西安交通大學網絡教育學院論文畢業論文任務書學生姓名學號學習中心入學時間專業藥學專業畢業論文題目半夏瀉心湯的工藝改進及藥效研究1.畢業論文任務要求：概述：半夏瀉心湯出自漢代著名醫家張仲景的《傷寒論》，由姜半夏、干姜、黃芩、黃連、黨參、灸甘草、大棗七味藥材組成，是和解劑的代表，可平調寒熱、和胃降逆、開解除痞，現代臨床仍然廣泛用于各種急慢性胃炎、胃潰瘍的治療。方中姜半夏、干姜、辛溫散結消痞，祛脾寒之氣以和陰，黃芩、黃連、苦寒降泄，清胃氣之熱以和陽，四藥互用，辛開苦降，陰陽得和，脾胃得調，為后世醫家辛開苦降法之始作。又佐以黨參、甘草、大棗甘平入脾胃，調和諸藥，補氣健脾，以固后天之本。即合《內經》“正氣存內，邪不可干”之旨。全方配伍嚴謹，祛邪補虛，融為一爐，為治療脾胃病的經典之作。大量臨床研究報道，此方具有和胃降逆，平調寒熱之功效，對治療脾虛胃熱證之胃脘痛，脘腹痞滿、呃逆噯氣、泛酸嘈雜、即見有上癥之慢性胃炎、消化性潰瘍有很好的療效，對人體內的幽門螺桿菌也有很好地效果。因此將其開發成新的治療慢性胃炎、胃潰瘍的中成藥對滿足臨床用藥顯得尤為重要。本研究旨在采用現代工藝技術，對有效部分進行藥效研究，為將古方制備成方便服用、質量可控、易保存的現代制劑提供技術及理論依據。目的：將半夏瀉心湯制造傳統工藝進行改造，并且對于改造以后的工藝的藥效進行分析。為將古方制備成方便服用、質量可控、易保存的現代制劑提供技術及理論基礎。方法：對處方用量進行調整，并采用乙醇提取、大孔樹脂純化的方法進行工藝改進，通過對其進行胃潰瘍的抑制作用、抗炎作用以及對幽門螺桿菌感染的治療作用等藥效研究，篩選出藥效最強的分離部位，結果：試驗結果顯示，采用質量分數為40%乙醇提取，并通過AB-8大孔樹脂富集，5倍量樹脂體積的40%乙醇洗脫得到的分離部位對抑制胃潰瘍、抗炎以及殺滅幽門螺桿菌的作用最強，故提取分離該有效部位，用于治療胃炎、胃潰瘍，可最大限度的減少患者服用量，保留有效成分。結論：本研究對半夏瀉心湯提取方法進行工藝改進，采用不同濃度的乙醇提取和純化，得到不同的提取組分，通過藥效試驗考察各提取組分抑制胃潰瘍、抗炎以及殺滅幽門螺桿菌(HP)的作用，并與古代水煎工藝進行對比。結果表明，采用質量分數為40%乙醇提取，并通過AB-8樹脂富集，5倍量樹脂體積的40%乙醇洗脫得到的提取組分對胃炎、胃潰瘍有良好的治療作用，在不影響藥效的前提下，大大減少了患者的服用量，為將古方制備成方便服用、質量可控、易保存現代制劑（顆粒、片劑、膠囊、口服液等）提供了技術和理論依據。2．主要參考資料：

[1]范方馨,謝鳴.半夏瀉心湯與黃連湯證治辨析[J].山東中醫藥大學學報,2019(04):343-346.[2]孫雪青.半夏瀉心湯加減治療痞滿的療效探析[J].海峽藥學,2019,31(06):159-160.[3]朱春亮.半夏瀉心湯加黃芪治療寒熱錯雜型腹瀉型腸易激綜合征的臨床研究[D].福建中醫藥大學,2019.[4]高來順.半夏瀉心湯治療慢性萎縮性胃炎的臨床效果[J].深圳中西醫結合雜志,2019,29(10):53-54.[5]楊貴珍,孫錦霞,王莉新,姜昕,鄭月娟.半夏瀉心湯通過介導MAPK信號通路抑制巨噬細胞炎癥因子的分泌[J].上海中醫藥大學學報,2018,32(05):67-72.[6]殷貝,李佑生,陳玲玲,陳伊莉.半夏瀉心湯治療糖尿病胃輕癱隨機對照試驗的Meta分析[J].中國中西醫結合消化雜志,2018,26(09):766-774.[7]李杰,賈壯壯.半夏瀉心湯臨床應用研究進展[J].湖南中醫雜志,2018,34(02):185-188.[8]史麗偉,杜立娟,倪青.半夏瀉心湯治療糖尿病的理論探討與臨床應用[J].中醫雜志,2018,59(03):246-250.3．