目錄2017年華中科技大學821生化與分子生物學考研真題（回憶版）（含部分答案）2016年華中科技大學821生化與分子生物學考研真題（回憶版）及詳解2015年華中科技大學821生化與分子生物學考研真題（回憶版）2014年華中科技大學生化與分子生物學考研真題（回憶版）2012年華中科技大學生化與分子生物學考研真題（回憶版）

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2017年華中科技大學821生化與分子生物學考研真題（回憶版）（含部分答案）一、名詞解釋1．凝膠過濾層析（gelfiltrationchromatograpHy）2．共價修飾（Covalentmodification）3．hnRNA4．岡崎片段（Okazakifragment）5．米氏常數（Michaelisconstant）（Km）二、填空1．OD260/OD280的比值在之間時表示為純RNA，OD260/OD280的比值約為時表示純DNA。2．真核生物中多數轉錄因子都含有、結構域。3．參與大腸桿菌DNA切除與修復的酶、和。4．膽固醇的核心結構是，含有極性頭部。5．蛋白質構象數量受到最大的限制因素和。6．在pH為7的緩沖液中，亮氨酸向級移動，賴氨酸向級移動。7．目前用于基因編輯的方法有、、。8．生物一般有正調控和負調控方式，原核生物一般采用方式，真核生物一般采用方式。9．下列具有還原性，是糖胺聚糖。A．蔗糖；B．麥芽糖；C．透明質酸；D．海藻糖；E．淀粉

三、計算1．一個二倍體生物，單倍基因組為45000kb的二倍體生物含有21%的G堿基。計算該生物每個細胞DNA中的A、C、G和T的數量。2．計算天冬氨酸分別在（1）pH＝1.0，（2）pH＝3.0，（3）pH＝6.0，（4）pH＝11.0，其主要離子形式所帶靜電荷數（已知α羧基的PKa為2.09，α氨基，R基羧基的PKa分別為9.82、3.86）3．根據以下實驗結果，確定某一個蛋白分子的亞基組成情況和該蛋白實際相對分子質量（1）凝膠過濾法測定相對分子質量為2000KDa（2）SDS不添加β-巰基乙醇，測的分子質量為100KDa（3）SDS添加β-巰基乙醇，測的分子質量為40KDa，60KDa兩條帶四、簡答題1．研究蛋白質分離純化時，有關等電電的技術有哪些？2．如何篩選含有重組質粒的陽性轉化子及原理，（題目條件給的是一個PSC質粒，含lacZ基因）3．天然蛋白質可以形成無規則的結構嗎？4．糖類結構對應其相應的糖的生物學功能的意義（1）細胞表面糖蛋白的寡糖鏈（2）糖胺聚糖的毛刷狀結構（3）糖原的多分枝結構（4）纖維素﹣1,4－糖苷鍵及纖維素鏈之間的氫鍵5．酶的抑制劑分別屬于哪種類型的抑制

（1）丙二酸和抑制琥珀酸脫氫酶（2）磺胺抑制葉酸合成（3）農藥抑制乙酰膽堿酸酯酶（4）碘乙酰胺抑制木瓜蛋白酶（5）TPCK抑制胰凝乳蛋白酶6．遺傳密碼子的簡并性？生物學意義？7．原核生物形成一個肽鍵，需要消耗高能磷酸鍵的步驟。五、問答題1．細胞級聯放大系統如何放大原初信號及生物學意義。2．原、真核生物RNA、rRNA、tRNA轉錄后加工修飾異同點。3．RNA病毒復制方式，為什么正鏈RNA病毒復制不需要依賴自身RNA聚合酶而負鏈RNA病毒需要依賴自身RNA聚合酶？4．高等生物選擇雙鏈DNA作為遺傳信息而不是單鏈DNA或者RNA的原因。部分答案及解析一、名詞解釋題1．凝膠過濾層析（gelfiltrationchromatography）答：凝膠過濾層析（gelfiltrationchromatography）又稱為排阻層析或分子篩法，是指根據蛋白質的大小和形狀，即蛋白質的質量進行分離和純化的一種方法。這種方法比較簡便，不要求復雜的儀器就能相當精確地測出蛋白質的相對分子質量。層析柱中的填料是某些惰性的多孔網狀結構物質，多是交聯的聚糖（如葡聚糖或瓊脂糖）類物質，使蛋白質混合物中的物質按分子大小的不同進行分離。一種利用帶孔凝膠珠作基質，按照分子大小分離蛋白質或其它分子混合物的層析技術。一般是大分子

