中 華 人 民 共 和 國 國 家 標 準B4食品安全國家標準食品中總砷及無機砷的測定8發布 8實施中華人民共和國國家衛生健康委員會國 家 市 場 監 督 管 理 總 局 發布B4前 言本標準代替食品安全國家標準 食品中總砷及無機砷的測定本標準與4相比主要變化如下:第一篇 食品中總砷的測定增加了石墨爐原子吸收光譜法為第三法;刪除了食品中總砷測定的銀鹽法;修改了氫化物發生原子熒光光譜法為第一法修改了試樣消解方法;修改了電感耦合等離子體質譜法為第二法。第二篇 食品中無機砷的測定增加了第一法第二法中稻米試樣中無機砷提取的微波輔助提取法;修改了第一法第二法的適用范圍檢出限定量限精密度和分析結果表述;修改了第一法第二法中試樣的預處理方法提取方法和分離測定條件。ⅠB4食品安全國家標準食品中總砷及無機砷的測定范圍本標準第一篇規定了食品中總砷的測定方法。本標準第一篇第一法第二法適用于食品中總砷的測定第三法適用于食品乳粉和調制乳粉油脂及其制品調味品特殊膳食用食品除外中總砷的測定。本標準第二篇規定了食品中無機砷的測定方法。本標準第二篇適用于谷物及其制品水產動物及其制品食用菌及其制品油脂及其制品調味品、嬰幼兒輔助食品藻類及其制品中無機砷的測定。第一篇 食品中總砷的測定第一法 氫化物發生原子熒光光譜法原理試樣經消解處理后加入硫脲使五價砷預還原為三價砷再加入硼氫化鈉或硼氫化鉀使三價砷還原生成砷化氫由氬氣載入石英原子化器中分解為原子態砷在砷空心陰極燈的發射光激發下產生原子熒光其熒光強度在固定條件下與被測液中的砷濃度成正比外標法定量。試劑和材料除非另有說明本方法所用試劑均為優級純水為2規定的一級水。試劑氫氧化鈉。氫氧化鉀。硼氫化鉀4分析純。硫脲分析純。鹽酸。硝酸3。硫酸4。高氯酸4。過氧化氫20。硝酸鎂32分析純。氧化鎂分析純。抗壞血酸6分析純。1B4試劑配制氫氧化鉀溶液稱取g氫氧化鉀溶于水并稀釋至0混勻。硼氫化鉀溶液稱取g硼氫化鉀溶于0L氫氧化鉀溶液中混勻。臨用現配。硫脲+抗壞血酸溶液稱取g硫脲加約0L水加熱溶解待冷卻后加入g抗壞血酸稀釋至0混勻。臨用現配。氫氧化鈉溶液稱取g氫氧化鈉溶于水并稀釋至0混勻。硝酸鎂溶液稱取g硝酸鎂溶于水并稀釋至0混勻。鹽酸溶液量取0L鹽酸緩緩倒入0L水中混勻。硫酸溶液量取0L硫酸緩緩倒入0L水中混勻。硝酸溶液量取0L硝酸緩緩倒入0L水中混勻。注本方法也可用硼氫化鈉作為還原劑稱取g硼氫化鈉溶于0L氫氧化鈉溶液中混勻。可根據儀器的靈敏度調整硼氫化鉀或硼氫化鈉溶液的濃度。臨用現配。標準品三氧化二砷3S號標準品純度5。標準溶液配制砷標準儲備液0以s計準確稱取于0℃干燥h的三氧化二砷加1L氫氧化鈉溶液和少量水溶解轉入0L容量瓶中加入適量鹽酸調整其酸度近中性用水稀釋至刻度。于2冰箱中避光保存有效期1年。或經國家認證并授予標準物質證書的砷標準溶液。砷標準使用液0以s計準確吸取0L砷標準儲備液0于0L容量瓶中用硝酸溶液稀釋定容至刻度。于2℃8℃冰箱中避光保存有效期3個月。砷標準系列溶液取5L容量瓶或比色管7支依次準確加入砷標準使用液0)050500L和0分別相當于砷濃度0、L和各加硫酸溶液5硫脲+抗壞血酸溶液2補加水至刻度混勻放置0n后測定。臨用現配。注:可根據儀器的靈敏度及樣品中砷的實際含量微調標準系列溶液中砷的質量濃度范圍。儀器和設備原子熒光光譜儀。電子天平感量為11g和1。勻漿機。高速粉碎機。:

