仿制藥品制劑的

生物等效性試驗(yàn)

一、專(zhuān)業(yè)術(shù)語(yǔ)定義

1.生物利用度（Bioavailability）：表示治療活性藥物達(dá)到體循環(huán)的速度和程度的量度。2.生物等效性（Bioequivalence）：生物等效藥品是指在相同實(shí)驗(yàn)條件下以相同劑量給藥，試驗(yàn)藥品與參比藥品的吸收速度和吸收程度沒(méi)有明顯差異，可認(rèn)為兩制劑具有生物等效性；對(duì)于某些藥品的吸收程度相同但吸收速度不同而又不影響治療的藥品，也可認(rèn)為兩制劑具有生物等效性。專(zhuān)業(yè)術(shù)語(yǔ)定義

3.生物等效藥品（Bioequivalentdrugproducts）：具有生物等效性特征的兩種藥品為生物等效藥品。4.制劑等效性（pharmaceuticalequivalence）：仿制藥品與參比藥品的藥劑等效性必須：兩制劑有相同活性成分，相同劑型，相同規(guī)格，相同給藥途徑，相同給藥劑量和給藥方法，但不要求輔料和釋放機(jī)制與參比制劑相同。5.修飾釋放制劑（Modifiedreleasedosageform）：

系指通過(guò)修飾藥物劑型，改變藥物釋放的時(shí)間過(guò)程，或定位釋放，或?yàn)榉奖阌盟幎_(dá)到治療目的而制備的藥物制劑。緩釋制劑、控釋制劑、延遲釋放制劑和延時(shí)釋放制劑均為修飾釋放制劑的不同類(lèi)型。常釋制劑（Immediatereleasedosageform）：國(guó)內(nèi)稱(chēng)之為普通制劑，為采用常規(guī)制劑學(xué)方法，而未采用修飾釋放技術(shù)制備的藥物制劑為常釋制劑，如常規(guī)片劑、膠囊劑和顆粒劑等。

專(zhuān)業(yè)術(shù)語(yǔ)定義

二、體內(nèi)藥物測(cè)定用生物樣品分析方法的建立和驗(yàn)證

生物樣品可根據(jù)需要選擇全血、血清、血漿或尿液測(cè)定其中藥物或活性代謝物的濃度用于生物利用度和生物等效性研究，具有取樣量少、藥物濃度低、內(nèi)源性物質(zhì)干擾大（如激素、維生素、膽汁以及可能同服的其他藥物）、個(gè)體的差異大等原因，因此必須根據(jù)待測(cè)物的結(jié)構(gòu)、生物樣品來(lái)源和預(yù)期的濃度范圍，建立靈敏、專(zhuān)一、精確、的生物分析方法，并經(jīng)驗(yàn)證后才能用于臨床試驗(yàn)。體內(nèi)藥物測(cè)定用生物樣品分析方法的建立和驗(yàn)證

1.生物樣品分析方法目前常用的幾種分析方法有：（1）色譜法：氣相色譜法(GC)、高效液相色譜法(HPLC)、色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法（LC－MS、LC-MS-MS，GC-MS，GC-MS-MS）等，可用于大多數(shù)藥物的檢測(cè)；（2）免疫學(xué)方法：放射免疫分析法、酶免疫分析法、熒光免疫分析法等，多用于蛋白質(zhì)多肽類(lèi)物質(zhì)檢測(cè)；（3）生物測(cè)定和微生物學(xué)方法。分析一般首選色譜法，如HPLC、GC法或LC－MS、GC－MS法，這類(lèi)方法靈敏度、特異性、準(zhǔn)確性一般都能適應(yīng)臨床藥代研究的需要，多數(shù)實(shí)驗(yàn)室也具備條件，因此應(yīng)用最廣。2.方法學(xué)驗(yàn)證為了保證分析方法可靠，一般應(yīng)進(jìn)行以下幾方面的考察：（1）特異性：特異性是指在樣品中存在干擾成分的情況下，分析方法能夠準(zhǔn)確、專(zhuān)一地測(cè)定分析物的能力。必須證明所測(cè)定物質(zhì)是受試藥品的原形藥物或特定活性代謝物、內(nèi)源性物質(zhì)和相應(yīng)代謝物、降解產(chǎn)物無(wú)干擾。如生物樣本分析法為色譜法，應(yīng)至少提供空白生物樣品、空白生物樣品加入標(biāo)準(zhǔn)品及服藥后生物樣品的色譜圖，以反映分析方法的特異性。體內(nèi)藥物測(cè)定用生物樣品分析方法的建立和驗(yàn)證

