細胞工程期末復習（必考）細胞工程：研究真核細胞的核—質關系以及細胞器、細胞質基因轉移的技術。組織工程：研究開發用于修復或改善人體病損組織或器官的結構、功能的生物活性替代物的一門科學。染色體工程：是按照一定的設計，有計劃的消減添加或替換同種或異種染色體從而達成定向改變遺傳特性和選育新品種的一種技術。細胞連接：使細胞間的聯系結構。細胞表面的特化結構或特化區域，是細胞間建立長期組織上聯系的結構基礎。涉及細胞外基質蛋白、跨膜蛋白、胞質溶膠蛋白、細胞骨架蛋白等。細胞全能性：指分化細胞保存著所有的核基因組，具有生物個體成長、發育所需要的所有遺傳信息，具有發育成完整個體的潛能。細胞分化：指細胞在形態、結構和功能上發生差異的過程。涉及時間和空間上的分化。脫分化：又稱去分化，指分化細胞失去特有的結構和功能變為具有未分化細胞特性的過程。即分化的細胞在適當條件下轉變為胚性狀態而重新獲得分裂能力的過程。再分化：是指在離體條件下，無序生長的脫分化細胞在適當條件下重新進入有序生長和分化狀態的過程。細胞培養：指從體內組織分離細胞，模擬體內環境，在無菌適當的條件使其生長繁殖的技術。人工種子：又稱合成種子或體細胞種子，指將植物離體培養中產生的胚狀體或芽包裹在具有養分和保護功能的人工胚乳和人工種皮中形成的類似種子的顆粒。植物胚胎培養：指對植物的胚及胚器官進行人工離體無菌培養，使其發育成幼苗的技術。試管受精：指在無菌條件下離體培養未受精子房或胚珠和花粉萌發產生的花粉管進入胚珠從而完畢受精過程。細胞核移植：一種運用顯微操作技術將一種動物的細胞核移入同種或異種動物的去核成熟卵細胞內的技術。體外受精：指使哺乳動物的精子和卵子在體外人工控制的環境中完畢受精過程的技術。胚胎移植:指將受精卵或發育到一定階段的胚胎移植到與供體同時發情排卵但為配種的受體母畜輸卵管或子宮的技術。人工受精：指將采集的精子注入人發情解決的母體內完畢受精過程。試管嬰兒：指將卵子與精子取出在體外受精，培養發育成初期胚胎，再植回母體子宮內發育出生的嬰兒，也就是采用體外受驚聯合胚胎移植技術哺育的嬰兒。胚胎核移植：一種運用顯微操作技術將一種動物的細胞核移入同種或異種動物的去核成熟卵細胞內的技術。愈傷組織：脫分化后的細胞通過細胞分裂，產生無組織結構、無明顯極性的松散的細胞團。胚狀體：由外植體或愈傷組織產生的與正常受精卵發育成的胚相類似的胚狀結構。胞質體：除去細胞核后由質膜包裹的無核細胞。細胞融合：指使用人工的方法使2個或2個以上的細胞合并形成1個細胞的技術。對稱融合：兩個完整的細胞間的融合。異核體：來自不同基因型的融合細胞。不對稱融合：用物理或化學方法使某親本的核或細胞質失活再與另一完整的細胞進行融合。體細胞雜交：指將不同來源的體細胞融合并使之分化再生、形成新品種的技術。花藥和花粉培養：指離體培養花藥和花粉，使小孢子改變原有的配子體發育途徑，轉向孢子體發育途徑，形成花粉胚或花粉愈傷組織，最后形成花粉植株，從中鑒定出單倍體植株并使之二倍化的技術。植物細胞培養：在離體條件下，將分離的植物細胞繼代培養增殖，獲得大量細胞群體的技術。動物細胞培養：模擬體內生理環境使分離的動物細胞在體外生存、增殖的技術。細胞懸浮培養：將細胞接種于液體培養基中并保持良好的分散狀態的培養方式。細胞固定化培養：將游離的細胞包埋在支持物內部或表面進行培養的技術。貼壁培養：指細胞貼附在一定的固相表面進行的培養。