先流出來，小分子后流出來。2．共價修飾（Covalentmodification）答：共價修飾（Covalentmodification）又稱化學修飾，是指酶蛋白肽鏈上的一些基團可與某種化學基團發生可逆的共價結合，從而改變酶的活性的過程。分為可逆共價修飾和不可逆共價修飾。（1）可逆共價修飾的調節。可逆共價修飾調節是由共價調節酶起作用。共價調節酶的催化性質因受到一個小基團的共價修飾而發生顯著變化：有活性?無活性。如大腸桿菌中的谷氨酰胺合成酶，因受ATP轉來的酰苷酰基的共價修飾，或酶促酰苷酰基，而調節酶的活性，這類酶嚴格地受著自我調控。（2）不可逆共價修飾的調節，又稱酶原的激活。酶原通過酶促激活作用，由無活性的前體轉變成有活性的酶是共價調節的一種特殊形式——共價鍵斷裂，造成不可逆的酶活性變化，轉變為有活性的酶。如胃蛋白酶原，在低于pH5時，酶原才會自動激活，失去44個氨基酸殘基方能轉變為高度酸性的、有活性的胃蛋白酶。3．hnRNA答：hnRNA的中文名稱是不均一核RNA，是指存在于真核生物細胞核中的不穩定、大小不均的一組高分子RNA（分子量約為105～2×107，沉降系數約為30～100S）的總稱。占細胞全部RNA之百分之幾，在核內主要存在于核仁的外側。hnRNA大多屬于mRNA的前體，包括各種基因的轉錄產物及其成為mRNA前的各中間階段的分子，在5＇末端多附有間隙結構，而3＇的末端附有多聚腺苷酸聚合酶分子。這些hnRNA在受到加工之后，移至細胞質，作為mRNA而發揮其功能。大部分的hnRNA在核內與各種特異的蛋白質形成復合體而存在著。4．岡崎片段（Okazakifragment）答：岡崎片段（Okazakifragment）是指在DNA的后隨鏈的不連續合成期間生成的相對比較短（大約1000核苷酸殘基）的不連續的DNA鏈片段。這是ReijiOkazaki在DNA合成實驗中添加放射性的脫氧核苷酸前體觀察到的。

5．米氏常數（Michaelisconstant）（Km）答：米氏常數（Km）是指酶促反應達最大速度（Vm）一半時的底物（S）的濃度。它是酶的一個特征性物理量，其大小與酶的性質有關。在20世紀初期，就已經發現了酶被其底物所飽和的現象，而這種現象在非酶促反應中，則是不存在的，后來發現底物濃度的改變，對酶反應速度的影響較為復雜。Km的意義：①Km是酶的一個特性常數，大小只與酶的性質有關，而與酶濃度無關。Km值隨測定的底物、反應的溫度、pH及離子強度而改變；②Km值可以判斷酶的專一性和天然底物，酶可作用于幾種底物就有幾個Km值，其中Km值最小的底物稱為該酶的最適底物，又稱天然底物；③ES的分解為反應的限制速率時，Km等于ES復合物的解離常數，可以作為酶和底物親和力的一個指標，Km越小親和力越大，反之成立；④已知某個酶的Km值，可以計算出在某一底物濃度時，其反應速率相當于Vmax的百分率。當v＝Vmax時，反應初速率與底物濃度無關，只與[ES]成正比，表明酶的活性部位全部被底物占據；⑤Km值可以幫助推斷某一代謝反應的方向和途徑。二、填空題1．OD260/OD280的比值在之間時表示為純RNA，OD260/OD280的比值約為時表示純DNA。【答案】（1.9，2.0）；1.8【解析】①純DNA：OD260/OD280≈1.8（＞1.9，表明有RNA污染；＜1.6，表明有蛋白質、酚等污染）。②純RNA：1.9＜OD260/OD280＜2.0（2.0時表明可能有異硫氰酸殘存）。2．真核生物中多數轉錄因子都含有、結構域。【答案】DNA結合結構域；DNA激活3．參與大腸桿菌DNA切除與修復的酶、和。【答案】特異的核酸內切酶；DNA聚合酶Ⅰ；DNA連接酶

