臨沂市重點中學(xué)2025屆高考仿真模擬生物試卷注意事項:1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號碼填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2．答題時請按要求用筆。3．請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試卷上答題無效。4．作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5．保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．研究發(fā)現(xiàn)，抑郁癥患者大腦中X細胞合成的FGF9（一種分泌蛋白）的含量遠高于非抑郁癥患者。下列敘述錯誤的是（）A．參與FGF9合成和分泌過程的細胞器有核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體和線粒體B．FGF9的分泌過程屬于胞吐C．FGF9的分泌過程體現(xiàn)了細胞膜具有流動性D．抑郁癥患者大腦中有較多FGF9的根本原因是X細胞中合成該物質(zhì)的酶的活性較高2．人類中禿頂和非禿頂受常染色體上的一對等位基因B、b控制，基因型為BB時，無論男女都表現(xiàn)為禿頂；基因型為Bb時，男性表現(xiàn)為禿頂，女性表現(xiàn)為非禿頂；基因型為bb時，無論男女都表現(xiàn)非禿頂。下列有關(guān)分析錯誤的是（）A．在自然人群中，禿頂患者男性多于女性B．生物體的內(nèi)在環(huán)境會影響顯性性狀的表現(xiàn)C．兩性體內(nèi)性激素的不同使雜合子的表現(xiàn)型不同D．非禿頂?shù)哪信榕渌蟠际欠嵌d頂3．從生長狀況相同的一些胚芽鞘上分別對應(yīng)截取三種切段即S1、S2和S3，然后把這三種切段分別放在不含IAA和赤霉素、含赤霉素、含IAA三種相同濃度的溶液中，培養(yǎng)3天后，測量切段長度，結(jié)果如下圖。下列敘述正確的是A．若從幼根獲取相應(yīng)切段進行處理，結(jié)果與上圖一致B．實驗結(jié)果表明赤霉素對切段伸長具有兩重性C．該濃度IAA對切段S2的促進生長作用低于切段S3D．該實驗結(jié)果可證明赤霉素和IAA共同作用促進伸長效果更好4．某類性別發(fā)育異常男性疾病性染色體正常且性腺為睪丸，而其他性征出現(xiàn)不同程度的女性化。臨床發(fā)現(xiàn)，該類病的甲患者促性腺激素水平偏高，但雄性激素水平相對偏低；乙患者促性腺激素和雄性激素水平均偏高。下列分析錯誤的是（）A．甲患者的女性化可能是雄性激素合成不足造成的B．甲患者雄激素水平偏低可能與促性腺激素受體缺乏有關(guān)C．乙患者的女性化可能是缺乏雄性激素受體導(dǎo)致的D．乙患者體內(nèi)促性腺激素的偏高與雄性激素水平偏高有關(guān)5．某小組為了解某種加酶洗衣粉對蛋白質(zhì)的水解作用，將相同大小的蛋白塊置于等量相同適宜濃度的洗衣粉溶液中，蛋白塊消失所需的時間與溫度的關(guān)系如下圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．該洗衣粉水解脂肪的最適溫度也是45℃B．B和C兩點催化效率相同的原因是酶的空間結(jié)構(gòu)相同C．若改變洗衣粉溶液的pH，則A點會向左或向右移動D．若減小洗衣粉的濃度，A、B、C點均向上移動6．隨著“螞蟻森林”的推行和廣大用戶的積極參與，阿拉善、通遼、鄂爾多斯等地已經(jīng)種上梭梭樹等樹木，以前的沙漠，現(xiàn)在已是綠油油的一片。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A．這些地方的抵抗力穩(wěn)定性和恢復(fù)力穩(wěn)定性都增強了B．沙漠變綠洲說明了人類活動可以改變演替的方向C．生態(tài)系統(tǒng)的食物鏈和食物網(wǎng)在不同的季節(jié)、氣候條件下可能發(fā)生改變D．種植梭梭樹等沙生植物固沙體現(xiàn)了生物多樣性的直接價值，7．如圖是某神經(jīng)纖維動作電位的模式圖，下列敘述不正確的是（）A．K+內(nèi)流是神經(jīng)纖維靜息電位形成的主要原因B．bc段Na+大量內(nèi)流，膜電位變成外負(fù)內(nèi)正C．cd段電位下降的原因是K+的大量外流D．動作電位發(fā)生是一系列離子通道順序開關(guān)的結(jié)果8．（10分）下列關(guān)于生物進化的敘述，正確的是（）A．種群間的雙向遷移，會使種群間的遺傳差異變大B．只要種群的個體間存在變異，自然選擇就發(fā)生作用C．生物界在類型上具有多樣性，模式上具有統(tǒng)一性D．達爾文在自然選擇的基礎(chǔ)上發(fā)現(xiàn)了人工選擇二、非選擇題9．（10分）三孢布拉式霉菌是一種可產(chǎn)生胡蘿卜素的真菌，常用于胡蘿卜素的工業(yè)化生產(chǎn)。請回答：（1）胡蘿卜素是常用的食品色素，廣泛地用作食品、飲料、飼料的添加劑，除此以外，它還可以用于治療______。（寫出一點即可）（2）配制三孢布拉式霉菌的培養(yǎng)基時，需將pH調(diào)至______（填“酸性”或“中性”或“微堿性”）

