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文檔簡介

年產100萬株梔子植物組培實驗方案設計目錄:第一章梔子花概述第二章功能說明一、整個工程的功能整二、梔子組織培養實驗室說明第三章土建工程一、組培實驗室平面圖二、工程平面圖第四章組培方案第五章主要設備第六章資金預算第七章市場前景一、梔子的市場展望二、中國梔子市場現狀及具分析三、效益分析第一章梔子花概述梔子花又名梔子,黃梔子,原產中國。喜溫暖濕潤和陽光充足環境,較耐寒,耐半陰,怕積水,要求疏松、肥沃和酸性的沙壤土。屬茜草科、梔子屬。常綠灌木。小枝綠色,葉對生,革質呈長橢圓形,有光澤。花腋生,有短梗,肉質。果實卵狀至長橢圓狀,有5-9條翅狀直棱,1室;種子很多,嵌生于肉質胎座上。5—7月開花,花、葉、果皆美,花芳香四溢。根、葉、果實均可入藥,有瀉火除煩,清熱利尿,涼血解毒之功效。梔(zhī)子花的話語是“永恒的愛,一生守侯和喜悅“。傳說中梔子花的花語是等待的愛情。梔子的功效與作用梔子花根的【功能主治】

清熱,涼血,解毒。治感冒高熱,黃疸型肝炎,吐血,鼻衄,菌痢,淋病,腎炎水腫,瘡癰腫毒。

①《分類草藥性》:治婦女氣血不和。

②《廣西中藥志》:治牙痛。

③《四川中藥志》:開心竅,解心熱,通小便。治黃疸,吐血,痢血,五淋,跌打。

④廣州部隊《常用中草藥手冊》:清熱解毒,涼血瀉火。治黃疸型肝炎,蠶豆黃,感冒高熱,菌痢,腎炎水腫,鼻衄,口舌生瘡,乳腺炎,瘡瘍腫毒。梔子花葉【功能主治】活血消腫;清熱解毒。主跌打損傷;疔毒;痔瘡;下疳第二章功能說明一、整個工程的功能整個工程的功能是要能夠在預定的時間里培養出一定數目的苗子(100萬),達到目標,實現市場化的要求。二、梔子組織培養實驗室說明在進行植物組織培養工作之前,首先應對工作中需要哪些最基本的設備條件有個全面的了解,以便因地制宜地利用現有房屋,或新建、改建實驗室。實驗室的大小取決于工作的目的和規模。以工廠化生產為目的,實驗室規模太小,則會限制生產,影響效率。在設計組織培養實驗室時,應按組織培養程序來沒計,避免某些環節倒排,引起日后工作混亂。植物組織培養是在嚴格無菌的條件下進行的。要做到無菌的條件,需要一定的設備、器材和用具,同時還需要人工控制溫度、光照、濕度等培養條件。

