EAAL擴增活化的自體淋巴細胞治療(zhìliáo)腫瘤技術簡介

IntroductionofEAALTherapy第一頁，共七十三頁。整理課件腫瘤(zhǒngliú)免疫治療的機制MechanismsofCancerImmunotherapy通過調動機體自身的免疫系統，達到控制腫瘤生長，殺傷腫瘤細胞的目的。前提：腫瘤細胞有別于正常細胞腫瘤抗原腫瘤特異性T細胞免疫應答腫瘤特異性抗體(kàngtǐ)免疫應答天然免疫對腫瘤細胞的殺傷作用第二頁，共七十三頁。整理課件如何達到有效(yǒuxiào)的免疫治療效果有足夠可以識別腫瘤抗原的殺傷性T細胞機體的免疫環境有利于上述細胞發揮抗腫瘤功能Th1/Th2Treg這些(zhèxiē)T細胞可以到達腫瘤組織局部T細胞歸巢在腫瘤局部，這些T細胞可以發揮有效的殺傷功能腫瘤基質及腫瘤組織微環境第三頁，共七十三頁。整理課件腫瘤(zhǒngliú)疫苗過繼(guòjì)細胞免疫治療腫瘤(zhǒngliú)的免疫治療方法

ApprochesofCancerImmunotherapy第四頁，共七十三頁。整理課件細胞(xìbāo)免疫治療

CellularImmunotherapy包括腫瘤在內的多種慢性病的最重要的生物治療方法(fāngfǎ)之一腫瘤的細胞免疫治療：非特異性※LAK細胞※CIK細胞※EAAL細胞特異性※Provenge,樹突狀細胞

※腫瘤特異性T細胞

-其它慢性病的細胞免疫治療：※慢性病毒感染性疾病乙肝、丙肝艾滋病※慢性寄生蟲感染(gǎnrǎn)※糖尿病※多發性硬化癥※系統性紅斑狼瘡第五頁，共七十三頁。整理課件擴增活化(huóhuà)的自體淋巴細胞（EAAL）的定義自體免疫細胞治療技術CD3+T淋巴細胞為主（95.91%±0.24%），含少量NK細胞體外擴增活化腫瘤殺傷功能改進的LAK和CIK治療：細胞培養效率和腫瘤殺傷能力顯著增強EAAL是ExpandedActivatedAutologousLymphocytes（擴增活化的自體淋巴細胞）的簡稱。其定義是通過采取機體自身20-100ml靜脈血，分離獲得0.8-3x107外周血單個核細胞，經過體外無血清培養基培養，獲得以CD3細胞為主的，包含(bāohán)CD8+T淋巴細胞、CD4+T淋巴細胞、CD3+CD56+NKT細胞、NK細胞，細胞數量在3x109以上的活化的混合淋巴細胞，這些細胞在體外具有明確腫瘤殺傷功能。

第六頁，共七十三頁。整理課件EAAL技術(jìshù)特點使用無血清淋巴細胞培養基進行細胞培養，保證沒有潛在(qiánzài)的病源微生物感染不需使用(shǐyòng)單采機，對患者免疫系統沒有破壞作用細胞擴增的高效性和高活性:擴增效率約為2001000倍獨特的細胞培養工藝，少量外周血即可滿足多次細胞回輸的要求可與化療聯合，完全滿足多個化療療程對細胞治療次數和細胞治療數目的要求，從而產生較好的協同治療腫瘤效果。可進行多次、高頻治療，達到最好的治療效果第七頁，共七十三頁。整理課件EAAL技術的臨床-實驗室操作(cāozuò)流程外周血20-100ml擴增及活化(huóhuà)回輸100ml/次，1-8次培養(péiyǎng)及擴增14-35天收集誘導的殺傷細胞第八頁，共七十三頁。整理課件EAAL的作用機制(jīzhì)研究第九頁，共七十三頁。整理課件自體腫瘤(zhǒngliú)細胞的體外殺傷效應（IFN-γ）第十頁，共七十三頁。整理課件培養后的淋巴細胞與順鉑以不同序貫方式聯合(liánhé)對PLA-801D細胞的抑制率Groupinhibitedrates(%)QDDPEAALDDP+EAAL淋巴細胞作用前10h順鉑淋巴細胞作用前8h順鉑淋巴細胞作用前4h順鉑淋巴細胞作用同時順鉑淋巴細胞作用后4h順鉑淋巴細胞作用后8h順鉑淋巴細胞作用后10h順鉑46±1.741.7±3.035.8±1.327.1±2.418.5±1.316.7±2.214.0±0.916.6±0.416.6±0.416.6±0.416.6±0.416.6±0.416.6±0.416.6±0.488.1±0.64*88.9±0.16*96.7±1.99*55.8±0.33*73.6±0.67*66.2±0.12*53.2±0.14*1.6021.7322.0801.4242.2972.1691.885(注：聯合作用(zuòyòng)組、單順鉑組和單淋巴細胞作用(zuòyòng)組抑制率進行單因素方差分析,P<0.01*)

