文檔簡介
細胞“罷工”？！細胞傳代后增殖緩慢之謎！培養箱里，我們的“小勞模”細胞們每天忙著分裂增殖，為我們的實驗貢獻著力量。然而，有時候，這些小家伙們卻會突然“罷工”，傳代后的增殖速度變得慢如蝸牛，仿佛一夜之間愛上了慢生活。這背后究竟是什么原因呢？怎樣才能讓細胞們恢復干勁呢？請看下文~1接種密度低你知道嗎？很多細胞都有密度依賴。細胞自身會分泌一些因子到培養基中促進周圍的細胞生長（旁分泌）。細胞密度太低，這種化學信號的傳遞減弱，細胞狀態受到影響。接種密度越低，增殖越慢，甚至不增殖。解決方案：根據細胞生長速度確定合適的傳代比例和接種密度。如果細胞已經傳稀了，可以耐心繼續培養，或將細胞重新傳到更小的器皿中，增加密度。特別提醒！T25培養瓶底面積為25cm2，10cm培養皿底面積是55cm2，所以一個T25傳兩個10cm皿約等于1：4傳代，而不是1：22培養基、血清不合適想象一下，你突然來到一個全新的城市上學上班，面對全新的環境，是不是也需要適應一段時間呢？細胞突然被換到新的培養基和血清中，也會出現水土不服的情況，特別是對血清要求高的細胞。新的培養基或血清不對細胞胃口時，導致它們“食欲不振”，生長速度自然就慢了下來。解決方案：檢查新培養基和原培養基的配方是否有差異，是否需要額外添加試劑，成分盡量保持一致。新培養基和原培養基混合培養1-2代，讓細胞慢慢適應，如果細胞正常生長，再完全替換為新的培養基。如果它們實在適應不了新培養基，還是換回原培養基，畢竟實驗不等人啊！另外，記得定期換液，別等培養基都變成金黃色了才換，這無異于把細胞活活餓死！3細胞受損在細胞傳代的過程中，如果發生一些“工傷”事故，比如胰酶消化時間過長，導致它們受傷；消化時間過短，細胞們還沒完全分開，就被強行“搬家”了，導致細胞膜受損；重懸時瘋狂吹打，生怕吹不均勻，結果把細胞打得半死不活，都會導致細胞增殖速度變慢。解決方案：傳代時嚴格控制胰酶消化時間，控制吹打次數和力道。如果細胞已經受損了，傳代后漂浮細胞和碎片很多，可以嘗試提高血清濃度（總量不超過20%），幫助它們恢復元氣。如果傷情嚴重，搶救失敗，那還是重新復蘇吧！4細胞衰老原代細胞以及一些有限傳代的細胞系，隨著傳代次數增多，細胞生長速度逐漸減慢，最終停止增殖。解決方案：細胞衰老是自然法則無法避免，但我們可以通過優化培養條件和操作，讓細胞盡可能保持好的狀態，并及時進行實驗。對于有限細胞系，要記得凍存早期代次作為備份。對于原代細胞，則要規范提取步驟，保證細胞質量穩定，實驗重復性才能更好。?雖然細胞不增殖的時候我們心急如焚，但也讓我們更加深入了解自己細胞的特性。通
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