紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的基本操作第1頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

能認(rèn)知儀器組成、配套部件和控制面板閱讀說(shuō)明書(shū)，編寫(xiě)儀器操作規(guī)程能熟練操作紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)能對(duì)儀器進(jìn)行校驗(yàn)，和對(duì)儀器進(jìn)行日常維護(hù)與保養(yǎng)能力目標(biāo)第2頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

2005年中央12臺(tái)曾報(bào)道，上海市的蔡女士一家剛住進(jìn)新房沒(méi)多久，丈夫就得了白血病去世。通過(guò)檢測(cè)機(jī)構(gòu)對(duì)室內(nèi)的空氣質(zhì)量進(jìn)行一次檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)儲(chǔ)藏室和臥室中的甲醛含量竟然遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出標(biāo)準(zhǔn)值的三倍。

學(xué)生根據(jù)所查資料現(xiàn)場(chǎng)討論以決定各方法的優(yōu)劣

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《公共場(chǎng)所空氣中甲醛測(cè)定方法》（GB/T18204.26-2000）；第一法：酚試劑分光光度法

（仲裁法）；第二法：氣相色譜法。課程引入請(qǐng)大家思考，現(xiàn)代家裝過(guò)程中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)甲醛超標(biāo)，如何進(jìn)行測(cè)定？

第3頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月測(cè)定過(guò)程一打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)檢驗(yàn)吸收池的成套性（具體過(guò)程在后面內(nèi)容中操作）選擇工作波長(zhǎng)（按設(shè)定鍵，以及增加、減小按鈕，進(jìn)行設(shè)定）

第4頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月潤(rùn)洗比色皿，依次裝入?yún)⒈热芤汉蜏y(cè)量溶液參比溶液于光路中，透射比模式下同時(shí)調(diào)0和100%在吸光度模式下，測(cè)定測(cè)量溶液的吸光度選擇測(cè)量方式（按方式鍵選擇透射比模式與吸光度模式）

測(cè)定過(guò)程二學(xué)生自學(xué)儀器使用說(shuō)明書(shū)

學(xué)生閱讀儀器UV-7504使用說(shuō)明書(shū)

對(duì)照說(shuō)明書(shū),學(xué)生認(rèn)知儀器的主要組成部分第5頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月光源單色器吸收池檢測(cè)器信號(hào)顯示系統(tǒng)組成結(jié)構(gòu)第6頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月光源：提供符合要求的入射光。要求：在整個(gè)紫外光區(qū)或可見(jiàn)光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜，具有足夠的輻射強(qiáng)度、較好的穩(wěn)定性、較長(zhǎng)的使用壽命。紫外光源---氘燈(185-375nm)可見(jiàn)光源---鎢燈(320-1000nm)光源第7頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月單色器：將光源發(fā)射的復(fù)合光分解成連續(xù)光譜并可從中選出任一波長(zhǎng)單色光的光學(xué)系統(tǒng)。棱鏡單色器利用不同波長(zhǎng)的光在棱鏡內(nèi)折射率不同將復(fù)合光色散為單色光。光柵單色器一系列等寬、等距離的平行狹縫以光的衍射現(xiàn)象和干涉現(xiàn)象為基礎(chǔ)（平面反射光柵和平面凹面光柵）單色器單色器主要由狹縫、色散元件和透鏡系統(tǒng)組成。色散元件是棱鏡和反射光柵的組合狹縫和透鏡系統(tǒng)控制光的方向第8頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月吸收池：又叫比色皿，用于盛放待測(cè)溶液和決定透光液層厚度的器件。主要有石英吸收池和玻璃吸收池兩種。在紫外區(qū)須采用石英吸收池，可見(jiàn)區(qū)一般用吸收玻璃池。吸收池主要規(guī)格0.5cm、1.0cm、2.0cm、3.0cm和5.0cm注意事項(xiàng)：手執(zhí)兩側(cè)的毛面，盛放液體高度四分之三。第9頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月檢測(cè)器：利用光電效應(yīng)將透過(guò)吸收池的光信號(hào)變成可測(cè)的電信號(hào)。常用的檢測(cè)器有光電池、光電管及光電倍增管。檢測(cè)器