（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線和線性范圍：標(biāo)準(zhǔn)曲線反映了所測(cè)定物質(zhì)濃度與儀器響應(yīng)值之間的關(guān)系，一般用回歸分析方法（如用加權(quán)最小二乘法）所得的回歸方程來(lái)評(píng)價(jià)。應(yīng)提供標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性方程和相關(guān)系數(shù)，說(shuō)明其線性相關(guān)程度。標(biāo)準(zhǔn)曲線高低濃度范圍為線性范圍，在線性范圍內(nèi)濃度測(cè)定結(jié)果應(yīng)達(dá)到試驗(yàn)要求的精密度和準(zhǔn)確度。體內(nèi)藥物測(cè)定用生物樣品分析方法的建立和驗(yàn)證

標(biāo)準(zhǔn)樣品：在生物介質(zhì)中加入已知量分析物配制的樣品，用于建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算質(zhì)控樣品和未知樣品中分析物濃度。不同生物樣品應(yīng)配制標(biāo)準(zhǔn)樣品制備各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線，用于建立標(biāo)準(zhǔn)曲線的標(biāo)準(zhǔn)濃度個(gè)數(shù)取決于分析物可能的濃度范圍和分析物/響應(yīng)值關(guān)系的性質(zhì)。應(yīng)使用與待測(cè)樣品相同生物介質(zhì)，一般用6-8個(gè)濃度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)于非線性相關(guān)可能需要更多濃度點(diǎn)。線性范圍要能覆蓋全部待測(cè)的生物樣品濃度范圍，不得用線性范圍外推的方法求算未知樣品的濃度。建立標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)應(yīng)隨行空白生物樣品，但計(jì)算時(shí)不包括該點(diǎn)，僅用于評(píng)價(jià)干擾。體內(nèi)藥物測(cè)定用生物樣品分析方法的建立和驗(yàn)證

（3）精密度與準(zhǔn)確度：精密度是指在確定的分析條件下，相同介質(zhì)中相同濃度樣品的一系列測(cè)量值的分散程度。通常用質(zhì)控樣品的批內(nèi)和批間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）來(lái)考察方法的精確度。一般RSD應(yīng)小于15％，在定量下限（LowerLimitofquantitation，LLOQ）附近RSD應(yīng)小于20％。體內(nèi)藥物測(cè)定用生物樣品分析方法的建立和驗(yàn)證

準(zhǔn)確度是指在確定的分析條件下，測(cè)得的生物樣品濃度與真實(shí)濃度的接近程度(即質(zhì)控樣品的實(shí)測(cè)濃度與真實(shí)濃度的偏差)，常以回收率表示。重復(fù)測(cè)定已知濃度分析物樣品可獲得準(zhǔn)確度。一般應(yīng)在85％～115％范圍內(nèi)(一般偏差應(yīng)少于15％)，在LLOQ附近應(yīng)在80％～120％范圍內(nèi)。體內(nèi)藥物測(cè)定用生物樣品分析方法的建立和驗(yàn)證

一般要求選擇3個(gè)濃度的質(zhì)控樣品同時(shí)進(jìn)行方法的精密度和準(zhǔn)確度考察：低濃度選擇在定量下限（LLOQ）附近，其濃度在LLOQ的3倍以?xún)?nèi)；高濃度接近于標(biāo)準(zhǔn)曲線的上限。每一濃度至少測(cè)定5個(gè)樣品。體內(nèi)藥物測(cè)定用生物樣品分析方法的建立和驗(yàn)證

（4）定量下限（LowerLimitofquantitation，LLOQ）定量下限是標(biāo)準(zhǔn)曲線上的最低濃度點(diǎn)，表示測(cè)定樣品中符合準(zhǔn)確度和精密度要求的最低藥物濃度。LLOQ應(yīng)能滿足測(cè)定3～5個(gè)消除半衰期時(shí)樣品中的藥物濃度或能檢測(cè)出Cmax的1/10～1/20時(shí)的藥物濃度。其準(zhǔn)確度應(yīng)在真實(shí)濃度的80%～120%范圍內(nèi)，RSD應(yīng)小于20%。體內(nèi)藥物測(cè)定用生物樣品分析方法的建立和驗(yàn)證