EAL聯合化療(huàliáo)的體外殺傷效果第十一頁，共七十三頁。整理課件EAL細胞的腫瘤(zhǒngliú)抗原特異性分析Donor

A2-01A2-02A2-03CancerAntigenNY-ESO-1BC(%)0.170.860.32AC(%)1.122.572.3Multiple6.592.997.19MAGE-1BC(%)0.390.070.1AC(%)0.251.150.51Multiple0.6416.435.10MAGE-3BC(%)0.450.060.07AC(%)0.280.360.36Multiple0.626.005.14MAGE-10BC(%)0.520.150.23AC(%)0.250.220.48Multiple0.481.472.09P53BC(%)0.631.130.78AC(%)5.2712.248.7Multiple8.3710.8311.15HIVBC(%)0.590.20.22AC(%)0.240.250.31Multiple0.411.251.41FLUBC(%)1.060.60.66AC(%)4.4411.7610.01Multiple4.1919.6015.17第十二頁，共七十三頁。整理課件EAAL在裸鼠體內(tǐnèi)

對HepG2形成腫瘤的抑制作用裸鼠注射(zhùshè)EAAL細胞的劑量分組組別注射渠道注射劑量(細胞數/只)注射液量(ml)每組裸鼠數量(個體號)每組腫瘤平均體積（mm3）每組腫瘤平均重量（g）G1陰性對照組微靜脈00.310(1M01–1M10)1444.690.96G2低劑量組微靜脈1.7×1050.310(2M11–2M20)1236.450.82G3中劑量組微靜脈5×1050.310(3M21–

3M30)979.910.73G4高劑量組微靜脈15×1050.310(4M31–

4M40)941.390.72G5陽性對照組腹腔2mg/kg10ml/kg10(4M41–

4M50)847.920.64p<0.05第十三頁，共七十三頁。整理課件G1G2G3G4G5第十四頁，共七十三頁。整理課件EAAL對患者體內免疫環境的改變(gǎibiàn)作用CD8+殺傷性T淋巴細胞比例上升NK細胞比例上升CD4/CD8T淋巴細胞比值下降分泌的IFN-γ細胞比例上升IFN-γ的分泌量上升經EAAL治療(zhìliáo)后，患者體內殺傷性淋巴細胞數量和比例顯著增加第十五頁，共七十三頁。整理課件EAAL為CD8+T細胞(xìbāo)為主細胞表面分子培養前的百分比（均值）培養后的百分比（均值）CD365.083.7CD433.210.6CD822.863.0CD4/CD81.90.2CD3+CD56+5.411.7CD3-CD16+12.611.8CD4+CD25+3.31.7第十六頁，共七十三頁。整理課件IL-2IFN-gIL-4IL-5TNF-ab-actin015(mg/ml)PHAABFigure5.Cytokinegeneexpressionbyexvivo-expandedTcells.ExpandedCyTcellswerere-stimulatedwithPHA(1and5mg/ml)for4hrandtotalRNAwasextractedfromthecellsandthegeneexpressionlevelsofIL-2,IFN-g,IL-4,IL-5,andTNF-awereanalyzedbyRT-PCR(A).Bandareaswereanalyzedusinganimageanalysissystems(Multi-Analyst,Bio-Rad,CA),anddatawerepresentedasratiosvs.b-actin,whichservedasaninternalcontrol(B).Representativeimagefromsample#4wasshown.EAAL細胞(xìbāo)分泌Th1類細胞因子第十七頁，共七十三頁。整理課件第十八頁，共七十三頁。整理課件PREPOST第十九頁，共七十三頁。整理課件第二十頁，共七十三頁。整理課件第二十一頁，共七十三頁。整理課件ThesubsetsofIFN-gamma+lymphocytes第二十二頁，共七十三頁。整理課件第二十三頁，共七十三頁。整理課件ThechangeoftheratioofIFN-gamma+cells第二十四頁，共七十三頁。整理課件EAAL的療效(liáoxiào)單獨(dāndú)使用手術后預防復發穩定腫瘤改善生活質量與化療/靶向治療聯合協同作用改善化療和靶向治療副作用延長患者的總生存期第二十五頁，共七十三頁。整理課件術後復

