ICS65.020DB36TechnicalrulesforidentifyingtheresistanceofcowpeavarietiestoCercospora江西省市場監督管理局發布IDB36/T1844—2023前言 12規范性引用文件 13術語和定義 1 25接種 26病情調查 27抗性評價 38鑒定后材料的處理 3DB36/T1844—2023本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定起請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發布機構不承擔識別專利的責任。本文件由江西省農業農村廳提出并歸口。本文件起草單位：江西省農業科學院植物保護研究所。本文件主要起草人：何烈干、鄒芬、馬輝剛、王修慧、熊水平、胡銘。1DB36/T1844—2023豇豆品種抗煤霉病鑒定技術規程本文件規定了豇豆品種對煤霉病抗性鑒定的試驗設計、接種方法、病情調查、抗性評價和接種后材料的處理等技術要求。本文件適用于豇豆品種對煤霉病的抗性鑒定。2規范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。NY/T496肥料合理使用準則通則NY/T2118蔬菜育苗基質3術語和定義下列術語和定義適用于本文件。3.1豇豆煤霉病cowpeasootyblotch由半知菌類尾孢屬菜豆尾孢(CercosporacruentaSacc.)侵染豇豆引起的一種真菌病害。3.2接種體inocula用于接種以引起病害的病原物或病原物的一部分。3.3人工接種artificialinoculation在適宜條件下，通過人工操作將接種體置于植物體的適當部位的過程。3.4病情級別diseaseratingscale植物個體或群體發病程度的數值化描述。3.52DB36/T1844—2023病情指數diseaseindex是反映發病率和嚴重度的綜合指標。4育苗選用當地歷年易感煤霉病的豇豆品種作為對照感病材料。每份豇豆品種選取健康飽滿種子，用30℃左右的溫水浸泡1h～2h，在25℃~28℃下催芽，待露白后播于營養缽中，每缽播種2粒，每份豇豆品種播種20粒，種子上覆蓋1.5cm厚營養土，肥水管理按NY/T496和NY/T2118進行，幼苗出土前保持氣溫25℃~30℃,出土后控制氣溫25℃~30℃,當株高達到1.5m時進行抗病性接種鑒定。5接種5.1培養基的制備豇豆殼汁培養基的制備方法：稱取60g豇豆殼用蒸餾水沖洗干凈，置于蒸餾水中浸泡24h，用搗碎機搗碎，55℃~60℃水浴1h～2h，經雙層紗布過濾，濾液補水至1L，加入瓊脂粉15g，121℃高壓蒸汽滅菌20min。5.2接種體制備將保存的豇豆煤霉病菌置于豇豆殼汁培養基上，在28℃~30℃條件下培養，7d后刮下菌絲體，在搗碎機上搗碎，雙層紗布過濾，加入適量葡萄糖及無菌水制得孢子懸浮液，利用血球計數板計數，并調整其濃度至3×104個/mL，3h內完成接種。5.3人工接種當植株長至1.5m時打頂，打頂后采用噴霧接種法接種，接種量以豇豆葉面有水滴而又不會掉落為佳。把接種好的植株置于26℃~30℃、相對濕度100%的空調房內黑暗培養48h，然后每天光照14h，強度為35klx，保持空氣濕度在80%以上，其他按照NY/T5079栽培管理進行。6病情調查6.1調查時間接種后15d進行病情調查。6.2病情分級標準分級標準的劃分詳見表1。3DB36/T1844—2023表1豇豆煤霉病病情分級標準6.3病情記載按照表1記載每份材料的病情級別，計算病情指數，結果記入表2。表2豇豆抗煤抗性評價表霉病鑒定病情記載表及品種013579ⅠⅡⅢ7抗性評價7.1抗性評價標準相對病情指數=IDm×100/IDCK 病情指數（ID）=Σ（各病級的株數×各級代表值）×100/調查總株數×最高級代表值 式中：ID—病情指數；m--供試種質資源；CK--對照感病品種。相對抗性指數（RRI）=1-IDm/IDCK............................................................(3)式中：RRI—相對抗性指數。依據相對抗性指數來評價豇豆對煤霉病的抗性，共分為6個級別（見表3）。表3豇豆對煤霉病的抗性評價標準SR4DB36/T1844—20237.2鑒定有效性判別當鑒定試驗中存在品種達到其相應感病程度（相對抗性指數<0.5）時，該批次抗豇豆煤霉病鑒定視為有效。7.3抗性評價一次鑒定結果不可