第第頁土壤銨態氮的測定土壤銨態氮的測定4.4.3.12mol·L—1KCl浸提—蒸餾法4.4.3.1.1方法原理用2mol·L—1KCl浸提土壤，把吸附在土壤膠體上的NH4+及水溶性NH4+浸提出來。取一份浸出液在半微量定氮蒸餾器中加MgO（MgO是弱堿，有防止浸出液中酰銨有機氮水解的可能）蒸餾。蒸出的氨以H3BO3汲取，用標準酸溶液滴定，計算土壤中的NH4+—N含量。4.4.3.1.2重要儀器振蕩器、半微量定氮蒸餾器、半微量滴定管（5mL）。4.4.3.1.3試劑（1）20g·L—1硼酸—指示劑。20gH3BO3（化學純）溶于1L水中，每升H3BO3溶液中加入甲基紅—溴甲酚綠混合指示劑5mL并用稀酸或稀堿調整至微紫紅色，此時該溶液的pH為4.8、指示劑用前與硼酸混合，此試劑宜現配，不宜久放。（2）0.005mol·L—11/2H2SO4標準液。量取H2SO4（化學純）2.83mL，加蒸餾水稀釋至5000mL，然后用標準堿或硼酸標定之，此為0.0200mol·L—1（1/2H2SO4）標準溶液，再將此標準液精準地稀釋4倍，即得0.005mol·L—11/2H2SO4標準液（注1）。（3）2mol·L—1KCl溶液稱KCl（化學純）14901g溶解于1L水中。（4）120g·L–1MgO懸濁液MgO12g經500～600℃灼燒2h，冷卻，放入100mL水中搖勻。4.4.3.1.4操作步驟取新鮮土樣10.0g（注2），放入100mL三角瓶中，加入2mol·L—1KCl溶液50.0mL。用橡皮塞塞緊，振蕩30min，立刻過濾于50mL三角瓶中（假如土壤NH4+—N含量低，可將液土比改為2.5:1）。吸取濾液25.0mL（含NH4+—N25μg以上）放入半微量定氮蒸餾器中，用少量水沖洗，先把盛有20g·L–1硼酸溶液5mL的三角瓶放在冷凝管下，然后再加120g·L–1MgO懸濁液10mL于蒸餾室蒸餾，待蒸出液達30～40mL時（約10min）停止蒸餾，用少量水沖洗冷凝管，取下三角瓶，用0.005mol·L—11/2H2SO4標準液滴至紫紅色為盡頭，同時做空白試驗。4.4.3.1.5結果計算土壤中銨態氮NH4+—（N）含量（mg·kg—1）=式中：c——0.005mol·L—11/2H2SO4標準溶液濃度；V——樣品滴定硫酸標準溶液體積（mL）；V0——空白滴定硫酸標準溶液體積（mL）；14.0——氮的原子摩爾質量（g·mol—1）；ts——分取倍數；103——“換算系數”（包括mL換算為L，10—3；g換算為mg，103；換算為kg，103）；m——烘干樣品質量（g）。4.4.3.22mol·L—1KCl浸提—靛酚藍比色法4.4.3.2.1方法原理2mol·L—1KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤膠體上的NH4+及水溶性NH4+浸提出來。土壤浸提液中的銨態氮在強堿性介質中與次氯酸鹽和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚藍，溶液的顏色很穩定。在含氮0.05～0.5mol·L—1的范圍內，吸光度與銨態氮含量成正比，可用比色法測定。4.4.3.2.2試劑（1）2mol·L—1KCl溶液稱取149.1g氯化鉀（KCl，化學純）溶于水中，稀釋至1L。（2）苯酚溶液稱取苯酚（C6H5OH，化學純）10g和硝基鐵氰化鈉[Na2Fe（CN）5NO2H2O]100mg稀釋至1L。此試劑不穩定，須貯于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。（3）次氯酸鈉堿性溶液稱取氫氧化鈉（化學純）10g、磷酸氫二鈉（Na2HPO4·7H2O,化學純）7.06g、磷酸鈉（Na3PO4·12H2O,化學純）31.8g和52.5g·L—1次氯酸鈉（NaOCl，化學純，即含5%有效氯的漂白粉溶液）10mL溶于水中，稀釋至1L，貯于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。（4）掩蔽劑將400g·L—1的酒石酸鉀鈉（KNaC4H4O6·4H2O,化學純）與100g·L—1的EDTA二鈉鹽溶液等體積混合。每100mL混合液中加入10mol·L—1氫氧化鈉0.5mL。（5）2.5μg·mL–1銨態氮（NH4+—N）標準溶液稱取干燥的硫酸銨[（NH4）2SO4，分析純]0.4717g溶于水中，洗入容量瓶后定容至1L，制備成含銨態氮（N）100μg·mL–1的貯存溶液；使用前將其加水稀釋40倍，即配制成含銨態氮（N）2.5μg·mL–1的標準溶液備用。4.4.3.2.3儀器與設備往復式振蕩機、分光光度計。4.4.3.2.4分析步驟（1）浸提稱取相當于20.00g干土的新鮮土樣（若是風干土，過10號篩）精準到0.01g，置于200mL三角瓶中，加入氯化鉀溶液100mL，塞緊塞子，在振蕩機上振蕩1h。取出靜置，待土壤—氯化鉀懸濁液澄清后，吸取肯定量上層清液進行分析。假如不能在24h內進行，用濾紙過濾懸濁液，將濾液儲存在冰箱中備用。（2）比色吸取土壤浸出液2mL～10mL（含NH4+—N2μg～25μg）放入50mL容量瓶中，用氯化鉀溶液補充至10mL，然后加入苯酚溶液5mL和次氯酸鈉堿性溶液5mL，搖勻。在20℃左右的室溫下放置1h后（注1），加掩蔽劑1mL以溶解可能產生的沉淀物，然后用水定容至刻度。用1cm比色槽在625nm波優點（或紅色濾光片）進行比色，讀取吸光度。（3）工作曲線分別吸取0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mLNH4+—N標準液于50mL容量瓶中，各加10mL氯化鈉溶液，同（2）步驟進行比色測定。4.4.3.2.5結果計算土壤中NH4+—（N）含量（mg·kg—1）=式中：ρ——顯色液銨