發

期間免疫群（76例）（＊）対照群（74例）ｐ値（＊＊）5年以內復發45(59%)57(77%)0.012年以內復發25(33%)40(54%)0.005（LANCET2000;356;802-07）EAAL的療效(liáoxiào)：降低肝癌手術后的復發率：隨機對照臨床實驗結果第二十六頁，共七十三頁。整理課件一例晚期肝癌患者(huànzhě)實現6年帶瘤生存

Hepatology(28),5,1436-7,1998.患者：62歲，男性，丙肝，肝癌ChildB級，約7厘米大小。已出現右門靜脈腫瘤栓塞和右腎轉移（T4N0M1,ⅣB期）該腫瘤已無法切除。該患者因此接受了質子照射治療，治療后腫瘤出現壞死并且體積縮小至原來的50%。EAAL治療：放射治療之后患者每1－2月應用一次過繼性免疫治療平均每次回輸細胞1.4±0.5×10（10）絕大多數為T細胞標記陽性（95%±2%CD3+，90％±2%CD3+/HLA-DR+，61%±9%CD8+，39%±8%CD4+）且對Daudi細胞具有細胞毒活性的細胞。細胞回輸在6年內共為53次完成（平均5-6周一次回輸）累計回輸細胞總數為7.3×10（11）結果：獲得了6年無復發生存，整個(zhěnggè)過程沒有出現治療相關的不良反應。在長期觀察中，該患者健康狀況良好，未出現肝癌的復發，且肝功能好轉。第二十七頁，共七十三頁。整理課件左眼瞼細胞(xìbāo)鱗癌和結腸腺癌雙原發

（JpnJClinOncol2000:30(6)267-271）患者：同時患有左眼瞼細胞鱗癌和結腸腺癌，兩者都已出現淋巴結轉移。患者接受了左眼剜除術及左頸部改良根治性淋巴結清掃術和隨后的跨結腸切除術和局部淋巴結清掃。治療：EAAL過繼性免疫治療作為單一術后輔助治療，而未接受可引起免疫抑制的化療。共進行了150次回輸（平均2周一次回輸）平均每次回輸細胞數為1.38×10（10）。結果(jiēguǒ)：至文章發表為止，術后6年內尚未發現復發和其它轉移。第二十八頁，共七十三頁。整理課件EAAL治療(zhìliáo)神經膠質母細胞瘤的效果Case

AgeSex

InitialtreatmentOpe.

Rad.