（5）樣品穩(wěn)定性：含藥生物樣品在室溫、冰凍和凍融條件下以及不同存放時(shí)間進(jìn)行穩(wěn)定性考察，以確定生物樣品的存放條件和時(shí)間。以及考察儲(chǔ)備液的穩(wěn)定性和樣品處理后的穩(wěn)定性。

（6）提取回收率：從生物樣本樣品中回收得到分析物質(zhì)的響應(yīng)值除以純標(biāo)準(zhǔn)品產(chǎn)生的響應(yīng)值即為分析物的提取回收率。也可以說(shuō)是將供試生物樣品中分析物提取出來(lái)供分析的比例。實(shí)驗(yàn)應(yīng)該考察高、中、低3個(gè)濃度的提取回收率，應(yīng)當(dāng)獲得一致、精密和可重現(xiàn)的回收率。體內(nèi)藥物測(cè)定用生物樣品分析方法的建立和驗(yàn)證

（7）方法學(xué)質(zhì)控（QC）在測(cè)定生物樣品中的藥物濃度時(shí)應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量控制。一般做法是在每批樣品測(cè)定時(shí)應(yīng)同時(shí)制備空白、低、中、高4份質(zhì)控（標(biāo)準(zhǔn)濃度）樣品或隨行制備標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法進(jìn)行方法學(xué)質(zhì)控研究。質(zhì)控樣品系將已知量的待測(cè)藥物加入到生物介質(zhì)中配制的樣品，用于監(jiān)測(cè)生物分析方法的效能和評(píng)價(jià)每一分析批中未知樣品分析結(jié)果的完整性和正確性。體內(nèi)藥物測(cè)定用生物樣品分析方法的建立和驗(yàn)證

應(yīng)在生物樣品分析方法確證完成之后開(kāi)始測(cè)試未知樣品。推薦由獨(dú)立的人員配制不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品對(duì)分析方法進(jìn)行考核。每個(gè)分析批生物樣品測(cè)定時(shí)應(yīng)建立新的標(biāo)準(zhǔn)曲線，并隨行測(cè)定高、中、低三個(gè)濃度的質(zhì)控樣品。每個(gè)濃度至少雙樣本。質(zhì)控樣品測(cè)定結(jié)果的偏差一般應(yīng)小于15%，低濃度點(diǎn)偏差一般應(yīng)小于20%，最多允許1/3不在同一濃度的質(zhì)控樣品結(jié)果超限。體內(nèi)藥物測(cè)定用生物樣品分析方法的建立和驗(yàn)證

（8）微生物學(xué)和免疫學(xué)分析：上述原則基本適用于生物學(xué)和微生物學(xué)或免疫學(xué)分析，但在方法確證中應(yīng)考慮到其特殊性。微生物學(xué)或免疫學(xué)分析的標(biāo)準(zhǔn)曲線本質(zhì)上是非線性的。結(jié)果的準(zhǔn)確度是關(guān)鍵的因素。體內(nèi)藥物測(cè)定用生物樣品分析方法的建立和驗(yàn)證

3.分析數(shù)據(jù)的報(bào)告

研究報(bào)告應(yīng)包括對(duì)測(cè)定方法的詳細(xì)描述：提供典型的色譜圖：至少要求提供空白生物樣品色譜圖，空白生物樣品體外加入標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖以及用藥后生物樣品的色譜圖。校正曲線應(yīng)提供測(cè)定數(shù)據(jù)及校正曲線，回歸方程和相關(guān)系數(shù)（r），r要求大于0.99；生物學(xué)、微生物學(xué)和免疫學(xué)方法r要求大于0.95。提供測(cè)定的精密度和準(zhǔn)確度，測(cè)定的最低定量限，提取回收率，樣品穩(wěn)定性和質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)。體內(nèi)藥物測(cè)定用生物樣品分析方法的建立和驗(yàn)證