（3）將發(fā)酵后的三孢布拉式霉菌處理后研磨成粉末，加入______（填“石油醚”或“乙醇”或“丙酮”）萃取選擇該萃取劑的依據(jù)是：具有較髙的沸點·能夠充分溶解胡蘿卜素，并且______。（4）將提取的胡蘿卜素粗品通過______法進行鑒定，據(jù)上圖結(jié)果可判斷出樣品2中含有胡蘿卜素，判斷依據(jù)是____________。（5）研究者利用聚丙烯酰胺凝膠電泳對三孢布拉氏霉菌的蛋白質(zhì)進行分離，為了消除蛋白質(zhì)分子原有電荷量對遷移率的影響，可在凝膠中加入______，原理是______，因而掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差別，使電泳遷移率完全取決于蛋白質(zhì)分子的大小。10．（14分）下圖是基因工程中獲取目的基因和構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程，請回答下列有關(guān)問題：（1）①分析上圖可知，構(gòu)建重組DNA分子最好選用_____限制酶，理由是____。②科學(xué)家已經(jīng)測出某種酶的氨基酸序列，因此可以通過_____方法來獲取目的基因，獲得目的基因后，常利用____在體外將其大量擴增；（2）將目的基因?qū)敫惺軕B(tài)細胞的處理方法是___。真核細胞作為受體細胞的優(yōu)勢是____。（3）若將某種酶的氨基酸順序進行重新排列，其催化能力能有效提高，生產(chǎn)上述高效酶的現(xiàn)代生物工程技術(shù)是____。（4）胚胎工程只是指對動物的____所進行的多種顯微操作和處理技術(shù)。雖然轉(zhuǎn)基因技術(shù)和細胞工程在動植物都有廣泛應(yīng)用。（5）生態(tài)工程是實現(xiàn)循環(huán)經(jīng)濟最重要的手段之一，請寫出它遵循的基本原理______（至少答二項）。11．（14分）營養(yǎng)缺陷型菌株就是在人工誘變或自發(fā)突變后，微生物細胞代謝調(diào)節(jié)機制中的某些酶被破壞，使代謝過程中的某些合成反應(yīng)不能進行的菌株。這種菌株能積累正常菌株不能積累的某些代謝中間產(chǎn)物，為工業(yè)生產(chǎn)提供大量的原料產(chǎn)物。以下是實驗人員利用影印法初檢氨基酸缺陷型菌株的過程。回答下列問題：（1）過程①的接種方法為______，與基本培養(yǎng)基（只含碳源、無機鹽、水）相比，待測培養(yǎng)皿中特有的成分有______。（2）進行②過程培養(yǎng)時，應(yīng)先將絲絨布轉(zhuǎn)印至基本培養(yǎng)基上，原因是______。從______培養(yǎng)基上獲得相應(yīng)的營養(yǎng)缺陷型菌株。釆用影印法培養(yǎng)的優(yōu)點是______。