Chemo.TTP＊Follow＊＊

1.37FTotal

60Gy

ACNU

10ｙ10ｍAlive

2.17FTotal

60Gy

ACNU

10ｙ2ｍAlive

3.49MTotal

60Gy

ACNU

24m

3ｙ9ｍDead

4.56MTotal

60Gy

ACNU

8m

4ｙ0ｍDead

5.40MTotal

60Gy

ACNU

2ｙ6ｍAlive＊TTP再発までの期間。＊＊2003年12月現在。＊5例中5例が3年以上の生存(shēngcún)。2例が10年以上生存。

2006年2月現在、5例中3例が5年以上の生存であることから論文投稿作業中。第二十九頁，共七十三頁。整理課件病例(bìnglì)1.非小細胞肺癌腦轉移患者男性，54歲，非小細胞肺癌，并伴有脾、腦轉移，TNMIV期治療：EAAL為單一治療，六周內共五次回輸總回輸細胞數為1.66×10(10)。結果：第五次輸注后10天行MRI檢查，與治療前對比：右額葉強化結節此次掃描未見異常強化，僅表現為斑片狀長T1長T2信號，范圍較前縮小，余腦實質結構對稱，灰白質界限清晰，未見異常強化灶，中線結構居中，腦室(nǎoshì)系統未見異常，小腦及腦干未見異常，頭顱諸骨未見骨質破壞灶。提示右額葉轉移瘤較EAAL細胞輸注前好轉。脾上極實性占位較前變化不大。胸部CT肺中葉下葉病灶變化不大。第三十頁，共七十三頁。整理課件病例(bìnglì)2.髓母細胞瘤術后和放化療后復發患者：女，21歲，小腦蚓部髓母細胞瘤手術后二年（2005年3月）脊髓復發，進行單純化療3個療程，腫瘤消失。繼續口服化療藥，連續7個療程。2006-2-28核磁共振發現，腦脊髓廣泛種植復發治療：化療與EAAL療法結合治療方案。累積回輸共14次，回輸細胞總數達到6.77×10（10）。結果：2個療程后，2006-6-21核磁共振發現轉移灶大部分消失，明顯好于對單純化療的預期。患者化療后白細胞，血色素低。EAAL細胞治療縮短了恢復時間，起到良好的支持治療作用。患者在化療期間(qījiān)無發熱和感染，一直堅持爬山鍛煉，也沒有出現過第一次化療時的貧血導致的心慌、氣短等癥狀；患者精神狀態良好，無食欲下降、體重減輕、睡眠不良、精神萎靡等化療不良反應。

第三十一頁，共七十三頁。整理課件病例(bìnglì)3.賁門癌肺轉移伴腹水患者：女，賁門癌肺轉移伴腹水，化療無效治療：兩周間隔，兩次輸注EAAL細胞，腹腔及靜脈各半，共計細胞總數為1.13×10（10），回輸前進行腹腔低劑量化療（以前同樣劑量化療未顯示治療效果）。結果：腹部CT檢查，與回輸前2005-11-15腹部CT結果相比較：可見肝S4結節低密度結節較前縮小（20mm×13mm→18×12mm）肝右葉低密度結節較前縮小(16mm×24mm→14mm×22mm)，臟壁層腹膜表面及腸管表面多發結節較前縮小（20mmX22mm→17mmX15mm）雙側附件區及盆腔內腹膜多發異常強化結節及腫塊(zhǒnɡkuài)亦較前縮小，現最大75mm×60mm，原為95mm×60mm。腹水較前減少。第三十二頁，共七十三頁。整理課件病例4：復發的乳腺癌

治療(zhìliáo)后(5次回輸),腫瘤標志物水平下降Patient:0012Infusiondate:12/29/051/5/061/12/061/19/061/26/06第三十三頁，共七十三頁。整理課件病例(bìnglì)5：顱內Ｂ淋巴細胞瘤患者：男，顱內Ｂ淋巴細胞瘤手術，未能完全切除治療：10倍于常規劑量化療，第一次化療后副作用強，無法正常生活每次化療后在化療間歇回輸兩次EAAL結果：手術未能切除的腫瘤消失患者未再產生化療的副作用，實現正常生活；無脫發、惡心、嘔吐；體重增加；每天堅持步行2小時(xiǎoshí)現每月一次EAAL細胞回輸，迄今未復發第三十四頁，共七十三頁。整理課件病例６．持續進展(jìnzhǎn)復發賁門癌患者：男，賁門癌復發未轉移，化療效果(xiàoguǒ)差治療：細胞治療配合原來效果不好的化療劑量，共10次回輸效果：疼痛（需服止痛藥）基本消失打嗝基本消失CA199從210降至78CA242從158降至85超聲胃鏡檢查腫瘤明顯縮小第三十五頁，共七十三頁。整理課件病例(bìnglì)７．持續進展胃癌患者：男，胃癌術后未發現腫瘤，但CA724進行性增高，未進行化療治療：每周回輸EAAL，共四次患者同時吃中藥，無其它治療效果：回輸兩周前：CA724為256回輸兩次后：降至39.8回輸三次后：降至22.5持續治療3個療程后腫瘤標志物正常(zhèngcháng)，迄今未復發第三十六頁，共七十三頁。整理課件病例(bìnglì)8：晚期賁門癌男性，48歲。賁門癌，皮革胃，腹膜(fùmó)后、縱隔、左鎖骨上淋巴結轉移；KPS100分2007.09：分子靶向治療+EAAL1次/2周+化療（TP）；2008.02：接近CR，2月后CR（包括皮革胃恢復正常）繼續：分子靶向治療+EAAL1次/2周；2008.07后改為：EAAL1次/2周2009.02：4次復查（包括胃鏡、PET/CT）無病生存。第三十七頁，共七十三頁。整理課件病例(bìnglì)9.結腸癌肝轉移患者：男，結腸癌肝轉移三年，手術、化療、介入、愛必妥目前治療：愛必妥之前使用約半年，可控制疾病進展。但2009年4月發現多項腫瘤標志物升高。細胞治療每5天一次回輸，目前已進行4次回輸結果：腫瘤標志物明顯(míngxiǎn)下降CEA：由421降至289CA19.9：由486降至303CA72.4：由107降至86第三十八頁，共七十三頁。整理課件病例(bìnglì)10：胰腺癌廣泛肝轉移男性，38歲。胰腺癌廣泛肝轉移；KPS100分2008.08：TACE1次后，分子(fēnzǐ)靶向治療+EAAL1次/2周+健擇1次/周；2008.10：MR;肝轉移灶減少、縮小2009.02：SD；肝轉移進一步減少、縮小，第三十九頁，共七十三頁。整理課件中國人民解放軍總醫院（301）患者(huànzhě)總結

