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文檔簡介
實驗動物的給藥方法實驗動物的給藥方法在動物實驗中,為了觀察藥物對機體功能、代謝及形態(tài)引起的變化,常需要將藥物注入動物體內(nèi)。給藥的途徑和方法多種多樣,可根據(jù)實驗?zāi)康摹嶒瀯游锓N類和藥物劑型、劑量等情況確定。(一)注射給藥法1.皮下注射注射時用左手拇指及食指輕輕捏起皮膚,右手持注射器將針頭刺入,固定后即可進行注射。①小鼠在背部或前肢腋下,大鼠在背部或側(cè)下腹部;
②豚鼠在后大腿內(nèi)側(cè)、背部等脂肪少的部位;
③兔在背部或耳根部注射;
④蛙可在脊背部淋巴囊注射;
⑤狗多在大腿外側(cè)注射,拔針時,輕按針孔片刻,防藥液逸出。2.皮內(nèi)注射此法用于觀察皮膚血管的通透性變化或觀察皮內(nèi)反應(yīng)。如將一定量的放射性同位素溶液、顏料或致炎物質(zhì)、藥物等注入皮內(nèi),觀察其消失速度和局部血液循環(huán)變化,作為皮膚血管通透性觀察指標之一。方法是:將動物注射部位的毛剪去,消毒后,用皮試針頭緊貼皮膚皮層刺入皮內(nèi),然后使針頭向上挑起并再稍刺入,即可注射藥液。注射后可見皮膚表面鼓起一白色小皮丘。3.肌肉注射當(dāng)給動物注射不溶于水而混懸于油或其他溶劑中的藥物時,常采用肌肉注射。肌肉注射一般選用肌肉發(fā)達、無大血管經(jīng)過的部位,多選臀部。注射時針頭要垂直快速刺入肌肉,如無回血現(xiàn)象即可注射。給大、小鼠作肌肉注射時,選大腿外側(cè)肌肉進行注射。4.腹腔注射先將動物固定,腹部用酒精棉球擦試消毒,然后在左或右側(cè)腹部將針頭刺入皮下,沿皮下向前推進約0.5厘米,再使針頭與皮膚呈45度角方向穿過腹肌刺入腹腔,此時有落空感,回抽無腸液、尿液后,緩緩?fù)迫胨幰骸4朔ù笮∈笥玫妮^多。5.靜脈注射為了鑒定藥物或毒物經(jīng)皮膚的吸收作用、局部作用、致敏作用和光感作用等,均需采用經(jīng)皮膚給藥方法。如兔和豚鼠常采用背部一定面積的皮膚脫毛后,將一定的藥液涂在皮膚上,藥液經(jīng)皮膚吸收。3.脊髓腔內(nèi)給藥:此法主要用于錐管麻醉或抽取腦脊液。4.腦內(nèi)給藥:此法常用于微生物學(xué)動物實驗,將病原體等接種于被檢動物腦內(nèi),然后觀察接種后的各種變化。5.直腸內(nèi)給藥:此種方法常用于動物麻醉。兔直腸內(nèi)給藥時,常采用灌腸的膠皮管或用14號導(dǎo)尿管代替。6.關(guān)節(jié)腔內(nèi)給藥:此法常用于關(guān)節(jié)炎的動物模型復(fù)制。大鼠給藥方法一、大鼠灌胃大鼠灌胃是最常見的給藥方法之一。灌胃所用的針頭可以從市場上購買,操作方法和小鼠灌胃大同小異,只是由于大鼠體積較大,抓大鼠的手法和小鼠有所不同。大鼠灌胃是在清醒狀態(tài)下進行的,不需要麻醉。大鼠的灌胃針長約6~8cm,直徑約1.2mm。大鼠灌胃時,右手持灌胃注射器,左手拇指和食中二指相對,抓住大鼠頸部皮膚,使大鼠的頭部和頸部及軀干呈一直線,不需要固定大鼠的尾巴,就可以實施灌胃操作了,其余的操作均和小鼠一樣。大鼠一般灌胃量為1ml/100g體重,因此一般大鼠灌入2ml是可以的。大鼠的灌胃給藥體積一般為5~10ml/kg。但是藥物的濃度是需要自己按照動物實驗方法學(xué)的方法進行換算:200g大鼠對應(yīng)70kg人的折算系數(shù)為0.018。二、大鼠腹腔注射腹腔注射是常見的給藥方式,尤其是在麻醉時。常見的麻醉方法均是麻醉藥物腹腔注射。大鼠腹腔注射的方法和小鼠基本相同。1.大鼠腹腔注射可以用5ml的注射器,配合5.5~7號針頭。2.腹腔注射時右手持注射器,左手的小指和無名指抓住大鼠的尾巴,另外三個手指抓住大鼠的頸部,使大鼠的頭部向下。這樣腹腔中的器官就會自然倒向胸部,防止注射器刺入時損傷大腸、小腸等器官。進針的動作要輕柔,防止刺傷腹部器官。3.