FISH技術在臨床中的應用基因科技（上海）有限公司FISH技術在臨床中的應用基因科技（上海）有限公司一、如何正確選擇探針二、如何正確使用探針三、臨床應用—胃癌

一、如何正確選擇探針一、如何正確選擇探針一、如何正確選擇探針FISH探針種類

染色體計數探針（CEP)位點特異性標識分子（LSI）端粒探針染色體結構著絲粒短臂長臂-端粒(TTAGGG)n特定區域或基因端粒(TTAGGG)nFISH探針種類染色體計數探針（CEP)染色體結構著絲粒短FISH技術在臨床中的應用課件HicksDG,TubbsRR.AssessmentoftheHER2statusinbreastcancerbyfluorescenceinsituhybridization:atechnicalreviewwithinterpretiveguidelines.HumPathol.2005Mar;36(3):250-61.RatioofHER2genetoChromosome17copynumberRatio<2;HER-2geneamplificationnotobservedRatio2;HER-2geneamplificationobservedPathVysionDNAProbesLSIHER-2/neu&CEP17~225.7kbHicksDG,TubbsRR.Assessment探針設計檢測遺傳物質的得與失在單個細胞核內針對某個特定靶分子檢測到多于或少于2個探針信號被認為異常<<正常異常異常探針設計檢測遺傳物質的得與失<<正常異常異常探針設計-雙色單融探針（DC/SF）染色體、基因重排檢測—已知斷點的平衡易位9正常異常BCRABLBCR22探針設計-雙色單融探針（DC/SF）染色體、基因重排檢使用指導存在假陽性如一個細胞中信號疊加。探針設計-雙色單融探針（DC/SF）使用指導探針設計-雙色單融探針（DC/SF）探針設計-雙色額外信號探針（ES）很好地克服了雙色單融出現的假陽性探針設計-雙色額外信號探針（ES）很好地克服了雙色單融出探針設計-雙色雙融探針（DC/DF）探針設計-雙色雙融探針（DC/DF）

使用指導

最敏感的探針（假陽性<1%）可用來檢測微小殘留性疾病不足是對融合信號不能區分使用指導FISH技術在臨床中的應用課件二、如何正確使用探針

二、如何正確使用探針FISH技術在臨床中的應用課件CE認證在歐洲，用于臨床診斷的醫療器械是需要的CE（CONFORMITEEUROPEENNE）認證的。近年來，在歐洲經濟區（歐洲聯盟、歐洲自由貿易協會成員國，瑞士除外）銷售的商品，CE標志的使用越來越多，CE標志加貼的商品表示其符合安全、衛生、環保和消費者保護等一系列歐洲指令所要表達的要求。目前，Abbott（Vysis）大約有336種FISH探針通過CE認證，并且這些探針具有廣泛的文獻支持（在產品說明書中列舉這些出文獻），這些文獻都客觀證明了VysisFISH探針在實際臨床上的應用的成功案例。例如P53探針，Abbott（Vysis）搜集了7篇相關文獻證明該探針在不同情況下的臨床應用的成功案例。再如應用于產后診斷的DiGeorge探針，在其說明書里面例舉了8篇相關文獻能證明Abbott（Vysis）探針成功診斷新生兒中的DiGeorge綜合征的成功案例。CE認證AbbottMolecular臨床產品AbbottMolecular臨床產品三、臨床應用三、臨床應用肺癌

肺癌FISH技術在臨床中的應用課件FISH技術在臨床中的應用課件FISH技術在臨床中的應用課件FISH技術在臨床中的應用課件FISH技術在臨床中的應用課件FISH技術在臨床中的應用課件FISH技術在臨床中的應用課件FISH技術在臨床中的應用課件FISH技術在臨床中的應用課件少突膠質瘤

少突膠質瘤FISH技術在臨床中的應用課件FISH技術在臨床中的應用課件FISH技術在臨床中的應用課件FISH技術在臨床中的應用課件FISH技術在臨床中的應用課件FISH技術在臨床中的應用課件Vysis1p36/1q25and19q13/19p13FISHProbeKitHunanMDTMeeting26Aug201436CompanyConfidential