畢業論文進度安排：起止時間階段內容收集有關論文（設計）資料，指導老師組織學生進行論文選題、指導學生選定任務書或審核學生自擬任務書并下達畢業論文（設計）任務書。撰寫論文、提交初稿，指導老師進行論文指導和評閱。上傳畢業論文（設計）終稿，指導老師進行指導和評閱。畢業論文（設計）答辯。目錄10354摘要 110318第一章引言 211986第二章實驗部分 2155312.1儀器及材料 2214742.2試驗方法 374632.2.1樣品1 3248472.2.2樣品2 343212.2.3樣品3 3160582.2.4樣品4 3116342.2.5樣品5 4102192.3提取組分藥效試驗 457112.3.1對大鼠幽門結扎型胃潰瘍的抑制作用研究 4237222.3.2抗炎作用研究 451752.3.3抗幽門螺桿菌（HP）作用研究 4205183結果與討論 5115893.1提取組分對大鼠幽門結扎型胃潰瘍的抑制作用藥效結果 5309963.2取組分抗炎作用藥效結果 5272253.3提取組分對幽門螺桿菌殺滅作用 524032第四章結論 67411參考文獻 6948致謝 7摘要目的：分析半夏瀉心湯的改造工藝以后的藥效，為將古方制備成方便服用、質量可控、易保存的現代制劑提供技術及理論基礎。方法：對處方用量進行調整，并采用乙醇提取、大孔樹脂純化的方法進行工藝改進，獲得4種提取組分，通過對其進行胃潰瘍的抑制作用、抗炎作用、以及對幽門螺桿菌感染的治療作用等藥效研究，篩選出藥效最強的分離部位，結果：試驗結果顯示，采用質量分數為40%乙醇提取，并通過AB-8大孔樹脂富集，5倍量樹脂體積的40%乙醇洗脫得到的分離部位對抑制胃潰瘍、抗炎以及殺滅幽門螺桿菌的作用最強，故提取分離該有效部位，用于治療胃炎、胃潰瘍，可最大限度的減少患者服用量，保留有效成分。結論：本研究對半夏瀉心湯提取方法進行工藝改進，采用不同濃度的乙醇提取和純化，得到不同的提取組分，通過藥效試驗考察各提取組分抑制胃潰瘍、抗炎以及殺滅HP的作用，并與古代水煎工藝進行對比。結果表明，采用質量分數為40%乙醇提取，并通過AB-8樹脂富集，5倍量樹脂體積的40%乙醇洗脫得到的提取組分對胃炎、胃潰瘍有良好的治療作用，在不影響藥效的前提下，大大減少了患者的服用量，為將古方制備成方便服用、質量可控、易保存現代制劑（顆粒、片劑、膠囊、口服液等）提供了技術和理論依據。關鍵詞：半夏瀉心湯；工藝改進；藥效第一章引言我國慢性胃炎、胃潰瘍發病率較高，統計數據表明，發病率可達60%以上，為臨床上常見多發病。現代醫學治療胃炎、胃潰瘍多對癥處理，藥物多為嗎丁啉和維酶素等，或針對主要致病因素——幽門螺桿菌（helicobacterpylori，HP）多種抗生素聯合治療，如采用質子泵抑制劑加克拉霉素加阿莫西林或甲硝唑三聯療法。雖然取得一定療效，但愈后復發率高，且病程又長，服藥時間長，還帶來胃腸道不適、失眠、頭昏、頭痛等副作用，尤其是隨著抗生素的廣泛使用，HP對常用抗生素的耐藥情況日益嚴重[1]。中醫認為，胃居心下與脾互為表里，同居中洲，胃氣以下降為順，脾氣以上升為暢，脾升胃降，中焦氣機順暢，腐熟運化有常，故能行使機體后天之本[2]。若因傷寒誤治，損傷脾胃、邪熱內陷，脾胃升降失職，病邪結于中焦，而成寒熱互結。或因素體中陽虧，脾胃虛弱，中陽不振，升降失職，加之飲食不節，情志不舒，勞逸失度，痰濕積滯，濕熱之邪乘虛而入，導致脾胃功能紊亂，陰陽失調，上下不通，氣機阻滯，寒熱互結，氣血運行不暢，胃之脈絡不通，而發生胃脘疼痛之癥[3]。半夏瀉心湯出自漢代著名醫家張仲景的《傷寒論》，由姜半夏、干姜、黃芩、黃連、黨參、灸甘草、大棗七味藥材組成，是和解劑的代表，可平調寒熱、和胃降逆、開解除痞，現代臨床仍然廣泛用于各種急慢性胃炎、胃潰瘍的治療。方中姜半夏、干姜、辛溫散結消痞，祛脾寒之氣以和陰，黃芩、黃連、苦寒降泄，清胃氣之熱以和陽，四藥互用，辛開苦降，陰陽得和，脾胃得調，為后世醫家辛開苦降法之始作[4]。