生物化學(xué)方法及其_第1頁
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第六章第四節(jié)生物化學(xué)方法及其在中醫(yī)研討中的運(yùn)用作者和所在科室引見。引言部分比較全面完好地引見了生化的開展歷程,及其燦爛的里程碑。仔細(xì)閱讀,有利于我們更好地了解這門學(xué)科,及其技術(shù)。生物化學(xué)是運(yùn)用化學(xué)實(shí)際和技術(shù)來研討組成生物體的根本成分及其在生物體內(nèi)所進(jìn)展的化學(xué)變化規(guī)律的一門學(xué)科,從而提示生命景象的化學(xué)本質(zhì)。生物化學(xué)的開展可以分為靜態(tài)生化、動(dòng)態(tài)生化和功能生化三個(gè)階段,這三個(gè)階段并不是截然分開的,它反映了人們對(duì)生命活動(dòng)認(rèn)識(shí)的深化過程。靜態(tài)生化,主要指以分別、制備、純化和檢測(cè)某物質(zhì)。動(dòng)態(tài)生化,主要指活體內(nèi)的化學(xué)反響,及其動(dòng)態(tài)平衡。功能生化,主要指研討某化學(xué)物質(zhì)分子構(gòu)造與功能的關(guān)系〔P169〕。從發(fā)揚(yáng)中醫(yī)學(xué)角度來說,掌握生物化學(xué)實(shí)際和技術(shù),不僅能更深化了解人體的生長(zhǎng)、發(fā)育、壯盛、衰老等問題,而且從蛋白質(zhì)、核酸的分子構(gòu)造變化來討論疾病的診斷、治療和預(yù)防,無疑會(huì)起到如虎添翼的作用。一、生物化學(xué)的主要方法生物化學(xué)技術(shù)是研討生物內(nèi)物質(zhì)的化學(xué)組成、構(gòu)造、功能以及在生命過程中化學(xué)物質(zhì)代謝變化規(guī)律,調(diào)理控制等的實(shí)驗(yàn)方法。常用的生物化學(xué)技術(shù)主要有物質(zhì)的分別、提純法,離心法,層析法,電泳法,光譜法以及分子雜交技術(shù)等。〔一〕生物大分子物質(zhì)的分別和提純生物大分子主要指蛋白質(zhì)、核酸、糖類和脂類等物質(zhì)。制備高度純化的生物大分子是研討大分子構(gòu)造與功能的前提,整個(gè)分別提純過程可分為以下幾個(gè)階段:1〕資料選擇。2〕細(xì)胞破碎。3〕亞細(xì)胞器的分別。4〕提取。5〕分別純化。6〕濃縮、枯燥及保管。1.資料選擇。原那么:選取所需成分含量較高、來源豐富、工藝簡(jiǎn)單、本錢低廉的目的資料或組織。〔這是指分別、純化、制備某種物質(zhì)而言的,詳細(xì)中醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)有詳細(xì)要求〕2.細(xì)胞破碎。常用的技術(shù)有:勻漿器研磨、高速組織搗碎器、反復(fù)凍融、超聲波破碎、自溶、酶消化、外表活性劑處置法等。不同型號(hào)的超聲波破碎儀3.亞細(xì)胞器的分別。普通采用不同密度梯度介質(zhì),經(jīng)差速離心法制備。4.提取。提取過程,首先要使生物大分子與其他物質(zhì)別分開來,使大分子物質(zhì)充分釋放出來,在此過程中,特別要思索溶劑性質(zhì)、pH值、離子強(qiáng)度、介電常數(shù)、抽提溫度等多種影響溶解度的要素,然后可結(jié)合閱歷并根據(jù)詳細(xì)實(shí)驗(yàn)條件靈敏地選取某一試劑進(jìn)展提取。5.分別純化。剛提獲得到的大分子物質(zhì),往往是粗制品,含有許多雜質(zhì),必需進(jìn)一步分別純化。分別提純各種生物大分子,主要根據(jù)各種物質(zhì)的分子大小、溶解度、帶電性、親和力大小等差別,選用有機(jī)溶劑沉淀、等電點(diǎn)沉淀、鹽析、層析、電泳、超離心、吸附、結(jié)晶等方法。以下會(huì)詳細(xì)引見。左圖真空冷凝枯燥儀右圖超低溫冰箱6.