4．膽固醇的核心結構是，含有極性頭部。【答案】環戊烷多氫菲；羥基基團5．蛋白質構象數量受到最大的限制因素和。【答案】主鏈C—N鍵不能自由旋轉；空間位阻6．在pH為7的緩沖液中，亮氨酸向級移動，賴氨酸向級移動。【答案】正；負【解析】因為亮氨酸的等電點為5.98，小于7；賴氨酸的等電點為9.74，大于7。氨基酸在電場中移動的原則：①在等電點以上的任一pH，氨基酸帶凈負電荷，在電場中將向正極移動；②在低于等電點的任一pH，氨基酸帶有凈正電荷，在電場中將向負極移動；③在一定pH范圍內，氨基酸溶液的pH離等電點愈遠，氨基酸所攜帶的凈電荷愈大。因此，在pH為7的緩沖液中，亮氨酸向正級移動，賴氨酸向負級移動。7．目前用于基因編輯的方法有、、。【答案】人工核酸酶介導的鋅指核酸酶（ZFN）技術；轉錄激活因子樣效應物核酸酶（TALEN）技術；RNA介導的CRISPR-Cas核酸酶技術（CRISPR-CasRGNs）8．生物一般有正調控和負調控方式，原核生物一般采用方式，真核生物一般采用方式。【答案】負調控；正調控9．下列具有還原性，是糖胺聚糖。A．蔗糖；B．麥芽糖；C．透明質酸；D．海藻糖；E．淀粉【答案】B；C四、計算題1．一個二倍體生物，單倍基因組為45000kb的二倍體生物含有21%的G

堿基。計算該生物每個細胞DNA中的A、C、G和T的數量。答：根據堿基在雙鏈DNA中的分布特性以及堿基互補配對原則可知：A＝T，G＝C，A＋T＋G＋C＝1；則G＝C＝45000kb×21%＝9450kb；A＝T＝45000kb×（1－21%×2）÷2＝13050kb。即該生物每個細胞DNA中A的數量為13050kb；C的數量為9450kb；G的數量為9450kb；T的數量為13050kb。2．計算天冬氨酸分別在（1）pH＝1.0，（2）pH＝3.0，（3）pH＝6.0，（4）pH＝11.0，其主要離子形式所帶靜電荷數。（已知α羧基的pKa為2.09，α氨基、R基羧基的pKa分別為9.82、3.86）答：根據天冬氨酸（Asp，D）的結構式可知：天冬氨酸有三個可解離基團，分別為α羧基、α氨基和R基羧基。根據其pKa可得：pI＝（2.09＋3.86）/2＝2.97。（1）pH＝1.0時，天冬氨酸帶正電荷，α羧基和R基羧基呈-COOH形式存在、α氨基呈-NH4＋形式存在，因此，其主要離子凈電荷為＋1。（2）pH＝3.0時，天冬氨酸帶負電荷，α羧基呈-COO－形式存在，R基羧基呈-COOH形式存在、α氨基呈-NH3＋形式存在，因此，其主要離子凈電荷為－1。（3）pH＝6.0時，天冬氨酸帶負電荷，α羧基和R基羧基呈-COO－形式存在，α氨基呈-NH3＋形式存在，因此，其主要離子凈電荷為－2。（4）pH＝11.0時，天冬氨酸帶負電荷，α羧基和R基羧基呈-COO－形式存在，α氨基呈-NH3＋形式存在，因此，其主要離子凈電荷為－2。3．根據以下實驗結果，確定某一個蛋白分子的亞基組成情況和該蛋白實際相對分子質量。（1）凝膠過濾法測定相對分子質量為2000KDa。（2）SDS不添加β-巰基乙醇，測的分子質量為100KDa。（3）SDS添加β-巰基乙醇，測的分子質量為40KDa，60KDa兩條帶。提示：本題暫不提供答案。五、簡答題1．研究蛋白質分離純化時，有關等電點的技術有哪些？答：研究蛋白質分離純化時，有關等電點的技術有：（1）等電點沉淀法。利用兩性電解質在等電點時溶解度最低，以及不同兩性電解質等電點不同的特性，通過調節溶液pH，使蛋白質或雜質沉淀析出，從而使蛋白質與雜質分離。（2）離子交換層析。常用的有陽離子交換和陰離子交換。蛋白質與離子交換劑的結合能力取決于彼此間相反電荷基團的靜電吸引，在某一pH條件下，不同蛋白質氨基酸組成不同，等電點不同，所帶的靜電荷性質、數量、與離子交換纖維素的吸附能力不同。通過改變洗脫液的pH和離子強度，可把不同的蛋白質依次洗脫下來。（3）等電聚焦：使電泳的介質中形成一定范圍的pH梯度，電泳時待分離的兩性分子可以在這種pH梯度中遷移，直到聚集于與其等電點相同的區域。該技術特別適用于分子量相近而等電點不同的蛋白質分離和分析。（4）層析聚焦。將蛋白質等兩性電解質的等電點的特性和層析的特性結合在一起，實現分離的技術。