尤其是對于體重較小的大鼠,腹腔注射時針頭可以在腹部皮下穿行一小段距離,最好是從腹部一側(cè)進針,穿過腹中線后在腹部的另一側(cè)進入腹腔,注射完藥物后,緩緩拔出針頭,并輕微旋轉(zhuǎn)針頭,防止漏液。4.大鼠腹腔注射的給藥容積一般為5~10ml/kg。三、大鼠尾靜脈注射這也是常見的操作,稍微有點難度,沒有指導(dǎo)的話,一開始可能會感覺有點手足無措。但是可以肯定的說,只要掌握了方法,大鼠的尾靜脈注射還是很容易的。總的來說,大小鼠的尾靜脈注射難度相當(dāng),熟練后,大鼠應(yīng)該比小鼠注射更容易,因為大鼠的尾巴較粗,而且血管也較粗,進針的手感比較好找。但是大鼠年齡增大后,尾部鱗片也較厚,此時尾靜脈注射難度會加大,進針點宜選擇兩個鱗片的間隙,以利于針尖順利刺入。操作步驟:1.首先要固定大鼠,最簡單的固定方法就是把大鼠麻醉,然后大鼠躺在那里不動,就可以順利操作了。但是我們往往需要多次給藥,就是單次給藥的話,每只都麻醉的話,也很麻煩,而且還要考慮麻醉對實驗結(jié)果和動物的影響,因此,有必要找另外的方法固定了。再有的固定方法就和小鼠類似,做一個圓筒,最好是金屬做的,(可以在當(dāng)?shù)氐蔫F匠鋪,或者買白鐵鋪里面定做)首先是金屬比較結(jié)實,而且可以用來固定在鐵架臺上,方便操作。圓筒的一段有個蓋子可以拿下來,蓋子中間有個小孔,可以讓大鼠的尾巴伸出來(中間的小孔可以用膠布纏一下,防止銳利的邊緣割傷大鼠尾巴)。另外一段可以用金屬網(wǎng)的結(jié)構(gòu),網(wǎng)的形狀可以做成子彈頭的頭端形狀。網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)可以讓光線透近來,方便大鼠鉆進圓筒里面。圓筒的長度約15~20cm,直徑約5~8cm,可以做個系列長度和直徑的圓筒,適合不同大小的大鼠。操作的時候,可以把圓筒固定在鐵架臺上面,有鐵絲網(wǎng)的一面稍微向上,拔下另外一頭的蓋子,抓住大鼠的尾巴,懸空大鼠,讓大鼠的頭部靠近圓筒,稍微引導(dǎo)一下,大鼠就會鉆進圓筒,將大鼠的尾巴穿過蓋子中間的小孔,蓋上蓋子,向外拉直大鼠尾巴,就可以進行下一步操作了。也有直接利用大鼠籠蓋的鐵絲網(wǎng)固定大鼠,向上面小鼠固定的方法固定大鼠,那是高手所為,總共只需要一次到兩次的靜脈注射時可以試用,不推薦使用。2.固定好大鼠后就是注射了,一般用一次性的5ml的注射器,去除針頭,接上5.5號的頭皮針,用頭皮針穿刺,個人感覺比較方便,而且便于固定針頭。3.注射前首先要讓大鼠的血管充盈。可以采用75%的酒精棉球擦拭的方法或者采用溫水浸泡的方法,(一般水浴溫度45度左右),大概2分鐘就可以讓尾部左右二側(cè)靜脈充分擴張,用電吹風(fēng)的熱風(fēng)吹大鼠尾部,這種使靜脈擴張的方法不但快而且操作方便,但要控制好吹的方式,不要弄傷動物。若大鼠的血管很不清楚,推薦采用溫水浸泡的方法,水溫以不燙手為宜。溫水浸泡2~3分鐘后,取出大鼠尾巴,用干棉球擦拭。等一會兒,待血管充盈后,酒精棉球擦拭后就可以進針了。若血管還不充盈,可以反復(fù)用溫水浸泡,切不可冒險注射,除非你手法很熟練,另當(dāng)別論。4.大鼠尾部共有四條血管,一般認為左右的兩條靜脈比較容易注射,多采用這兩條靜脈進針。一般要求進針部位靠近大鼠的尾端,這樣若注射失敗的話,還可以再向上選擇進針點。但是進針部位也不可以太靠下,因為越往下,靜脈越細,操作越難,一般以大鼠尾巴下三分之一的位置比較好。5.最關(guān)鍵的就是進針了。進針時操作者左手食指和拇指固定住大鼠的尾巴,讓大鼠的尾巴在經(jīng)過拇指后向下彎曲,進針點靠近拇指指甲。針頭和血管呈約30°角,針尖斜面朝上,輕輕挑刺入皮膚后針頭立即和血管平行,一般情況下一次就可以進入血管,可以將針頭刺入血管一大半,輕輕回抽針栓,看見有明顯的回血,就可以推注藥液了,正常情況下,推注的過程應(yīng)該沒有明顯阻力,血管也不會鼓起。