, , 。電熱消解裝置控溫電熱板或石墨消解儀

最高溫度不低于0℃控溫精度5℃馬弗爐。恒溫干燥箱

控溫精度℃。微波消解系統配有聚四氟乙烯消解內罐。壓力消解罐。注玻璃器皿及聚四氟乙烯消解內罐均需以的硝酸溶液浸泡用自來水反復沖洗最后用水沖洗干凈。2B4分析步驟試樣制備固體樣品干樣谷物干食用菌水產動物干制品等樣品取可食部分粉碎均勻對于固體乳制品面粉嬰幼兒谷類輔助食品等呈均勻狀的粉末樣品搖勻。鮮樣蔬菜水果水產動物鮮食用菌肉類及蛋類等樣品洗凈晾干取可食部分勻漿至均質。速凍及罐裝食品經解凍的速凍食品取可食部分粉碎至均勻罐裝食品粉碎或均漿至均勻。液體樣品飲料調味品乳及其制品油脂及其制品等樣品勻漿或均質。半固體樣品攪拌均勻。試樣消解濕法消解固體試樣稱取精確至液體試樣稱取精確至于消解瓶或消解管中加0L硝酸4L高氯酸5L硫酸放置過夜。次日于0℃0℃逐級升溫加熱消解若消解液處理至5L左右時仍有未分解物質或色澤變深補加硝酸50再消解至2左右如此反復2次次注意避免炭化繼續加熱消解至消解液1左右呈無色澄清,且消解瓶或消解管中充滿白煙對于有機砷較高的水產動物及其制品食用菌及其制品魚油及其制品、磷蝦油及其制品藻類及其制品等樣品將消解溫度升至0℃0℃繼續加熱消解至消解液為5L左右呈無色澄清且消解瓶或消解管中充滿白煙。冷卻后沿消解容器壁緩慢加水約0,再蒸發至消解瓶或消解管充滿白煙。冷卻用水將消解液轉入5L容量瓶或比色管中加入2L硫脲+抗壞血酸溶液用水定容至刻度混勻放置0待測。同時做空白試驗。干灰化法固體試樣稱取精確至液體試樣油脂樣品除外稱取精確至置于00L坩堝中。加0L硝酸鎂溶液混勻低熱蒸干將g氧化鎂覆蓋在干渣上對于油脂樣品稱取g于00L坩堝中直接加入g氧化鎂覆蓋在油脂上于電爐上炭化至無黑煙移入0℃馬弗爐灰化。取出放冷小心加入50L鹽酸溶液以中和氧化鎂并溶解灰分轉入5L容量瓶或比色管向容量瓶或比色管中加入2L硫脲+抗壞血酸溶液另用硫酸溶液分次洗滌坩堝后合并洗滌液并定容至刻度混勻放置0待測。同時做空白試驗。3B4微波消解法固體試樣和油脂及其制品試樣稱取精確至含水分較多的試樣或液體試樣稱取精確至于消解罐中加入58L硝酸放置0n以上。對于肉類、油脂等難消解的樣品再加入51L過氧化氫蓋好安全閥將消解罐放入微波消解系統中。根據不同類型的樣品設置適宜的微波消解程序見附錄A表按相關步驟進行消解消解結束后于5℃5℃趕酸至12。將消化液轉移至5L容量瓶或比色管用少量硫酸溶液)洗滌消解罐3次合并洗滌液于容量瓶或比色管中并加入2L硫脲+抗壞血酸溶液用硫酸溶液)定容至刻度混勻放置0待測。同時做空白試驗。注微波消解法不適用有機砷含量較高的水產動物及其制品食用菌及其制品魚油磷蝦油及其制品水產調味品藻類及其制品等基質復雜的樣品。壓力罐消解法固體試樣和油脂及其制品試樣稱取精確至鮮樣或液體試樣稱取g精確至于消解內罐中加入5L硝酸浸泡過夜。蓋好內蓋旋緊不銹鋼外套放入恒溫干燥箱0℃0℃保持自然冷卻至室溫然后緩慢旋松不銹鋼外套將消解內罐取出放在控溫電熱板上5℃5℃趕酸至12。將消化液轉移至5L容量瓶或比色管用少量硫酸溶液洗滌消解罐3次合并洗滌液于容量瓶或比色管中并加入2L硫脲+抗壞血酸溶液用硫酸溶液定容至刻度混勻放置0待測。同時做空白試驗。注壓力罐消解法不適用有機砷含量較高的水產動物及其制品食用菌及其制品魚油磷蝦油及其制品水產調味品藻類及其制品等基質復雜的樣品。儀器參考條件負高壓0砷空心陰極燈電流00載氣氬氣載氣流速0屏蔽氣流速0測量方式熒光強度讀數方式峰面積。標準曲線的制作儀器預熱穩定后將試劑空白標準系列溶液依次引入儀器進行原子熒光強度的測定。以原子熒光強度為縱坐標砷質量濃度為橫坐標制作標準曲線得到回歸方程。試樣溶液的測定相同條件下將空白溶液和樣品溶液分別引入儀器進行測定。根據回歸方程計算出樣品中砷元素的質量濃度。分析結果的表述試樣中砷的含量按式計算。式中:

X=ρ0V0m0

…………1)X試樣中砷的含量單位為毫克每千克;ρ試樣溶液中砷的含量單位為微克每升;4B40 —空白液中砷的含量單位為微克每升;V —試樣消化液的定容體積單位為毫升;0—換算系數;m 試樣的稱樣量單位為克。當砷含量0g時計算結果保留3位有效數字當砷含量0g時計算結果保留2位有效數字。精密度樣品中砷含量大于0g時在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的0小于或等于0g且大于0g時在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的5小于或等于0g時在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的0。其他當固體樣品稱樣量為0定容體積為5L時方法檢出限為1方法定量限為4。當液體樣品取樣量為定容體積為5L時方法檢出限為5方法定量限為2。第二法 電感耦合等離子體質譜法參見8第一法。第三法 石墨爐原子吸收光譜法原理試樣消解處理后經石墨爐原子化在m處測定吸光度。在一定濃度范圍內砷的吸光度值與砷含量成正比外標法定量。試劑和材料除非另有說明本方法所用試劑均為優級純水為2規定的一級水。試劑硝酸3。過氧化氫20。硝酸鈀32。氫氧化鈉。試劑配制硝酸溶液量取0L硝酸緩緩倒入0L水中混勻。5B4硝酸溶液量取0L硝酸緩慢加入到0L水中混勻。氫氧化鈉溶液稱取g氫氧化鈉用水溶解并定容至0混勻。硝酸鈀溶液稱取g硝酸鈀用硝酸溶液稀釋至0混勻。標準品三氧化二砷3S號標準品純度5。標準溶液配制砷標準儲備液0以s計同。砷標準使用液0以s計同。砷標準系列溶液分別吸取適量砷標準使用液0用硝酸溶液配制砷的質量濃度分別為L和L的標準系列溶液。注:可根據儀器的靈敏度及樣品中砷的實際含量微調標準系列溶液中砷的質量濃度范圍。儀器和設備原子吸收光譜儀配石墨爐原子化器。電子天平感量為11g和1。控溫電熱板控溫精度℃。微波消解系統。恒溫干燥箱控溫精度℃。壓力消解罐。勻漿機。高速粉碎機。注玻璃器皿及聚四氟乙烯消解內罐均需以的硝酸溶液浸泡用自來水反復沖洗最后用水沖洗干凈。分析步驟試樣制備同。試樣消解微波消解法固體試樣和油脂及其制品試樣稱取精確至含水分較多的試樣或液體試樣稱取精確至于消解罐中加入58L硝酸放置0n以上對于肉類、水產動物及其制品等難消解的樣品再加入51L過氧化氫蓋好安全閥將消解罐放入微波消解系統中。根據不同類型的樣品設置適宜的微波消解程序見表按相關步驟進行消解消解完全后于0℃5℃趕酸至51用水定容至5混勻備用。同時做空白試驗。壓力罐消解法固體試樣和油脂及其制品試樣稱取精確至鮮樣或液體試樣稱取g6B4精確至于消解內罐中加入5L硝酸浸泡過夜。蓋好內蓋旋緊不銹鋼外套放入恒溫干燥箱0℃0℃保持自然冷卻至室溫然后緩慢旋松不銹鋼外套將消解內罐取出放在控溫電熱板上0℃5℃趕酸至51用水定容至5混勻備用。同時做空白試驗。儀器參考條件儀器參考條件見附錄B中表。采用氘燈自吸收或塞曼效應扣除背景。標準曲線的制作吸取L砷標準系列溶液和L硝酸鈀溶液可根據所使用的儀器確定最佳進樣量,按質量濃度由低到高的順序分別注入石墨爐原子化后測其吸光度值以質量濃度為橫坐標吸光度為縱坐標制作標準曲線。試樣溶液的測定在與測定標準溶液相同的實驗條件下吸取L空白溶液或試樣溶液和L硝酸鈀溶液可根據所使用的儀器確定最佳進樣量注入石墨爐原子化后測其吸光度值與標準系列比較定量。分析結果的表述試樣中砷的含量按式計算。式中:

X=ρ0V0m0

…………2)X —試樣中砷的含量單位為毫克每千克;ρ —試樣溶液中砷的含量單位為微克每升;0 —空白液中砷的含量單位為微克每升;V —試樣消化液的定容體積單位為毫升;0—換算系數;m 試樣的稱樣量單位為克。當砷含量0g時計算結果保留3位有效數字當砷含量0g時計算結果保留2位有效數字。精密度同第7章。其他當固體樣品稱樣量為5定容體積為5L時方法檢出限為3方法定量限為9。當液體樣品取樣量為定容體積為5L時方法檢出限為8方法定量限為3。7B4第二篇 食品中無機砷的測定第一法 液相色原子熒光光譜聯用法原理試樣中無機砷經稀硝酸提取后以液相色譜進行分離分離后的目標化合物在酸性環境下與硼氫化鉀或硼氫化鈉反應生成氣態砷化合物以原子熒光光譜儀進行測定。保留時間定性外標法定量。試劑和材料除非另有說明本方法所用試劑均為優級純水為2規定的一級水。試劑磷酸二氫銨4分析純。磷酸氫二銨44分析純。硝酸銨3分析純。磷酸氫二鉀4分析純。硼氫化鉀4分析純。氫氧化鉀。硝酸3。過氧化氫20。鹽酸。氨水3·。正己烷323色譜純。試劑配制鹽酸溶液量取0L鹽酸溶于水并稀釋至0混勻。硝酸溶液5量取0L硝酸溶于水并稀釋至0混勻。硝酸+過氧化氫溶液5L硝酸5過氧化氫量取0L硝酸50過氧化氫加水稀釋至0混勻。臨用現配。氫氧化鉀溶液稱取g氫氧化鉀溶于水并稀釋至0混勻。氫氧化鉀溶液稱取g氫氧化鉀溶于水并稀釋至0混勻。硼氫化鉀溶液稱取g硼氫化鉀用L氫氧化鉀溶液溶解并定容至0,混勻。臨用現配。流動相5L磷酸二氫銨稱取g磷酸二氫銨溶于0L水中以氨水調節H至混勻。于超聲水浴中超聲脫氣0備用。流動相1L磷酸氫二銨稱取g磷酸氫二銨溶于0L水中以氨水調H至混勻。于超聲水浴中超聲脫氣0備用。流動相0L磷酸氫二銨稱取g磷酸氫二銨溶于0L水中以氨水調節H至混勻。于超聲水浴中超聲脫氣0備用。流動相5L磷酸氫二鉀1L硝酸銨稱取g磷酸氫二鉀和8B4g硝酸銨溶于0L水中以氨水調節H至混勻。于超聲水浴中超聲脫氣0,備用。流動相5L磷酸氫二鉀0L硝酸銨稱取g磷酸氫二鉀和g硝酸銨溶于0L水中以氨水調節H至混勻。于超聲水浴中超聲脫氣0備用。注本方法也可用硼氫化鈉作為還原劑稱取g硼氫化鈉溶于0L氫氧化鈉溶液中混勻。可根據儀器的靈敏度調整硼氫化鉀或硼氫化鈉溶液的濃度。臨用現配。標準品1三氧化二砷3S號標準品純度5。2砷酸二氫鉀4S號標準品純度5。標準溶液配制亞砷酸鹽Ⅲ標準儲備液0以s計準確稱取于0℃干燥h的三氧化二砷加L氫氧化鉀溶液1L和少量水溶解轉入0L容量瓶中加入適量鹽酸調整其酸度近中性加水稀釋至刻度。于2冰箱中避光保存有效期1年。或經國家認證并授予標準物質證書的亞砷酸根標準溶液。砷酸鹽Ⅴ標準儲備液0以s計準確稱取于0℃干燥h的砷酸二氫鉀用水溶解轉入0L容量瓶中并用水稀釋至刻度。于2℃8℃冰箱中避光保存有效期1年。或經國家認證并授予標準物質證書的砷酸根標準溶液。有機砷標準溶液一甲基砷二甲基砷砷甜菜堿購買經國家認證并授予標準物質證書的標準溶液。有機砷標準中間液0以s計分別準確吸取一定量的一甲基砷二甲基砷砷甜菜堿標準溶液用適量水稀釋配制成0L的有機砷中間液。于2℃8℃冰箱中避光保存有效期6個月。