又佐以黨參、甘草、大棗甘平入脾胃，調和諸藥，補氣健脾，以固后天之本。即合《內經》“正氣存內，邪不可干”之旨。全方配伍嚴謹，祛邪補虛，融為一爐，為治療脾胃病的經典之作。大量臨床研究報道，此方具有和胃降逆，平調寒熱之功效，對治療脾虛胃熱證之胃脘痛，脘腹痞滿、呃逆噯氣、泛酸嘈雜、即見有上癥之慢性胃炎、消化性潰瘍有很好的療效，對人體內的幽門螺桿菌也有很好地抑滅效果[5]。因此將其開發成新的治療慢性胃炎、胃潰瘍的中成藥對滿足臨床用藥顯得尤為重要。本研究旨在采用現代工藝技術，對有效部分進行藥效研究，為將古方制備成方便服用、質量可控、易保存的現代制劑提供技術及理論依據。第二章實驗部分2.1儀器及材料T2K202中試提取機組、2K00401濃縮機組（江漢醫療制藥設備有限公司），2002型旋轉蒸發儀（上海申勝生物技術有限公司），DZF6050型真空干燥箱（上海精宏實驗設備有限公司），CCPP-176聚丙烯層析柱（天津市德固特科技發展有限公司），Wistar大鼠［（200±10）g，湖北中醫藥大學］，姜半夏、干姜、黃芩、黃連、黨參、灸甘草、大棗（湖北強康中藥飲片有限公司），AB-8樹脂（安徽三星樹脂有限公司），質量分數95%乙醇（藥用級，湖南爾康制藥股份有限公司），水為注射用水（湖北科益藥業股份有限公司）。2.2試驗方法2.2.1樣品1水提對照樣品制備：稱取姜半夏4kg、黃芩3kg、干姜3kg、黨參3kg、炙甘草3kg、黃連2kg、大棗2kg，煎煮2次，每次2h，第一次加水200L，第二次加水160L，合并提取液，孔徑為150μm篩過濾，減壓濃縮，60℃真空干燥，粉碎至細粉備用。2.2.2樣品220%乙醇提取組分制備：稱取姜半夏4kg、黃芩3kg、干姜3kg、黨參3kg、炙甘草3kg、黃連2kg、大棗2kg，用質量分數為20%乙醇（以下簡稱20%乙醇）加熱回流2次，每次2h，第1次加20%乙醇200L，第2次加20%乙醇160L，合并提取液，孔徑為150μm篩過濾，將濾液減壓濃縮至相對密度為1.10的濃縮液，濃縮液上AB-8型大孔吸附樹脂柱（20kgAB-8樹脂裝柱，樹脂重量為藥材重量的1倍），用20%乙醇85L（為大孔吸附樹脂柱體積的5倍）洗脫樹脂柱，收集洗脫液，減壓濃縮，60℃真空干燥，粉碎至細粉備用。2.2.3樣品340%乙醇提取組分制備：稱取姜半夏4kg、黃芩3kg、干姜3kg、黨參3kg、炙甘草3kg、黃連2kg、大棗2kg，用質量分數為40%乙醇（以下簡稱40%乙醇）加熱回流2次，每次2h，第1次加40%乙醇200L，第2次加40%乙醇160L，合并提取液，孔徑為150μm篩過濾，將濾液減壓濃縮至相對密度為1.10的濃縮液，濃縮液上AB-8型大孔吸附樹脂柱（20kgAB-8樹脂裝柱，樹脂重量為藥材重量的1倍），用40%乙醇85L（為大孔吸附樹脂柱體積的5倍）洗脫樹脂柱，收集洗脫液，減壓濃縮，60℃真空干燥，粉碎至細粉備用。2.2.4樣品460%乙醇提取組分制備：稱取姜半夏4kg、黃芩3kg、干姜3kg、黨參3kg、炙甘草3kg、黃連2kg、大棗2kg，用質量分數為60%乙醇（以下簡稱60%乙醇）加熱回流2次，每次2h，第1次加60%乙醇200L，第2次加60%乙醇160L，合并提取液，孔徑為150μm篩過濾，將濾液減壓濃縮至相對密度為1.10的濃縮液，濃縮液上AB-8型大孔吸附樹脂柱（20kgAB-8樹脂裝柱，樹脂重量為藥材重量的1倍），用60%乙醇85L（為大孔吸附樹脂柱體積的5倍）洗脫樹脂柱，收集洗脫液，減壓濃縮，60℃真空干燥，粉碎至細粉備用。