第二節白細胞檢查

EXAMINATIONOFLEUKOCYTE

重慶三峽醫專檢驗教研室譚海明授課對象：2010級醫學檢驗專科

外周血：白細胞(leukocyte，LEU)

粒細胞(granulocyte，GRAN)、淋巴細胞(1ymphocyte，L)

單核細胞·(monocyte，M)。

粒細胞顆粒的特點又可分為三個亞類，中性粒細胞(桿狀、分葉)、嗜酸性粒細胞嗜堿性粒細胞。血細胞發育規律圖血細胞發育規律圖根據細胞動力學的原理，將粒細胞分化、發育和成熟的過程劃分為干細胞池(stemcellpool)、分裂池(mitoticpool)、成熟池(maturationpool)、貯存池(storagepool)、循環池(circulatingpool)、邊緣池(marginalpool)。貯存池的桿狀核及分葉核粒細胞僅有約1／20釋放到外周血中。成熟粒細胞進入血液后約50％運行于血循環之中，構成循環池，另一半則附著于血管內壁而形成邊緣池。粒細胞的生成和去路多能干細胞（CFU-S）粒C系干細胞（CFU-GM）外周血組織體腔肝脾淋巴結衰老、死亡

分化

CSF（集落刺激因子），分化

分裂

分裂

分裂

發育發育在骨髓10天

發育到

6---10天

（破壞

）（破壞

）1—2天.防御能力細胞動力學分裂池成熟池貯備池循環池邊緣池釋放外周血互換、維持動態平衡骨髓

1/2

1/2日常工作所作的WBC計數，實際上只反映了循環池的WBC數白細胞計數(whitebloodcellcount，WBC)：指測定單位容積的外周血各種白細胞的總數。[檢測原理]（顯微鏡計數法）用白細胞計數稀釋液(稀乙酸)，將血液稀釋一定倍數并破壞成熟紅細胞和固定白細胞充入改良牛鮑(Neubauer)計數板，在顯微鏡下計數一定范圍內的白細胞數經換算求得每升血液中各種白細胞的總數。一、白細胞計數【質量保證】1．計數誤差

(1)技術誤差：規范、熟練的操作，儀器的校正、試劑的標準化和操作人責任心。

1)器材：清潔、干燥，校準，合格試劑。

2)標本要求：血液分析儀檢測的標本要求及質量保證見表2—25。

3)加蓋玻片影響：WHO推薦采用“推式”法，此法較“蓋式”法更能保證充液體積的高度為0.10mm。

4)充池影響：①充池前充分混勻白細胞懸液，避免氣泡。②充池應避免充液過多、過少、斷續，避免氣泡及充液后移動蓋玻片。

技術誤差5)計數原則：計數壓線細胞時，數上不數下,數左不數右。6)計數室內細胞分布要均勻：白細胞總數在正常范圍內時，各大方格間的細胞數不得相差8個以上。2次重復計數誤差不超過l0％。7)有核紅細胞影響：外周血出現有核紅細胞，可使白細胞計數結果偏高，須校正。

技術誤差(2)固有誤差：主要是指計數域誤差(fielderror)。是由于每次充池后血細胞在計數室內分布不同計數域誤差變異系數(CV)可隨計數的細胞數量增多而減小。

白細胞數量太少時(<3X109／L)8個大方格或縮小稀釋倍數白細胞數量太多時(>15X109／L)稀釋固有誤差還應包括計數室和吸管的使用次數，即計數池誤差(chambererror)和吸管誤差

計數誤差3)生理狀態影響：運動、勞動、冷熱水浴、酷熱、嚴寒等常出現一過性白細胞增高；一日之內白細胞數最高值與最低值可相差1倍。另外，吸煙者白細胞總數平均較非吸煙者高30％。最好在固定檢查時間。計數誤差

2．質量考核與評價

(1)．經驗控制

(1)與紅細胞數相對比較：正常范圍下，紅細胞數／白細胞數約為500：1。

(2)判斷白細胞計數與顯微鏡白細胞分布密度一致性(表2—4)：由于手工制備血涂片難以標準化，因此也只能粗略估計，有矛盾者再復查。表2—4血涂片上WBC密度與WBC數量關系血涂片上WBC數：／HP

WBC(×109／L)

2~44~7

4~67~9

6~1010~1210~12

13~18(2).兩差比值評價法(3).雙份計數標準差評價法

2．質量考核與評價①成人：(4～10)×109／L②新生兒：(15～20)×109／L③6月～2歲：(11～12)×109／L參考值＞10×109／L稱白細胞增多(1eukocytosis)，＜4×109／L稱白細胞減低(1eukopenia)。白細胞數在生理或病理情況下均可有變異。由于中性粒細胞占白細胞總數的50％～70％，其增高和減低直接影響白細胞總數的變化，中性粒細胞增減的意義與白細胞總數的增減的意義基本上是一致的。有時兩者的數量關系也有不一致的情況，要具體情況具體分析。臨床意義