( /, :有機砷混合標準使用液0gL以s計

分別準確吸取0L一甲基砷標準中間液00L二甲基砷標準中間液00L砷甜菜堿標準中間液0)于0L容量瓶中用水稀釋定容至刻度。臨用現配。Ⅲ和Ⅴ混合標準使用液0以s計分別準確吸取0LⅢ標準儲備液00LⅤ標準儲備液0于0L容量瓶中用水稀釋定容至刻度。臨用現配。五種砷形態混合標準溶液L或以s計根據測定需要分別準確吸取一定量的有機砷混合標準使用液0和Ⅲ和Ⅴ混合標準使用液0用硝酸溶液5配制成L或L的混合標準溶液。臨用現配。Ⅲ和Ⅴ混合標準系列溶液分別準確吸取適量體積的Ⅲ和Ⅴ混合標準使用液0用硝酸溶液5稀釋配制成質量濃度為000、L和L的系列標準溶液。臨用現配。注可根據樣品中Ⅲ和Ⅴ的實際含量適當調整標準系列溶液中Ⅲ和Ⅴ的質量濃度。儀器和設備原子熒光光譜聯用儀由液相色譜儀與原子熒光光譜儀組成。組織勻漿器。高速粉碎機。9B4微波消解系統配有微波萃取罐。離心機轉速。H計精度為。電子天平感量為11g和1。恒溫干燥箱控溫精度℃。超聲波清洗器。濾膜。篩網粒徑篩孔0目。注玻璃器皿及微波萃取內罐均需以的硝酸溶液浸泡用自來水反復沖洗最后用水沖洗干凈。分析步驟試樣制備固體樣品干樣谷物干食用菌嬰幼兒谷類輔助食品水產動物干制品藻類等樣品取可食部分粉碎均勻粒徑達m以下相當于0目以上當采用熱浸提法處理谷物試樣時試樣需粉碎至粒徑達m以下相當于0目以上。鮮樣鮮食用菌水產動物等樣品洗凈晾干取可食部分勻漿至均質。速凍及罐裝食品經解凍的速凍食品取可食部分粉碎至均勻罐裝食品粉碎或均漿至均勻。液體樣品調味品油脂及其制品等勻漿或均質。半固體樣品攪拌均勻。試樣提取谷物及其制品熱浸提法稱取試樣約準確至于0L聚丙烯離心管中加入05L硝酸溶液。于0℃恒溫箱中熱浸提每h振搖1。提取完畢取出冷卻至室溫n離心5取上層清液經m濾膜過濾待測。同時做空白試驗。微波輔助提取法稱取試樣約準確至于微波萃取罐中加入55L硝酸溶液蓋好內蓋旋緊外蓋置于微波消解儀中采用梯度升溫方式進行提取微波輔助提取程序見附錄C中0B4表。提取完畢冷卻后取出n離心5取上層清液經m濾膜過濾待測。同時做空白試驗。水產動物及其制品稱取試樣約準確至于0L聚丙烯離心管中加入05L硝酸5過氧化氫溶液。于0℃恒溫箱中熱浸提每h振搖1。提取完畢取出冷卻至室溫n離心5。取5L上清液置于離心管中加入5L正己烷振搖1n后,n離心5棄去上層正己烷。按此過程重復一次。吸取下層清液經5m濾膜過濾待測。同時做空白試驗。嬰幼兒輔助食品嬰幼兒谷類輔助食品添加藻類的產品除外)稱取試樣約準確至于0L聚丙烯離心管中加入05L硝酸溶液,于0℃恒溫箱中熱浸提每h振搖1。提取完畢取出冷卻至室溫n離心5。吸取上層清液經m濾膜過濾待測。同時做空白試驗。嬰幼兒谷類輔助食品添加藻類的產品)稱取試樣約準確至于0L聚丙烯離心管中加入05L硝酸5過氧化氫溶液。于0℃恒溫箱中熱浸提每h振搖1。提取完畢取出冷卻至室溫n離心5。吸取上層清液經m濾膜過濾待測。同時做空白試驗。嬰幼兒罐裝輔助食品稱取試樣約準確至于0L聚丙烯離心管中加入05L硝酸5過氧化氫溶液。于0℃恒溫箱中熱浸提每h振搖1。