原代培養：接種組織塊直接長出單層細胞或將組織分散成單個細胞再進行培養，在初次傳代前的培養成為原代培養。傳代培養：指將原代培養的細胞繼續轉接培養的過程。原代細胞：有分裂但不旺盛，且多呈二倍體核型的細胞。細胞系：由原代培養經傳代培養純化，獲得的能在體外生存的細胞群體。細胞株：指從一個通過生物學鑒定的細胞系用單細胞分離培養或通過篩選的方法，有單細胞增殖形成的細胞群。天然培養基：只要有血清、組織提取液、雞胚汁等，營養價值高，成分復雜來源有限。單克隆抗體：通過免疫哺乳類動物單一的B淋巴細胞，可以分泌單一性抗體，這種具有特異性的同質性的抗體為單抗。轉基因技術：通過人工方式將外源基因整合到生物體基因組內，并使該轉基因生物能穩定地將此基因遺傳給后代的技術。轉基因生物反映器：將外源基因轉入細胞或動植物，運用細胞增殖或動植物代謝制備外源基因的表達產物的技術。乳腺生物反映器：將外源基因置于乳腺特異性調節序列指下，使之在乳腺中表達，然后通過回收乳汁獲得有重要價值的生物活性蛋白的技術。轉基因克隆動物：通過核移植產生的轉基因動物。轉基因動物：指在基因組內穩定地整合外源基因，并且外源基因可以穩定地遺傳給后代的基因工程動物。轉基因植物：指將外源基因轉入到植物的細胞或組織獲得了新的遺傳性狀的植物。轉基因植物轉化方法：載體介導法、基因直接導入法、種質系統法、病毒感染法。干細胞：一類具有自我更新和分化潛能的細胞。分為胚胎干細胞和成體干細胞。胚胎干細胞（ES細胞）：從著床前胚胎內細胞團或原始生殖細胞經體外分化克制培養分離的一種全能性細胞，是可以分化成任何一種組織類型的細胞。成體干細胞：是成體組織內具有進一步分化潛能的細胞，是多能或單能干細胞。單能干細胞：只能分化為單一類型細胞的干細胞。如表皮的基質細胞只能分化產生表皮細胞。多能干細胞：可以形成兩種或兩種以上類型細胞的干細胞。如骨髓造血干細胞可以分化成紅細胞、巨噬細胞、粒細胞、巨核細胞、淋巴細胞等多種類型細胞。全能干細胞：具有無限分化潛能的干細胞。如胚胎干細胞。細胞重組：是指從活細胞中分離出細胞器及其組分，在體外進行重組裝配成為具有生物活性的細胞的一種技術。 胞質雜種：將兩種來源不同的核外遺傳物質（細胞器）與一個特定的核組合在一起得到的細胞是胞質雜種。同核體：基因型相同的細胞融合成的細胞。異核體：來自不同基因型的融合細胞。胚乳培養：指處在細胞期的胚乳組織的離體培養。胚乳是獨特的組織，它的功能是為胚發育和種子萌發提供營養。胚珠培養：指未受精或受精后的胚珠離體培養。未受精胚珠培養可為；離體受精提供雌配子體，也可誘發大孢子發育成單倍體植株。細胞工程發展史：1839年，施萊登和施旺發現了細胞學。192023，Haberlabdt提出了細胞全能學說。1958年，Stwovrd有胡蘿卜韌皮部組織誘導生成再生植株。192023，Harrison創建動植物的組織培養技術。細胞核移植：一種運用現為操作技術將一種動物的細胞核移入同種或異種動物的去核成熟卵細胞內的技術。細胞核移植事件：1997年，英格蘭愛丁堡羅斯林研究所和PPL制藥公司運用高度分化的綿羊乳腺上皮細胞，通過核移植克隆了一只雌性小綿羊——多莉植物原生質體融合有關事件：1960年，科金應用酶解法初次成功的從番茄幼苗根部制備出大量原生質體。1972年，卡爾森用NaNO3做誘導劑將來自不同種的兩個煙草原生質體進行融合，得到一個體細胞雜種植株。體細胞雜交：將不同來源的體細胞融合并使之分化再生形成新品種的技術。