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文檔簡介
2雞球蟲種類ITS1-PCR鑒定技術GB/T6682-2008,分析實驗室用水規格和試驗方法.PCR:聚合酶鏈式反應(PolymeraseITS:內轉錄間隔區(InternalTranscribedSpacer)DNA:脫氧核糖核酸(DeoxyribonucleicaciTAE:三羥甲基氨基甲烷-乙酸-乙二胺四乙酸(Tbp:堿基對(Basepair)PCR儀、4℃高速低溫離心機、電泳槽,微量移液器、凝膠成像系統異硫氰酸胍、苯酚、氯仿、異戊醇、無水乙醇、70%酒精DNAMarkerDL-2000、2×TaqDNA聚合酶Mix、瓊脂糖、飽和食鹽水(1000m取2000個左右待檢雞球蟲孢子化卵囊置于2mL離心管中,加入直徑為1mm的3),倒混勻,12000g離心10min,棄上清;向沉淀加入70%酒上清;室溫干燥后,加入50μL雙蒸水溶雞球蟲的陽性對照樣品和陰性對照樣品與待檢樣品同步、相同方法處理,進行DNA抽提。另外,),凝膠電泳,電泳程序為恒壓120V,時間30min,電泳結束后將凝膠置于凝膠成像系統下成像,觀7.2在實驗成立的前提下,被檢樣品出現××種球蟲的目的條帶,判為雞球蟲××種7.3在實驗成立的前提下,被檢樣品未出現××種球蟲的目的條帶,判為雞球蟲××種陰4EimeriaacervulinaEimeriabrunettiEimeriamaximaEimeriamitis上游bcEimerianecatrixEimeriapraecoxAATAAATAGCGCAAAATTAAGEimeriatenella5[1]GB/T1.1-2020,標準化工作導則第1部分:標準化文[2]GB/T6682-2008,分析實驗室用水規格和試驗方法.[3]SN/T4881—2017,雞球蟲病檢疫技術規范.[4]LewAE,AndersonGR,Minchinternaltranscribedspacer1(ITS-1)sequencesofAustralianisolatesofEimeriaspeciesfromchickens[J].[5]HaugA,TheboP,MattssonJG.AsimplifiedprotocolformolecularidentificationofEimeriasp
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