微病毒感染的檢查方法與防治原則第1頁，課件共29頁，創作于2023年2月目的與要求了解病毒的診斷，抗病毒治療，病毒感染的預防。第2頁，課件共29頁，創作于2023年2月第一節病毒感染的檢查方法第3頁，課件共29頁，創作于2023年2月病毒感染的檢查檢測內容查病毒查特異性抗體病毒顆粒病毒抗原病毒核酸病毒酶類：如逆轉錄酶電鏡直接觀察光鏡檢查包涵體分離培養第4頁，課件共29頁，創作于2023年2月一、標本的采集與送檢原則基本與細菌相似，但應注意：

1.標本用“雙抗”或兩性霉素B處理

2.低溫保存，盡快送檢

3.血清學診斷采雙份血清第5頁，課件共29頁，創作于2023年2月二、病毒的分離與鑒定（一）病毒的分離培養

細胞培養（cell

culture）

雞胚接種（egginoculation）

動物接種（animalinoculation）第6頁，課件共29頁，創作于2023年2月1.雞胚培養

采用孵化9～14天的雞胚

絨毛尿囊膜

痘苗病毒、人類皰疹病毒

尿囊腔接種部位流感病毒、腮腺炎病毒

羊膜腔

流感病毒的初次分離

卵黃囊嗜神經病毒

第7頁，課件共29頁，創作于2023年2月第8頁，課件共29頁，創作于2023年2月1、雞胚培養優點：易管理，不帶微生物，成本較低缺點：操作程序復雜第9頁，課件共29頁，創作于2023年2月第10頁，課件共29頁，創作于2023年2月2.動物接種

應用：尚無敏感細胞的病毒培養

動物：兔、鼠、黑猩猩、猴等

優點：結果易觀察，可建立動物模型缺點：有飼養條件要求，費用高，動物體內常帶有潛伏病毒第11頁，課件共29頁，創作于2023年2月病毒的分離培養

3.細胞培養

單層細胞培養（monolayercellculture）

分類懸浮細胞培養（suspendedcellculture）原代細胞（primarycell）細胞種類二倍體細胞（diploidcell）傳代細胞系（continuouscellline）第12頁，課件共29頁，創作于2023年2月病毒的細胞培養細胞培養瓶單層細胞第13頁，課件共29頁，創作于2023年2月1．病毒增殖鑒定

(1)細胞病變效應（cytopathiceffect,

CPE）

①細胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落等（多數病毒）；②形成多核巨細胞或稱融合細胞（麻疹病毒、巨細胞病毒、呼吸道合胞病毒等）；③在培養細胞中形成包涵體（狂犬病病毒、麻疹病毒等）。（二）病毒的鑒定

第14頁，課件共29頁，創作于2023年2月①細胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落第15頁，課件共29頁，創作于2023年2月麻疹病毒感染細胞呼吸道合胞病毒感染細胞②形成多核巨細胞或稱融合細胞(1)細胞病變效應(cytopathiceffect,CPE)第16頁，課件共29頁，創作于2023年2月③形成包涵體(inclusionbody)(1)細胞病變效應(cytopathiceffect,CPE)第17頁，課件共29頁，創作于2023年2月腮腺炎病毒感染細胞(2)紅細胞吸附（hemadsorption）病毒囊膜表面血凝素(HA)＋紅細胞表面HA受體第18頁，課件共29頁，創作于2023年2月(3)干擾現象（interference）風疹病毒＋人胚腎細胞病毒增殖，CPE(－)埃可病毒＋人胚腎細胞病毒增殖，CPE(＋)＋人胚腎細胞風疹病毒？埃可病毒CPE(-)—風疹病毒(+)

埃可病毒(-)CPE(+)—風疹病毒(-)

埃可病毒(+)第19頁，課件共29頁，創作于2023年2月2.病毒數量與感染性測定1.蝕斑形成試驗

（plaqueformationtest）

2.50％組織細胞感染量（50％tissueculture

infectiousdose,TCID50）感染性病毒量第20頁，課件共29頁，創作于2023年2月2.病毒形態學鑒定電子顯微鏡：設備、操作復雜，應用受限光學顯微鏡：可見大病毒（痘類病毒），對一般病毒檢測意義不大第21頁，課件共29頁，創作于2023年2月3.病毒血清學鑒定

用已知的抗體，鑒定病毒種、型、亞型

(1)血凝抑制試驗--—正粘病毒型與亞型鑒定病毒＋雞紅細胞＝凝集（血凝試驗）病毒＋特異性抗體＋雞紅細胞＝不凝集

（血凝抑制試驗）

(2)免疫標記法（FIA、EIA、RIA）

——多種病毒鑒定第22頁，課件共29頁，創作于2023年2月三、病毒分子生物學鑒定抗原變異病毒基因的鑒定核酸擴增核酸雜交基因芯片基因測序第23頁，課件共29頁，創作于2023年2月四、病毒感染的血清學診斷應用：①采取標本分離病毒為時已晚②目前尚無分離此病毒的方法或難以分離的病毒③為證實所分離的病毒的臨床意義④進行血清流行病學調查等第24頁，課件共29頁，創作于2023年2月1.中和試驗（neutralizingtest）病毒＋中和抗體

病毒失去感染性

特點：特異性高，抗體維持時間長應用：人群免疫情況的調查臨床診斷少用第25頁，課件共29頁，創作于2023年2月五、病毒感染的快速診斷數小時內出結果病毒顆粒病毒成分（抗原或核酸）早期抗體檢測（IgM）第26頁，課件共29頁，創作于2023年2月病毒的快速診斷光鏡-----包涵體電鏡免疫熒光ELISA分子生物學技術雜交SouthernblotPCRNorthernblot第27頁，課件共29頁，創作于2023年2月第二節病毒感染的防治原則第28頁，課件共29頁，創作于2023年2月滅活疫苗（inactivatedvaccine）活疫苗（livingvaccine）重組載體疫苗（recombinantc