體細胞雜交相關事件：1972年，卡爾森開發出第一個體細胞雜種植物1978年，米歇爾斯初次將番茄與馬鈴薯細胞雜交成功。動物細胞培養：模擬體內生理環境使分離的動物細胞在體外生存，增值的一門技術。動物細胞培養相關事件：192023，哈里森開創了動物組織培養的先河1923年，卡雷爾設計的卡氏培養瓶，用于培養基胚的心肌組織取得成功，機打推動了動物細胞培養技術的建立。1951年，厄爾利等人開發了動物細胞體外培養的培養基。發展歷史：19世紀30年代，施萊登和施旺創建了細胞學說。192023，哈波蘭德提出人工哺育植物。1934年，懷特配置出了植物組織培養用的培養基，發現了維生素和植物激素在植物組織培養中的重要作用。1943年，懷特正式提出植物細胞具有全能性的學說。1948年，催繳和斯庫格發現腺嘌呤和生長素的比例是控制芽和根形成的重要條件之一。1953年，繆爾開創了單細胞無性繁殖的工作。1956年，米勒發現了有高度活力的促進細胞分裂和芽形成的物質命名為激動素。1958年，史都華德初次通過實驗證實了細胞具有全能性。1960年，莫雷爾采用蘭屬的莖尖培養，實現了去病毒和快速繁殖兩個目的。轉基因技術：通過人工方式將外源g整合到生物體g組內，并使該g生物能穩定地將此g遺傳給后代的技術。緒論：細胞工程的地位，內容和技術從某種意義上來說，基因工程是現在生物技術的核心，而細胞工程則是它的基礎和公共平臺，基因工程與細胞工程的結合決定著生物技術的發展按照生物類型可以分為：動物細胞工程，植物細胞工程，微生物細胞工程，按照操作對象可以分為細胞與植物培養，細胞融合，細胞核移植，染色體操作，轉基因生物等，2-5，常用的化學消毒方法有哪些？化學方法（75%的酒精，甲醛，環氧乙烷，氯已定，戊二醛，過氧乙酸，等）4-1體培養細胞有哪些類型？其生長有什么區別？一；貼壁型細胞1成纖維型細胞：細胞貼壁后呈長梭形，圓形細胞核位于中央，生長呈放射狀，旋渦狀走向。細胞之間排列疏散，有較大的細胞間隙。2上皮型細胞：細胞貼壁后呈三角形及不規則扁平的多角形，中央有扁圓形核，細胞彼次緊密連接。3游走型細胞：細胞在支持物上分散生長，一般不連接成片形成菌落，呈活躍的游走和變形運動，速度快且方向不固定，外形不規則且不斷變化。4多形型細胞：形態上不規則，一般分胞體和胞突兩部分，其中胞突為細長型，類似絲狀偽足，胞體呈現多角形。二：懸浮型細胞：某些細胞體外培養不需要貼附支持物上而生存空間大，能大量繁殖細胞，容易進行傳代培養。4-2細胞系的生長過程涉及哪些？每一個生長階段有什么特性？（1）原代培養期：也稱初代培養，是指從體內取出組織接種培養到第一代的階段，一般連續1～4周。此期細胞移動比較的活躍，可見細胞分裂，但是不旺盛。（2）傳代期：原代細胞生長一定期間后，如是貼附型細胞就會連接成片而鋪滿瓶底，這時需要將原代細胞分開至多個培養瓶中。細胞增殖旺盛，并維持二倍體核型。（3）衰退期：此期細胞仍生存，但是不增殖或者增殖很慢，最后衰退死亡。4-3每代細胞的生長曲線涉及那幾個重要時期？各期細胞有何特點？（1）潛伏期：此時細胞已存活具有代謝及運動功能，但是尚未增殖（2）指數生長期：又稱對數期，此期細胞增殖旺盛，成倍增長，活力最佳，合用于進行實驗研究。（3）停止期，又稱平臺期，此期細胞幾經將其支持物表面沾滿，細胞活力減退，已不再進行分裂增殖。4-4體外培養的細胞應滿足哪些營養成分？