體外診斷試劑(shìjì)分析性能評估

指導原則2013.04.25精品資料目錄(mùlù)1.檢測限2.線性范圍3.可報告范圍4.準確度（回收(huíshōu)實驗）5.準確度（方法學比對）6.精密度7.干擾實驗8.穩定性9.參考值（參考區間）精品資料基本(jīběn)要求實驗(shíyàn)人員儀器設備試劑精品資料檢測(jiǎncè)限（limitofdetection）1、定義：檢測限是指檢測方法可檢測出的最低被測量濃度，，也稱檢測低限或最小檢出濃度，有時也稱分析(fēnxī)靈敏度。2、檢測方法：一次運行中將空白樣本重復測定20次。3、空白樣本制備：空白樣本應不含被測物，但其基質應與待測常規樣本相同。若空白樣本難以得到，可采用5%牛血清或人血清白蛋白溶液，或根據測定項目選用相應基質樣本，但應將基質效應減至最小。4、數據處理記錄：記錄初始響應值，如吸光度值等。統計：計算20次結果的均值X與標準差SD。5、結果報告以空白均值加兩倍標準差報告方法的檢測限。（即X+2SD）精品資料線性范圍(fànwéi)線性：測量結果與樣品中被測量的值直接成比例的能力。樣本要求樣本基質應與臨床實驗樣本相似。樣本不得含有干擾物質：溶血、脂血、黃疸(huángdǎn)等。實驗過程建立線性范圍：在預期線性范圍內選擇9-11個濃度水平，每個濃度水平重復測定3-4次。驗證線性范圍：測定4-6個濃度水平，每個濃度水平重復測定3-4次。精品資料線性范圍(fànwéi)數據處理記錄原始數據計算精密度，剔除離群值進行線性回歸線性范圍應符合一定(yīdìng)要求精品資料可報告(bàogào)范圍（reportablerange）可報告范圍包括可報告低限和可報告高限樣本要求低值樣本：接近方法線性范圍低限濃度水平的樣本，一般為5個濃度水平，濃度水平間隔應小于線性范圍低限的10%。高值樣本：含有被測物的高值樣本，必要時可加入被分析物純品，并計算出理論值。將該高值樣本稀釋使其接近于線性范圍的上1/3區域內，并記錄稀釋倍數。至少(zhìshǎo)選擇3個高濃度樣本。精品資料可報告(bàogào)范圍（reportablerange）實驗過程在一次運行中將低值樣本重復測定10次，高值稀釋樣本重復測定3次。數據(shùjù)處理數據(shùjù)記錄數據(shùjù)統計：分別計算AVE、SD、CV值。對于可報告高限還應計算乘以稀釋倍數后的還原濃度和相對偏差。精品資料可報告(bàogào)范圍（低限）數據記錄表

濃度1濃度2濃度3濃度4濃度512345678910AVESDCV精品資料可報告(bàogào)范圍（高限）數據記錄表濃度1濃度2濃度3123AVE稀釋倍數還原濃度理論濃度相對偏差（%）精品資料可報告(bàogào)范圍（reportablerange）結果報告(bàogào)可報告(bàogào)范圍低限：以方法性能標示的CV值為可接受界值，由數據中選取CV值等于或小于可接受界值的最低濃度水平作為可報告(bàogào)低限。可報告(bàogào)范圍高限：選取還原濃度與理論濃度的偏差（%）等于或小于方法標示的界值時的最大稀釋倍數為方法推薦的最大稀釋倍數，方法線性范圍的上限與最大稀釋倍數的乘積為該方法可報告(bàogào)范圍的高限。精品資料準確度（回收(huíshōu)實驗）準確度：一個測量值與可接受的參考值之間的一致程度。樣本制備1、選擇合適濃度的常規檢測樣本，分為體積相同的3-4份。2、在其中(qízhōng)2-3份樣本中加入不同量的待測物標準，制成2-3個不同加入濃度的回收樣本，計算加入的待測物的濃度。3、在另一份樣本中加入同樣量的無被測物的溶劑，制成基礎樣本。注意事項1、加入體積：加入的標準液體積一般在樣本體積的10%以內2、加入待測物的濃度：保證總濃度在方法分析測量范圍內。3、標準物濃度：因為標準物溶液加入體積不到10%，為保證得到不同濃度的回收樣本，標準物的濃度應該足夠高。精品資料準確度（回收(huíshōu)實驗）

accuracy（recovery）實驗過程：用待評價方法對回收樣本(yàngběn)和基礎樣本(yàngběn)進行測定，通常對樣本(yàngběn)進行2-3次重復分析，取其均值進行計算。數據處理及結果報告1、計算回收率：回收率=（回收樣本(yàngběn)濃度-基礎樣本(yàngběn)濃度）/加入濃度×100%2、計算平均回收率：平均回收率=（回收率1+回收率2+回收率3）/3×100%3、計算比例系統誤差：比例系統誤差=100%-平均回收率4、可接受判斷：比例系統誤差應不大于相關規定。精品資料范例(fànlì)-某法測定血清葡萄糖回收率1、樣本制備基礎樣本：血清1ml（濃度5.5mmol/L）+蒸餾水0.1ml回收樣本1：血清1ml+0.1ml葡糖糖水溶液（濃度22mmol/L）回收樣本2：血清1ml+0.1ml葡糖糖水溶液（濃:55mmol/L）2、數據結果(jiēguǒ)3、計算平均回收率：平均回收率=（103+99）/2×100%=101%4、計算比例系統誤差：比例系統誤差=/100%-101%/=1%測定濃度mmol/L加入濃度mmol/L回收濃度mmol/L回收率%基礎樣本5.00回收樣本17.062.002.06103回收樣本29.955.004.9599精品資料精密度批內精密度：嚴格的相似條件下，所得到的最佳精密度。批間精密度：指在同一實驗室，由同一（組）操作員在同一儀器上，使用同一方法和同種、同一批號試劑，在一段時間內（一般為一個月或20個工作日）對同一測試(cèshì)樣品（常用質控品）測量結果的精密度。精品資料精密度樣本要求1、至少評估兩個濃度水平(shuǐpíng)的樣本，若兩個濃度樣本的精密度由顯著差異，則建議增加第三個濃度水平(shuǐpíng)樣本；2、樣本濃度在測量范圍內，至少有一個濃度在醫學決定水平(shuǐpíng)左右；3、不要為了得到較小的精密度，而選擇高值樣本，也不要選擇靠近檢出限的樣本；4、如果不存在醫學決定水平(shuǐpíng)，可在參考區間上限左右選一個濃度。精品資料精密度只評估批內精密度1、試劑和標準品：應使用同一種類、同一批號的試劑和校準物。2、方法(fāngfǎ)：在一次檢測中，對同一樣本至少進行20次重復測定。3、數據處理：記錄所有數據，計算平均值、標準差及變異系數。4、離群值：結果與總均值的差值超過4個標準差時，可認為該結果為離群值。一次評估只能有一個離群值，當離群值超過一個時，應懷疑該方法(fāngfǎ)的穩定性及操作者的熟練程度。精品資料精密度同時評價批內和批間精密度依據樣品(yàngpǐn)的情況選擇實驗方法1、每天做2個批次的測試，每批對同一樣品(yàngpǐn)作雙份測量，工作20天，共80個測試結果。2、每天做1個批次的測試，每批對同一樣品(yàngpǐn)作4次測量，工作20天，共80個測試結果。3、每天做2個批次的測試，每批對同一樣品(yàngpǐn)作8次測量，工作5天，共8