（2007-2009）患者一般情況EAAL治療組晚期患者共51例，男性38例，女性13例，患者年齡31-78歲。其中晚期肺癌患者22例，晚期結直腸癌患者17例，晚期胰腺癌患者7例，原發性肝癌患者5例。治療方案在最佳支持治療或者化療的基礎(jīchǔ)上加用EAAL細胞治療，本試驗用的EAAL細胞由患者自身提供20－100ml外周血（根據患者本人淋巴細胞絕對值決定所需要的血量），體外培養使淋巴細胞數目擴增。每次回輸含3－10X109細胞/100－200ml含1％白蛋白的生理鹽水。細胞產品無細菌、霉菌、支原體、病毒等任何微生物和內毒素的污染。抽外周血后約２周左右開始回輸，患者每周回輸一次，或者配合化療，化療后48小時回輸，至少回輸6次。

病例隨訪密切隨訪觀察接受EAAL治療患者，記錄其生存情況，隨訪終點為患者死亡。

第四十頁，共七十三頁。整理課件隨訪(suífǎnɡ)結果（至2009年10月4日）腫瘤類型病例數中位生存期（月）及說明1年生存率肺癌22到隨訪截止時間有6例死亡，中位生存期尚未到達。74.4%結直腸癌17到隨訪截止時間有4例死亡，中位生存期尚未到達。88.9%胰腺癌6到隨訪截止時間有2例死亡，中位生存期尚未到達。60.0%原發性肝癌5到隨訪截止時間有0例死亡，中位生存期尚未到達。80.0%第四十一頁，共七十三頁。整理課件EAAL技術研究(yánjiū)歷程引進應用提高細胞培養過程細胞因子組合(zǔhé)無血清培養基電子化管理系統推廣第四十二頁，共七十三頁。整理課件EAAL細胞治療(zhìliáo)的建議方案和流程第四十三頁，共七十三頁。整理課件不良反應統計(tǒngjì)統計患者總數:107人回輸總次數:518次按癥狀種類統計癥狀低熱中熱高熱頭暈腹脹腹瀉嘔吐數量按人次13322211按回輸次數18622211比例按人次12.15%2.80%1.87%1.87%1.87%0.93%0.93%按回輸次數3.47%1.16%0.39%0.39%0.39%0.19%0.19%按癥狀種類統計癥狀感冒樣癥狀嗜睡寒戰靜脈炎頭疼胸悶合計數量按人次22221134按回輸次數33221245比例按人次1.87%1.87%1.87%1.87%0.93%0.93%31.78%按回輸次數0.58%0.58%0.39%0.39%0.19%0.39%8.69%第四十四頁，共七十三頁。整理課件不良反應免疫治療組(n=76)*細胞回輸(n=370)發熱36(47%)50(14%)頭痛3(4%)5(1%)惡心3(4%)4(1%)頭暈1(1%)1(0·3%)搔癢1(1%)1(0·3%)心動過速1(1%)1(0·3%)總體45(59%)62(17%)患者(huànzhě)出現的不良反應在45位患者中共出現了62次不良反應，所有均為1或2級并且具有自限性，未有患者出現肺或腎部的癥狀(zhèngzhuàng)、任何跡象的感染、肝功能衰退或自身免疫失調。TheLancet,356（9232）：802-807第四十五頁，共七十三頁。整理課件EAAL的禁忌癥感染發熱期的患者（腫瘤熱除外(chúwài)）進行器官移植的患者有嚴重自身免疫病的患者T細胞相關淋巴瘤和白血病患者第四十六頁，共七十三頁。整理課件EAAL細胞(xìbāo)免疫治療細胞類型：混合型T淋巴細胞，CD8+殺傷性T細胞為主應用：多次（2-6周一次）大量淋巴細胞（1010/次）效果：有效控制實體腫瘤復發和進展、延長患者無瘤生存期配合常規放化療延長病人生存期，實現無瘤、帶瘤生存提高放化療耐受性提高病人生存質量機制：具有(jùyǒu)腫瘤抗原特異性可明顯改善腫瘤病人機體免疫功能狀態，增加TH1類細胞因子的表達其它：治療效果與臨床使用方案密切相關第四十七頁，共七十三頁。