（1）水（2）平衡鹽溶液（3）消化液（4）消化酶克制液（5）PH調整液：NaHCO3溶液，HEPES溶液，（6）抗生素液（7）谷氨酰胺補充液4-5什么是細胞系，細胞株？如何建立細胞系？在研究中細胞系和細胞株能發揮哪些作用？國際上有哪些著名的細胞庫？細胞系：是由原代培養經初步純化，獲得的一種細胞為主的，能在體外長期生存的不均一的細胞群體。細胞株：細胞系通過進一步的克隆化，便得到由單一細胞組成的細胞株。初代培養，又稱為原代培養，即直接從體內取出的細胞，組織和器官進行第一次的培養物。一旦進行傳代培養的細胞，便不再稱為初代培養，而改稱為細胞系美國的美國標準細胞庫或細胞銀行（ATCC）和人遺傳突變細胞庫（HGMR），細胞衰老細胞庫（CAR）等。4-6細胞培養細胞培養是動物細胞工程的重要技術基礎，細胞培養涉及天然培養基和合成培養基，天然培養基重要來自動物體液或從組織分離提純制備的，營養成分高，但是成分復雜，來源有限，合成培養基是根據天然培養基的成分，用化學物質模擬合成的，細胞培養涉及原代培養和傳代培養，原代培養是指細胞或組織離開有機體之后的初次培養，培養到細胞生長到一定密度后就需要更新培養液，這就是細胞的傳代培養，細胞培養的方法通常有：懸滴培養法，培養瓶培養法，和旋轉管培養法。4-7動物的細胞與組織培養是從動物體內取出組織或細胞，模擬有機體內生理條件，在體外建立無菌，適溫和一定營養條件等，使之生長和生存，并維持其結構和功能的技術，動物細胞和組織培養的動物細胞工程的重要技術基礎，細胞融合，組織工程，胚胎工程，動物克隆等都離不開細胞的培養，4-8培養細胞的生長特點細胞的生長特點有：貼附，接觸克制，密度依賴性等。接觸克制：是體外培養中某些貼附型細胞生長特性之一，當兩個細胞由于移動而互相靠近發生接觸時，細胞不在移動，在接觸區域的細胞膜皺褶樣活動停止，從而使細胞停止運動，這種由于細胞接觸而克制細胞運動的現象稱為接觸克制。密度克制：當細胞密度進一步增大，培養液中營養成分減少，代謝產物增多，細胞由于營養的枯竭和代謝物的影響，則發生密度克制，導致細胞分裂停止。4-9細胞培養常用的液體【1】水【2】平衡鹽溶液【3】消化液【4】消化酶克制液【5】PH調整液;常用的有碳酸氫鈉溶液和HEPES溶液【6】抗生素液【7】谷氨酰胺補充液4-10原代培養的過程：原代培養就是初次培養，是從供體獲取組織后的初次培養，過程一般涉及：取材——培養材料的制備——接種——加培養液——培養4-11傳代培養的過程：傳代培養分為第一次傳代和常規傳代兩種方法。第一次傳代，當原代培養的細胞生長到一定的階段時，可以進行第一次傳代，通常取決于原代培養方法，培養物的細胞活性，細胞類型和特點，接種的細胞密度，培養條件。常規傳代：【1】貼壁細胞的消化傳代法，【2】懸浮細胞傳代5-1簡述單克隆抗體的制備過程及其重要原理。動物免疫、細胞融合、選擇雜交細胞、檢測抗體、雜交瘤細胞的克隆化、單克隆抗體的大量產生幾個環節。免疫小鼠注射特定的抗原蛋白培養骨髓溜細胞↓↓B淋巴細胞骨髓瘤細胞↘↙融合↓雜交細胞↓篩選雜交細胞（抗體檢查）↓克隆能產生抗體的陽性細胞↓在克隆陽性細胞↙↘注射小鼠體外培養↓↓單克隆抗體單克隆抗體5-2HAT的選擇原理是什么？HAT培養基是根據細胞由次黃嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸合成DNA途徑而設計的。5-3細胞融合的定義細胞融合是又稱體細胞雜交或細胞雜交，是指在離體條件下用人工的方法將不同的生物或同種生物不同類型的單細胞通過無性方式融合成一個雜合細胞的技術。