實驗室設計原則:保證無菌操作,達到工作方便,防止污染。

實驗室組成:化學實驗室、洗滌菌室、無菌操作室(接種室)、培養室、細胞學實驗室、其他小型儀器設備。(一)基本實驗室基本實驗室包括準備室、洗滌滅菌室、無菌操作室、培養室、緩沖間,是組織培養實驗所必須具備的基本條件。1、準備室(化學實驗室)功能:又叫化學實驗室,進行一切與實驗有關的準備工作:完成所使用的各種藥品的貯備、稱量、溶解、器皿洗滌、培養基配制與分裝、培養基和培養器皿的滅菌、培養材料的預處理等。要求:有20M2。要寬敞明亮、以便于放置多個實驗臺和相關設備,方便多人同時工作;同時要求通風條件好,便于氣體交換;實驗室地面應便于清潔,并應進行防滑處理。分類:分體式-研究性質實驗室,分開的若干房間將準備室分解為藥品貯藏室、培養基配制與洗滌室和滅菌室等,功能明確,便于管理,但不適于大規模生產。通間式-規模化實驗室,準備室一般設計成大的通間,使試驗操作的各個環節在同一房間內按程序完成。準備試驗的過程在同一空間進行,便于程序化操作與管理,試驗中減少各環節間的銜接時間,從而提高工作效率。此外還便于培養基配制、分裝和滅菌的自動化操作程序設計,從而減少規模化生產的人工勞動,更便于無菌條件的控制和標準化操作體系的建立。設備:準備室應具備實驗臺、藥品柜、水池、儀器、藥品、防塵櫥(放置培養容器)、冰箱、天平、蒸餾水器、酸度計及常用的培養基配制用玻璃儀器等。2、洗滌滅菌室功能:完成各種器具的洗滌、干燥、保存、培養基的滅菌等。要求:洗滌滅菌室根據工作量的大小決定其大小,本實驗室面積控制在40M2。在實驗室的一側設置專用的洗滌水槽,用來清洗玻璃器皿。中央實驗臺還應配置2個水槽,用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大,可以購置一臺洗瓶機。準備1-2個洗液缸,專門用于洗滌對潔凈度要求很高的玻璃器皿,地面應耐濕并排水良好。設備:水池、落水架、中央實驗臺、高壓滅菌鍋、超聲波清洗器、干燥滅菌器(如烘箱)等。3、緩沖間功能:是進入無菌室前的一個緩沖場地,減少人體從外界帶入的塵埃等污染物。工作人員在此換上工作服、拖鞋,戴上口罩,才能進入無菌室和培養室。進入無菌操作室前在此更衣換鞋,以減少進出時帶入接種室雜菌。要求:緩沖間需5M2設備:1-2盞紫外燈、水槽、實驗臺、鞋帽架、柜子、滅菌后的工作服、拖鞋、口罩。4、無菌操作室(接種室)功能:也叫接種室,主要用于植物材料的消毒、接種、培養物的轉移、試管苗的繼代、原生質體的制備以及一切需要進行無菌操作的技術程序,是植物離體培養研究或生產中最關鍵的一步。要求:接種室宜小不宜大,一般7~8平米(10-20平米)即可,本實驗室定為15M2。一般新建實驗室的無菌室在使用之前應進行滅菌處理,處理方法是甲醛和高錳酸鉀熏蒸,并需定期滅菌處理,還可用紫外線照射1-2h/周,或每次使用前照射10-30min。設備:紫外燈、空調、解剖鏡、消毒器、酒精燈、接種器械(接種鑷子、剪刀、解剖刀、接種針),實驗臺和擱架,還有超凈工作臺和整套滅菌接種儀器、藥品、時鐘等。5、培養室功能:對接種到培養瓶等器皿中的植物離體材料進行控制條件下的培養,無論是研究性實驗室還是生產性實驗材料進行培養的場所。要求:約需10-20平方米左右,培養室的大小可根據需要培養架的大小、數目、及其他附屬設備而定,其設計以充分利用空間和節省能源為原則。本實驗室定為20M2為了控制培養室的溫度和光照時間及其強度,培養室的房間不要窗戶,但應當留一個通氣窗,并安上排氣扇。室內溫度由空調控制,光照由日光燈控制。天花板和內墻最好用塑料鋼板裝修,地面用水磨石或瓷磚鋪設,一般要分兩間,一為光照培養室,一為暗培養室。培養室外應有一預備間或走廊。培養材料放在培養架上培養。培養架大多由金屬制成,一般設5層,最低一層離地高約lOcm,其他每層間隔30cm左右,培養架即高1.7m左右。