整理課件一、單獨(dāndú)使用EAAL進行治療適用人群預期效果使用方案手術后無其它治療患者預防復發轉移四個療程回輸。第一、二個療程每周一次回輸，共6-8次回輸；第三個療程每2周一次回輸，共3-4次回輸；第四個療程每月一次回輸，共3-4次回輸；此后可每三個月至半年進行一個療程，每周一次的回輸所有其它治療無效、腫瘤持續進展的患者改善生活質量穩定腫瘤1周一次回輸，兩個療程后評價療效。如患者要求，根據病情進展可持續進行1-2周一次的EAAL細胞回輸化療或放療有效，但已停用，需維持治療效果的患者長期維持腫瘤穩定患者無腫瘤：同手術后無其它治療患者方案患者體內仍有腫瘤：第一、二個療程每周一次回輸，共6次回輸；第三個療程每2周一次回輸，共3次回輸；此后根據患者的要求，可長期進行每2周一次的細胞回輸。第四十八頁，共七十三頁。整理課件二、聯合(liánhé)化療適用人群預期效果使用方案正在進行化療的患者改善生活質量消除化療副作用與化療產生協同作用，殺傷腫瘤維持腫瘤穩定三周化療方案：自第一天給與化療計算，第三至七天回輸EAAL細胞一次。如能在七天后再給一次，效果更好四周化療方案：化療第七天和第十七天各回輸一次EAAL細胞1、8天化療，三周方案：化療第三天、第十天回輸EAAL細胞第四十九頁，共七十三頁。整理課件三、聯合(liánhé)靶向治療適用人群預期效果使用方案正在進行抗體靶向治療的患者通過ADCC作用與靶向治療產生協同作用，殺傷腫瘤維持腫瘤穩定根據靶向藥物的治療方案而定，細胞回輸通常在靶向藥物給藥后48小時第五十頁，共七十三頁。整理課件方

案

舉

例星期一星期二星期三星期四星期五星期六星期日

2009-2-26回輸細胞-4

2009-3-9化療2009-3-10化療

2009-3-16細胞回輸-5

2009-3-27細胞回輸-6

2009-4-6化療2009-4-7化療

2009-4-13細胞回輸-7

2009-4-24細胞回輸-8

2009-5-4化療2009-5-5化療

2009-5-11細胞回輸-9

2009-5-22細胞回輸-10

第五十一頁，共七十三頁。整理課件方

案

舉

例治療計劃（預估）如在治療過程中疾病進展，可隨時加入化療星期一星期二星期三星期四星期五星期六星期日

2009-2-26取血，回輸和凍存

2009-3-12取血2009-3-13回輸-1

2009-3-20回輸-2

2009-3-26取血2009-3-27細胞回輸-3

2009-4-3回輸-4

2009-4-9取血2009-4-10回輸-5

2009-4-17回輸-6

2009-4-24回輸-7

2009-4-30回輸-8如不進行后續治療，此日回輸前取血，進行培養凍存，備化療時使用；如進行后續治療，每2-3周一次回輸，一次取血，一次回輸

第五十二頁，共七十三頁。整理課件取血要求(yāoqiú)（1）取血前必需進行的醫院檢驗科檢查項目（取血前一周內結果有效）：血常規:(檢查后及取血前無其它治療)決定病人是否可以取血決定取血量取血量=80ml/淋巴細胞絕對值例如(lìrú)：患者淋巴細胞絕對值為1.2，取血量=80ml/1.2=67ml，一般取70ml。感染篩查：乙肝、丙肝、愛滋、梅毒。（檢查后及取血前未進行輸血）愛滋病、梅毒患者不進行細胞培養血培養：極晚期患者，保證病人血液中沒有細菌感染第五十三頁，共七十三頁。整理課件取血要求(yāoqiú)（2）取血量：3天內的血常規，要求白細胞在正常范圍，淋巴細胞絕對值大于0.8。近3天內不能用升白藥及化療。滿足取血條件(tiáojiàn)情況下，取血量取決淋巴細胞絕對值：淋巴細胞絕對值 <0.8不能取血