?2014Abbott正常缺失Vysis1p36/1q25and19q13/19p1惡性神經膠質瘤惡性神經膠質瘤包括:WHOIII級–間變性星形細胞瘤，間變性少突膠質細胞瘤，間變混合性膠質細胞瘤WHOIV級–多形性膠質母細胞瘤多形性膠質母細胞瘤是高度惡性的膠質瘤，占近15％的原發性腦和中樞神經系統腫瘤和54%的所有神經膠質瘤1,2.高度侵襲性,幾乎無法治愈，患者迅速死亡高度未分化因不可預知的化學敏感性，故具有治療挑戰性多形性膠質母細胞瘤患者的預后非常差32年總生存期:26%4年總生存期:12%37NationalComprehensiveCancerNetwork.Availableat:.CentralBrainTumorRegistryoftheUnitedStates..StuppR,etal.NEnglJMed.2005;352:987-996.惡性神經膠質瘤惡性神經膠質瘤包括:37NationalC形態學上，小細胞型膠質母細胞瘤和間變性少突膠質細胞瘤都屬中等細胞密度，形態單一的膠質瘤；細胞膜清楚，胞質透亮；明顯活躍的核分裂、微血管增生或顯著壞死表明腫瘤小細胞型膠質母細胞瘤和間變性少突膠質細胞瘤的鑒別事關重要因為這兩種腫瘤的臨床表現和治療意義極其不同一些分子特征可用于鑒別小細胞型膠質母細胞瘤和間變性少突膠質細胞瘤：膠質母細胞瘤小細胞型幾乎普遍缺失10號染色體短臂60%–70%的小細胞型膠質母細胞瘤帶有EGFR基因擴增相反的，間變性少突膠質細胞瘤幾乎無10q缺失和EGFR基因擴增。大約60%的間變性少突膠質細胞瘤帶有1p/19q雜合性缺失.形態學上，小細胞型膠質母細胞瘤和間變性少突膠質細胞瘤都屬中等VysisEGFR/CEP7FISHProbeKitHunanMDTMeeting26Aug201439CompanyConfidential

?2014Abbott正常擴增VysisEGFR/CEP7FISHProbe10號染色體短臂缺失10qLoss10號染色體短臂缺失在源發和繼發性多形性膠質母細胞瘤里其中一個重要的特征10號染色體短臂缺失在間變性星形細胞瘤和多形性膠質母細胞瘤指示不良預后，生存期較短PTEN基因位于10號染色體短臂(10q23),其多肽具有對脂質和蛋白質的磷酸酶活性，也是其中一個在10號染色體短臂缺失與多形膠質母細胞瘤相關的候選基因在兒童多形性膠質母細胞瘤族群里10號染色體短臂缺失是唯一于患者不良預后相關的記物。EGFR基因擴增,1p/19q雜合性缺失和p16基因缺失并不能提示兒童病患的預后相反，在成人病患里并不提供獨立的預后信息HunanMDTMeeting26Aug201440CompanyConfidential

?2014AbbottFallonetal.JNeuropatholExpNeurol2004;63:314322.Horbinskietal.BrainPathology2011;21:57–73Nikiforova&Hamilton.ArchPatholLabMed.2011;135:558–56810號染色體短臂缺失10qLoss10號染色體短EGFR擴增

EGFR基因擴增在神經膠質瘤里只適用于鑒別診斷

。這基因改變不是個獨立的預后標記物。EGFR基因擴增是與多形性膠質母細胞瘤發病的相關的主要基因。EGFR

擴增基本上是GBM的特殊病癥，微觀標簽很容易認出，來自GBM浸潤邊緣的組織有時可以顯示腫瘤的本質，即使組織學標準不足以指定為WHOIV級。

HunanMDTMeeting26Aug201441CompanyConfidential

?2014AbbottFallonetal.JNeuropatholExpNeurol2004;63:314322.Horbinskietal.BrainPathology2011;21:57–73Nikiforova&Hamilton.ArchPatholLabMed.2011;135:558–568EGFR擴增EGFR基因擴增在神經膠質瘤里只適用于鑒別CDKN2A,p16CDKN2A基因是位于9號染色體長臂上,9p21,的一個腫瘤抑制基因CDKN2A純合性缺失可見于11%II級,47%III級,and60%IV級腫瘤1