2．如何篩選含有重組質粒的陽性轉化子及原理。（題目條件給的是一個PSC質粒，含lacZ基因）答：（1）篩選含有重組質粒的陽性轉化子的過程：①利用電轉化法或者CaCl2轉化法，將含有lacZ基因的重組PSC質粒導入到β-半乳糖苷酶依賴性的菌株中；②將含有重組PSC質粒的β-半乳糖苷酶依賴性的菌株接種到無β-半乳糖苷酶的培養基中，在適當條件下培養。③培養一段時間后，存活下來的即為含有重組質粒的陽性轉化子。（2）篩選含有重組質粒的陽性轉化子的原理：含有重組質粒的陽性轉化子含有重組基因（lacZ基因），因此，含有重組質粒的陽性轉化子可以產生β-半乳糖苷酶，而陰性轉化子則不能，通過這種特性，可以利用選擇性培養來篩選，即選擇β-半乳糖苷酶依賴性的菌株，在不含有β-半乳糖苷酶的培養基中培養，存活下來的則為含有重組質粒的陽性轉化子。3．天然蛋白質可以形成無規則的結構嗎？答：天然蛋白質不可以形成無規則的結構。天然蛋白質是指在自然界中存在的，不經過人工的任何修飾或加工的蛋白質。天然蛋白質的二級結構主要有三種基本類型：α-螺旋、β-折疊和β-轉角，其中，α-螺旋絕大多數都是右手螺旋。而且，天然蛋白質一般具有穩定的結構和功能，因此，天然蛋白質不能在自然狀態下形成無規則的結構。4．糖類結構對應其相應的糖的生物學功能的意義。（1）細胞表面糖蛋白的寡糖鏈（2）糖胺聚糖的毛刷狀結構（3）糖原的多分枝結構（4）纖維素﹣1,4－糖苷鍵及纖維素鏈之間的氫鍵答：（1）細胞表面糖蛋白的寡糖鏈：

①糖蛋白N-糖鏈參與新生肽鏈的折疊，糖鏈對維持亞基的正確構象和相互識別締合有作用。②糖鏈影響糖蛋白的分泌、穩定性和生物活性。③糖鏈參與分子識別和細胞識別。a．糖鏈與血漿中老蛋白的清除的機制有關；b．糖鏈幫助精卵識別；c．糖鏈與與細胞粘著相關，細胞粘著是多細胞生物中細胞有相互識別而聚集成細胞群的能力。（2）糖胺聚糖的毛刷狀結構：①親水性強，保持疏松結締組織中的水分。②調節K＋、Na＋、Ca2＋在組織中的分布。③具有潤滑和保護作用。④有促進創傷愈合的作用。（3）糖原的多分枝結構：增加糖原分子的溶解度，有利于及時動用葡萄糖貯庫以供代謝的急需。（4）纖維素﹣1,4－糖苷鍵及纖維素鏈之間的氫鍵：維持纖維素的構象。5．酶的抑制劑分別屬于哪種類型的抑制。（1）丙二酸和抑制琥珀酸脫氫酶（2）磺胺抑制二氫葉酸合成（3）農藥抑制乙酰膽堿酸酯酶（4）碘乙酰胺抑制木瓜蛋白酶

（5）TPCK抑制胰蛋白酶答：（1）丙二酸和抑制琥珀酸脫氫酶：可逆的競爭性抑制劑。（2）磺胺抑制二氫葉酸合成：可逆的競爭性抑制劑。（3）農藥抑制乙酰膽堿酸酯酶：非專一性不可逆抑制劑。（4）碘乙酰胺抑制木瓜蛋白酶：非專一性不可逆抑制劑。（5）TPCK抑制胰蛋白酶：專一性不可逆抑制劑。6．遺傳密碼子的簡并性？生物學意義？答：（1）遺傳密碼子的簡并性是指同一種氨基酸有兩個或更多個密碼子的現象。（2）密碼子的簡并性的生物學意義：①減少有害突變。設若每種氨基酸只有一個密碼子，64個密碼子中只有20個是有意義的，對應于一種氨基酸，那么剩下44個密碼子都將是無意義的，將使肽鏈合成導致終止。因而由基因突變而引起肽鏈合成終止的概率也會大大提高，這將極不利于生物生存。②增加密碼子中堿基改變仍然編碼原來氨基酸的可能性。③在物種的穩定上起一定作用。密碼簡并可使DNA上堿基組成有較大的變動余地，細菌DNA中G＋C含量變動很大，但不同G＋C含量的細菌卻可以編碼出相同的多肽鏈，所以密碼子的簡并性在物種的穩定上起一定作用。7．原核生物形成一個肽鍵，需要消耗高能磷酸鍵的步驟。答：原核生物中，單看形成肽鍵是不消耗高能磷酸鍵的，但是蛋白質的生物合成是一個耗能過程。延長時每個氨基酸活化為氨基酰-tRNA，需要使ATP變為AMP，此步消耗2個高能鍵，進位、轉位各消耗1個GTP，成肽只需轉肽酶催化即可。