（3）為了進一步完成對初檢的營養(yǎng)缺陷型菌株的鑒定，實驗人員進行了如下操作：①用接種針挑取______（填“菌落A”或“菌落B”）接種于盛有完全培養(yǎng)液的離心管中，28℃振蕩培養(yǎng)1～2天后，離心，取沉淀物用______洗滌3次，并制成菌懸液。②吸取1mL菌懸液加入無菌培養(yǎng)皿中，傾注15mL融化并冷卻至45?50℃的基本培養(yǎng)基，待其冷凝后用記號筆在皿底劃分五個區(qū)域，標(biāo)記為A、B、C、D、E。③在劃分的五個區(qū)域上放入少量分組的氨基酸粉末（如下表所示），經(jīng)培養(yǎng)后，觀察生長圈出現(xiàn)的區(qū)域，從而確定屬于何種氨基酸缺陷型。組別所含氨基酸A組氨酸蘇氨酸谷氨酸天冬氨酸亮氨酸B精氨酸蘇氨酸賴氨酸甲硫氨酸苯丙氨酸C酪氨酸谷氨酸賴氨酸色氨酸丙氨酸D甘氨酸天冬氨酸甲硫氨酸色氨酸絲氨酸E半胱氨酸亮氨酸苯丙氨酸丙氨酸絲氨酸在上述鑒定實驗中，發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)基A、D區(qū)域出現(xiàn)生長圈，說明該營養(yǎng)缺陷型菌株屬于______。12．以廣東科學(xué)家領(lǐng)銜的國際研究團隊歷時四年，利用基因編輯技術(shù)（CRISPR/Cas9）和體細胞核移植技術(shù)，成功地將亨廷頓舞蹈病基因（HTT基因）導(dǎo)入豬的受精卵中，從而培育出首例患亨廷頓舞蹈病轉(zhuǎn)基因的豬，精準(zhǔn)地模擬出人類神經(jīng)退行性疾病，標(biāo)志我國大動物模型研究走在了世界前列。具體操作過程如圖。（1）利用基因編輯技術(shù)，將人突變的HTT基因插入到豬的內(nèi)源性HTT基因的表達框中，可能用到的基因工程工具酶有___________。目的基因能否在成纖維細胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是_______________________。（2）欲獲取單個的成纖維細胞，需用________酶處理豬的相應(yīng)組織，放置于混合氣體培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，其中CO2的主要作用是___________________。過程①得到去核卵細胞普遍采用__________的方法。（3）為獲得更多的患亨廷頓舞蹈病豬，可在胚胎移植前對胚胎進行__________，若操作對象是囊胚階段的胚胎，要注意______________________。（4）比起果蠅、線蟲、小鼠，豬作為人類疾病模型的優(yōu)勢有______________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解析】

