ZHUANTIYI|專項1基因工程1．1DNA重組技術的基本工具課堂知能驗收對應學生用書P0011．下列有關基因工程誕生的說法，不對的的是()A．基因工程是在生物化學、分子生物學和微生物學等學科的基礎上發展起來的B．工具酶和載體的發現使基因工程的實施成為可能C．遺傳密碼的破譯為基因的分離和合成提供了理論根據D．基因工程必須在同物種間進行答案D解析基因工程可在不同物種間進行，它可打破生殖隔離的界限，定向改造生物的遺傳性狀，D錯誤。2．下列有關限制性核酸內切酶的說法錯誤的是()A．限制性核酸內切酶重要是從微生物細胞中分離提純的B．限制性核酸內切酶不能將目的基因連接到不同的載體上C．一種限制性核酸內切酶只能識別一種特定的核苷酸D．限制性核酸內切酶既可切割鏈狀DNA也可切割環狀DNA答案C解析限制性核酸內切酶重要是從原核生物中分離出來的，A對的；把目的基因連接到載體上使用的酶是DNA連接酶，B對的；普通一種限制性核酸內切酶只能識別一種特定的核苷酸序列，C錯誤。3．限制酶是一種核酸切割酶，可辨識并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。如圖所示為四種限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ以及BglⅡ的識別序列。箭頭表達每一種限制酶的特定切割部位，其中哪兩種限制酶所切割出來的DNA片段末端能夠互補黏合并且對的的末端互補序列是()A．BamHⅠ和EcoRⅠ；末端互補序列—AATT—B．BamHⅠ和HindⅢ；末端互補序列—GATC—C．EcoRⅠ和HindⅢ；末端互補序列—AATT—D．BamHⅠ和BglⅡ；末端互補序列—GATC—答案D解析限制酶BamHⅠ與BglⅡ即使識別的核苷酸序列不同，但切割后露出的黏性末端相似，故末端序列能夠進行堿基互補配對。4．“分子縫合針”——DNA連接酶“縫合”的部位是()A．堿基對之間的氫鍵B．堿基與脫氧核糖C．雙鏈DNA片段間的磷酸二酯鍵D．脫氧核糖與脫氧核糖答案C解析相鄰的兩個脫氧核苷酸之間由磷酸和脫氧核糖形成的磷酸二酯鍵連接，DNA連接酶連接的是此化學鍵。5．(·石家莊一中月考)基因工程載體必須含有的條件中，錯誤的是()A．能在受體細胞中復制并穩定保存B．含有多個限制酶切點，方便與外源基因連接C．能進入受體細胞中并控制其新陳代謝過程D．在限制酶切點外必須含有標記基因，便于篩選答案C解析作為基因工程的載體必須能夠在受體細胞內復制并穩定保存，有多個限制酶的切點，含有某些標記基因，A、B、D對的；載體的存在與否對受體細胞生存沒有決定性作用，即不影響宿主細胞的正常代謝活動，C錯誤。6．質粒之因此能作為基因工程的載體，是由于它()A．含蛋白質，從而能完一生命活動B．能夠自我復制C．是RNA，能夠指導蛋白質的合成D．含有環狀構造，能夠攜帶目的基因答案B解析質粒是一種小型環狀DNA分子，不含蛋白質，A、C錯誤；質粒在受體細胞中能夠自我復制，從而保持持續性，B對的；質粒含有環狀構造，但不是作為基因工程載體的必備條件，D錯誤。7．下列是基因工程的有關問題，請回答：(1)限制性核酸內切酶能夠識別雙鏈DNA分子中的特定核苷酸序列，并能夠使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的______________(填化學鍵名稱)斷裂，形成的末端總體可分為兩種類型，分別是____________________。(2)目的基因和載體重組時需要的工具酶是______________，與限制性核酸內切酶相比，它對所重組的DNA兩端堿基序列________(填“有”或“無”)專一性規定。(3)如圖表達的是構建體現載體時的某種質粒與目的基因。已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是—↓GATC—。分析可知，最佳選擇限制酶________切割質粒，限制酶________切割目的基因所在的DNA，這樣做的好處分別是________________________________________________________________________、________________________________________________________________________。答案(1)磷酸二酯鍵黏性末端和平末端(2)DNA連接酶無(3)ⅠⅡ限制酶Ⅰ切割質粒不會把兩個標記基因都破壞目的基因兩端都有限制酶Ⅱ的識別序列解析(1)限制性核酸內切酶作用的化學鍵是磷酸二酯鍵。限制性核酸內切酶切割DNA分子后形成平末端或黏性末端。