細胞融合技術的出現標志著細胞工程的誕生。5-4細胞融合的核心過程？（P82）6-1胚胎工程的概念：胚胎工程是在胚胎移植的技術上發展起來的現代生物技術，重要涉及體外受精技術，胚胎移植技術，胚胎分割技術，胚胎冷凍保存技術和性別控制技術。6-2體外受精體外受精：是指哺乳動物的精子和卵子在體外人工控制的環境中完畢受精過程的技術。它的基本原理是人工模擬體內環境，涉及溫度，濕度，營養，氣體，滲透壓，PH等，使卵丘卵母細胞復合體中的初級卵母細胞成熟，同時使精子獲能，完畢受精。6-3體外受精技術卵母細胞的采集和成熟培養；【1】超數排卵，從活體卵巢中采集卵母細胞；從屠宰后母畜卵巢上采集卵母細胞；【2】卵母細胞的選擇，【3】卵母細胞的成熟培養精子的獲能解決；體外受精【1】常規的體外受精技術【2】與分離精子相結合的體外受精技術【3】顯微受精技術。受精卵的體外培養；胚胎移植。7-1干細胞的定義干細胞是一類具有自我更新和分化潛能的細胞，根據其發育階段，干細胞可分為胚胎干細胞和成體干細胞，按照分化的潛能的大小，可以將干細胞分為全能干細胞，多能干細胞，定向干細胞。7-2成體干細胞的類型成體干細胞是分布在成體組織中尚未分化的，具有自我更新，并能構建和補充相應組織的各種類型細胞潛能的干細胞，分為：造血干細胞，神經干細胞，胰島干細胞，皮膚干細胞。7-3組織工程組織工程是指應用工程學和生命科學的原理和方法來研究正常或病理狀況下的哺乳動物組織的結構功能和生長的機制，研究開發可以修復，維持或改善損傷組織的人工生物替代物的一門學科。8-1簡述細胞核移植的發展史，討論“多莉”羊產生的學術意義？1952年Briggs和King發明了細胞核移植技術，初次把兩棲淚囊體胚的細胞核移植到去核卵中，發育成為可攝食的蝌蚪1997年，英格蘭愛丁堡羅斯林研究所和PPL制藥公司運用高度分化的綿羊乳腺上皮細胞，通過核移植克隆了一只雌性小綿羊——多莉它是人類初次用成年的體細胞——乳腺上皮細胞獲得的克隆后代，證明了哺乳動物高度分化的細胞核在卵母細胞質的支持下也可以恢復其全能性，為細胞的全能性增長了新的實驗證據。8-2簡述細胞核移植的類型和重要的操作技術？【1】胚胎細胞核移植技術【2】干細胞核移植技術【3】體細胞核移植技術操作技術：【1】核受體細胞的準備【2】核供體細胞的準備【3】細胞核移植【4】激活【5】重組胚的體內或體外培養【6】胚胎移植8-3核移植技術的應用？【1】制備基因克隆動物，進行生物藥物的生產【2】哺育優良畜種，擴大良種種群【3】開展異種動物克隆，拯救瀕危動物【4】與干細胞技術結合。開展治療性克隆【5】運用核移植技術，研究生物學的基本問題。9-1什么是轉基因動物？指在基因組內穩定地整合外源基因，并且外源基因可以穩定地遺傳給后代的基因工程動物。9-2簡述轉基因動物的制備方法，分析比較幾種方法的原理與特點。方法原理特點基因顯微注射法通過顯微注射儀將外源基因直接注射到受精卵的雄原核內使外源基因整合到DNA中，發育成轉基因動物外源分子的DNA大小不受限制，每次注射外源基因的長度可達50KB。