CDKN2A基因的純合性缺失被認為是一種不良預后因子。18%原發性腦膠質瘤與43%復發性腦膠質瘤中p16缺失的發現進一步證實了其與腫瘤進展的相關性1HunanMDTMeeting26Aug201442CompanyConfidential

?2014AbbottFallonetal.JNeuropatholExpNeurol2004;63:314322.Horbinskietal.BrainPathology2011;21:57–73Nikiforova&Hamilton.ArchPatholLabMed.2011;135:558–568CDKN2A,p16CDKN2A基因是位于9號染色體長新靶向治療?ROS1基因重排陽性腫瘤對克唑替尼crizotinib(賽可瑞XALKORI)有顯著的治療活性ROS1是否成為膠質母細胞瘤里的新的靶向治療的靶點？HunanMDTMeeting26Aug201443CompanyConfidential

?2014Abbott新靶向治療?ROS1基因重排陽性腫瘤對克唑替尼crizo肉瘤

肉瘤肉瘤簡介骨和軟組織肉瘤是一組罕見且異質性的腫瘤。在成人里占所有腫瘤的少于5%，在兒童里卻占大約10%1.按照腫瘤細胞來源，這些腫瘤可分為兩大類1,2:原發于骨骨肉瘤Osteosarcoma(硬骨部分中形成）軟骨肉瘤Chondrosarcoma(軟骨中形成）

尤因氏肉瘤Ewing‘ssarcoma(骨髓組織中形成）原發于其他的組織，也稱為i軟組織肉瘤纖維肉瘤Fibrosarcomas和惡性纖維組織細胞瘤

（在纖維組織中形成）

脂肪肉瘤Liposarcomas平滑肌瘤Leiomyomas和橫紋肌肉瘤rhabdomyosarcomas(原發于肌肉）滑膜肉瘤Synovialsarcoma（在關節周圍的組織，通常是膝蓋關節周圍的組織中形成）HunanMDTMeeting26Aug201445CompanyConfidential

?2014AbbottOsuna&deAlava.ReviewsonRecentClinicalTrials2009;4:12-26.Antonescu.Histopathology2006;48:13-21.肉瘤簡介骨和軟組織肉瘤是一組罕見且異質性的腫瘤。在成人里占所肉瘤里的遺傳異常肉瘤很難診斷，亞型往往難以區分。然而準確診斷對評估預后以及選擇適當的療法十分重要

基于組織切片鏡檢的形態學診斷仍是肉瘤診斷的金標準輔助技術對于支持形態學診斷非常有用，尤其是采用FISH或基于PCR方法的分子檢測。

所有肉瘤約有1/3具有特定復發性染色體易位的特征，從而導致高度特異性基因融合，采用上述分子檢測方法很容易檢測。

這些易位往往是唯一的細胞遺傳學異常現象，且最可能具有致病重要性HunanMDTMeeting26Aug201446CompanyConfidential

?2014AbbottAntonescu.Histopathology2006;48:13-21.NCCNClinicalPracticeGuidelinesinOncology.SoftTissueSarcomas,version2.2014.Osuna&deAlava.ReviewsonRecentClinicalTrials2009;4:12-26.肉瘤里的遺傳異常肉瘤很難診斷，亞型往往難以區分。然而準確診斷肉瘤的分子診斷以下情況下應考慮分子診斷:在免疫組化或超微結構研究結果未有定論是良性和惡性腫瘤時的鑒別診斷例如，FUS易位檢測可區別低級別纖維粘液樣肉瘤和神經束膜瘤或其他良性纖維性或神經性細胞增生惡性類型的鑒別診斷例如，DDIT3易位可用于鑒別兒童里的粘液樣脂肪肉瘤和脂肪母細胞瘤

驗證異常的臨床表現（例如，異常年齡組或腫瘤部位）或非典型的免疫組化結果例如，具有典型尤因氏肉瘤表型的腫瘤如果發生在老年人身上，或者如果存在于內臟部位或不僅僅在病灶部位表達，則可能需要分子確認HunanMDTMeeting26Aug201447CompanyConfidential

