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文檔簡介

細菌細胞壁與革蘭氏染色目錄/Contents01

革蘭氏染色技術03革蘭氏染色機理

細菌細胞壁與革蘭氏染色02細菌細胞壁的結構成分01革蘭氏染色技術革蘭氏染色技術是由丹麥醫生Gram1884年建立的一種復合染色技術。革蘭氏染色是分類鑒定菌種的一個重要指標。革蘭氏染色技術革蘭氏陽性菌革蘭氏陰性菌草酸銨結晶紫

碘液（媒染）95％乙醇（脫色）蕃紅（復染）

染色步驟：水洗水洗水洗

經乙醇處理不褪色，保持初染時深紫色的菌體，稱為革蘭氏染色陽性菌（G+菌）；

G+菌G-菌染色結果：

經乙醇處理迅速脫去原色，而能染上沙黃紅顏色的菌體稱為革蘭氏染色陰性菌（G-菌）。細胞壁是位于菌體細胞的最外層，內側緊貼細胞膜的一層無色透明、堅韌而略具彈性的結構。約占干重的10－25%。構成細胞壁的主要化學成分（基本骨架）是肽聚糖層，除此之外有的細菌具有磷壁酸；有的細菌具有脂多糖、磷脂、蛋白等成分。采用革蘭氏染色技術可以將細菌分為兩種類型，革蘭氏陽性（G+）菌和革蘭氏陰性（G-）菌。02細菌細胞壁的結構成分革蘭氏陽性菌細胞壁厚，結構致密。化學成分簡單，主要是由肽聚糖和磷壁酸組成；革蘭氏陰性菌的細胞壁比陽性菌的薄，分為外壁層和內壁層兩部分，外壁層包括脂多糖、蛋白質（脂蛋白、基質蛋白和外壁蛋白）和磷脂層，內壁層緊貼胞膜，僅由1～2層肽聚糖分子構成

。成分占細胞壁干重的量

革蘭氏陽性細菌革蘭氏陰性細菌肽聚糖含量很高（30%～95%）含量很低（5%～20%）磷壁酸含量較高（<50%）無類脂質一般無（<2%）含量較高（約20%）蛋白質無含量較高G+細菌與G-細菌細胞壁成分比較

革蘭氏染色機理03革蘭氏染色的結果不同正是由于G+和G-細菌細胞壁的化學結構和組成不同造成的。肽聚糖磷壁酸肽聚糖脂蛋白磷脂脂多糖內壁層外壁層

細胞壁較厚。肽聚糖15～20層，交聯度高，三維網格狀結構致密堅韌。細胞壁較薄，肽聚糖層少，交聯度低，網格狀結構疏松，脂質含量高。

G+

G-G﹢菌：細胞壁的肽聚糖層厚且交聯緊密，當乙醇脫色時，肽聚糖層脫水而孔隙變小，顆粒較大的結晶紫-碘復合物不能從細胞壁中脫除，復染的紅色染料雖然也進入細胞，但被紫色遮蓋，所以G﹢菌仍保持紫色。Gˉ菌：肽聚糖層薄，交聯疏松且富含類脂，乙醇脫色后類脂溶出導致其細胞壁的空隙變大，結晶紫-碘復合物易從細胞壁中脫出，再用紅色沙黃復染后呈紅色。草酸銨結晶紫碘液（媒染）95％乙醇蕃紅（復染）G＋藍紫色G＋

紅色G＋

未脫色G-

脫色

小結：

1、革蘭氏染色是分類鑒定菌種的一個重要指標。

（1）染色步驟：初染、媒染、酒精脫色、復染

（2）染色結果：

G＋：藍紫色、G-：紅色

2、細菌細胞壁的結構成分：

G＋：肽聚糖層厚、磷壁酸；

G-：內壁層：薄的肽聚糖、外壁層：磷脂、脂蛋白、

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