推液時動作宜輕柔,若發(fā)現(xiàn)血管鼓起,那是針頭沒有刺入血管,需立即拔出針頭,重新注射。(正常情況下,均可以看見回血,若沒有回血,9成是沒有進入血管,不要推藥,拔出針頭,重新穿刺,以防推注藥液導(dǎo)致大鼠尾巴皮下水腫,加大穿刺的難度,若是帶有顏色的液體,如伊文斯蘭,就更要注意)6.注射結(jié)束后,輕輕拔出針頭,可以用干燥的棉球壓一下進針點,防止液體回漏。四、大鼠舌靜脈注射大鼠的舌靜脈給藥比較少見,因為他需要在麻醉狀態(tài)下方可以操作。不麻醉的情況下也不是不可以,但是若不麻醉的話,既不符合動物福利,也很容易失敗,而且操作人員也容易受傷。一般在做垂體后葉素致大鼠心肌缺血的實驗中,垂體后葉素的靜脈注射采用舌靜脈注射。1.舌靜脈注射一般采用1ml注射器,配4號針頭。
2.大鼠麻醉后,仰臥位固定在鼠板上,牙齒也固定好。右手持眼科鑷,輕輕拉出大鼠舌頭,左手拇指和食指輕輕捏住舌尖,可見大鼠舌頭兩側(cè)均有一條很清楚的靜脈,一般右側(cè)的比較順手(我是右撇子),左手稍微繃緊大鼠舌頭,不要繃的太緊,這樣靜脈會看的不清楚,以能拉直大鼠舌頭,且能清楚看見血管為宜。
3.右手持注射器,針尖斜面朝上,和舌頭血管呈15°角,挑刺入血管。(舌靜脈非常淺,針尖挑刺舌面皮膚后就進入血管了),輕輕推注藥液,若發(fā)現(xiàn)舌頭有鼓起,則是注射失敗。這樣注射點很容易出很多學(xué),形成血腫,這側(cè)靜脈想再次注射就很困難了,那么最好就選用另外一側(cè)靜脈了。
4.舌靜脈血流很豐富,拔針時一定要用干棉球壓迫注射點,幫助止血。
5.正常的舌靜脈注射不影響大鼠的進食。五、大鼠經(jīng)皮膚給藥首先需要脫毛可以配制8%的硫化鈉溶液,也可以自配脫毛劑,配方:硫化鈉:肥皂粉:淀粉為3:1:7,加水混合成糊狀軟膏。用棉簽將脫毛劑涂在要脫毛的部位,觀察看見區(qū)域內(nèi)鼠毛發(fā)粘用干凈棉簽沾潔凈的水將脫毛部位清洗干凈,大鼠一般用腹部皮膚,小鼠可用背部皮膚。六、大鼠鞘內(nèi)給藥鞘內(nèi)給藥有兩種方式:一是急性給藥,二是長期慢性給藥。慢性給藥,具體的說應(yīng)該是在暴露出寰枕膜后將PE10管插入蛛網(wǎng)膜下隙,至有清亮腦脊液反流后可確定位置正確,然后將PE10管插入7.5cm達腰膨大水平,固定并縫合即可。注射反意寡核苷酸,所以直接在L4~5椎間隙進針就可以對于長期給藥宜選慢性套管給藥,選做好插入深度標記的PE-10導(dǎo)管,根據(jù)動物大小和所需埋置的脊髓節(jié)段,決定好插入深度,一般270~320g的大白鼠腰骶部約7.5cm,胸段約5~5.5cm。給藥:將4號注射針頭鋸斷,并磨尖,插在PE-10導(dǎo)管上,導(dǎo)管另一端接在另一接又注射器的4號針頭上,給藥時只需將鋼管另一端與動物身上埋植好的PE-10導(dǎo)管相接即可。七、大鼠陰道給藥大鼠陰道給藥方法類似于小鼠,而且大鼠的生殖道比小鼠要長一些,會比小鼠操作相對容易一些。小鼠陰道內(nèi)感染,是往小鼠陰道內(nèi)注射感染菌液,開始感染時采用的是用小兒科的頭皮針改做的軟管向小鼠生殖道內(nèi)注射,但因為小鼠生殖道很淺,而且軟管本身占有小鼠生殖道的一部分體積,導(dǎo)致主入的菌液易漏,后來嘗試用50ul的加樣器每次取20ul,采取多次注射的辦法。做此類實驗主要是注意感染的藥物或液體不要漏出來,可以采取多次注射的辦法。八、大鼠鼻腔給藥1.有滴鼻和噴霧兩種常見方式噴霧其實就是霧化吸入。
滴鼻給藥沒有辦法達到霧化吸入的效果。
霧化吸入需要有霧化設(shè)備,一般醫(yī)院的都有,但是醫(yī)院的如果借不出來,自己家里的加濕器也可以湊合。
霧化給藥的時候,要把大鼠放在一個相對比較密閉的的容器中(當(dāng)然要有透氣孔),讓大鼠盡可能多地接觸藥物,但是好象沒有專門的這種容器,一般都是自制的,材料最好是有機玻璃。如果需要一只一只給藥的話,
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