>0.8 可以取血取血量(ml)=80ml/淋巴細胞絕對值第五十四頁，共七十三頁。整理課件取血要求(yāoqiú)（3）病人清晨抽血前可以進食，但勿食用油膩食物抽血前不能輸液抽血前病人沒有任何感染(gǎnrǎn)及心肝肺腎功能異常手術病人：術前取血化療病人：化療前（需凍存步驟）或化療后待血象正常后取血。放療病人：放療前或血象正常后取血每次抽血必須是在回輸之前根據病人淋巴細胞計數確定外周血取血量，一般為20－100ml/每次培養或每次凍存第五十五頁，共七十三頁。整理課件回輸要求(yāoqiú)（1）回輸前病人狀態：血象基本正常，回輸之日無感染發燒病人沒有進行(jìnxíng)免疫抑制藥物治療（本方法不能用于器官移植術后病人）第五十六頁，共七十三頁。整理課件回輸要求(yāoqiú)（2）回輸延期：實驗室在回輸前3-7天通知醫院主管大夫回輸日期醫生需在回輸前至少一天確認患者是否可以回輸。否則細胞收獲后，則無法再進行延期。一般(yībān)由于病人的原因，可延期1－2天，不影響治療效果第五十七頁，共七十三頁。整理課件回輸要求(yāoqiú)（3）回輸步驟：細胞運輸：常溫4C（可置于化學冰保溫的保溫筒內運輸），收獲后12小時內回輸細胞總體積約100ML-200ML回輸速度開始約40-50滴/分鐘，總共約60分鐘回輸過程中約5-8分鐘輕輕擠捏轉輸袋上部混勻細胞 注意：不要碰到輸液器針頭尖部以免刺穿轉輸袋；避免產生氣泡。回輸前不建議做抗過敏預處理，醫生(yīshēng)可根據患者實際情況給予5mg地塞米松，并做好過敏急救準備細胞回輸后，繼續輸約50ML生理鹽水沖洗細胞回輸管第五十八頁，共七十三頁。整理課件操

作

流

程患者簽署知情同意書，一式兩份：醫生、永泰免疫各一份保存制定細胞(xìbāo)治療計劃：永泰免疫配合醫生回輸次數是否配合其它治療、配合的方案獲得患者感染篩查和血常規結果（淋巴細胞絕對值）收費采血：取血量=80ml/淋巴細胞絕對值。永泰免疫提供采血管，護士采血細胞培養：永泰免疫永泰免疫以E-MAIL形式，在細胞培養開始約7-9天確認治療方案中細胞回輸的日期永泰免疫在每周四或星期五以E-MAIL形式和電話形式通知負責醫生下周患者回輸日期和時間回輸：永泰免疫提供質量檢測報告，負責醫生簽署接收報告和細胞，護士用輸血器進行細胞回輸第五十九頁，共七十三頁。整理課件目前使用EAAL進行(jìnxíng)腫瘤治療的醫院中國人民解放軍總醫院北京協和醫院北京大學人民醫院山東大學(shāndōnɡdàxué)齊魯醫院第六十頁，共七十三頁。整理課件謝謝(xièxie)！第六十一頁，共七十三頁。整理課件北京永泰免疫應用科技(kējì)有限公司

ImmunotechAppliedScienceLimited(IMAS)簡介(jiǎnjiè)Introduction第六十二頁，共七十三頁。整理課件全球唯一經過(jīngguò)隨機對照臨床試驗證實的、安全、有效的同類腫瘤免疫治療產品

THEONLY

Randomizedclinicaltrialprovedeffectiveandsafecancerimmunotherapeuticproductofthiskindintheworld.EAAL擴增活化(huóhuà)的自體淋巴細胞治療腫瘤技術

ExpandedActivatedAutologouseLymphocytes:ACellularImmunotherapyPlatformforCancerChineseMedicine第三類醫療(yīliáo)技術第六十三頁，共七十三頁。整理課件2005年5月，EAAL基本技術(jìshù)引入中國!