三、仿制常釋制劑的生物等效性

1.目的：以便申報(bào)者通過(guò)這一試驗(yàn)進(jìn)入常釋制劑簡(jiǎn)易申請(qǐng)。2.管理要求①?lài)?guó)家藥品監(jiān)督管理局為法定受理和批準(zhǔn)仿制藥品簡(jiǎn)易申請(qǐng)的權(quán)利機(jī)構(gòu)。常釋制劑的簡(jiǎn)易申請(qǐng)必須證明其仿制藥品與參比藥品在藥學(xué)上和生物學(xué)上具有等效性。②仿制藥品的藥學(xué)等效性：仿制藥品與參比藥品比較必須滿足藥學(xué)等效性的條件，即：相同活性成分，相同劑型，相同規(guī)格，相同給藥途徑，相同給藥劑量和給藥方法，但不要求輔料和釋放機(jī)制與參比制劑相同。③生物等效性：要求證明仿制藥品與指定參比藥品生物等效，為此必須按此指南進(jìn)行一系列生物等效試驗(yàn)。④在進(jìn)行生物等效性試驗(yàn)前，必須按中國(guó)藥典要求進(jìn)行體外溶出度實(shí)驗(yàn)。

仿制常釋制劑的生物等效性

3.生物等效性的基本要求申報(bào)者申報(bào)的常釋制劑仿制藥品的人體生物等效性試驗(yàn)必須證明兩制劑的吸收速度和程度無(wú)顯著差異，主要藥代參數(shù)（AUC、Cmax、Tmax）經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理等效。為滿足仿制藥品與參比藥品生物等效的基本要求，必須進(jìn)行單劑量空腹交叉試驗(yàn)：以仿制藥品與參比藥品相同劑量進(jìn)行單劑量二周期二處理的隨機(jī)交叉試驗(yàn)。4.單劑量空腹交叉試驗(yàn)(1)設(shè)計(jì)在健康受試者進(jìn)行的本雙交叉試驗(yàn)為單劑量、二處理、二周期、二順序的交叉試驗(yàn)。仿制常釋制劑的生物等效性(2)要求①仿制藥品與參比藥品的服用劑量相同；所用劑量一般應(yīng)與臨床用藥劑量一致；在測(cè)定靈敏度有限時(shí)，可適當(dāng)增加劑量時(shí)，也不得超過(guò)臨床最大劑量；②受試者應(yīng)隨機(jī)分組，二組例數(shù)相同；③二期試驗(yàn)的清洗期應(yīng)大于該藥的7倍半衰期，一般應(yīng)間隔一周或更長(zhǎng)時(shí)間；④試驗(yàn)方案必須經(jīng)過(guò)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)討論批準(zhǔn)。仿制常釋制劑的生物等效性

(3)試驗(yàn)條件①研究機(jī)構(gòu)必須是符合GCP規(guī)范的臨床藥理研究部門(mén)；②研究機(jī)構(gòu)必須有一定的數(shù)量的不同學(xué)科的研究人員；③研究機(jī)構(gòu)必須具備一定的分析測(cè)試條件；④在獲得正式批件后，提出的試驗(yàn)方案必須經(jīng)過(guò)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)討論通過(guò)后執(zhí)行。仿制常釋制劑的生物等效性

(4)試驗(yàn)藥品和參比藥品①試驗(yàn)藥品必須是經(jīng)藥政管理部門(mén)審核同意進(jìn)行人體生物等效性試驗(yàn)的試驗(yàn)藥品；②參比藥品必須是經(jīng)檢驗(yàn)合格已上市藥品（進(jìn)口藥品國(guó)內(nèi)未上市的不能作為參比）；③申辦單位必須提供試驗(yàn)藥品和參比藥品的溶出度數(shù)據(jù)。仿制常釋制劑的生物等效性

(5)受試者①例數(shù)：一般不少于18例，在某些情況下，應(yīng)根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)要求確定例數(shù)。②年齡和性別：18-45歲，同批試驗(yàn)者的年齡范圍不得相差10歲，除特殊要求外，一般為男性受試者。③體重：按體重指數(shù)（體重kg/身高m2）評(píng)價(jià)，在20-24范圍內(nèi)；或按標(biāo)準(zhǔn)體重（(身高cm-80)×0.7或(身高cm-170)×0.6+62）±10評(píng)價(jià)。④病史、體格檢查、臨床實(shí)驗(yàn)室檢查（血液學(xué)、血液生化、心電圖等），有特殊要求時(shí)，應(yīng)增加相應(yīng)檢查項(xiàng)目（除降糖藥外可不查血糖