濃縮、枯燥及保管。〔二〕離心技術(shù)離心技術(shù)是利用物體高速旋轉(zhuǎn)時(shí)產(chǎn)生強(qiáng)大的離心力,使置于旋轉(zhuǎn)體中的懸浮顆粒〔指懸浮形狀的細(xì)胞、細(xì)胞器、病毒和生物大分子等〕發(fā)生沉降或漂浮,從而使某些顆粒到達(dá)濃縮或與其他顆粒分別之目的。離心機(jī)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)時(shí),當(dāng)懸浮顆粒密度大于周圍介質(zhì)密度時(shí),顆粒分開軸心方向挪動(dòng),發(fā)生沉降;假設(shè)顆粒密度低于周圍介質(zhì)的密度時(shí),那么顆粒朝向軸心方向挪動(dòng)而發(fā)生漂浮。常用的離心機(jī)分類:“低速離心機(jī)〞最高轉(zhuǎn)速不超越6000rpm.“高速離心機(jī)〞在25000rpm以下.“超速離心機(jī)〞達(dá)30000rpm以上。冷凍離心機(jī)構(gòu)造圖左上:普通臺(tái)式離心機(jī)。左下:冷凍臺(tái)式離心機(jī)。右:超速離心機(jī)。左圖:不同離心機(jī)的不同轉(zhuǎn)頭右圖:超速離心機(jī)的不同轉(zhuǎn)頭離心方法主要有三大類型:差速離心、密度梯度離心、沉降平衡離心。1.差速離心法。經(jīng)過逐漸添加相對(duì)離心力,使一個(gè)非均相混合液內(nèi)外形不同的大小顆粒分步沉淀。2.密度梯度離心法。離心前,離心管內(nèi)先裝入分別介質(zhì)〔如蔗糖、甘油等〕,使構(gòu)成延續(xù)的或不延續(xù)的密度梯度介質(zhì),然后參與樣品進(jìn)展離心,詳細(xì)又可分為:〔1〕速度區(qū)帶離心法。離心前,離心管內(nèi)先裝入蔗糖、甘油、CsCl、Percoll等密度梯度介質(zhì),待分別樣品鋪在梯度液的頂部,離心管底部或梯度層中間,同梯度液一同離心,利用各顆粒在梯度液中沉降速度或漂浮速度的不同,使具有不同沉降速度的顆粒處于不同密度的梯度層內(nèi),到達(dá)彼此分別的目的。本法可分別各種細(xì)胞、病毒、染色體、脂蛋白、DNA和RNA等生物樣品。〔2〕預(yù)制梯度等密度離心法。要求在離心前預(yù)先配制管底濃而管頂稀的密度梯度介質(zhì),常用介質(zhì)有蔗糖、CsCl、Cs2SO4等,待分別樣品普通鋪在梯度液頂上,如需挾在梯度液中間或管底部,那么需調(diào)理樣品液密度。離心后,不同密度的樣品顆粒到達(dá)與本身密度相等的梯度層,即到達(dá)等密度的位置而獲得分別。〔3〕自成梯度等密度離心法。某些密度介質(zhì)經(jīng)過離心后會(huì)自成梯度,例Percoll,可迅速構(gòu)成梯度,CsCl、Cs2SO4和三碘甲酰葡萄糖胺經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間離心后也可產(chǎn)生穩(wěn)定的梯度。需求離心分別的樣品可和梯度介質(zhì)先均勻混合,離心開場(chǎng)后,梯度介質(zhì)由于離心力的作用逐漸構(gòu)成管底濃而管頂稀的密度梯度,與此同時(shí),可以帶動(dòng)原來混合的樣品顆粒也發(fā)生重新分布,到達(dá)與其本身密度相等的梯度層里,即到達(dá)等密度的位置而獲得分別。3.沉降平衡離心法。根據(jù)被分別物質(zhì)的浮力密度差別進(jìn)展分別,所用的介質(zhì)起始密度約等于被分別物質(zhì)的密度,介質(zhì)在離心過程中構(gòu)成密度梯度,被分別物質(zhì)沉降或上浮到達(dá)與之密度相等的介質(zhì)區(qū)域中停留并構(gòu)成區(qū)帶。〔三〕層析技術(shù)層析法又稱色譜法,是目前廣泛運(yùn)用的一類分別分析技術(shù)。