培養架長度都是根據日光燈的長度而設計,如采用40W日光燈,則長I.3m,30W的長lm,寬度一般為60cm。日光燈一般用40W,固定在培養架的側面或擱板的下面,每層有兩支日光燈,距離在20cm,光照強度為2000-3000lx。培養室最重要的因子是溫度,一般保持在20—27℃設備:培養架(控溫控光控濕)、搖床、轉床、自動控時器、紫外燈、光照培養箱或人工氣候箱、生化培養箱、邊臺實驗臺用于拍攝培養物生長狀況,除濕機、顯微鏡、溫濕度計、空調等。(二)輔助實驗室根據研究或生產的需要而配套設置的專門實驗室,主要用于細胞學觀察和生理生化分析等。1、細胞學實驗室功能:用于對培養物的觀察分析與培養物的計數,對培養材料進行細胞學鑒定和研究,由制片室和顯微觀察室組成。制片是獲取顯微觀察數據的基礎,配備有切片機、磨刀機、溫箱及樣品處理和切片染色的設備。應有通風柜和廢液處理設施。顯微觀察室主要是顯微鏡和圖像拍攝、處理設備。要求:明亮、清潔、干燥、防止潮濕和灰塵污染。設備:雙筒實體顯微鏡、顯微鏡、倒置顯微鏡等。2、生化分析實驗室功能:培養細胞產物為主要目的的實驗室,應建立相應的分析化驗實驗室,隨時對培養物成分進行取樣檢查。大型次生代謝物生產,還需有效分離實驗室。第三章土建工程一、組培實驗室平面圖高壓滅菌器高壓滅菌器水槽天平冰箱儀器藥品柜工作臺培養瓶架烘箱化學實驗室20M培養室20M緩沖間5M超凈工作臺培養架推拉門滅菌待用培養瓶架培養架培養架無菌室15M二、工程平面圖(總面積26000M2緩沖室展覽大廳緩沖室展覽大廳組培大樓大門組培總倉庫二樓化學室室無菌操作室培養室一樓洗滌及滅菌室室組培基地組培基地馴化室溫室苗圃圃馴化室面積100㎡,里面配有空調、加濕器、恒溫恒濕控制儀、噴霧器、通風口、必要的殺蟲劑等馴化室面積100㎡,里面配有空調、加濕器、恒溫恒濕控制儀、噴霧器、通風口、必要的殺蟲劑等溫室:面積200㎡,有溫度控制裝置、通風口、殺蟲工具及藥劑。溫室采用鋼架塑料薄膜形式,薄膜每年更換一次。組培方案方案一:取一、二年生的幼芽,用自來水沖洗,在無菌條件下,先用75%酒精浸泡30秒鐘,然后置于0.1%升汞溶液中處理10~一14分鐘,最后用無菌水沖洗5~6次。把經過消毒滅菌后的外殖體用無菌吸水紙吸干水分,將葉片一層層剝掉,露出芽點,接種到Ms+6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L(單位下同)的培養基上,pH值為6.0,培養溫度22~27℃,每天光照12小時,光照強度1500—2000Ix,15天后芽點開始萌動并生長,35天左右莖段芽點誘導成0.2.1.0cm叢生芽數個。將誘導的叢生芽切下,接種于MS+6-BA3.0+NAA0.2的培養基中,經過約30天的培養,腋芽基部開始形成3~5個叢生狀的不定芽,而愈傷組織則形成長滿大量不定芽的芽塊,這些芽塊可用于大量增殖。將30天左右,高約3.0em的增殖芽從芽塊上切下,轉人生根培養基1/2MS+6-BA2.0+NAA0.1培養15天左右,產生1.0—3.0cm方案二:外植體的采集、滅菌:從田間或盆栽取回整株梔子,用自來水沖洗干凈外表泥土。剝去植株外層葉片及葉鞘,切掉植株根部和大部分葉片。用75%酒精浸泡15秒鐘,再用0.1%升汞消毒15分鐘,最后用無菌水沖洗4—5次。把材料縱切成兩小塊,用于接種。培養基和培養方法:采用MS為培養基,附加蔗糖3%、瓊脂0.5%以及不同種類和濃度的激素,PH5.8,培養溫度28±1℃,光強2000Lux,每天光照10—12小時。將前面的材料小塊,接種在MS+6-BA3.5mg/L十NAA0.2mg/L的初代培養基上,培養15天后,頂芽開始生長。為減少褐色分泌物的影響,20天后轉移到同樣的新鮮培養基上,5—7天后肢芽萌動生長。20天后每個外植體可長出3—4個小芽。