方法簡樸，導入過程直觀逆轉錄病毒感染法將目的基因重組到逆轉錄病毒基因組上，人為的感染床前或者著床后的胚胎，可以高效哦的感染宿主細胞，感染率達成100%胚胎干細胞介導法外源DNA導入體外培養的ES細胞，經篩選后獲得整合穩定和表達好的轉化細胞系，然后將這些細胞注入受體類囊配腔中，精子載體導入法以精子作為外源DNA載體的轉基因方法YAC介導的基因轉移細胞核移植技術9-6轉基因動物的應用，【1】改良動物品種【2】生物制藥【3】建立診斷和治療人類疾病的動物模型【4】生產可用于人體器官移植的動物器官【5】基因治療【6】基因打靶9-7動物乳腺生物反映器的制備【1】表達載體的構建【2】目的基因的選擇【3】體外重組【4】基因轉導【5】胚胎移植【6】鑒定，轉基因動物乳腺生物反映器可以從分子水平和乳腺分泌物兩個方面鑒定10-1什么是染色體工程？動物染色體工程重要涉及哪些方面？是按照人們的需要對生物的染色體進行操作，添加，消減或者替換染色體，從而達成定向選育新品種或者發明人工新物種的目的，動物染色體工程重要涉及染色體倍性改造，結構改造及人工染色體的運用。10-2動物染色體加倍技術重要有哪些？【1】化學誘導法；運用秋水仙素，細胞松弛素，麻醉劑N2O【2】物理方法；溫度休克法，水靜壓法【3】生物學方法；通過雜交技術11-1結合細胞工程的發展，全面分析和理解細胞學說和植物全能性理論的意義？細胞工程發展史：1839年，施萊登和施旺發現了細胞學。192023，Haberlabdt提出了細胞全能學說。1958年，Stwovrd有胡蘿卜韌皮部組織誘導生成再生植株。192023，Harrison創建動植物的組織培養技術。植物細胞的全能性：植物體的一部分組織或者器官具有發育成完整植株的潛在能力，稱之為植物細胞的全能性。植物全能性理論是植物細胞工程的理論基礎。11-2愈傷組織有什么特點？它在植物細胞工程中有什么作用？脫分化后的細胞通過細胞分裂，產生無組織結構、無明顯極性的松散的細胞團。愈傷組織的誘導是植物細胞體外再生的第一步。也是關鍵的一步。愈傷組織形成再生植株需要通過什么途徑？要通過器官的發生和胚狀體發生兩條途徑。器官的發生是由愈傷組織一方面在一種培養基生誘導形成的芽（或根），再在另一種培養基上誘導形成根（或芽）。胚狀體發生是由愈傷組織形成類似種子的胚的結構，同時產生芽端和根端的結構，稱為胚狀體。11-4分析影響植物組織脫分化和再分化的因素？內部因素：涉及植物的遺傳性狀和生理狀況，外部因素：涉及營養條件（如植物激素，無機鹽，有機營養成分）和環境條件（如培養基的PH，滲透壓，溫度，濕度，光照）11-5植物組織培養基的組成成分有哪幾類？在離體培養中的功能是什么？【1】無機營養成分。如鎂是葉綠素分子的一部分，鈣是細胞壁的組成之一，氮是各種氨基酸，維生素，蛋白質和核酸的重要組成部分。【2】有機營養成分。碳源，含氮物質【3】植物激素類，生長素類，細胞分裂素類，赤霉素類【4】瓊脂它是培養基中的一種必需成分【5】PH值在滅菌之前培養基的PH值一般都調節到5.0～6.011-6分析植物離體培養的環境條件及對培養的影響？環境的影響重要有：【1】光的影響：光對培養基所產生的影響是不同的，在煙草細胞培養物中泛醌的合成不受光的影響，【2】溫度的影響：不同植物細胞培養物的生長和次生產物的合成對溫度有一定的規定?！?】振蕩的頻率：搖床的振蕩頻率對細胞培養物的生長和代謝物的積累都會產生影響。11-13植物幾種大規模培養系統各有什么特點？培養體系營養特點懸浮細胞培養細胞生長較慢，易成團產物含量較低，遺傳不穩定，培養后期粘性大固定化培養載體固定化：生長慢，產物含量較高，遺傳穩定，可以連續培養，自固定化：生長較快，細胞聚集，成大顆粒，產量高。