FGF9是大腦中X細胞合成的一種分泌蛋白，分泌蛋白的合成與分泌過程：附著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體合成蛋白質(zhì)→內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進行粗加工→內(nèi)質(zhì)網(wǎng)“出芽”形成囊泡→高爾基體進行再加工形成成熟的蛋白質(zhì)→高爾基體“出芽”形成囊泡→細胞膜，整個過程還需要線粒體提供能量。【詳解】A、根據(jù)題意分析可知，參與FGF9合成和分泌過程的細胞器有核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體和線粒體，A正確；BC、FGF9的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，以胞吐方式分泌，其分泌過程體現(xiàn)了細胞膜的結(jié)構(gòu)特點，即具有一定的流動性，BC正確；D、抑郁癥患者大腦中FGF9含量遠高于正常人，其根本原因是控制合成FGF9的基因過量表達，D錯誤。故選D。【點睛】本題結(jié)合抑郁癥，考查分泌蛋白的合成、分泌等相關(guān)知識，要求考生掌握分泌蛋白的合成和分泌過程，屬于考綱理解和應(yīng)用層次的考查。2、D【解析】

分析題干：人類的非禿頂和禿頂受常染色體上的等位基因B、b控制，這對相對性狀的遺傳遵循基因的分離定律。在男性中，BB表現(xiàn)為非禿頂，Bb和bb表現(xiàn)為禿頂。在女性中，BB和Bb表現(xiàn)為非禿頂，bb表現(xiàn)為禿頂。【詳解】ABC、基因型為Bb時，男性表現(xiàn)為禿頂，女性表現(xiàn)為非禿頂，因此在自然人群中，禿頂患者男性多于女性，這也說明生物體的內(nèi)在環(huán)境會影響顯性性狀的表現(xiàn)，而這種差異與兩性體內(nèi)性激素的不同有關(guān)，ABC正確；D、非禿頂?shù)哪信榕洌襞詾殡s合子，則后代男孩可能是禿頂，D錯誤。故選D。【點睛】本題的性狀是從性遺傳，考生需要將其與伴性遺傳分開。3、C【解析】

分析題圖：S1為胚芽鞘尖端，具有分裂能力，S3段為成熟組織，不具有分裂能力。柱狀圖：與對照組相比，赤霉素促進切段S1的生長，IAA抑制切段S1的生長；赤霉素明顯促進S2的生長，而對于S3的促進生長的效果不太明顯；IAA對S3的促進生長的效果比赤霉素要強，即S2切段對于赤霉素的敏感性要高于切段S3的細胞，而S2切段對于生長素的敏感性要低于切段S3的細胞。【詳解】A、由于根和芽對生長素的敏感性不同，因此若從幼根獲取相應(yīng)切段進行處理，結(jié)果與上圖有所不同，A錯誤；B、圖中三個實驗結(jié)果中赤霉素對切段伸長都是促進作用，沒有體現(xiàn)出兩重性，B錯誤；C、據(jù)圖可知該濃度IAA對切段S2的促進生長作用低于切段S3，C正確；D、由于缺少赤霉素和IAA共同作用的實驗組，因此無法得出“赤霉素和IAA共同作用促進伸長效果更好”的結(jié)論，D錯誤；故選C。【點睛】本題考查了植物激素的作用及相應(yīng)的實驗設(shè)計，解題關(guān)鍵是對題圖的分析：先找出實驗的自變量和因變量，再分析坐標(biāo)圖中各柱形的變化規(guī)律，結(jié)合教材的知識點，分析各選項。4、D【解析】

該題主要考察了性激素的分級調(diào)節(jié)和反饋調(diào)節(jié)的特點，首先下丘腦分泌促性腺激素釋放激素作用于垂體，促進垂體分泌促性腺激素，又該激素作用于性腺，促進性腺分泌雄性激素，而雄性激素可以反過來抑制下丘腦和垂體的分泌作用。【詳解】A、雄性激素具有激發(fā)和維持雄性第二性征的作用，甲患者體內(nèi)的雄性激素減少，可能使其女性化的原因，A正確；B、當(dāng)個體缺乏促性腺激素受體，則促性腺激素?zé)o法促進性腺分泌雄性激素，可能導(dǎo)致雄性激素偏低，B正確；C、乙患者體內(nèi)的雄性激素很高，正常情況下會抑制下丘腦和垂體的分泌作用，但促性腺激素含量也很高，則可能是缺乏雄性激素受體導(dǎo)致的，C正確；D、雄性激素水平偏高應(yīng)該造成促性腺激素偏低，D錯誤；故選D。5、D【解析】