(2)目的基因與載體連接需要用DNA連接酶，它連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵，對所重組的DNA兩端的堿基序列無專一性。(3)限制酶Ⅰ的識別序列和切點是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是—↓GATC—，目的基因的兩端皆有限制酶Ⅱ的識別序列，用限制酶Ⅰ切割質粒只會破壞一種標記基因，用限制酶Ⅱ切割質粒則會將兩個標記基因全部破壞。8．啤酒酵母菌是啤酒生產上慣用的典型的發酵酵母菌，除用于釀造啤酒及其它的飲料酒外，還可發酵面包，菌體維生素、蛋白質含量高，可作食用、藥用和飼料。科學家將大麥細胞的LTP1基因植入啤酒酵母菌中，獲得的啤酒酵母菌種可產生LTP1蛋白，并釀出泡沫豐富的啤酒。基本的操作過程以下：(1)該技術定向變化了啤酒酵母菌的性狀，這在可遺傳變異的來源中屬于________。(2)為了將LTP1基因導入酵母菌細胞內，所用的載體是________。(3)要使載體與LTP1基因連接，首先應使用________進行切割。如果載體被切割后，得到的分子末端序列為eq\b\lc\\rc\(\a\vs4\al\co1(AATTC—,G—))，則能與該載體連接的目的基因分子末端有(多選)________，其中與eq\a\vs4\al(\b\lc\\rc\(\a\vs4\al\co1(AATTC—,G—)))是同一種限制酶切割的是________。A.eq\b\lc\\rc\(\a\vs4\al\co1(—G,—CTTAA))B.eq\b\lc\\rc\(\a\vs4\al\co1(AATTT—,A—))C.eq\b\lc\\rc\(\a\vs4\al\co1(AATTG—,C—))D.eq\b\lc\\rc\(\a\vs4\al\co1(TTAAG—,C—))(4)將LTP1基因片段與載體“縫合”起來，需要________酶，慣用的有________________、________________，它們連接的化學鍵是________，其中能“縫合”兩個雙鏈DNA片段的平末端的酶是________。答案(1)基因重組(2)(大腸桿菌的)質粒(3)限制酶ABCA(4)DNA連接E·coliDNA連接酶T4DNA連接酶磷酸二酯鍵T4DNA連接酶解析(1)由圖可知該技術屬于基因工程，該變異屬于基因重組。(2)據圖能夠看出，載體來自大腸桿菌，一定是質粒。(3)與eq\b\lc\\rc\(\a\vs4\al\co1(AATTC—,G—))含有相似黏性末端的是A、B、C，它們能互相連接，但與其來自同一種限制酶切割的是A。(4)不同來源的DNA片段結合需要的酶是DNA連接酶，慣用的有E·coliDNA連接酶、T4DNA連接酶，它們連接的化學鍵是磷酸二酯鍵，而起到“縫合”平末端作用的連接酶是T4DNA連接酶。

課后提能訓練對應學生用書P0031．(·貴州遵義四中高二月考)下列說法中，對的的是()A．DNA連接酶最初是從人體細胞中發現的B．限制酶的切口一定是GAATTC堿基序列C．運用載體在宿主細胞內對目的基因進行大量復制的過程可稱為“克隆”D．限制酶能識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并使鏈間的氫鍵斷裂答案C解析DNA連接酶最初是從原核細胞中發現的，A錯誤；限制酶有多個，每種限制酶都能識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，因此不是全部限制酶的切口都是GAATTC的堿基序列，B、D錯誤；運用載體在宿主細胞內對目的基因進行大量復制的過程可稱為分子水平上的“克隆”，C對的。2．(·河南師大附中高二月考)下列有關限制性核酸內切酶的敘述中對的的是()A．用限制酶切割一種DNA分子中部，獲得一種目的基因時，被水解的磷酸二酯鍵有2個B．限制性核酸內切酶識別序列越短，則該序列在DNA中出現的幾率就越大C．—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制性核酸內切酶切出的黏性末端游離堿基數不同D．只有用相似的限制性核酸內切酶解決含目的基因的DNA片段和質粒，才干形成重組質粒答案B解析用限制性核酸內切酶切割一種DNA分子中部，獲得一種目的基因時，需要切割目的基因的兩側，因此要斷裂4個磷酸二酯鍵，A錯誤；限制性核酸內切酶識別序列越短，則該序列在DNA中出現的幾率就越大，B對的；—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制酶切出的黏性末端游離堿基數均為四個，C錯誤；不同的限制性核酸內切酶切割也可能形成相似的末端序列，因此不同限制酶解決含目的基因的DNA片段和質粒，也能形成重組質粒，D錯誤。