因此可以近似的認為，每增加一個肽鍵平均需要消耗由GTP或ATP提供的4個高能磷酸鍵。六、問答題1．細胞級聯放大系統如何放大原初信號及生物學意義。答：（1）細胞的級聯放大系統是指從細胞表面受體接收外部信號到最后作出綜合性應答的將信號逐步放大的過程，主要是由磷酸化和去磷酸化的酶組成。細胞級聯放大系統主要通過細胞信號分子來放大原初信號的。如一個原初的激素信號，通過G蛋白激活多個效應酶，并產生多種第二信使分子，從而激活一系列生理生化反應，達到放大原處信號的目的。（2）信號的級聯放大系統的生物學意義：①同一級聯中所有具有催化活性的酶受同一分子調控。如糖原分解級聯中有三種酶：依賴于cAMP的蛋白激酶、糖原磷酸化酶激酶和糖原磷酸化酶都是直接或間接受cAMP調控的。②使引起同一級聯反應的信號得到最大限度的放大。如10～10M的腎上腺素能夠通過對糖原分解的刺激將血液中的葡萄糖水平提高50%。在腎上腺素的刺激下，細胞內產生6～10M的cAMP。③信號轉移。將原始信號轉移到細胞的其他部位。④信號轉化。將信號轉化成能夠激發細胞應答的分子。如級聯中的酶的磷酸化。⑤信號的分支。即將信號分開為幾種平行的信號，影響多種生化途徑，引起更大的反應。2．原、真核生物mRNA、rRNA、tRNA轉錄后加工修飾異同點。提示：此題暫不提供答案。3．RNA病毒復制方式，為什么正鏈RNA病毒復制不需要依賴自身RNA聚合酶而負鏈RNA病毒需要依賴自身RNA聚合酶？

答：這主要取決于RNA復制酶。RNA復制酶又稱RNA指導的RNA聚合酶，為以RNA為模板合成RNA的酶，存在于某些RNA病毒中，其底物和作用方式均與DNA指導的RNA聚合酶相似，是通過其高級結構的變化來調節病毒RNA復制與翻譯、正鏈與負鏈合成的。（1）病毒含有正鏈RNA，進入宿主細胞后首先合成復制酶（以及有關蛋白質），然后在復制酶作用下進行病毒RNA的復制，最后由病毒RNA和蛋白質裝配成病毒顆粒。（2）病毒含有負鏈RNA和復制酶，病毒侵入細胞后，借助于病毒帶進去的復制酶合成出正鏈RNA，再以正鏈RNA為模板，合成病毒蛋白質和復制病毒RNA。4．高等生物選擇雙鏈DNA作為遺傳信息而不是單鏈DNA或者RNA的原因。答：原因如下：（1）雙鏈DNA是由兩條單鏈DNA根據氫鍵相結合在一起的，分子結構是比較穩定的，不易發生基因突變等等結構改變，因此雙鏈DNA適合充當遺傳物質；而單鏈RNA或DNA只是一條鏈，分子結構很不穩定，很容易發生基因突變等結構改變，因此單鏈RNA或DNA不適合充當遺傳物質。（2）雙鏈DNA的堿基排列，以及空間結構更加多樣，從而使得生物多樣性大大增加。