2005年12月，EAAL技術(jìshù)正式在中國投入臨床腫瘤治療!

2007年10月，EAAL技術(jìshù)和試劑系統申請專利！2007年10月，EAAL技術獲得北京協和醫院倫理委員會批準，進行肝癌治療！2007年12月，永泰免疫在北京建立中國第一個獨立的GMP級別的細胞制備車間并投入使用！2008年7月，EAAL無血清培養基系統建立，永泰免疫進入國際細胞免疫治療領先領域!

2009年2月，EAAL技術獲得北京協和醫院倫理委員會批準，進行惡性腫瘤治療并簽署合作協議，進行EAAL技術的臨床應用研究!2009年2月，永泰免疫與山東大學齊魯醫院簽署合作協議，進行EAAL技術的臨床應用研究！2009年10月，永泰免疫與北京大學人民醫院簽署合作協議，進行EAAL技術的臨床應用研究！2009年10月，永泰免疫在北京的第二個獨立的GMP級別的細胞制備車間投入使用！2009年10月，永泰免疫投資的濟南永泰細胞工程有限公司成立！2010年4月，隸屬國藥集團、由新型疫苗國家工程研究中心--北京微谷生物醫藥有限公司，正式簽約控股永泰免疫，使永泰免疫進入快速市場發展階段！永泰免疫發展歷史TheHistoryofIMAS第六十四頁，共七十三頁。整理課件永泰免疫(miǎnyì)獲得的榮譽TheHonorsofIMAS中國醫藥生物技術(jìshù)協會理事會員ChinaMedicalBiotechnologyAssociationMember國家“十一五”重大新藥創制項目資助(zīzhù)單位National"EleventhFive"MajorDrugDiscoveryProjectFundedUnit中國生物技術外包服務聯盟（ABO）成員ChinaBiotechnologyOutsourcingServicesAlliance(ABO)Member

國家衛生部第三類醫療技術規范起草單位MinistryofHealth3rdTypeofMedicalTechnical

SpecificationsDrafting

Unit第六十五頁，共七十三頁。整理課件外資(wàizī)49%新型疫苗國家工程(gōngchéng)研究中心51%永泰免疫股權(ɡǔquán)分析

ShareHoldersofIMAS第六十六頁，共七十三頁。整理課件永泰免疫(miǎnyì)關聯企業RelatedInstitutes中國(zhōnɡɡuó)生物技術集團新型疫苗(yìmiáo)國家工程研究中心永泰免疫北京生物制品研究所北京天壇生物制品股份有限公司中國疾病預防控制中心病毒病預防和控制所中國醫藥集團總公司第六十七頁，共七十三頁。整理課件中國人民解放軍總醫院北京大學人民醫院北京(běijīnɡ)普仁醫院山東大學(shāndōnɡdàxué)齊魯醫院永泰免疫面貌(miànmào)展示（1）

AppearanceofIMAS第六十八頁，共七十三頁。整理課件永泰免疫(miǎnyì)面貌展示（2）

AppearanceofIMAS第六十九頁，共七十三頁。整理課件沈心亮董事長著名生物(shēngwù)疫苗專家國家疫苗工程中心北京生物制品研究所所長，新型疫苗國家工程(gōngchéng)研究中心主任；國家重大傳染病專項首席科學家《國家中長期科學和技術發展規劃綱要》（2006－2020年）“重大傳染病”科技重大專項“疫苗、抗原篩選和國家應急系統建設”專家組組長，“重大新藥創制”科技重大專項“新藥研究開發關鍵技術研究”平臺復審專家。國家科技部863生物和醫藥技術領域專家組專家，專家組組長；國家新藥審評專家，國家藥典委員會委員，受聘擔任中華預防醫學會常務委員，中國醫藥生物技術學會基因工程藥物多肽藥物和疫苗專業委員會副主任委員、國家藥典委員會委員。國家新藥申評專家庫專家、國家創業板發生委唯一行業委員，享受政府特殊津貼。王歈總經理著名(zhùmíng)生物免疫學專家北京大學醫學部免疫學博士，曾任北京大學醫學部免疫學系副教授、北京大學臨床腫瘤學院腫瘤生物診斷與治療中心副主任，北京市