3．下列有關DNA連接酶作用的敘述，對的的是()A．不能將單個核苷酸加到某DNA片段末端B．一種DNA連接酶只能連接某一特定序列的DNA片段C．連接兩條DNA鏈上堿基之間的氫鍵D．只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間連接起來，而不能將雙鏈DNA片段平末端之間進行連接答案A解析DNA連接酶的作用是連接兩個DNA片段，形成磷酸二酯鍵，并不是只能作用于某一特定序列，A對的，B、C錯誤；T4DNA連接酶既能夠連接DNA片段互補的黏性末端，也能夠連接平末端，但連接平末端的效率比較低，D錯誤。4．如圖所示DNA分子的某一片段，其中①②③分別表達某種酶的作用部位，則對應的酶依次是()A．DNA連接酶、限制性核酸內切酶、解旋酶B．限制性核酸內切酶、解旋酶、DNA連接酶C．解旋酶、限制性核酸內切酶、DNA連接酶D．限制性核酸內切酶、DNA連接酶、解旋酶答案C解析使氫鍵斷裂的酶是解旋酶，限制性核酸內切酶使相鄰兩個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，連接DNA片段之間的磷酸二酯鍵的酶是DNA連接酶。5．(·云南師大附中月考)下列有關酶的敘述，對的的是()A．同種限制酶既能夠切割目的基因所在片段又能夠切割質粒，因此不含有專一性B．RNA聚合酶和DNA聚合酶都能夠催化遺化信息的轉錄C．限制酶不能切割煙草花葉病毒的核酸D．DNA連接酶可催化脫氧核苷酸鏈間形成氫鍵答案C解析一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，并在特定的位點上切割DNA分子，因此含有專一性，A錯誤；DNA聚合酶不能催化遺傳信息的轉錄，B錯誤；煙草花葉病毒的核酸為RNA，不能用限制酶切割，C對的；DNA連接酶可催化DNA片段間的磷酸二酯鍵的形成，D錯誤。6．(·天津六校聯考)下列有關基因工程的敘述對的的是()A．DNA連接酶的作用是使互補的黏性末端之間發生堿基A與T，C與G之間的連接B．基因工程中使用的載體最常見的是大腸桿菌C．載體上的抗性基因有助于篩選含重組DNA的細胞并可增進目的基因的體現D．基因工程造成的變異，實質上相稱于人為的基因重組，但卻產生了定向變異答案D解析DNA連接酶連接的是磷酸二酯鍵，A錯誤；基因工程中使用的載體最常見的是質粒，B錯誤；載體上的抗性基因有助于篩選含重組DNA的細胞，但不能增進目的基因的體現，C錯誤；基因工程能按照人們的意愿定向改造生物的性狀，其原理是基因重組，D對的。7．下圖表達兩種限制酶識別DNA分子的特定序列，并在特定位點對DNA分子進行切割的示意圖，請回答下列問題：(1)圖中甲和乙代表________________。(2)EcoRⅠ、HpaⅠ代表________________。(3)圖中甲和乙通過對應操作均形成兩個片段，切口的類型分別為________、________。甲中限制酶的切點是________之間，乙中限制酶的切點是________之間。(4)由圖解能夠看出，限制酶的作用特點是_______________________________________。(5)如果甲中G堿基發生基因突變，可能發生的狀況是_______________________________________________。答案(1)有特定脫氧核苷酸序列的DNA片段(2)兩種不同的限制酶(限制性核酸內切酶)(3)黏性末端平末端G、AT、A(4)能識別雙鏈DNA分子的特定脫氧核苷酸序列，并從特定的位點將DNA分子切開(5)限制酶不能識別切割位點解析(1)由圖示看出，甲和乙代表由脫氧核苷酸構成的有不同的酶切位點的DNA片段。(2)EcoRⅠ和HpaⅠ能切割DNA分子，闡明它們是限制酶(限制性核酸內切酶)。(3)甲中切點在G、A之間，切口在識別序列中軸線兩側，形成黏性末端；乙中切點在T、A之間，切口在識別序列中軸線處，形成平末端。(4)限制酶能識別DNA分子的特定核苷酸序列，并從特定位點切割DNA分子。(5)當特定核苷酸序列變化后，就不能被對應限制酶識別。8．下表中列出了幾個限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中箭頭表達有關限制酶的酶切位點，請回答下列問題：(1)一種圖1所示的質粒分子經SmaⅠ切割前后，分別含有________、________個游離的磷酸基團。(2)若對圖中質粒進行改造，插入的SmaⅠ酶切位點越多，質粒的熱穩定性越________。(3)要用圖1中的質粒