層析法利用混合物各組分理化性質(zhì)上的差別,例如吸附力、溶解度、分配系數(shù)、帶電性、分子大小、親和力等,使各組分以不同程度分布在二個(gè)相中,其中一個(gè)為固定相,另一個(gè)為流動(dòng)相,當(dāng)混合物隨流動(dòng)相經(jīng)過固定相時(shí),由于各組分受固定相的阻力和流動(dòng)相的推力不同,而使各組分挪動(dòng)速度各異,以到達(dá)分別的目的。1.根據(jù)分別的原理劃分〔1〕吸附層析。是利用混合物隨流動(dòng)相經(jīng)過由吸附劑組成的固定相時(shí),因吸附劑對(duì)各組分的吸附才干的不同,而使各組分流動(dòng)速度不同,將各組分分別。吸附層析根據(jù)支持物裝填方式的不同有柱層析和薄層層析類,前者常用于分別非極性或極性較小的有機(jī)物,后者用于分別氨基酸、類固醇激素等。〔2〕分配層析。利用混合物隨流動(dòng)相〔非極性溶劑〕經(jīng)過含極性溶劑的載體組成的固定相時(shí),由于各組分在二相中的分配系數(shù)的不同,而使混合物各組分在兩相間發(fā)生不同的分配景象而逐漸分開。分配層析運(yùn)用最廣泛的是紙層析。〔3〕離子交換層析。離子交換層析是利用離子交換劑作為固定相,離子交換劑是一類具有酸性或堿性基團(tuán),能與溶液中的陽離子或陰離子發(fā)生交換的不溶性物質(zhì),流動(dòng)相通常是具有一定pH值和一定離子強(qiáng)度的電解質(zhì)溶液。將混合溶液參與離子交換柱,由于離子交換劑對(duì)混合液中各種離子具有不同的親和力而產(chǎn)生不同的吸附作用,當(dāng)流動(dòng)相流經(jīng)離子交換柱時(shí),可以降低離子交換劑對(duì)吸附離子的親和力而被交換洗脫下來,從而到達(dá)分別的目的。〔4〕凝膠層析。以多孔性網(wǎng)狀構(gòu)造的凝膠〔葡聚糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠或瓊脂糖凝膠等〕為固定相裝柱,將分子量大小不同的混合組分參與柱,用一種洗脫液作為流動(dòng)相進(jìn)展洗脫。小分子物質(zhì)易進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部使流程延伸,大分子物質(zhì)不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)而被排阻在外,流程較短,經(jīng)過一定洗脫時(shí)間后,可將混合物按分子大小不同別分開來。〔5〕親和層析。親和層析是根據(jù)生物大分子與其配基之間具有高度專注性的親和力而設(shè)計(jì)的一種層析技術(shù)。具有專注親和力的生物分子對(duì)主要有:酶與底物〔包括輔酶與輔基〕、激素與受體、抗原與抗體、DNA與RNA、凝集素與糖蛋白等,由于結(jié)合雙方是互配的,因此分子對(duì)任何一方均可作為配基,經(jīng)過化學(xué)法銜接到載體上作為固定相裝柱,將欲分別的混合物〔分子對(duì)另一方〕參與柱,由于分子對(duì)雙方有高度親和力而被吸附結(jié)合在柱上,其它雜質(zhì)首先隨流動(dòng)相被洗脫下來,然后改動(dòng)流動(dòng)相成分,將吸附結(jié)合在柱上的親合分子洗脫下來。2.根據(jù)兩相物理形狀劃分〔1〕液相層析。流動(dòng)相為液體的層析,如上述各種層析。低壓液相層析儀高效液相儀〔2〕氣相層析。流動(dòng)相為氣體的層析。固定相有固體或液體,故又分作氣固層析或氣液層析。3.根據(jù)支持物的裝填方式劃分柱層析〔將支持物裝在管子中成柱形,在柱中進(jìn)展層析〕,薄層層析〔支持物鋪在玻璃板上成一薄層,在薄層上進(jìn)展層析〕,紙層析〔用紙做支持物的層析〕。〔四〕電泳技術(shù)原理:帶電顆粒在電埸作用下,向著其電性相反方向挪動(dòng)的景象稱為電泳。由于被分別物質(zhì)各自的帶電性、帶電量、分子顆粒大小和外形等的不同,在同一電埸下它們的挪動(dòng)速度各異,經(jīng)過一定時(shí)間電泳后可被別分開來。影響電泳的要素:在電泳過程中,帶電顆粒的遷移率在一定條件下與其所帶電量、顆粒半徑和溶液的粘度相關(guān)。此外還有以下要素可以影響物質(zhì)的電泳遷移率:電場(chǎng)強(qiáng)度、溶液的pH值、溶液的離子強(qiáng)度、電滲作用等。