2016年華中科技大學821生化與分子生物學考研真題（回憶版）及詳解一、名詞解釋1．反義RNA（antisenseRNA）答：反義RNA是指與mRNA互補的RNA分子，也包括與其它RNA互補的RNA分子。由于核糖體不能翻譯雙鏈的RNA，所以反義RNA與mRNA特異性的互補結合即抑制了該mRNA的翻譯。通過反義RNA控制mRNA的翻譯是原核生物基因表達調控的一種方式，最早是在E.coli的產腸桿菌素的ColE1質粒中發現的。2．操縱子（operon）答：操縱子是指很多功能上相關的基因前后相連成串，由一個共同的控制區進行轉錄的控制，包括結構基因以及調節基因的整個DNA序列。主要見于原核生物的轉錄調控，如乳糖操縱子、阿拉伯糖操縱子、組氨酸操縱子、色氨酸操縱子等，但在真核生物中也存在。3．限制性核酸內切酶（Restrictionendonuclease）答：限制性核酸內切酶是指可以識別DNA的特異序列，并在識別位點或其周圍切割雙鏈DNA的一類內切酶，簡稱限制酶。根據限制酶的結構，輔因子的需求切位與作用方式，可將限制酶分為三種類型，分別是第一型（TypeⅠ）、第二型（TypeⅡ）及第三型（TypeⅢ）。Ⅰ型限制性內切酶既能催化宿主DNA的甲基化，又催化非甲基化的DNA的水解；而Ⅱ型限制性內切酶只催化非甲基化的DNA的水解。Ⅲ型限制性內切酶同時具有修飾及認知切割的作用。4．選擇性剪接（alternativesplicing）答：選擇性剪接又稱可變剪接是指從一個mRNA前體中通過不同的剪接方式（選擇不同的剪接位點組合）產生不同的mRNA剪接異構體的過程，而最終的蛋白產物會表現出不同或者是相互拮抗的功能和結構特性，或者在相同的細胞中由于表達水平的不同而導致不同的表型。5．抑癌基因（Tumorsuppressorgene）答：抑癌基因又稱抗癌基因，是指正常細胞中存在的一類在被激活情況下具有抑制細胞增殖作用，但在一定情況下被抑制或丟失后可減弱甚至消除抑癌作用的基因。正常情況下它們對細胞的發育、生長和分化的調節起重要作用。6．基因診斷（Geneticdiagnosis）答：基因診斷又稱DNA診斷或分子診斷，用目前人類對基因組的認識和分子遺傳學數據檢查分子結構水平和表達水平，對普通遺傳病或家族遺傳病做出的診斷。某些受精卵（種質）或母體受到環境或遺傳等的影響，引起的下一代基因組發生了有害改變，產生了（體質）疾病，為了有針對性的解決和預防，故需要通過實驗室的基因診斷、基因分析才能得到確認。7．RNA干擾（RNAinterference，RNAi）答：RNA干擾（RNAi）是利用雙鏈小RNA高效、特異性降解細胞內同源mRNA從而阻斷靶基因表達，使細胞出現靶基因缺失表型的現象。其分子機制是雙鏈RNA（dsRNA）是RNAi的觸發物，引發與之互補的單鏈RNA（ssRNA）的降解，較長雙鏈RNA經過Dicer加工被降解形成21～25個核苷酸的siRNA，并有效地定位目標mRNA。由siRNA中的反義鏈指導合成RISC（RNA誘導的沉默復合體）的核蛋白體，再由RISC介導切割目的mRNA分子中與siRNA反義鏈互補的區域，從而實現干擾靶基因表達的功能。8．質粒（plasmid）答：質粒是細胞中染色體或核區DNA能夠自主復制的較小的雙鏈環狀DNA分子（即細胞附殖粒、又胞附殖粒），它存在于許多細菌以及酵母菌等生物（多為原核生物）中，乃至于植物的線粒體等細胞器中。9．遺傳作圖（geneticmapping）答：遺傳作圖是指應用遺傳學技術構建能顯示基因以及其他序列待征在基因組上位置的圖。遺傳學技術包括雜交育種實驗，對人類則是檢查家族史或系譜。與任何一種圖一樣，一個遺傳圖必須顯示出顯著特征的位置。10．管家基因（house-keepinggenes）答：管家基因又稱持家基因，是指所有細胞中均要表達的一類基因，其產物是對維持細胞基本生命活動所必需的。如微管蛋白基因、糖酵解酶系基因與核糖體蛋白基因等。具有相同遺傳信息的同一個體細胞間其所利用的基因并不相同，管家基因活動是維持細胞基本代謝所必需的，這正是細胞分化、生物發育的基礎。二、問答題1．真核基因組的結構和功能特點。（20分）答：真核基因組的結構和功能特點有：（1）真核生物基因組DNA與蛋白質結合形成染色體，儲存于細胞核內，除配子細胞外，體細胞內的基因組是雙份的，即有兩份同源的基因組。（2）真核細胞基因轉錄產物為單順反子，即一個結構基因轉錄、翻譯成一個mRNA分子，一條多肽鏈。（3）存在大量重復序列，即在整個DNA中有許多重復出現的核苷酸順序，重復序列長度可長可短，短的僅含兩個核苷酸，長的多達數百、乃至上千。重復頻率也不盡相同；高度重復序列重復頻率可達106次，包括衛星DNA、反向重復序列和較復雜的重復單位組成的重復序列；中度重復序列可達103～104次，如為數眾多的Alu家族序列，KpnI家族，Hinf家族序列，以及一些編碼區序列如rRNA基因、tRNA基因、組蛋白基因等；單拷貝或低度重復序列，指在整個基因組中只出現一次或很少幾次的核苷酸序列，主要是編碼蛋白質的結構基因，在人基因組中占約60%～65%，因此所含信息量最大。（4）真核基因組大部分為非編碼序列，占整個基因組序列的90%以上，這是真核生物與細菌和病毒之間最主要的區別。（5）基因是不連續的，在真核生物結構基因的內部存在許多不編碼蛋白質的間隔序列，稱為內含子，編碼區則稱為外顯子。內含子與外顯子相間排列，轉錄時一起被轉錄下來，然后RNA中的內含子被切掉，外顯子連接在一起成為成熟的mRNA，作為指導蛋白質合成的模板。