小芽長至1—2厘米時切成單芽,轉入繼代培養基MS+6-BA4mg/L十IBA0.3mg/L。30天后形成叢生芽,每叢有6-8個小芽。以后可多次分割繼代增殖。將長約2—3厘米的單芽,轉人生根培養基1/2MS+NAA2mg/L十0.3%活性碳,15天后即可生根。30天后,組培苗株高7—10厘米,葉片3-5張,葉色濃綠,有粗牡白根4—移栽和栽培管理:移栽前3天,打開瓶蓋,讓組培苗逐漸適應外界氣候。小心地把苗從培養瓶中取出,洗凈基部培養基,移栽于塑料篩或沙床中。栽培基質按塘泥、腐殖上、河砂、椰糖(或珍珠巖)2∶1∶1∶1混合配制。掌握移栽深度“深不埋心,淺不露根”,保持空氣溫度70—80%,移栽成活率達80%以上,小苗移栽成活后即可上盆種植或大田栽植。梔子的大田種植宜選擇陽光充足、排水良好、肥沃疏松的砂壤土地塊。多施農家肥,防止清水。第五章主要設備設備:(①實驗設備;②無菌操作設備;③滅菌設備;④培養設備;⑤接種工具等5個方面。也就是說,與一般的化學實驗室相比,需要加上無菌和組織培專用的設備。)組培室最基本的實驗設備指實驗臺、晾干架、藥品柜、冰箱、烘箱、溫箱、攪拌器、離心機、電爐、蒸餾器、天平、ph計、高壓滅菌鍋、培養基分裝器,以及各種玻璃器皿,如燒杯、培養皿、三角瓶、量筒、滴管、移液管、定容瓶等。此外,還應當有培養與接種方面的設備與用具,如溫濕度調節設備、日光燈、培養架、搖床或轉床(供懸浮培養用)、各種類型的培養箱(可調節溫度、濕度、光照等)、各種規格的三角瓶、試管、鑷子、剪刀、解剖刀、接種針、酒精燈等。第六章資金預算對年產100萬梔子組培苗的工廠化育苗其成本預算、成本構成進行了分析和計算,總計預算金額:為120萬,除了固定的資金外,其余作為流動資金。以下為詳細預算表:建筑預算表:名稱面積(M2)單價(元)金額(萬元)建筑預算一樓展覽大廳100100010組培總倉庫1006006其他506003二樓洗滌及滅菌室5010005化學室8010008無菌操作室5010005緩沖間2010002培養室808006.4合計53045.4樓內儀器設備藥品等預算表:樓內設備預算設備名稱數量規格單價(元)金額(萬元)高壓滅菌器2400L35000.7水槽51M800.04烘箱11000×800×80032000.32培養架65×2×1.88000.48培養瓶5000015操作臺34M10001.2冰箱21200×1000×160040000.8PH計220000.4試劑柜、藥瓶柜及器械柜310000.3電子天平20.018000.16分析天平20.000135000.75蒸餾水制備器120升/時10000.1超凈工作臺4雙人單面1150004.6恒溫培養箱230-10015000.3空調21.5-3匹30000.6日光燈30030W40.12化學藥品500005包扎線及封口膜50000.5工具如剪刀等2000.02其他2合計23.39組培基地預算表:組培基地預算面積600平米,基地內設備與建筑預算在20萬元左右預算總金額:金額總計88.79萬元第七章市場前景一、梔子的前景由于梔子藍色素與其他紅黃品系的天然色素調和后能產生一系列藍綠變化的色調,可以開發出多種顏色的實用色素。在制取梔子藍的過程中,控制不同的反應條件還可生產出梔子紅色素。由梔子黃、藍、紅三元色,可以調制出如梔子棣、紫等其他的顏色。因此,開發梔子色素資源具有廣闊的前景。用梔子花采用浸提法可生產梔子花浸膏(浸膏得率0.1%~0.3%),梔子花浸膏可廣泛用于化妝品香料和食品香料。采用水蒸氣蒸餾法可生產梔子花油(得油率0.02%)。梔子花油可配制多種花香型香水、香皂、化妝品香精。此外,用減壓分餾方法將梔子花油的乙酸芐酯及乙酸芳樟酯單離出來,可作為日用化妝品常用的主香劑或協調劑,也常用于食品,如口香糖的香精。二、中國梔子市場現狀及具分析