不同型號(hào)的毛細(xì)管電泳儀及其任務(wù)原理電泳的分類:顯微電泳〔毛細(xì)管電泳〕、自在界面電泳和區(qū)帶電泳三大類。以上區(qū)帶電泳運(yùn)用較為廣泛,其特點(diǎn)是在電埸作用下,被分別的各組分在支持物上相互分別為不同的區(qū)帶。分類如下:〔1〕按支持物的物理性狀不同可分為:1〕濾紙及其他纖維紙電泳,2〕粉末電泳,3〕凝膠電泳、4〕緣線電泳。〔2〕按支持物的安裝方式不同可分為:1〕平板式電泳,2〕垂直板式電泳,3〕垂直柱式電泳,4〕延續(xù)液動(dòng)電泳。〔3〕按pH的延續(xù)性不同可分為:1〕延續(xù)pH電泳,2〕非延續(xù)pH電泳。左上:電泳結(jié)果左下:垂直電泳架右:雙向電泳結(jié)果凝膠成像系統(tǒng)〔五〕光譜技術(shù)光譜技術(shù)是利用各種化學(xué)物質(zhì)所具有的發(fā)射、吸收或散射輔射能的特性,對(duì)物質(zhì)進(jìn)展定性或定量的一類分析技術(shù)。它具有靈敏度高,測(cè)定簡(jiǎn)便、快速,試樣不被破壞等優(yōu)點(diǎn),是一類最常用的生化測(cè)定技術(shù)。1.比色分析法。比色法是利用有色物質(zhì)對(duì)一定波長(zhǎng)的光的吸收特性來進(jìn)展定量的一種分析方法。在一定濃度范圍內(nèi),溶液中有色物質(zhì)的濃度與溶液顏色的深度成正比,用可見光〔400-760nm〕作光源,比較溶液的顏色深淺度以測(cè)定所含有色物質(zhì)濃度的方法,叫做比色法。常用的有:〔1〕規(guī)范對(duì)照法。將樣品和規(guī)范樣品溶液在一樣條件下分別測(cè)定它們的吸光度,計(jì)算出試樣溶液的濃度。〔2〕規(guī)范曲線法。配制一系列濃度不同的規(guī)范品溶液,按一定操作方法顯色,在選定波長(zhǎng)條件下分別測(cè)定它們的吸光度,以吸光度為縱坐標(biāo),規(guī)范溶液的濃度為橫坐標(biāo),作一條規(guī)范曲線或任務(wù)曲線。以后只需在一樣條件下實(shí)驗(yàn),測(cè)定未知樣品溶液的吸光度,從規(guī)范曲線上求得相對(duì)應(yīng)的濃度值,即為未知樣品液的濃度,一條規(guī)范曲線,如測(cè)定條件不變,可供多次運(yùn)用,否那么應(yīng)重新繪制。2.分光光度法。分光光度是根據(jù)被測(cè)物質(zhì)對(duì)各種波長(zhǎng)光的吸收才干〔吸光度或光密度〕,繪制吸收光譜曲線,不同的物質(zhì),分子構(gòu)造不同,其吸收曲線各有特殊方式,根據(jù)曲線的特征,用于物質(zhì)的定性定量。分光光度法波長(zhǎng)范圍較大〔200-1000nm〕,因此,既可用于可見光,也可用于紫外光和紅外光的分光測(cè)定,故測(cè)定物質(zhì)既可是有色物,也可是無色物,擴(kuò)展了運(yùn)用范圍。由于分光光法采用單色光器〔棱鏡〕,得到單色光,其波長(zhǎng)范圍比濾光片波長(zhǎng)更狹窄,提高了分析的靈敏度、準(zhǔn)確度和選擇性。所用的儀器721分光光度計(jì)、752紫外分光光度計(jì)等。比色實(shí)驗(yàn)和不同的可見光和紫外分析儀3.熒光光度法。某些物質(zhì)經(jīng)紫外光照射能發(fā)出比原激發(fā)光的頻率低,波長(zhǎng)長(zhǎng)的可見光,這種光稱為熒光。各種物質(zhì)經(jīng)紫外光激發(fā)后能發(fā)出的熒光特性與物質(zhì)的化學(xué)性有關(guān)。在激發(fā)光強(qiáng)度和所經(jīng)過的溶液厚度不變時(shí),在一定濃度范圍內(nèi)該物質(zhì)所產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度與其濃度成正比。