2.2.5樣品580%乙醇提取組分的制備：稱取姜半夏4kg、黃芩3kg、干姜3kg、黨參3kg、炙甘草kg、黃連2kg、大棗2kg，用質量分數為80%乙醇（以下簡稱80%乙醇）加熱回流2次，每次2h，第1次加80%乙醇200L，第2次加80%乙醇160L，合并提取液，孔徑為150μm篩過濾，將濾液減壓濃縮至相對密度為1.10的濃縮液，濃縮液上AB-8型大孔吸附樹脂柱（20kgAB-8樹脂裝柱，樹脂重量為藥材重量的1倍），用80%乙醇85L（為大孔吸附樹脂柱體積的5倍）洗脫樹脂柱，收集洗脫液，減壓濃縮，60℃真空干燥，粉碎至細粉備用。2.3提取組分藥效試驗2.3.1對大鼠幽門結扎型胃潰瘍的抑制作用研究健康Wistar大鼠，隨機分為正常對照組、樣品1～5組，每組均10只，雌雄各半。1～5組的給藥劑量相同，即將干膏折算成生藥材的重量，按10g生藥材每1kg體重進行灌胃給藥，正常對照組給予等容量蒸餾水。試驗第一天上午各組分別灌胃1次，下午開始禁食不禁水，第二、三天上午再分別灌胃1次，第三天下午（即禁食48h后）開始手術。手術時，將大鼠用乙醚麻醉、沿腹中線切開腹壁，找出胃與十二指腸，用縫合線避開血管結扎胃幽門與十二指腸結合部，并由十二指腸再給藥一次，隨后縫合腹壁、碘酊消毒后放回籠中，同時禁食禁水。18h后，拉頸椎處死大鼠，剖腹取出胃并收集胃液，隨即向胃內注入質量分數為1%福爾馬林溶液10mL，再將胃放入質量分數1%福爾馬林溶液中固定10min以上。然后沿胃大彎剪開胃，將其平展于玻璃板上，仔細觀察前胃部粘膜潰瘍的發生情況，并按下述標準進行潰瘍分級。0：無潰瘍；1：潰瘍點、出血點（＜1mm）；2：1~5個小潰瘍（＞1mm，＜3mm）；3：6個以上小潰瘍或1個大潰瘍（＞3mm）；4：2個以上大潰瘍；5：穿孔性潰瘍。2.3.2抗炎作用研究取健康Wistar大鼠，隨機分為正常對照組、樣品1~5組，每組均10只，雌雄各半。進行灌胃給藥，正常對照組給予等容量蒸餾水。連續3d，每天灌胃一次，最后一次灌胃后0.5h，從大鼠左后肢足趾皮下注射新鮮蛋清0.1毫升/只致炎。致炎前測量一次踝關節周長，并于致炎后2h分別測量一次踝關節周長，計算關節腫脹率。2.3.3抗幽門螺桿菌（HP）作用研究幽門螺桿菌（HP）是一種革蘭陰性需氧螺桿菌，目前全世界超過50%的人受其感染，是導致胃炎、胃潰瘍的一種最常見致病因素，WHO將其定為胃的Ⅰ類致病因子。本試驗將考察不同分離部位對HP的殺滅效果。取健康Wistar大鼠，隨機分為正常對照組、無治療藥物組、樣品1～5組、每組均10只，雌雄各半。除正常對照組外其余各組連續10天空腹灌胃食醋2.5mL/只；第11天，采用空腹束縛水浴6h；從第12天起，上述隔天空腹灌胃HP混懸液（1×109CFU/mL）1.5mL/只，共3次；第16天除正常對照組和無治療藥物模型對照組外其余各組灌胃給藥，連續給藥10天。第25天下午所有組動物禁食過夜，次日將各組動物脫頸椎處死，在無菌的條件下，取胃粘膜快速進行尿素酶試驗和HP接種培養，同時直接涂片觀察HP陽性率。第三章結果與討論3.1提取組分對大鼠幽門結扎型胃潰瘍的抑制作用藥效結果各提取組分對大鼠幽門結扎型胃潰瘍的抑制作用藥效試驗結果用t值法進行統計分析，結果見表1。表1各提取組分大鼠幽門結扎型胃潰瘍的抑制作用組別劑量/（g/kg）潰瘍潰瘍分級抑制率/%對照-3.4±1.2-樣品110.01.7±1.1*50.0樣品210.02.1±1.1*38.2樣品310.01.6±1.2**52.9樣品410.02.2±1.2*35.3樣品510.02.4±1.1*29.4藥效結果顯示，采用40%乙醇提取和洗脫得到的提取組分（樣品3）對大鼠幽門結扎型胃潰瘍具有顯著的抑制作用，效果略優于傳統水煎，表明該分離部位對胃潰瘍有較好的治療作用[6]。3.2取組分抗炎作用藥效結果各提取組分抗炎作用藥效試驗結果見表2。試驗結果表明，采用40%乙醇提取和洗脫得到的提取組分（樣品3）具有較