白細胞分類計數(differentialcount，DC)是將血液制成涂片，經染色后在油鏡下觀察白細胞的形態并進行分類，求得各種類型白細胞的比值(百分率)。分析白細胞分類變化意義時，必須計算各類型白細胞的絕對值(各類型白細胞絕對值＝白細胞計數值×白細胞分類計數百分率)，才有診斷參考價值。白細胞分類計數的方法有兩種：一種是傳統顯微鏡分類法，一種是血液分析儀分類計數法。二、白細胞分類計數

[檢測原理](顯微鏡分類法)

將血液涂成薄膜，經Wright染色后，于顯微鏡下，按白細胞形態學特征逐個分別計數，得出各種白細胞百分率。結合白細胞計數結果，可間接求出每升血液中各種白細胞的絕對值。

[質量保證]

1．計數誤差

(1)血涂片制備和染色：

(2)觀察部位：體尾交界處或片頭至片尾的3／4區域

(3)分類計數的范圍和移動規律:“城垛式”

(4)分類計數的白細胞數量：計數越多，誤差越小全國臨床檢驗方法學學術研討會推薦的方案見表。

(5)注意事項：

1)觀察全片：

2)計數異常和幼稚血細胞：①白細胞包括在白細胞分類的比值或百分率中。②幼稚紅細胞以分類100個白細胞時見到幼稚紅細胞的數量來報告。3)觀察其他血細胞或成分：紅細胞、血小板

[質量保證]

1．計數誤差

2．質量考核與評價

由于手工制備的血涂片細胞分布不均勻，分類計數結果變化大，很難對每張血涂片進行嚴格的質量控制。目前亦缺乏統一的質量控制方法，關鍵在于熟練操作技術，嚴格控制各個操作環節，盡量減少誤差。[質量保證]形態識別：桿狀核和分葉核標準的不同，單核細胞與大淋巴細胞的鑒別、染色較差的涂片，脫顆粒的嗜堿性粒細胞與中性粒細胞的區分等。凡不能識別的細胞應歸為“未能識別的白細胞”。

[質量保證]

白細胞分類計數的參考方法-------尚無統一美國國家臨床實驗室標準化委員會(NationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandards，NCCLS)使用的參考方法是：使用EDTA-K2抗凝的靜脈血，人工制成血涂片，以Romanowaky液進行染色，使用“城墻式”移動法，油鏡下分類計數200個白細胞。當以其他分類法與此法作為標準進行比較時，需要4個熟練檢驗人員對同一張涂片，各計數200個白細胞(即總數為800個細胞)后，求出平均值來作為各類白細胞的靶值。

成人白細胞分類參考值百分率(％)絕對值(×109／L)中性桿狀核粒細胞1~50.04~0.5中性分葉核粒細胞50~702~7嗜酸性粒細胞0.5~5

0.05~0.5嗜堿性粒細胞0~1

0~1淋巴細胞20~40

0.8~4單核細胞3~8

0.12~0.8參考值正常情況下，中性桿狀核粒細胞占1％一5％，中性分葉核粒細胞占50％一70％，

2葉核細胞為10％～30％，

3葉核為40％～50％，

4葉核為10％一20％，

5葉核小于3％。正常時，外周血中性粒細胞核以3葉的居多，桿狀核與分葉核之間的正常比值為l：13。參考值1.中性粒細胞增多白細胞總數與中性粒細胞(neutrophil，N)白細胞總數與中性粒細胞數量增多及減少的定義見表.

在外周血中，由于中性粒細胞占白細胞總數的50％一70％，臨床意義基本一致。淋巴細胞、嗜酸性粒細胞等數量上的改變也會引起白細胞總數的變化。因此，還應具體分析。

臨床意義1)中性粒細胞生理性增多：常不伴有白細胞質量的改變。年齡：臨床意義1)生理性增多：日間變化：一日之間最高值與最低值之間可相差1倍。運動、疼痛和情緒的影響：如劇烈運動可使短時間內白細胞高達35X109／L，以中性粒細胞為主。當運動結束后迅即恢復原有水平。妊娠與分娩：分娩后2～