?2014AbbottAntonescu.Histopathology2006;48:13-21.NCCNClinicalPracticeGuidelinesinOncology.SoftTissueSarcomas,version2.2014.Osuna&deAlava.ReviewsonRecentClinicalTrials2009;4:12-26.肉瘤的分子診斷以下情況下應考慮分子診斷:HunanMDTHunanMDTMeeting26Aug201448CompanyConfidential

?2014AbbottAntonescu.Histopathology2006;48:13-21.FOXO1EWSR1ALKSS18FUS/DDIT3HunanMDTMeeting48CompanyCon粘液樣腫瘤的鑒別

粘液樣軟組織腫瘤的鑒別診斷通常較困難，原因是有許多腫瘤有重疊的組織學特征，尤其當評估基于較小的活檢標本時

因這些腫瘤具有復發和轉移的潛在差異，故正確分類十分重要，手術前診斷可能影響手術和新輔助療法不同的復發性遺傳變異與不同的粘液樣腫瘤相關，即:骨骼外粘液樣軟骨肉瘤和粘液樣脂肪肉瘤中的EWSR1基因重排；

低級別纖維粘液樣肉瘤和粘液樣脂肪肉瘤中的FUS基因重排；以及粘液樣脂肪肉瘤中的DDIT3(之前稱為CHOP)基因重排，FUS作為伙伴基因。

HunanMDTMeeting26Aug201449CompanyConfidential

?2014AbbottDowns-Kellyetal.AmJSurgPathol2008;32:8–13.Wangetal.ModernPathology2008;21:1303–1310.Jainetal.IntJClinExpPathol2010;3(4):416-429.粘液樣腫瘤的鑒別粘液樣軟組織腫瘤的鑒別診斷通常較困難，原粘液樣腫瘤的鑒別FUS-DDIT3重排是粘液樣脂肪肉瘤的高靈敏度和特異性特征。形態相似的腫瘤里（如，有大量粘液樣變化的分化良好的脂肪肉瘤或粘液樣纖維肉瘤）未有檢測到FUS-DDIT3重排基因在很少的粘液樣脂肪肉瘤中也可檢測到另一種易位，t(12;22)(q13;q12)，既是EWSR1-DDIT3重排

多數骨骼外粘液樣軟骨肉瘤病例攜帶t(9;22)(q31;q12)EWSR1-NR4A3融合基因。其他涉及NR4A3基因的變體之前有人曾鑒定，包括t(9;17)(q31;q12)TAF15-NR4A3融合基因和t(9;15)(q31;q21)TCF12-NR4A3融合基因HunanMDTMeeting26Aug201450CompanyConfidential

?2014AbbottDowns-Kellyetal.AmJSurgPathol2008;32:8–13粘液樣腫瘤的鑒別FUS-DDIT3重排是粘液樣脂肪肉瘤的高VysisEWSR1BreakApartFISHProbeKitHunanMDTMeeting26Aug201451CompanyConfidential

?2014Abbott正常的EWSR1基因EWSR1基因重排VysisEWSR1BreakApartFISHPVysisDDIT3BreakApartFISHProbeKitHunanMDTMeeting26Aug201452CompanyConfidential

?2014Abbott正常的DDIT3基因DDIT3基因重排VysisDDIT3BreakApartFISHPVysisFUSBreakApartFISHProbeKitHunanMDTMeeting26Aug201453CompanyConfidential

