后的重組蛋白4℃可以保存1周。復溶液的長期保存：由于Abbkine重組蛋白凍干液成分及復溶buffer均不含蛋白保護劑，溶解后的蛋白溶液如需長期保存，建議添加載體蛋白（5%HSA,10%FBS或0.1%BSA)后，分裝保存，避免反復凍融。常見問答Q:為何一定要開蓋前離心？A:打開試管前務必進行離心，Abbkine重組蛋白不含載體蛋白或其他添加劑（如HSA、BSA或蔗糖、甘露醇、海藻糖等），通常以最少量的鹽溶液凍干處理后盛放于無菌管內。微量的蛋白在凍干過程中會沉積在管壁內，形成很薄或不可見的蛋白膜，凍干粉在運輸過程中可能會因顛簸而飄散并粘附于管壁或管蓋上，因此開蓋前需離心將凍干粉收集到管底，以減少凍干粉的開蓋損失，確保溶解蛋白的正確濃度。Q:為何不能直接將蛋白稀釋至實驗所需濃度，還要先復溶？A:說明書建議的復溶buffer是溶解凍干粉的最佳條件，直接稀釋可能會存在不溶的情況。蛋白在一定的濃度范圍內可以保持良好的活性及穩定性。低于或高于該濃度范圍，可能會導致蛋白無法完全溶解，甚至出現蛋白質聚集現象，或是活性減弱甚至喪失。Q:為何有時凍干粉不易溶解？A:蛋白的溶解性與很多因素有關，如pH值和離子強度等，說明書上推薦的復溶buffer均經過嚴格測試，是能夠將該活性蛋白完全溶解的液體。若難以立即溶解，可以室溫靜置20min，使其完全溶解，或將其放置于水平搖床上低速搖一段時間，或是將重懸液在4℃靜置2小時以上。Q:能否使用渦旋儀劇烈震蕩，幫助蛋白快速溶解呢？A:切忌使用渦旋儀進行快速振蕩。一般用移液槍的槍頭輕吹幾下，即可使重組蛋白完全溶解。如不易溶解，應考慮其它因素，嘗試使用其它方式促進溶解。Q:重組蛋白種是否含有防腐劑？A:Abbkine重組蛋白均為無菌級別且不含防腐劑，使用過程中注意避免微生物污染。建議使用滅菌溶液復溶，使用無菌管子進行分裝保存，避免多次使用交叉污染。新品推薦貨號中文名稱規格PRP1048重組人轉化生長因子-β（TGF-β）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1049重組人表皮生長因子（EGF）100μg/500μg/1mg/10mgPRP1050重組人干擾素-γ（IFN-γ）20μg/100μg/500μg/1mgPRP1151重組小鼠粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子（GM-CSF）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1051重組人白介素-13（IL-13)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1135重組小鼠白介素17（IL-17)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1052重組人白介素-17（IL-17)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1136重組小鼠巨噬細胞集落刺激因子（M-CSF5μg/20μg/100μg/10mgPRP1053重組人干擾素-β1a（IFN-β1a）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1054重組人血管內皮生長因子165（VEGF165)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1055重組人白介素-10（IL-10)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1056重組人核因子κB受體活化因子配體（RANKL）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1057重組人骨形態發生蛋白-2（BMP-2)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1137重組小鼠白介素-4（IL-4)5μg/20μg/100μg/10mgPRP1138重組小鼠干擾素-γ（IFN-γ）20μg/100μg/500μg/10mgPRP1058重組人促血小板生成素（TPO）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1059重組人Noggin蛋白（Noggin）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1060重組人白介素-1β（IL-1β）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1061重組人神經生長因子-β（β-NGF）20μg/100μg/500μg/1mgPRP1062重組人Fms相關酪氨酸激酶3配體(Flt-3Ligand)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1063重組人白介素-15（IL-15)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1064重組人骨形態發生蛋白-4（BMP-4）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1065重組人胰島素樣生長因子-I（IGF-I)100μg/500μg/1mg/10mgPRP1140睫狀神經營養因子（CNTF）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1141重組小鼠白介素-10（IL-10)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1142重組小鼠表皮生長因子（EGF）100μg/500μg/1mg/1mgPRP1143重組小鼠神經生長因子-β（β-NGF）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1144重組小鼠白介素-15（IL-15)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1145重組小鼠/大鼠血管內皮生長因子165（VEGF165)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1146重組小鼠胰島素樣生長因子-I（IGF-I)20μg/100μg/500μg/1mgPRP1147重組小鼠骨形態發生蛋白-4（BMP-4)5μg/20μg/100μg/1mgPRP1148重組小鼠趨化因子配體2（CCL2）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1149重組小鼠Fms相關酪氨酸激酶3配體（Flt-3Ligand）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1066重組人/小鼠/大鼠腦源性神經營養因子（BDNF）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1067重組人膠質細胞源性神經營養因子（GDNF）5μg/20μg/100μg/1mgPRP1068重組人成纖維細胞生長因子-2（FGF-2）20μg/100μg/500μg/1mgPRP1150重組小鼠/大鼠成纖維細胞生長因子-2（FGF-2）20μg/100μg/500μg/1mgPRP1069重組人轉化生長因子-β3（TGF-β3）5μg/20μg/100μg/1mg歡迎廣大“蝌蚪”們多多關注Abbkine公眾號，還會有更多科研驚喜等著大家喲。同時，Abbkine的技術專家為了給廣大讀者提供學習生物知識的平臺，經過不懈努力，將多種高端生物實驗的干貨整理出來，后期陸續在微信公眾號中刊登，請廣大熱愛科學的讀者持續關注Abbkine公眾號。Abbkine致力于為廣大科研用戶提供高品質，高性價比的科研試劑！想要了解更多實驗干貨，敬請關注Abbkine微信公眾號及視頻號！我們將持續更新更多技術前沿資訊，敬請期待！Abbkine的技術專家為了給廣大讀者提供學習生物知識的平臺，經過不懈努力，將多種高端生物實驗的干貨整理出來，后期陸續在微信公眾號中刊登，請廣大熱愛科學的讀者持續關注Abbkine公眾號。Abbkine專注于蛋白學和細胞學領域，致力于創新和研發各類抗體、蛋白質、分析試