分析題圖可知，隨著溫度升高，蛋白塊消失所需時間逐漸縮短，在45℃時蛋白塊消失所需時間最短，而后隨著溫度升高，蛋白塊消失所需時間逐漸延長。結(jié)合題意可知該實驗探究洗衣粉中蛋白質(zhì)水解酶的活性與溫度的關(guān)系，可知該酶的活性隨溫度上升先增加后減少，該酶的最適溫度為45℃。【詳解】A、酶具有專一性，分析題圖可知該洗衣粉中具有蛋白質(zhì)水解酶，蛋白質(zhì)水解酶的最適溫度為45℃，但無法判斷是否含有脂肪水解酶，A錯誤；B、酶在C點溫度下催化效率下降是由于高溫破壞了酶的空間結(jié)構(gòu)導(dǎo)致酶的失活，B、C兩點的酶的空間結(jié)構(gòu)不相同，B錯誤；C、若改變洗衣粉溶液的pH值，不會使酶的最適溫度發(fā)生改變，只會改變酶的催化效率，故會使A點向上或向下移動，C錯誤；D、若減小洗衣粉的濃度，即降低酶的量，會延長蛋白塊消失所需的時間，則A、B、C三點均向上移動，D正確；故選D。6、D【解析】

生物多樣性通常有三個主要的內(nèi)涵，即生物種類的多樣性、基因（遺傳）的多樣性和生態(tài)系統(tǒng)的多樣性。其價值主要體現(xiàn)在三個方面：直接價值：指對人類的社會生活有直接影響和作用的價值，如：藥用價值、觀賞價值、食用價值和生產(chǎn)使用價值。間接價值：一般表現(xiàn)為涵養(yǎng)水源、凈化水質(zhì)、鞏固堤岸、防止土壤侵蝕、降低洪峰、改善地方氣候、吸收污染物，調(diào)節(jié)碳氧平衡，在調(diào)節(jié)全球氣候變化他的作用，主要指維持生態(tài)系統(tǒng)的平衡的作用等等。潛在價值：今天還未被利用的哪些物種在將來會有利用的價值．栽培植物的野生親緣種究竟能提供多少對農(nóng)林業(yè)發(fā)展有用的遺傳材料，是不可估量的。【詳解】A、由于這些地方的物種豐富度提高，營養(yǎng)結(jié)構(gòu)變得復(fù)雜，故該地生態(tài)系統(tǒng)的的抵抗力穩(wěn)定性和恢復(fù)力穩(wěn)定性都有所增強，A正確；B、由于人類的活動沙漠變綠洲，說明了人類活動可以改變演替的方向，B正確；C、由于該地氣候條件波動性較大，故生態(tài)系統(tǒng)的食物鏈和食物網(wǎng)在不同的季節(jié)、氣候條件下可能發(fā)生改變，C正確；D、種植梭梭樹等沙生植物固沙體現(xiàn)了生物多樣性的間接價值，D錯誤。故選D。7、A【解析】

根據(jù)題意，圖中a點之前為靜息電位，由K+外流所致，而此時膜外Na+高于膜內(nèi)，膜外K+低于膜內(nèi)；曲線上升過程bc段是因為Na+內(nèi)流所致；下降過程cd段是因為K+外流所致。【詳解】A、K+外流是神經(jīng)纖維靜息電位形成的主要原因，A錯誤；B、靜息電位是外正內(nèi)負(fù)的膜電位，bc段由于Na+通道打開，Na+大量內(nèi)流，膜電位變成外負(fù)內(nèi)正的動作電位，B正確；C、由圖可知cd段Na+通道關(guān)閉，K+通道打開，故cd段電位下降的原因是K+的大量外流，使電位逐漸恢復(fù)為外正內(nèi)負(fù)的靜息電位，C正確；D、由圖可知，動作電位發(fā)生是一系列離子通道順序開關(guān)的結(jié)果，D正確。故選A。8、C【解析】