?2014Abbott正常的FUS基因

FUS基因重排Downs-Kellyetal.AmJSurgPathol2008;32:8–13VysisFUSBreakApartFISHPro透明細胞肉瘤與惡性黑色素瘤的鑒別診斷透明細胞肉瘤是一種罕見而獨特的腫瘤，好發于青少年和青年四肢遠端的肌腱和腱膜中。透明細胞肉瘤很少發生在兒童人群，所報告的病例中只有2%發生在不到10歲的兒童身上。透明細胞肉瘤也稱為軟組織黑色素瘤，原因是這種腫瘤顯示的表型特征與惡性黑色素瘤相似，包括存在黑色素，具有黑素體的超微結構以及表達S-100蛋白質和黑色素瘤相關標志物的免疫表型。透明細胞肉瘤的鑒別診斷包括各種發生在成人和兒童身上的上皮腫瘤和間質腫瘤。鑒別診斷包括原發性和轉移性黑色素瘤、細胞型藍痣、惡性外周神經鞘腫瘤（MPNST）、滑膜肉瘤(SS)、纖維肉瘤、橫紋肌肉瘤(RMS)(尤其是腺泡狀RMS)、平滑肌肉瘤、顆粒細胞瘤、腺泡狀軟組織肉瘤(ASPS)，等等。多數透明細胞肉瘤病例中能檢測到特定的復發性染色體易位t(12;22)(q13;q12)或所產生的22q12上EWSR1基因和12q13上ATF1基因的融合基因。HunanMDTMeeting26Aug201454CompanyConfidential

?2014AbbottJainetal.IntJClinExpPathol2010;3(4):416-429.Pateletal.ModernPathology2005;18:1585–1590.Songetal.PathologyInternational2010;60:608–613.透明細胞肉瘤與惡性黑色素瘤的鑒別診斷透明細胞肉瘤是一種罕見而橫紋肌肉瘤的分子診斷橫紋肌肉瘤

是兒童和小于15歲的青少年最常見的軟組織肉瘤通常以肌肉塊形式出現在四肢、鼻竇或腹膜后腔橫紋肌肉瘤不同的組織學亞型包括腺泡狀（alveolarrhabdomyosarcoma）、胚胎性（embryonalrhabdomyosarcoma）和多形性(pleomorphicrhabdomyosarcoma).胚胎性橫紋肌肉瘤是最常見的橫紋肌肉瘤，占大約70%，最常出現在頭部和頸部區域以及泌尿生殖道；腺泡狀橫紋肌肉瘤占大約21%，最常出現在四肢胚胎性和腺泡狀橫紋肌肉瘤的臨床表現極其不同。胚胎性腫瘤有較良的預后一些特異性的遺傳變異可用于鑒別腺泡狀橫紋肌肉瘤，與其與FOXO1基因重排有關：t(2;13)(q35:q14)PAX3/FOXO1A（~70%ofARMS）t(1;13)(p36;q14)PAX7/FOXO1A（~10%–15%ofARMS）或其他變異HunanMDTMeeting26Aug201455CompanyConfidential

?2014AbbottDowns-Kellyetal.DiagnMolPathol2009;18:138–143.Jainetal.IntJClinExpPathol2010;3(4):416-429.Wexler&Ladanyi.JClinOncol

2010;28:132126-2128.橫紋肌肉瘤的分子診斷橫紋肌肉瘤是兒童和小于15歲的青少年最MolecularDiagnosisofRhabdomysarcomasPAX/FOXO1陽性ARMS的患者(ARMSp)預后明顯更差。(A)總體生存期；(B)無事件生存期。融合基因陰性ARMS(ARMSn)和胚胎性RMS(ERMS)患者的生存期無明顯不同ARMSp的轉移頻率百分比明顯高于ARMSn或ERMS.HunanMDTMeeting26Aug201456CompanyConfidential

?2014AbbottWiliamsonetal.JClinOncol2010;28:2151-2158MolecularDiagnosisofRhabdomVysisFOXO1BreakApartFISHProbeKitHunanMDTMeeting26Aug201457CompanyConfidential

?2014Abbott正常的FOXO1基因FOXO1基因重排Downs-Kellyetal.DiagnMolPathol2009;18:138–143.VysisFOXO1BreakApartFISHP炎性肌纖維母細胞瘤與ALK基因重排炎性肌纖維母細胞瘤(IMT)是一種獨特的間質瘤，其特征在于梭形細胞增生與炎性浸潤，好發于兒童和年輕人身上。通常出現在腹部，尤其是腹膜后腔或腸系膜，可能單發或多發，很少出現在其他軟組織部位。約50%ofIMT涉及染色體2p23上的ALK基因重排。報道也曾描述ALK的非整倍性-在無重排情況下拷貝數增多。