（6）基因組遠大于原核生物的基因組，具有許多復制起點，而每個復制子的長度較小。（7）真核基因組存在大量的順式作用元件，包括啟動子、增強子、沉默子等。（8）真核基因組具有端粒結構，起保護線性DNA的完整復制、保護染色體末端的作用。（9）基因組龐大，一般都遠大于原核生物的基因組。（10）存在大量的DNA多態性。DNA多態性是指DNA序列中發生變異而導致的個體間核苷酸序列的差異，主要包括單核苷酸多態性（SNP）和串聯重復序列多態性兩類。2．人類基因組的結構特征。（15分）答：人類基因組的結構特征有：（1）人類有24個染色體，分別是22個體染色體、X染色體與Y染色體。含有約30億個DNA堿基對。堿基對是以氫鍵相結合的兩個含氮堿基，以A、T、C、G四種堿基排列成堿基序列。其中一部分的堿基對組成了大約20000到25000個基因。（2）結構基因是不連續的，內部含有不編碼蛋白質的內含子，編碼區稱為外顯子。全世界的生物學與醫學界在人類基因組計劃中，調查人類基因組中的真染色質基因序列。發現人類的基因數量比原先預期的更少，其中的外顯子，也就是能夠制造蛋白質的編碼序列，只占總長度的1.5%。（3）基因轉錄產物為單順反子，即一個結構基因轉錄、翻譯成一個mRNA分子、一條多肽鏈。（4）在人類基因組中存在大量的重復序列，短的僅含2個堿基，長的多達數百、上千個堿基，可分為高度重復序列、中度重復序列、低度重復序列三種。高度重復序列重復頻率可達106次，包括反向重復序列、衛星DNA等約占10%～15%。

