關于流式細胞術在白血病和淋巴瘤中的應用免疫分型的作用區分淋系、髓系白血病區分淋系白血病中的T、B-ALL鑒定混合細胞性白血病的類型：T-M、B-M、T-B、T-B-M于治療過程中監測MRD，評價療效提示某些遺傳學異常：CD56+APL---t（11；17）？CD19+AML---t（8；21）（q22；q21）？提示預后：CD7、CD11b、CD56等陽性的AML患者預后不良CD15陽性的AML患者CR率高

第2頁,共50頁，2024年2月25日，星期天免疫分型的原理正常造血細胞白血病細胞

抗原表達遵循系列保守性出現抗原跨系表達

髓系:CD33+,T系:CD7+髓系:CD33+CD7+

抗原表達有一定的時序性出現抗原時序混亂表達

原始細胞:CD34+CD11B- 原始細胞:CD34+CD11B+

各階段細胞按一定的比例分布出現分化阻滯

原幼細胞<5%原幼細胞>20%第3頁,共50頁，2024年2月25日，星期天免疫分型需要掌握什么理論知識？正常造血細胞的抗原表達規律不同系列的細胞表達的抗原？同一系列不同階段的細胞表達的抗原？每種抗原的表達強度？第4頁,共50頁，2024年2月25日，星期天正常B系細胞分化圖

源于王建中等編著的《臨床流式細胞分析》第5頁,共50頁，2024年2月25日，星期天正常T系細胞分化圖源于王建中等編著的《臨床流式細胞分析》第6頁,共50頁，2024年2月25日，星期天正常粒細胞分化圖源于王建中等編著的《臨床流式細胞分析》第7頁,共50頁，2024年2月25日，星期天正常單核細胞分化圖源于王建中等編著的《臨床流式細胞分析》第8頁,共50頁，2024年2月25日，星期天免疫分型中的重要抗原CD45正常成人骨髓標本成熟粒細胞：約占40-60%，表達CD11b、CD13、CD33、CD15、CD16、CD10、CD64,不表達CD34、HLA-DR、CD14、CD117有核紅細胞：<50%,表達GPA成熟單核細胞：約占2-8%，表達CD11b、CD64、CD14、HLA-DR，不表達CD34、CD117成熟淋巴細胞：約占20-40%T細胞：表達CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD7,不表達CD10、CD34、TDT等

B細胞：表達CD19、CD20、CD22，不表達CD10、CD34、TDT等NK細胞：CD3-(CD16+CD56)+正常幼稚B細胞：<5.0%,表達CD10、CD19、CD22、弱表達CD20，少量CD10stCD34+TDT+幼稚髓系細胞：〈5.0％第9頁,共50頁，2024年2月25日，星期天免疫分型常用的抗體AMLCD34、CD117、CD33、CD13、HLA-DR、CD11b、CD15、CD64、CD14、CD65s、MPO懷疑M6加做CD71、GPA懷疑M7加做CD61、CD41B-ALLCD34、CD10、CD19、CD20、CD22、c/mIg、TDT、cCD22/CD79aT-ALLCD34、CD10、CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD7、HLA-DR、CD1a、TDT、cCD3NK細胞CD16、CD56、CD57漿細胞CD38、CD138、cκ、cλ、CD19、CD56第10頁,共50頁，2024年2月25日，星期天免疫分型的步驟一第一步：初篩，初步篩選白血病類型CD7/CD19/CD33/CD10/CD117/HLA-DR/CD34/CD45CD7+CD19-CD33+/-HLA-DR-CD117+/-疑為T-ALLCD7+CD19-CD33+HLA-DR+CD117+疑為AML伴CD7+CD19+CD7-CD33-CD10+/-CD117-疑為B-ALLCD19+CD7-CD33+CD10+CD117-疑為B-ALL伴CD33+CD19+CD7-CD33+CD10-CD117+疑為AML伴CD19+CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR+疑為AMLCD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR-疑為APL第11頁,共50頁，2024年2月25日，星期天免疫分型的步驟二第二步：確診，進一步確定白血病類型，并且將某一系別的白血病根據分化程度的不同再分為不同亞型根據初篩結果加做其他系別特異性標記T-ALL:CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD1a、TDT、cCD3B-ALL:CD20、CD22、c/mIg、TDT、cCD22/CD79aAML:CD13、CD11b、CD15、CD64、CD14、CD65s、MPO,懷疑M6加做CD71、GPA,懷疑M7加做CD61、CD41第12頁,共50頁，2024年2月25日，星期天B-ALL免疫亞型亞型CD19CD34TdTCD10CyIgSmIgFAB分型earlyB-precursorALL+++（－）--L1、L2CommonB-ALL++++（－）-L1、L2PreB-ALL+－/+++（+）-L1B-ALL+－－－－/+（+）L3第13頁,共50頁，2024年2月25日，星期天T-ALL免疫亞型分型CD7CD2TdTCD3c/mCD1aFAB分型急性早期T前體細胞白血病earlyT-precursorALL+－+－/+-L1、L2胸腺皮質T-ALL+++++L1、L2急性T細胞白血病T-ALL++－+-L1、L2第14頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：T-ALL