ALK的始終介入而且可與多個不同基因發生重排，意味著ALK組成性激活在IMT形成中的關鍵作用，以及這種激活中嵌合融合蛋白同源二聚作用機制的重要性ALK基因重排目前已是靶向治療其中一個重要的靶點HunanMDTMeeting26Aug201458CompanyConfidential

?2014AbbottButrynskietal.NEnglJMed.2010;363:1727–1733.Fisher.VirchowsArch2010;456:153–166.Jainetal.IntJClinExpPathol2010;3(4):416-429.炎性肌纖維母細胞瘤與ALK基因重排炎性肌纖維母細胞瘤(脂肪肉瘤中的MDM2分化良好脂肪肉瘤/非典型性脂肪瘤和去分化型脂肪肉瘤是老年人中最常見的惡性軟組織腫瘤。分化良好脂肪肉瘤/非典型性脂肪瘤和去分化型脂肪肉瘤可能很難與良性脂肪瘤和其他高級別肉瘤區分，尤其在缺乏分化良好脂肪肉瘤區域的穿刺活檢標本上脂肪肉瘤內常見環形染色體和巨大標記染色體。這些異常的染色體是由12q13-15區域的擴增組成，導致一些基因的擴增，包括最顯著的MDM2擴增MDM2通過降解TP53在控制細胞周期和腫瘤生成中起著重要的作用。HunanMDTMeeting26Aug201459CompanyConfidential

?2014AbbottSirventetal.AmJSurgPathol2007;31:1476–1489.Weaveretal.ModernPathology2008;21:943–949.脂肪肉瘤中的MDM2分化良好脂肪肉瘤/非典型性脂肪瘤和去分

VysisMDM2/CEP12

FISHProbeKitHunanMDTMeeting26Aug201460CompanyConfidential

?2014Abbott正常擴增

VysisMDM2/CEP12

FISHProbe脂肪肉瘤中的MDM2HunanMDTMeeting26Aug201461CompanyConfidential

?2014AbbottWeaveretal.ModernPathology2008;21:943–949.脂肪肉瘤中的MDM2HunanMDTMeeting61滑膜肉瘤的分子診斷滑膜肉瘤占了5–14%軟組織肉瘤，通常發生在年輕人的四肢。

滑膜肉瘤屬于高度侵襲性腫瘤，主要轉移到肺部。約90%滑膜肉瘤具有t(X;18)(p11.2;q11.2)的特征，這是因18號染色體上的SS18基因與X染色體上的SSX基因（SSX1、SSX2或SSX4）發生融合。

尤因氏肉瘤和低分化小細胞型滑膜肉瘤是難以鑒別。二者均表達CD99但缺乏細胞角蛋白。以EWSR1和SS18基因的分子診斷有助于區分這兩種腫瘤HunanMDTMeeting26Aug201462CompanyConfidential

?2014AbbottAmaryetal.ModernPathology2007;20:482–496.Jainetal.IntJClinExpPathol2010;3(4):416-429.滑膜肉瘤的分子診斷滑膜肉瘤占了5–14%軟組織肉瘤，通常發VysisSS18BreakApartFISHProbeKitHunanMDTMeeting26Aug201463CompanyConfidential

?2014Abbott正常的SS18基因SS18基因重排VysisSS18BreakApartFISHPrFISH在淋巴瘤里的臨床應用64FISH在淋巴瘤里的臨床應用64非霍奇金淋巴瘤(NHL)NHL的病理亞型超過30種B細胞來源占大約90%，其余為T/NK細胞來源NHL好發于淋巴結、胃腸相關淋巴組織等，亦可侵及骨髓和外周血大部分NHL都具有特定的遺傳學異常最新WHO分類明確指出各類亞型相關遺傳學異常，并作出說明其在診斷、預后方面的意義HunanMDTMeeting26Aug201465CompanyConfidential

?2014Abbott非霍奇金淋巴瘤(NHL)NHL的病理亞型超過30種Hun小細胞B-NHL臨床侵襲性相對較低，但目前治愈率較低通常包括濾泡性淋巴瘤FL（22%）套細胞淋巴瘤（6%）B-CLL/SLL（6%）淋巴漿細胞性淋巴瘤（6%）邊緣區淋巴瘤(NMZL,MALT,splenic,cutaneous)（5%）HunanMDTMeeting26Aug201466CompanyConfidential