光電池

光電管光電倍增管第10頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月信號(hào)顯示器以檢流計(jì)或微安表指示儀表數(shù)字顯示和自動(dòng)記錄型裝置

信號(hào)顯示系統(tǒng)第11頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月請(qǐng)學(xué)生對(duì)其他類型的分光光度計(jì)認(rèn)知7230型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)其他型號(hào)儀器學(xué)生進(jìn)行儀器的基本操作訓(xùn)練第12頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月儀器操作規(guī)程學(xué)生總結(jié)、歸納并示范Uv7504儀器的操作規(guī)程。學(xué)生總結(jié)、歸納7230儀器的操作規(guī)程。第13頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月同學(xué)們根據(jù)教師的要求用白紙片遮住光路，改變波長(zhǎng)從750nm到400nm，觀察白紙片中顏色的變化。波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的準(zhǔn)確檢查譜釹濾光片吸收曲線苯蒸汽的吸收曲線儀器的校驗(yàn)一第14頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

波長(zhǎng)

/nm

溫度

/℃2352573133502518.213.751.322.9

的溶液的透射比以0.001mol.L-1HClO4為參比，以1cm的石英比色皿做吸收池，分別在235、257、313、350波長(zhǎng)處測(cè)定相應(yīng)溶液的透射比。儀器的校驗(yàn)二透射比正確度的檢驗(yàn)第15頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月JJG178-96規(guī)定：石英吸收池：220nm、蒸餾水；350nm、K2Cr2O70.001mol.L-1HClO4溶液；玻璃吸收池：600nm、蒸餾水；相對(duì)校正法：用一套比色皿裝待測(cè)試樣的溶劑，以其中一個(gè)為參比，測(cè)定其他吸收池的吸光度。若吸光度為零，或相等，即可配對(duì)。若不相等，可選最小吸光度值的作參比，測(cè)定其它的吸光度，求修正值。儀器的校驗(yàn)三吸收池成套性檢驗(yàn)第16頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

學(xué)生操作訓(xùn)練、教師指導(dǎo)學(xué)生操作，教師指導(dǎo)。隨機(jī)抽查學(xué)生進(jìn)行操作演示。學(xué)生評(píng)價(jià)。第17頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

日常維護(hù)、保養(yǎng)

對(duì)儀器工作環(huán)境的要求穩(wěn)固的工作臺(tái)溫度、濕度合適

儀器保養(yǎng)和維護(hù)方法儀器工作電源光源使用注意事項(xiàng)單色器使用注意事項(xiàng)正確使用吸收池第18頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

故障排除第19頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

故障排除第20頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月引入問(wèn)題：為什么分光光度法能測(cè)定空氣中甲醛的含量？主要是由于空氣中的甲醛與酚試劑反應(yīng)生成嗪，嗪在酸性溶液中被高鐵離子氧化形成蘭綠色化合物，可以對(duì)630nm的光產(chǎn)生選擇性吸收，而可以建立相應(yīng)的分析方法。問(wèn)題：為什么不同的物質(zhì)呈現(xiàn)不同的顏色？原因由于溶液對(duì)光的選擇性吸收引起的，溶液呈現(xiàn)的是被吸收物質(zhì)的互補(bǔ)色。硫酸銅溶液吸收黃光，呈現(xiàn)蘭色。高錳酸鉀溶液吸收綠色光，呈現(xiàn)紫紅色第21頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月單色光：具有同一波長(zhǎng)的光稱為單色光。復(fù)合光：含有多種波長(zhǎng)的光稱為復(fù)合光?；パa(bǔ)光：如果把適當(dāng)顏色的兩種光按一定強(qiáng)度比例混合，可合成白色光，這兩種顏色的光稱為互補(bǔ)色?？梢?jiàn)光：凡是能被肉眼感覺(jué)到的光稱為可見(jiàn)光。

