項目七組培實例

香蕉的植物組織培養(yǎng)技術(shù)

學(xué)習(xí)目標(biāo)了解香蕉的主要價值；了解蘆薈的組培的原因；掌握香蕉的組織培養(yǎng)技術(shù)。一、香蕉簡介香蕉古稱甘蕉，為多年生常綠大型草本單子葉植物，無主根。葉片長圓形，亮綠色。穗狀花序下垂。果黃綠色，長圓形，微彎，略具三棱。其肉質(zhì)軟糯，香甜可口。香蕉是熱帶地區(qū)廣泛栽培食用。香蕉味香、富于營養(yǎng)，終年可收獲，在溫帶地區(qū)也很受重視。喜高溫多濕，最適生長溫度為24-32℃，不宜低于15.5℃。對土壤要求嚴(yán)格，尤以沖積土壤或腐殖質(zhì)壤土為宜。二、香蕉的價值香蕉的營養(yǎng)價值非常豐富，對減肥很有效。因此，可以作為早餐、減肥食品，且具有降壓通便的作用。香蕉味甘性寒，具有較高的藥用價值。主要功用是清腸胃，治便秘，并有清熱潤肺、止煩渴、填精髓、解酒毒等功效。三、香蕉的品種簡介千層蕉仙人蕉芭蕉蘋果蕉牛角蕉粉蕉四、香蕉組培的原因香蕉生產(chǎn)中為害較重的病害主要有病毒性病害如束頂病和花葉心腐病；真菌性病害如葉斑病、炭疽病等，蟲害主要有象鼻蟲、花薊馬（俗稱葉跳甲）。花葉心腐病葉斑病五、香蕉的組培技術(shù)1.外植體的選取及處理應(yīng)選取無任何檢疫性病蟲害、生長健壯、高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、吸芽生長發(fā)育飽滿的植株作種源。將吸芽帶回實驗室后，將莖尖部切下2-3cm長并消毒。用75%酒精洗滌15s，用以殺死莖尖表面的病毒。然后用0.1%升汞溶液浸泡10min或1.5%次氯酸鈉溶液浸泡15min，接著用無菌水沖洗4-5次。將分生組織連同1-3個圓錐形葉原基一并切下，長度為0.2-0.5mm，迅速接種于培養(yǎng)基上。2.培養(yǎng)基及溫光條件基本培養(yǎng)基為MS；吸芽培養(yǎng)基①MS+6-BA5.0mg?L-1+KT0.5mg?L-1+2%蔗糖；莖尖培養(yǎng)基②改良MS培養(yǎng)基（MS無機鹽+鹽酸硫胺素0.5mg?L-1）+6-BA2.0-5.0mg?L-1+3%蔗糖；③改良MS+6-BA2.0mg?L-1+蔗糖3%（液體培養(yǎng)基）；生根培養(yǎng)基④MS+KT0.5mg?L-1+NAA0.8mg?L-1+蔗糖3%+活性炭0.3%。培養(yǎng)溫度25-28℃，光照10-12h/d，光照度為2000-3000lx。3.芽的誘導(dǎo)與增殖將滅過菌的外植體接種到培養(yǎng)基①上，先暗培養(yǎng)，待芽萌動后，每天光照10h，光照度為2000-3000lx，約經(jīng)40-60d培養(yǎng)，可形成叢生芽，每個叢芽有2.5-3個小芽從培養(yǎng)的叢生芽中選取一些高5cm，生長較粗壯的、基部膨大的無根苗，用鑷子將小葉片剝除，直到生長點充分暴露，然后切取大小約0.5-1.5mm、帶有1-2個葉原基的莖尖，經(jīng)無菌水洗凈后接種于液體培養(yǎng)基③中進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。待莖尖長至3-5mm大小時便可轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)基②中進(jìn)行固體培養(yǎng)。開始生長緩慢，基部逐漸長大形成基盤，并分化出白色球狀小突起，經(jīng)培養(yǎng)60d左右，逐漸形成叢生芽，芽數(shù)通常有2~3個。此時將叢生芽切成單芽再轉(zhuǎn)至相同新鮮培養(yǎng)基②上培養(yǎng)。當(dāng)苗高2cm時，具有叢芽的基盤切成若干塊，每塊帶1苗，按上述方法再繼代繁殖至一定數(shù)的小苗后即可生根培養(yǎng)。4.生根與煉苗移栽將繼代增殖苗從基盤處切離成單苗后，接種于生根培養(yǎng)基④上，15d后逐漸形成生根苗。待小植株長到7-8cm，具5片綠葉時便可移栽。移栽前，先將培養(yǎng)瓶置陽光下閉瓶煉苗2-3d，再打開瓶蓋曬苗適應(yīng)3d，取出小苗移栽于能保濕、保溫、防蟲的大棚內(nèi)，每隔2d噴霧1次，定期噴施殺蟲農(nóng)藥。移苗10d后可噴施0.5%KNO3肥液2次，每隔7d噴1次。20d