我國是一個擁有13億人口的大國,有著廣闊的消費市場,隨著改革開放,人民收入水平逐步提高。從消費結構看,人們用于食品上的消費支出比例在逐漸下降。而用于穿、用方面的消費支出比例在逐漸增加。我國的恩格爾系數由80年代的56%下降的1997年的52%,其中城市部分已達48%。逐步提高的生活水平、快速的生活節奏和時尚化的現代文明改變著人們的消費觀念和生活方式,人們越來越注重生活質量。從消費心理看,人們越來越偏愛天然產品、方便產品,人們的保健、美容意識越來越強,而梔子這種神奇的常綠植物所具有的天然、保健和醫療等性能恰恰適合我國目前社會的、經濟的和人們心理的需求趨向。

目前,在我國消費品市場上,梔子制品主要在化妝品領域發展。1985年我國化妝品銷售額為10億元,1996年銷售額約220億元,1997年約253億元,比1996年增長15%。中國化妝品行業2000年計劃工業總產值為300億元人民幣,出口創匯15億美元,2010年計劃工業總產值達800億萬人民幣,出口可達5億美元。然而,我國梔子制品產值至今不足1億元。如果我國梔子化妝品能占10%,目前可有25億元銷售額,至2010年可達80億元。而梔子制品的主要生產國美國梔子產業產值現已達20億美元。據美國人對中國梔子市場的調查推測,中國在未來的5~8年間僅含梔子化妝品的銷售額就可達10億美元,合80多億元人民幣,是我國目前全部梔子產品產值的80倍,若屆時我國化妝品總產值達500億元,則含梔子化妝品可占全部化妝品份額的16%。在保健品、食品和藥品行業,我國梔子產品還沒有顯示出大的發展勢頭,但國外梔子食品和藥品的消費已很普遍,如梔子糕點、梔子飲料、梔子軟膠囊、梔子調料、梔子快餐等等。如果我國發展趨向與國外雷同,梔子保健食品和藥品的需求將不亞于化妝品。近年來美、日、韓等國已看好中國梔子市場發展潛力,準備大舉進攻中國市場。目前我國梔子種植約有1000公頃,梔子制品企業僅十多家,使用梔子添加劑的企業不足30家,產品品種30余種,產值1億元人民幣,說明我國梔子產業目前還遠遠不能滿足市場。

國家已將梔子產業列為科技扶貧的發展項目,一些地方政府也把梔子產業列為農業項目、科技綜合開發項目,對梔子研究和產業發展給予政策支持,是我國梔子市場發展的巨大加速力。從目前態勢看,有廣大的梔子產品發展空間和市場潛力。

總之,梔子產業是高附加值和高技術的生物工程產業,它將成為21世紀保健食品和化妝品行業中的支柱,將會為我國的輕工業作出巨大貢獻。三、效益分析梔子的組培繁殖很快。在最佳培養基和培養條件下,一年內,由1株可繁殖10000—12000株組培苗。組培苗大田種植半年左右,植株長高20-30厘米,現市場價每株2-3元;一年后,株高40一50厘米,葉片12一15張,市場價為每株10—15元。再者,從梔子花中提取化學成分可用于化妝品香料和食品香料,以及醫療

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