提取完畢取出冷卻至室溫n離心5。吸取上層清液經m有機濾膜過濾待測。按同一操作方法做空白試驗。必要時可按2中取5L上清液置于離心管中……吸取下層清液經m濾膜過濾,待測步驟操作。同時做空白試驗。食用菌及其制品稱取干試樣g或鮮試樣準確至于5L聚丙烯離心管中加入05L硝酸溶液置于0℃超聲水浴中提取每0n振搖1次。提取完畢取出冷卻至室溫n離心0吸取上層清液經m濾膜過濾待測。同時做空白試驗。調味品稱取試樣約0準確至1于0L聚丙烯離心管中加入0L5L硝酸5過氧化氫溶液。于0℃恒溫箱中熱浸提每h振搖1。提取完畢取出冷卻至室溫n離心5。后續步驟同取5L上清液置于離心管中……同時做空白試驗。油脂及其制品稱取試樣約準確至于0L聚丙烯離心管中加入05L硝酸5過氧化氫溶液。于0℃恒溫箱中熱浸提每h振搖1。提取完畢取出冷卻至室溫n離心5。后續步驟同取5L上清液置于離心管中……同時做空白試驗。1B4藻類及其制品稱取試樣約準確至于0L聚丙烯離心管中加入05L硝酸5過氧化氫溶液。于0℃恒溫箱中熱浸提每h振搖1。提取完畢取出冷卻至室溫n離心5。吸取上層清液經m濾膜過濾待測。同時做空白試驗。注試樣提取時可根據樣品中砷含量適當調整加入提取試劑5L硝酸溶液或5L硝酸5過氧化氫溶液的體積。儀器參考條件液相色譜參考條件液相色譜分離體系一:)或等效柱陰離子交換色譜保護柱01)或等效柱陰離子交換色譜保護柱01或等效柱;)。等度洗脫適用于谷類及其制品和嬰幼兒谷類輔助食品添加藻類的產品除外;等度洗脫流動相5L磷酸二氫銨溶液H流速)。等度洗脫適用于谷類及其制品和嬰幼兒谷類輔助食品添加藻類的產品除外;梯度洗脫流動相1L磷酸氫二銨溶液流動相0L磷酸氫二銨溶液流速0進樣量。梯度洗脫程序見表。梯度洗脫程序適用于所有試樣。液相色譜分離體系二:)或等效柱陰離子交換色譜保護柱0)或等效柱陰離子交換色譜保護柱04或等效柱;b 梯度洗脫流動相5L磷酸氫二鉀1L硝酸銨H流動相:5L磷酸氫二鉀0L硝酸銨H流速2進樣量。梯度洗脫程序見表。梯度洗脫程序適用于所有試樣。注根據各自實驗室儀器設備情況適當調整流動相濃度及以保證分離度及靈敏度滿足試驗要求。原子熒光光譜參考條件原子熒光檢測參考條件如下:)負高壓00;砷燈總電流0;輔助電流0;原子化方式火焰原子化;原子化器溫度0℃;載液57鹽酸溶液;還原劑L硼氫化鉀溶液;載氣氬氣流速0;輔助氣氬氣流速0。標準曲線的制作設定儀器最佳條件待基線穩定后測定砷形態混合標準溶液L或確定各砷形態完全分離后將Ⅲ和Ⅴ混合標準系列溶液按質量濃度由低到高分別注入液相色譜原子熒光光譜聯用儀中進行測定以標準系列溶液中目標化合物的濃度為橫坐標以色譜峰面積為縱坐標制作標準曲線。標準溶液色譜圖見附錄D中圖~圖。2B4注當測定有機砷含量較高的水產動物及其制品食用菌及其制品魚油磷蝦油及其制品水產調味品藻類及其制品等復雜基質樣品中無機砷時需采用質量濃度為L的砷形態混合標準溶液確定分離度。試樣溶液的測定吸取試樣溶液L注入液相色譜原子熒光光譜聯用儀中得到色譜圖以保留時間定性。根據標準曲線得到試樣溶液中Ⅲ與Ⅴ含量。分析結果的表述試樣中Ⅲ或Ⅴ含量按式計算。式中:

X=ρ0V0m0

…………3)X試樣中Ⅲ或Ⅴ的含量以s計單位為毫克每千克;ρ—測定溶液中Ⅲ或Ⅴ的質量濃度單位為微克每升;0 —空白溶液中Ⅲ或Ⅴ的質量濃度單位為微克每升;V—試樣提取液的體積單位為毫升;0換算系數;m 試樣的稱樣量單位為克。無機砷含量等于Ⅲ含量與Ⅴ含量之和。當無機砷含量0g時計算結果保留3位有效數字當無機砷含量0g時計算結果保留2位有效數字。精密度樣品中無機砷含量大于0g時在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的0小于或等于0g且大于0g時在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的5小于或等于0g時在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的0。其他當稱樣量為加入提取試劑體積為0L時方法檢出限為2方法定量限為5。第二法 液相色電感耦合等離子體質譜聯用法原理試樣中無機砷經稀硝酸等提取后以液相色譜進行分離分離后的目標化合物經過霧化由載氣送入電感耦合等離子體炬焰中經過蒸發解離原子化電離等過程經離子采集系統進入質譜儀質譜儀根據質荷比進行分離測定。以保留時間和質荷比定性外標法定量。3B4試劑和材料除非另有說明本方法所用試劑均為優級純水為2規定的一級水。試劑磷酸氫二銨44分析純。硝酸3。過氧化氫20。正己烷323色譜純。甲醇色譜純。氨水3·。氫氧化鉀。鹽酸。碳酸銨43分析純。磷酸氫二鉀4分析純。硝酸銨3分析純。試劑配制硝酸溶液5量取0L硝酸加水稀釋至0混勻。硝酸+過氧化氫溶液5L硝酸5過氧化氫量取0L硝酸50過氧化氫加水稀釋至0混勻。臨用現配。流動相0L磷酸氫二銨1甲醇H準確稱取g磷酸氫二銨置于0L容量瓶中用水溶解加入0L甲醇用水稀釋定容至刻度氨水調節H至混勻。于超聲水浴中超聲脫氣0備用。流動相0L磷酸氫二銨1甲醇H準確稱取g磷酸氫二銨置于0L容量瓶中用水溶解加入0L甲醇用水稀釋定容至刻度混勻。于超聲水浴中超聲脫氣0備用。流動相0L碳酸銨1甲醇H準確稱取g碳酸銨置于0L容量瓶中用水溶解加入0L甲醇用水稀釋定容至刻度氨水調節H至混勻。于超聲水浴中超聲脫氣0備用。流動相0L磷酸氫二鉀準確稱取g磷酸氫二鉀置于0L容量瓶中用水稀釋定容至刻度氨水調節H至混勻。于超聲水浴中超聲脫氣0備用。流動相0L硝酸銨準確稱取g硝酸銨置于0L容量瓶中,用水稀釋定容至刻度氨水調節H至混勻。于超聲水浴中超聲脫氣0備用。氫氧化鉀溶液稱取g氫氧化鉀加水溶解并稀釋至0混勻。標準品1三氧化二砷3S號標準品純度5。2砷酸二氫鉀4S號標準品純度5。標準溶液配制亞砷酸鹽Ⅲ標準儲備液0以s計準確稱取于0℃干燥h的三氧化二4B4砷精確至加1L氫氧化鉀溶液和少量水溶解轉入0L容量瓶中加入適量鹽酸調整其酸度近中性加水稀釋至刻度。于2℃℃冰箱中避光保存有效期1年。或經國家認證并授予標準物質證書的亞砷酸根標準溶液。砷酸鹽Ⅴ標準儲備液0以s計準確稱取于0℃干燥h的砷酸二氫鉀精確至水溶解轉入0L容量瓶中并用水稀釋至刻度。于2℃8℃冰箱中避光保存有效期1年。或經國家認證并授予標準物質證書的砷酸根標準溶液。有機砷標準溶液一甲基砷二甲基砷砷甜菜堿購買經國家認證并授予標準物質證書的溶液標準物質。有機砷標準中間液0以s計分別準確吸取一定量的一甲基砷二甲基砷砷甜菜堿溶液標準物質用適量水稀釋配制成0L的單標準儲備液。于2℃8℃冰箱中避光保存有效期6個月。

( /, :有機砷混合標準使用液0gL以s計

分別準確吸取0L一甲基砷標準儲備液00L二甲基砷標準儲備液00L砷甜菜堿的標準儲備液0于0L容量瓶中用水稀釋定容至刻度。臨用現配。Ⅲ和Ⅴ混合標準使用液0以s計分別準確吸取0LⅢ標準儲備液00LⅤ標準儲備液0于0L容量瓶中用水稀釋定容至刻度。臨用現配。