初篩CD7+CD19-CD33+/-HLA-DR-CD117+/-第15頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：AML伴CD7+

初篩CD7+CD19-CD33+HLA-DR+CD117+第16頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：B-ALL

初篩CD19+CD7-CD33-CD10+/-CD117-第17頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：BALL+CD33

初篩CD19+CD7-CD33+CD10+CD117-第18頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：AML+CD19

初篩CD19+CD7-CD33+CD10-CD117+第19頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：AML

初篩CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR+第20頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：AML-M3

初篩CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR-第21頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：AML-M3V

初篩CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR-第22頁,共50頁，2024年2月25日，星期天混合細胞性白血病的免疫分型雙表型：一種白血病細胞同時表達兩個或兩個以上系列標志。雙克隆型：同時存在兩種或兩種以上異常細胞，分別表達各自的系列特異性標志。類型：T-M、B-M、T-B、T-B-M第23頁,共50頁，2024年2月25日，星期天白血病中各種抗原的積分情況PointsB-lymphoidT-lymphoidMyeloid2CD79acCD22cIgMCD3TCRa/bTCRg/dMPO1CD19CD10CD20CD2CD5CD8CD10CD117CD65CD13CD330.5TdTCD24TdTCD7CD1aCD14CD15CD64混合細胞性白血病判斷標準：每個系列積分>或=2.5分第24頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：B-M型AL第25頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：T-M型AL第26頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：T-B-M型AL第27頁,共50頁，2024年2月25日，星期天免疫表型的預后價值第28頁,共50頁，2024年2月25日，星期天第29頁,共50頁，2024年2月25日，星期天第30頁,共50頁，2024年2月25日，星期天第31頁,共50頁，2024年2月25日，星期天第32頁,共50頁，2024年2月25日，星期天第33頁,共50頁，2024年2月25日，星期天免疫分型在慢淋、淋巴瘤中的應用簡介腫瘤性B細胞鑒別關鍵：κ、λ輕鏈出現單克隆表達或雙陰性或表達強度明顯異常。腫瘤性T細胞鑒別關鍵：CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD7中出現抗原表達缺失或抗原表達強度的改變；CD45RA、CD45RO的表達情況出現異常；表達TDT、CD10等幼稚抗原；TCRVβ系列抗原出現單克隆表達。漿細胞腫瘤鑒別關鍵：CD138+細胞表達CD56，不表達CD19，出現cyκ、cyλ輕鏈的單克隆表達。NK細胞腫瘤鑒別關鍵：出現CD16、CD56、CD7、CD2等抗原的缺失，CD45表達強度的改變每種類型都必須關注異常細胞CD45表達強度、SSC、FSC的變化。第34頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：正常淋巴細胞正常T細胞正常B細胞正常NK細胞第35頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：B-CLL/SLL第36頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：MCL第37頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：HCL第38頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：Burkkit淋巴瘤第39頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：FL第40頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：脾邊緣區淋巴瘤第41頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：NK-T淋巴瘤第42頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：T-NHL82.5%15.6%第43頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例：細針穿刺B-NHL第44頁,共50頁，2024年2月25日，星期天示例