3．原癌基因的特點。（15分）答：細胞癌基因又稱原癌基因，是指在正常細胞基因組中對細胞正常生命活動起主要調控作用的基因，在發生突變或被異常激活后變成具有致癌能力的癌基因。原癌基因的特點有：（1）正常細胞中原癌基因的表達水平一般較低，而且是受生長調節的，其表達主要有三個特點：①具有分化階段特異性；②細胞類型特異性；③細胞周期特異性。（2）腫瘤細胞中原癌基因的表達有2個比較普遍和突出的特點：①一些原癌基因具有高水平的表達成過度表達。②原癌基因的表達程度和次序發生紊亂，不再具有細胞周期特異性。4．蛋白質組研究常用技術及用途。（15分）答：（1）蛋白質組研究常用技術有：①雙向凝膠電泳技術（2-DE）：雙向凝膠電泳技術與質譜技術是目前應用最為廣泛的研究蛋白質組學的方法。雙向凝膠電泳技術利用蛋白質的等電點和分子量差別將各種蛋白質區分開來。雖然二維凝膠電泳難以辨別低豐度蛋白，對操作要求也較高，但其通量高、分辨率和重復性好以及可與質譜聯用的特點，使其成為目前最流行、可靠的蛋白質組研究手段。②高效液相色譜技術（HPLC）：多維液相色譜作為一種新型分離技術，不存在相對分子質量和等電點的限制，通過不同模式的組合，消除了二維凝膠電泳的歧視效應，具有峰容量高、便于自動化等特點。二維離子交換-反相色譜（2D-IEC-RPLC）是蛋白質組學研究中最常用的多維液相色譜分離系統。③飛行時間質譜技術：通常情況下將樣品經過簡單的預處理后直接滴加到表面經過特殊修飾的芯片上，既可比較兩個樣品之間的差異蛋白，也可獲得樣品的蛋白質總覽。因此，在應用方面具有顯著優勢。④同位素標記親和標簽（ICAT）技術：同位素親和標簽技術是近年發展起來的一種用于蛋白質分離分析技術，此技術目前是蛋白質組研究技術中的核心技術之一。該技術用具有不同質量的同位素親和標簽（ICATs）標記處于不同狀態下的細胞中的半胱氨酸，利用串聯質譜技術，對混合的樣品進行質譜分析。來自兩個樣品中的同一類蛋白質會形成易于辨識比較的兩個不同的峰形，能非常準確的比較出兩份樣品蛋白質表達水平的不同。⑤生物信息學技術：生物信息學在生命科學研究中起著越來越重要的作用。利用生物信息學對蛋白質組的各種數據進行處理和分析，也是蛋白質組研究的重要內容。生物信息學是蛋白質組學研究中不可缺少的一部分。（2）蛋白質組研究用途：蛋白質組學將成為尋找疾病分子標記和藥物靶標最有效的方法之一。在對癌癥、早老性癡呆等人類重大疾病的臨床診斷和治療方面蛋白質組技術也有十分誘人的前景。5．基因治療存在的問題。（15分）答：基因治療是將具有治療價值的基因，即“治療基因”裝配于帶有在人體細胞中表達所必備元件的載體中，導入人體細胞，直接進行表達。近年來，載體系統不斷完善和發展，利用逆轉錄病毒基因與宿主細胞基因組的整合特性介導并表達目的基因，經過改建后的逆轉錄病毒載體已用于基因治療并開始為人類造福。基因治療作為一種新興的治療技術讓人類看到希望，但基因治療還存在很多問題，如用于治療的基因過少，基因治療缺乏靶向性，導入的基因表達缺乏可控性，基因治療的安全性等。具體如下：（1）用于治療的基因過少目前在已用于臨床實驗的治療基因僅集中于少數基因，對大多數疾病致病基因有待闡明。這不僅限于致病基因的發現，同時也包括已知和目前未知功能基因的表達調控序列的確定，以及其相互作用規律的闡明，這將有賴于人基因組計劃、尤其是功能基因組學的發展。（2）基因導入系統缺乏靶向性，效率較低如以腺病毒為載體的p53基因轉移治療惡性腫瘤的方案中，只能直接將腺病毒注射到腫瘤局部。若靜脈注射，病毒顆粒將很快被清除，真正能夠到達腫瘤組織的很少，難以達到治療效果，且增加了副作用。（3）導入的基因表達缺乏可控性現有的基因導入載體容量有限，不能包容全基因或完整的調控順序，同時人們對導入的基因在體內的轉錄調控機理的認識有限，導致了導入的基因表達缺乏可控性。載體將外源目的基因導入宿主細胞后，目的基因并不一定完全按照需要適時、適量和適度地進行表達。目前，載體的調控能力較差，也是影響基因治療效果的一個重要因素。（4）安全性問題目前針對遺傳性疾病的基因治療方案大多采用逆轉錄病毒載體，其插入或整合到染色體的位置是隨機的，有引起插入突變及細胞惡性轉化的潛在危險。而理想的基因治療方案應該是在原位補充、置換或修復致病基因，或者將治療基因插入到宿主細胞染色體上不致病的安全位置。

2015年華中科技大學821生化與分子生物學考研真題（回憶版）

2014年華中科技大學生化與分子生物學考研真題（回憶版）一、名詞解釋題1．EFhand2．結構域3．核酶二、簡答題1．關于PCR的知識點2．氨基酸相互轉化會對蛋白質結構的影響3．酶曲線4．DNA變性和蛋白質變性的異同點5．原核生物復制叉上有何活動和需要什么酶6．蛋白糖鏈的生物功能7．關于酶分類。六種酶要求會根據方程式判斷三、論述題1．血紅蛋白與氧氣的結合分析，與BPG結合如何影響與氧氣的親和力2．脂溶性激素、水溶性激素的信號轉導有何差異3．當大腸桿菌遇到氨基酸匱乏或紫外線照射有何調控機制4．蛋白質一級結構測序的策略和步驟四、計算題1．關于DNA長度、超螺旋的計算

2．關于酶純化倍數、回收率的計算

2012年華中科技大學生化與分子生物學考研真題（回憶版）2011年華中科技大學生化與分子生物學考研真題（回憶版）一、名詞解釋CompetentcellSuicidesubstrateTmCodondegeneracyOkazakifragmentHomologousRecombinationReversetranscriptaseGlucoseeffectEnh