因此,可以用知濃度的規(guī)范與待測(cè)樣品同樣操作,經(jīng)過測(cè)定熒光強(qiáng)度〔F〕,按前述的規(guī)范曲線法和規(guī)范對(duì)照法,求得待測(cè)物質(zhì)的濃度。所用的儀器如國產(chǎn)930型、910型等熒光光度計(jì)。4.比濁法。比濁法是利用混懸溶液中顆粒對(duì)光線產(chǎn)生散射特性進(jìn)展測(cè)定。其測(cè)定的實(shí)際、方法和計(jì)算等類似于比色分析法,因此根本上任何一種光電比色計(jì)或分光光度計(jì)都能用于比濁測(cè)定。以上這些技術(shù),被稱為生化的四大技術(shù),很傳統(tǒng)的。大體可以滿足靜態(tài)生化、動(dòng)態(tài)生化的檢測(cè),而機(jī)能生化那么首先有賴于對(duì)化學(xué)物質(zhì)的構(gòu)造認(rèn)識(shí),這樣的研討目前非常搶手,自然雜志專門有關(guān)于蛋白質(zhì)三級(jí)機(jī)構(gòu)圖的專刊,目前積累迅速。而研討那么是一條長(zhǎng)鏈,有許多環(huán)節(jié)構(gòu)成,投入本錢高。全自動(dòng)生化檢測(cè)儀〔六〕分子雜交技術(shù)〔詳見有關(guān)章節(jié)〕二、用生物化學(xué)方法研討中醫(yī)的現(xiàn)狀該章節(jié)援用了大量的國內(nèi)研討進(jìn)展資料,值得仔細(xì)閱讀。〔一〕物質(zhì)代謝引見了:陰虛、陽虛、心氣虛、肝氣虛、脾虛、肺虛、腎虛、體質(zhì)學(xué)說與物質(zhì)代謝〔其中:毛良、顧文聰〔我校教師〕〕1.陰虛、陽虛與物質(zhì)代謝毛良是我校的生化專業(yè)的老教師。2.心氣虛與物質(zhì)代謝心氣虛證患者紅細(xì)胞SOD活性明顯下降、血清LPO含量顯著升高,推測(cè)由于紅細(xì)胞SOD活性下降不能維護(hù)心肌免受超氧自在基的攻擊,以致產(chǎn)生心氣虛的臨床病癥。心氣虛患者血漿核酸總量及DNA、RNA含量均低于正常對(duì)照組,提示心氣虛患者蛋白質(zhì)合勝利能有一定的妨礙。3.肝氣虛證與物質(zhì)代謝4.脾虛與物質(zhì)代謝脾虛患者:檸檬酸刺激后唾液淀粉酶活性下降。血清胃泌素和胰淀粉酶活性低下,胃腸蠕動(dòng)紊亂,小腸吸收功能低下。闡明脾虛患者的胃腸功能確有紊亂。木糖排泄率較正常人顯著降低,而且食少、腹脹滿、大便不調(diào)、神疲氣短等脾虛四大主癥與木糖排泄率下降有一致性的規(guī)律。血清淀粉酶及其同功酶和胰脂肪酶均顯著下降,且食欲減退、食后腹脹與大便溏泄等脾氣虛的三個(gè)主癥與之呈正相關(guān),闡明胰腺外分泌功能的降低可視為脾氣虛證的特異性診斷目的之一,且淀粉酶總活性的降低取決于胰淀粉酶同功酶的下降,而與唾液淀粉酶無關(guān),為脾氣虛證診斷提供了一個(gè)更準(zhǔn)確有效的實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?.肺虛與物質(zhì)代謝6.腎虛與物質(zhì)代謝7.體質(zhì)學(xué)說與物質(zhì)代謝〔二〕能量代謝引見了:心氣虛、肝血虛、脾虛證、體質(zhì)學(xué)說與能量代謝〔其中匡調(diào)元為我校教師〕1.心氣虛證與能量代謝2.肝血虛證與能量代謝3.脾虛證與能量代謝脾氣虛患者肌纖維的肌酸磷酸激酶〔CPK〕、琥珀酸脫氫酶、輔酶1-四氮唑復(fù)原酶〔NADH-TR〕活性、肌球蛋白腺苷三磷酸酶〔M-ATPase〕活性,以及肌糖原含量均減少,線粒體發(fā)生改動(dòng),骨骼肌有氧氧化效率降低,糖酵解供能途徑妨礙,能量代謝受阻;實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)CPK和肌型肌酸磷酸激酶〔CPK-MM〕活性的降低與脾氣虛的輕重程度有量的相關(guān)性。