( /, :五種砷形態混合標準溶液gL以s計

分別準確吸取0L有機砷混合標準使用液00Ⅲ和Ⅴ混合標準使用液0于0L容量瓶中用硝酸溶液5或水僅限食用菌測定時稀釋定容至刻度。臨用現配。μ μ μ μ μ Ⅲ和Ⅴ混合標準系列溶液分別準確吸取適量體積的Ⅲ和Ⅴ混合標準使用液0用硝酸溶液5或水僅限食用菌測定時稀釋配制成質量濃度為μ μ μ μ μ 00000L和0L的系列標準溶液。臨用現配。注可根據樣品中Ⅲ和Ⅴ的實際含量適當調整標準系列溶液中Ⅲ和Ⅴ的質量濃度。儀器和設備電感耦合等離子體質譜聯用儀由液相色譜儀與電感耦合等離子體質譜儀組成。 。。組織勻漿器。高速粉碎機離心機轉速。H計精度為。電子天平感量為11g和1。恒溫干燥箱控溫精度℃。微波消解系統配有微波萃取罐。超聲波清洗器。濾膜。1篩網粒徑5篩孔0目。注玻璃器皿及微波萃取罐均需以的硝酸溶液浸泡用自來水反復沖洗最后用水沖洗干凈。分析步驟試樣制備同。5B4試樣提取谷物及其制品熱浸提法同。微波輔助提取法同。水產動物及其制品同。嬰幼兒輔助食品同。食用菌及其制品稱取干試樣g或鮮試樣準確至于5L聚丙烯離心管中加入0L水置于0℃超聲水浴中提取每0n振搖1次。提取完畢取出冷卻至室溫n離心0吸取上層清液經m濾膜過濾待測。同時做空白試驗。調味品同。油脂及其制品同。藻類及其制品同。注試樣提取時可根據樣品中砷含量適當調整加入提取試劑5L硝酸溶液或5L硝酸5過氧化氫溶液的體積。儀器參考條件液相色譜參考條件液相色譜分離體系一適用于除食用菌及其制品外的試樣參考如下:)或等效柱陰離子交換色譜保護柱01)或等效柱陰離子交換色譜保護柱01或等效柱;)1甲醇流動相0L磷酸氫二銨1甲醇H流動相)1甲醇洗脫方式梯度洗脫梯度洗脫程序見表;)進樣量。液相色譜分離體系二適用于食用菌及其制品試樣參考如下:色譜柱填料為季銨化的苯乙烯和二乙烯基苯共聚物的陰離子交換色譜柱04,6B4)或等效柱陰離子交換色譜保護柱04或等效柱;b 流動相)或等效柱陰離子交換色譜保護柱04或等效柱;洗脫方式等度洗脫;流速1;進樣量。液相色譜分離體系三適用于所有試樣參考如下:)或等效柱陰離子交換色譜保護柱04)或等效柱陰離子交換色譜保護柱04或等效柱;b 流動相0L磷酸氫二鉀流動相0L硝酸銨;洗脫方式梯度洗脫梯度洗脫程序見表;流速0;進樣量。注根據各自實驗室儀器設備情況適當調整流動相濃度及以保證分離度及靈敏度滿足試驗要求。電感耦合等離子體質譜參考條件電感耦合等離子體質譜儀參考條件如下:)射頻功率0W0W;采樣深度8;霧化室溫度2℃;載氣氬氣流量5;補償氣氬氣流量5;積分時間;檢測質荷比和。標準曲線的制作設定儀器最佳條件待基線穩定后測定五種砷形態混合標準溶液0確定各砷形態完全分離后將Ⅲ和Ⅴ混合標準系列溶液按質量濃度由低到高分別注入液相色譜電感耦合等離子體質譜聯用儀中進行測定以標準系列溶液中目標化合物的濃度為橫坐標以色譜峰面積為縱坐標,制作標準曲線。標準溶液色譜圖見附錄E中圖~圖。試樣溶液的測定依次將空白溶液和試樣溶液注入液相色譜電感耦合等離子體質譜聯用儀中得到色譜圖以保留時間定性。根據標準曲線得到試樣溶液中Ⅲ與Ⅴ含量。分析結果的表述試樣中Ⅲ或Ⅴ的含量按式計算。式中:

X=ρ0V0m0

…………4)X 試樣中Ⅲ或Ⅴ的含量以s計單位為毫克每千克;ρ 測定溶液中Ⅲ或Ⅴ的質量濃度單位為微克每升;0 空白溶液中Ⅲ或Ⅴ的質量濃度單位為微克每升;7B4V 試樣提取液的體積單位為毫升;0換算系數;m 試樣的稱樣量單位為克。無機砷含量等于Ⅲ含量與Ⅴ含量之和