幾種光的性質(zhì)紫外可見(jiàn)分光光度法概念紫外可見(jiàn)分光光度法是基于物質(zhì)分子對(duì)200-780nm區(qū)域光的選擇性吸收而建立起來(lái)的分析方法。第22頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月紫外可見(jiàn)分光光度法分類比色分析法：利用比較待測(cè)溶液本身的顏色或加入試劑后呈現(xiàn)的顏色深淺來(lái)測(cè)定溶液中待測(cè)物質(zhì)的濃度的方法按檢測(cè)器不同分為目視比色法和光電比色法。以人的眼睛來(lái)檢測(cè)顏色深淺的方法稱目視比色法；以光電轉(zhuǎn)換器為檢測(cè)器來(lái)區(qū)別顏色深淺的方法稱光電比色法；根據(jù)物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)的單色光的吸收程度不同而對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法稱為分光光度法。第23頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月紫外可見(jiàn)分光光度法特點(diǎn)

較高的靈敏度；適合于測(cè)定低含量和微量組分，而不適用于中高組分分析速度快，操作簡(jiǎn)便；價(jià)格低廉，應(yīng)用廣泛紫外可見(jiàn)分光光度法應(yīng)用

紫外吸收光譜可用于芳香化合物及含共軛體系化合物的鑒定與結(jié)構(gòu)分析紫外與可見(jiàn)分光光度法均可用于定量分析。紫外與可見(jiàn)分光光度法還可用于化學(xué)反應(yīng)平衡的研究。第24頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月按波長(zhǎng)范圍劃分：可見(jiàn)分光光度計(jì)（400-780nm）紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(200-1000nm)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)類型按光路劃分：?jiǎn)喂馐止夤舛扔?jì)雙光束分光光度計(jì)雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)第25頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月單光束分光光度計(jì)雙光束分光光度計(jì)雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)光路第26頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月吸收光譜曲線（定性分析）1-c(KMnO4)=1.56×10-4mol·L-12-c(KMnO4)=3.12×10-4mol·L-13-c(KMnO4)=4.68×10-4mol·L-1

KMnO4溶液的光吸收曲線

將不同波長(zhǎng)的光依次通過(guò)某一固定濃度和厚度的有色溶液，分別測(cè)出它們對(duì)各種波長(zhǎng)光的吸收程度（用吸光度A表示）。以波長(zhǎng)為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)作圖，畫(huà)出曲線，此曲線即稱為該物質(zhì)的光吸收曲線（或吸收光譜曲線）。溶液對(duì)不同波長(zhǎng)的光的吸收程度是不同的，存在最大吸收峰的位置稱為最大吸收波長(zhǎng)。不同濃度的溶液，其吸收曲線的形狀相似，最大吸收波長(zhǎng)也一樣。不同物質(zhì)的吸收曲線，其形狀和最大吸收波長(zhǎng)都各不相同，可利用吸收曲線來(lái)作為物質(zhì)定性分析的依據(jù)。第27頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月光的吸收程度與光程長(zhǎng)的關(guān)系？朗伯定律第28頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月比爾定律光的吸收程度與濃度的關(guān)系？第29頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月光吸收定律：幾個(gè)概念：入射光通量、透射光通量、透射比、吸光度、比例常數(shù)光吸收定律（定量分析）成立的條件：一是必須使用單色光二是吸收發(fā)生在均勻的介質(zhì)三是吸收過(guò)程中，吸收物質(zhì)互相不發(fā)生作用第30頁(yè)，課件共33頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月吸收系數(shù)的物理意義：?jiǎn)挝粷舛鹊娜芤阂簩泳€厚度為1cm時(shí)，在一定波長(zhǎng)下測(cè)得的吸光度。A=ε