培養夜澄清植物器官培養毛狀根生長迅速，分支多，不需要外源激素，向地型弱，產量高，遺傳穩定芽生長較慢，遺傳較穩定，產物含量高，需要光照，體細胞胚生長慢，遺傳穩定，次級代謝產物含量較高。冠癭組織生長快，不需要外源激素，產量高，遺傳穩定，懸浮培養為顆粒狀12-1什么是植物快繁技術？總結其重要的操作環節。運用組織培養技術，將優良植株的莖尖，腋芽，葉片，鱗片等器官，組織和細胞進行離體培養，在短時間內獲得大量遺傳性一致的植株的技術稱為植物的快繁技術。其重要的操作流程涉及無菌母株的制備，不定芽增殖，完整植株的形成，再生植株的鍛煉和馴化及再生植株的鑒定等環節。12-2植物脫毒方法有哪些？有微莖尖培養法，株心組織培養法，熱解決法13-1通過離體培養獲得單倍體的途徑有哪些？通過離體培養花藥和花粉，是離體培養獲得單倍體的重要途徑13-2花藥培養中再生植株的形成途徑與再生植株倍性有何關系？花藥再生植株有兩種方式：【1】花粉在誘導培養基上先形成愈傷組織，再分化形成植株，【2】胚狀體再生，即花藥中的花粉通過形成胚狀體，發育成單倍體植株，在花藥培養中，花藥中的花粉最容易形成胚狀體或愈傷組織，但是，有時花藥的體細胞也可以分裂繁殖，因此，體外花藥培養除了得到小孢子來源的單倍體植物，還會的到花藥體細胞來源的二倍體植株。13-3花粉培養過程花粉培養是指把花粉從花藥中分離出來，以花粉粒作為外植體進行離體培養的技術。13-4花藥與花粉培養的方法13-4-1材料如何選擇【1】材料的遺傳差異【2】母本生理狀態的影響【3】花粉發育時期13-4-2材料的預解決【1】低溫解決【2】高溫解決【3】離心解決【4】激光照射【5】乙烯利解決【6】甘露醇解決13-4-3培養基基本培養基，【1】碳源【2】激素【3】附加成分13-4-4，接種與再生植株的培養【1】材料的滅菌解決【2】培養條件【3】花粉的培養【4】花粉植株的鑒定【5】單倍體植物的染色體加倍14-1植物胚乳有哪些類型？植物胚乳可以分為兩大類：被子植物胚乳和騾子植物胚乳。胚乳發育初期是否形成細胞壁可分為：【1】核型胚乳【2】細胞型胚乳【3】沼生目型胚乳植物胚胎培養的定義和發展植物胚胎培養涉及：胚培養，胚珠培養，子房培養和胚乳培養。胚培養涉及成熟胚培養和幼胚培養。192023Hanning培養羅卜和辣根菜的胚，Laibach在1925年～19289年培養亞麻種間雜種幼胚成功的獲得了種間雜種，初次證實了這種方法在實際應用中的價值胚培養的意義？1克服了遠源雜交不孕和幼胚敗育2成熟胚培養快速繁殖3胚培養作為轉基因受體材料15-1愈傷組織與體細胞胚胎發生愈傷組織本來是指植物受損時在愈合傷口處長出的一團瘤狀突起，突起內的細胞已發生脫分化的變化，培養中的愈傷組織是指從外植體的內部或切口表面形成的一團沒有分化的均勻一致，無序生長的薄壁細胞團。這種組織具有再分化能力。愈傷組織的形成大體要通過起動期，分裂期，形成期三個階段。愈傷組織器官的發生：【1】不定芽方式：是指愈傷組織培養物，通過形成不定芽的再生植株，【2】胚狀體的形成，是指培養的組織或細胞中直接或間接形成胚胎的生長方式。15-2人工種子就是將植物離體培養產生的體細胞胚包埋在具有營養成分和保護功能的物質中而制成的，在條件適宜時他同普通種子同樣可以發芽成苗。人工種子涉及：體細胞胚，人工胚乳，人工中皮。15-3人工種子的研究現狀【1】人工種子結構完整，體積小，便于儲藏和運送?！?】供制作人工種子的體細胞胚數量多，