5d內恢復正常。其他：吸煙者白細胞的生理波動很大，30%以內波動多無意義，只有通過定時和反復觀察才有意義。2)病理性：

核左移(shifttotheleft)：外周血中桿狀核粒細胞增多或(和)出現晚幼粒、中幼粒、早幼粒等細胞時稱為核左移。核右移(shihtotheright)：

中性粒細胞核分葉5葉以上者超過3％則稱為核右移，常伴有白細胞總數減低。

2)病理性增多：

2)病理性增多：外周血白細胞>10X109／L

①反應性增多，可見于：

A、急性感染或炎癥：為引起白細胞總數和中性粒細胞增多最常見的原因。球菌、桿菌、真菌、放線菌、病毒、立克次體、螺旋體、寄生蟲等。增高程度與病原體種類、感染部位和程度以及機體的反應性等有關

B、類白血病反應：指機體在有明確病因的刺激下，出現白細胞數中度增高(<50Xl09／L)，多以成熟中性粒細胞增多為主，原始、早幼粒細胞增多少見(<10％)，常伴較明顯的中性粒細胞中毒性改變，其他細胞均無明顯變化。C.廣泛組織損傷或壞死：嚴重外傷、手術創傷、大面積燒傷、凍傷以及血管栓塞(如心肌梗死、肺梗死)所致局部缺血性壞死等使組織嚴重損傷者，在12～36h內常見白細胞增高，以中性分葉核粒細胞增多為主。有無術后感染，與心絞痛鑒別。

D、

急性溶血：缺氧及分解產物刺激

E、

急性失血：消化道大量出血、內臟破裂如脾破裂或輸卵管妊娠破裂等，白細胞總數常在1～2h內迅速增高，可達(10～

20)X109／L，但此時的紅細胞數和血紅蛋白量仍可暫時保持正常范圍，待組織間液吸收回血液或補充循環血容量后，才出現紅細胞和血紅蛋白減低。早期診斷內出血的參考指標。F、急性中毒：a、外源性中毒：化學物質或藥物如汞、鉛、安眠藥急性中毒，生物毒素如昆蟲毒、蛇毒以及植物毒素如毒蕈中毒。b、內源性中毒：如尿毒癥、糖尿病酮癥酸中毒、子癇、內分泌疾病危象等。G、惡性腫瘤：

非造血系統惡性腫瘤可出現持續性白細胞增高，以中性分葉核粒細胞增多為主。其機制可能為：①腫瘤壞死分解產物刺激②腫瘤細胞(如肝癌、胃癌等)促粒細胞生成因子。③惡性腫瘤骨髓轉移，破壞骨髓調控作用等H、其他原因：見于類風濕性關節炎、自身免疫性溶血性貧血、痛風及嚴重缺氧應用皮質激素、腎上腺素、氯化鋰等。

②異常增生性增多

A、白血病：B、骨髓增殖性疾病：包括真性紅細胞增多癥、原發性血小板增多癥和骨髓纖維化癥(也可包括慢性粒細胞白血病)等。本組疾病均系多能干細胞的病變引起，具有潛在演變為急性白血病的趨勢。其特點為除了一種血細胞成分的主要增多外，常伴有其他一種或兩種血細胞的增生，故常有中性粒細胞增多，白細胞數常在(10—30)X109／L。

(2)中性粒細胞減低(neutropenia)：

白細胞減低主要是中性粒細胞減低。粒細胞減低癥(granulocytopenia)：中性粒細胞絕對值成人<

2.0X109／L,

兒童<1.5X109／L粒細胞缺乏癥(agranulocytosis)：外周血白細胞<2.0X109／L,

中性粒細胞絕對值<0.5X109／L(2)中性粒細胞減低(neutropenia)：

(2)中性粒細胞減低(neutropenia)：

1)嗜堿性粒細胞增多(basophilia)：指外周血嗜堿性粒細胞濃度絕對值超過參考值的上限(>0.05×109／L)的一種征象

(2)嗜堿性粒細胞減少(basopenia)：多無臨床意義。減少可見于過敏性休克、促腎上腺皮質激素或糖皮質激素應用過量以及應激反應等。3．淋巴細胞(lymphocyte，L)(1)淋巴細胞增多(lymphocytosis)：指外周血淋巴細胞絕對值增高成人大于4.0×109／L；兒童：4歲以上大于7.2×109／L、

4歲以下大于9.0×109／L。

成人淋巴細胞約占白細胞的1／4，起源于多能干細胞。在骨髓、脾、淋巴結和其他淋巴組織生發中心發育成熟者稱為B淋巴細胞，占淋巴細胞的20％～30％；B細胞壽命較短，一般僅3—5d。在胸腺、脾、淋巴結和其他組織，依賴胸腺素發育成熟者稱為T淋巴細胞，占淋巴細胞的60％～70％。T細胞壽命較長，可達數月，甚至數年。此外，還有少數NK細