現(xiàn)代生物進化理論認(rèn)為：生物進化的單位是種群，生物進化的實質(zhì)是種群基因頻率的改變，引起生物進化的因素包括突變、自然選擇、遷入和遷出、非隨機交配、遺傳漂變等；可遺傳變異為生物進化提供原材料，可遺傳變異包括基因突變、染色體變異、基因重組，基因突變和染色體變異統(tǒng)稱為突變；自然選擇決定生物進化的方向；隔離導(dǎo)致新物種的形成。【詳解】A、種群之間的雙向遷移，即種群間互有遷出和遷入，會弓|起種群間遺傳差異的減少，種群內(nèi)變異量增大，A錯誤；B、只有個體的變異性狀影響了個體的存活和繁殖，自然選擇才會發(fā)生作用，B錯誤；C、生物界在類型上具有多樣性，模式上具有統(tǒng)一性，C正確；D、達爾文的自然選擇學(xué)說研究的是自然條件對生物的選擇，達爾文并沒有研究人工選擇的作用，D錯誤。故選C。二、非選擇題9、因缺乏維生素A而引起的各種疾病，如：夜盲癥、幼兒生長發(fā)育不良、干皮癥等酸性石油醚不與水混溶紙層析樣品2具有與標(biāo)準(zhǔn)樣對應(yīng)的色帶1SDSSDS能與各種蛋白質(zhì)形成蛋白質(zhì)—SDS混合物，SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量【解析】

1.蘿卜素的提取：

（1）胡蘿卜素的性質(zhì)：胡蘿卜素是橘黃色結(jié)晶，化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有機溶劑。

（2）胡蘿卜素的提取來源：提取天然胡蘿卜素的方法主要有：一是從植物中提取；二是從大面積養(yǎng)殖的巖藻中荻得；三是利用微生物的發(fā)酵生產(chǎn)。

（3）萃取劑：最適宜作胡蘿卜素萃取劑的是石油醚。

（4）實驗流程：胡蘿卜→粉碎→干燥→萃取（石油醚）→過濾_→濃縮→胡蘿卜素→鑒定（紙層析法）。

2.凝膠電泳法：

（1）原理：不同蛋白質(zhì)的帶電性質(zhì)、電量、形狀和大小不同，在電場中受到的作用力大小、方向、阻力不同，導(dǎo)致不同蛋白質(zhì)在電場中的運動方向和運動速度不同。

（2）分離方法：瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳等。

（3）分離過程：在一定pH下，使蛋白質(zhì)基團帶上正電或負(fù)電；加入帶負(fù)電荷多的SDS，形成“蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物”，使蛋白質(zhì)遷移速率僅取決于分子大小。【詳解】（1）胡蘿卜素是常用的食品色素，廣泛地用作食品、飲料、飼料的添加劑，除此以外，它還可以用于治療因缺乏維生素A而引起的各種疾病，如：夜盲癥、幼兒生長發(fā)育不良、干皮癥等；

（2）在三孢布拉氏霉菌的發(fā)酵培養(yǎng)基中，為其提供氮源的成分是玉米蛋白水解物和豆粕。在制備該培養(yǎng)基的過程中，滅菌之前應(yīng)將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性；

（3）萃取胡蘿卜素選用石油醚，其原因是石油醚具有較高的沸點，能夠充分溶解胡蘿卜素，并且不與水混溶；

（4）提取的胡蘿卜素粗品通過紙層析法進行鑒定，據(jù)圖示結(jié)果可判斷出樣品2中含有胡蘿卜素，判斷依據(jù)是樣品2具有與標(biāo)準(zhǔn)樣對應(yīng)的色帶1；