?2014Abbott小細胞B-NHL臨床侵襲性相對較低，但目前治愈率較低HunFISH技術在臨床中的應用課件小細胞B-NHLHunanMDTMeeting26Aug201468CompanyConfidential

?2014AbbottCLLMCLFL免疫表型CD5(+)CD23(+)CD5(+)CD23(-)CD5(-)CD10(+)Bcl-2(+)Bcl-6(+)遺傳學異常t(11;14)IGH/CCDN1(-)t(14;18)IGH/BCL2(-)t(11;14)IGH/CCDN1(+)t(14;18)IGH/BCL2(-)t(11;14)IGH/CCDN1(-)t(14;18)IGH/BCL2(+)小細胞B-NHLHunanMDTMeeting68Co常見淋巴瘤—FLFL占NHL22–35%，僅次于DLBCL80–90%FL患者存在t(14;18)(q32;q21)

IGH/BCL2易位t(14;18)陰性患者通常存在BCL6基因重排(ABR)FLI~III級，惰性→高侵襲性FISH在FL診斷中應用：形態學不典型-濾泡結構不清或消失免疫表型不典型-

CD10(-)，Bcl2(-)樣本量不足（如穿刺等）-無法觀察到明確的濾泡結構HunanMDTMeeting26Aug201469CompanyConfidential

?2014Abbott常見淋巴瘤—FLFL占NHL22–35%，僅次套細胞淋巴瘤(MCL)

MCL占NHL~6%50-70%病例伴有t(11;14)(q13;q32)CCND1(CyclinD1)易位t(11;14)(q13;q32)通常涉及cyclinD1(CCND1/PRAD1/BCL1)基因和IGH基因CCND1過表達，導致細胞周期調控紊亂，細胞過度增殖傳統細胞遺傳學方法只能檢出70-75%t(11;14)(q13;q32)，但FISH方法可檢出率為80-100%t(11;14)(q13;q32)可用于CLL的鑒別診斷–

CLL，t(11;14)陰性HunanMDTMeeting26Aug201470CompanyConfidential

?2014Abbott套細胞淋巴瘤(MCL)MCL占NHL~6%Hunan案例63歲，男性，多發淺表淋巴結腫大形態學濾泡結構殘存細胞形態均一，染色質深染，生發中心樣免疫表型CD20(+),CD79a(+)CD10(+),Bcl-6(+)

（FL？）CD5(+),CD23(-),CyclinD1(+)（MCL？）HunanMDTMeeting26Aug201471CompanyConfidential

?2014Abbott案例63歲，男性，多發淺表淋巴結腫大HunanMDT侵襲性B細胞淋巴瘤HunanMDTMeeting26Aug201472CompanyConfidential

?2014Abbott臨床表現和病理特征多樣WHO2008分類列出多種亞型Jaffe&Pittaluga.HematologyAmSocHematolEduc

Program.2011;2011:506-14.WHO/NCCN指南相關的遺傳學特征：BCL2重排BCL6重排MYC重排侵襲性B細胞淋巴瘤HunanMDTMeeting72CoFISH技術在臨床中的應用課件彌漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)DLBCL占NHL中30-40%根據來源分為GCB、non-GC，包含多種亞型，形態學、免疫表型、細胞遺傳學及分子特征各有不同最常見遺傳學異常：t(3q27)BCL6rearrangement：20–40%t(14;18)(q32;q21)IGH/BCL2：10–40%t(8q34;14q32)c-MYC/IGH：5–10%HunanMDTMeeting26Aug201474CompanyConfidential

?2014Abbott彌漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)DLBCL占NHL伯基特淋巴瘤(BL)BL占NHL~2.5%需要與DLBCL鑒別診斷，治療方法迥異

遺傳學改變以c-MYC基因(8q)易位為主：

t(8;14)，c-MYC/IGH，75

-

85%；

t(2;8)(p12;q24)，IGK/MYC，~5%；

t(8;22)(q24;q11)，IGL