脾氣虛大鼠骨骼肌細(xì)胞ATP含量和能荷值顯著減小,與無氧酵解相關(guān)的乳酸脫氫酶〔LDH〕以及有氧氧化相關(guān)的琥珀酸脫氫酶〔SDH〕活性顯著升高,提示能量代謝異常,與之相關(guān)的微量元素鋅和鐵含量也相應(yīng)升高,而與肌肉收縮有關(guān)的元素銅、砷、鈉減少而鈣增多。紅細(xì)胞膜Na+-K+-ATPase活性也顯著低于正常組。4.體質(zhì)學(xué)說與能量代謝〔三〕神經(jīng)內(nèi)分泌引見了:陰虛、陽虛、心氣虛、肝、脾虛、肺虛、腎虛、與神經(jīng)內(nèi)分泌〔其中趙偉康、金國琴、為我校教師,沈自尹、王文健華山醫(yī)院藏象研討室,在腎虛證研討方面全國領(lǐng)先〕1.陰虛陽虛與神經(jīng)內(nèi)分泌2.心氣虛與神經(jīng)內(nèi)分泌3.肝與神經(jīng)內(nèi)分泌4.脾虛證與神經(jīng)內(nèi)分泌5.肺虛證與神經(jīng)內(nèi)分泌6.腎虛證與神經(jīng)內(nèi)分泌沈自尹等從1959年,在“腎〞本質(zhì)的研討中,得到腎陽虛證具有下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸功能紊亂的結(jié)論,這一結(jié)論閱歷了全國七個(gè)省市和日本京都病院的反復(fù)驗(yàn)證。他們從1979年起,經(jīng)過選擇符合典型腎陽虛證患者與正常組、同病無特殊見證組下丘腦-垂體及其所屬三個(gè)靶腺軸功能的全套測(cè)定的對(duì)比研討,結(jié)果顯示腎陽虛證不僅表現(xiàn)為腎上腺皮質(zhì)軸功能紊亂,而且在不同的靶腺軸、不同環(huán)節(jié)、不同程度上呈現(xiàn)隱潛性變化。采用了溫補(bǔ)腎陽法治療后,靶腺功能明顯恢復(fù)。由于累及三個(gè)靶腺軸,由此可以推論腎陽虛證主要發(fā)病環(huán)節(jié)是下丘腦〔或更高中樞〕的調(diào)理紊亂。〔1〕下丘腦-垂體-性腺軸與腎虛〔2〕下丘腦-垂體-腎上腺軸與腎虛沈自尹等實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),35例腎陽虛證患者尿17羥均值治療后顯著高于治療前,24例腎陽虛證患者ACTH滴注實(shí)驗(yàn)呈延遲反響,治療后復(fù)查其值均恢復(fù)至正常;6例腎陽虛證患者血漿ACTH濃度治療后顯著高于治療前;7例腎陽虛者血皮質(zhì)醇晝夜節(jié)律呈異常曲線者,有4例治療后得以恢復(fù)。趙偉康等經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)補(bǔ)腎益精方藥固真方能明顯提高老年大鼠〔腎虛衰老〕海馬細(xì)胞降低的糖皮質(zhì)激素受體〔GCR〕數(shù),提高下丘腦降低的NE、DA和5-HT含量,降低老年大鼠異常升高的血漿皮質(zhì)酮,使之趨于正常青年對(duì)照組。〔3〕下丘腦-垂體-甲狀腺軸與腎虛沈自尹等察看了8例腎陽虛者血清總T3含量,與治療前相比較,發(fā)現(xiàn)治療后血清總T3含量顯著增高,4例腎陽虛者TRH興奮實(shí)驗(yàn)呈延遲反響,經(jīng)治療后有2例得以恢復(fù)。李曉玲等察看了27例腎虛型惡性腫瘤患者的甲狀腺功能,其腎陰虛、腎陽虛兩組的血清T3、T4含量均顯著低于安康對(duì)照組,腎虛兩組間T3相接近,T4那么以腎陽虛組更低下,腎陽虛組代償率僅9.0%,兩組有顯著差別。因此以為,甲狀腺功能變化可作為臨床判別腎虛型腫瘤患者病情和療效的參考目的。趙偉康等動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),老年大鼠〔腎虛衰老〕血清T3、T4、FT3、FT4和L-EK含量明顯下降,rT3顯著添加,血清TRH

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