（5）利用聚丙烯酰胺凝膠電泳對三孢布拉氏霉菌的蛋白質(zhì)進行分離，為了消除蛋白質(zhì)分子原有電荷量對遷移率的影響，可在凝膠中加入SDS，原理是SDS能與各種蛋白質(zhì)形成蛋白質(zhì)-SDS混合物，SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量，因而掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差別，使電泳遷移率完全取決于蛋白質(zhì)分子的大小。【點睛】本題考查了胡蘿卜素的提取的有關(guān)知識，要求考生識記胡蘿卜素的特點和理化性質(zhì)，識記從生物材料中提取某些特定成分的原理、方法及注意事項，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。10、BamHI和PstI提高重組DNA分子的比例（防止自身的黏性末端連接和防止目的基因與載體反向連接）化學(xué)合成PCR技術(shù)Ca2+處理細胞，使之轉(zhuǎn)化為感受態(tài)細胞含有的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體可對蛋白質(zhì)進行加工和修飾蛋白質(zhì)工程（或在基因工程基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程）配子或早期胚胎系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理、物種多樣性原理【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA—分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)—抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）①由圖示可知，質(zhì)粒和外源DNA中共同含有且不會破壞目的基因的限制酶是BamHI和PstI，因此構(gòu)建重組DNA分子最好選用BamHI和PstI限制酶，這樣可以防止自身的黏性末端連接，防止目的基因與載體反向連接。②由于已經(jīng)測出該酶的氨基酸序列，故可推測出相應(yīng)的RNA和DNA的序列，因此可以通過化學(xué)合成方法來獲取目的基因。獲得目的基因后，常利用PCR技術(shù)在體外將其大量擴增。（2）受體細胞是微生物，將目的基因?qū)胧荏w細胞，常用Ca2+處理細胞，使之轉(zhuǎn)化為感受態(tài)細胞，真核細胞作為受體細胞的優(yōu)勢是細胞中含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，可對蛋白進行加工和修飾。（3）若將某種酶的氨基酸順序進行重新排列，實質(zhì)是對其基因進行改造，使其催化能力能有效提高，該技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程。（4）胚胎工程只是指對動物的配子或早期胚胎所進行的多種顯微操作和處理技術(shù)。（5）生態(tài)工程遵循的基本原理有：物質(zhì)循環(huán)再生原理、系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理、物種多樣性原理、協(xié)調(diào)與平衡原理、整體性原理。【點睛】本題考查基因工程、胚胎工程和生態(tài)工程原理的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的操作工具及具體的操作步驟，掌握各步驟中的相關(guān)細節(jié)，能結(jié)合題干信息準(zhǔn)確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查。11、稀釋涂布平板法氨基酸防止將特定營養(yǎng)成分帶入培養(yǎng)基完全同種菌株的接種位置相同菌落A無菌水天冬氨酸缺陷型【解析】

分析題圖：圖中首先利用稀釋涂布平板法分離細菌，然后運用“影印法”將菌種接種到兩種培養(yǎng)基中：基本培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基。在基本培養(yǎng)基中，氨基酸缺陷型菌株不能生長，而在完全培養(yǎng)基中能夠生長，據(jù)此可以選擇出氨基酸缺陷型菌株。【詳解】（1）根據(jù)過程①培養(yǎng)的效果圖可以判斷，該過程所采用的接種方法為稀釋涂布平板法。圖示為實驗人員利用影印法初檢氨基酸缺陷型菌株的過程，據(jù)此可知：與基本培養(yǎng)基（只含碳源、無機鹽、水）相比，待測培養(yǎng)皿中的特有的成分有氨基酸。（2）為了防止將特定營養(yǎng)成分帶入培養(yǎng)基，進行②過程培養(yǎng)時，應(yīng)先將絲絨布轉(zhuǎn)印至基本培養(yǎng)基上。氨基酸缺陷型菌株只能在完全培養(yǎng)基或補充了相應(yīng)的氨基酸的基本培養(yǎng)基中生長，因此應(yīng)從題圖中完全培養(yǎng)基上獲得相應(yīng)的營養(yǎng)缺陷型菌株。釆用影印法培養(yǎng)的優(yōu)點是同種菌株的接種位置相同。（3）為了進一步完成對初檢的營養(yǎng)缺陷型菌株的鑒定，結(jié)合對（2）的分析可知：①用接種針挑取菌落A接種并培養(yǎng)；離心后菌株存在于沉淀物中，為了防止雜菌污染，需取沉淀物用無菌水洗滌3次，并制成菌懸液。③表中信息顯示：A、D區(qū)域含有、其它區(qū)域不含有的氨基酸是天冬氨酸，而實驗結(jié)果只有A、D區(qū)域出現(xiàn)生長圈，說明該營養(yǎng)缺陷型菌株屬于天冬氨酸缺陷型。【點睛】本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識，要求考生能夠根據(jù)題干信息確定