王紅寧四川大學生命科學學院動物疫病防控與食品安全四川省重點實驗室動物疫病防控與食品安全目前一頁\總數三十五頁\編于十二點主要內容一、動物疫病防控與食品安全研究背景二、我們的重要研究進展為食品安全提供技術支持目前二頁\總數三十五頁\編于十二點一、動物疫病防控與食品安全研究背景2010年我國肉類、蛋類和奶類產量將分別達到8,600萬噸、3,000萬噸和4,200萬噸,飼料產量13,100萬噸,產值3000億元人民幣，豬約900億元(出欄6億頭),家禽約500億元（100億只）。四川豬總產量占全國10%,居全國第一位,家禽居全國第六位，我國畜牧業總產值占農業總產值的40%,四川已超過50%。動物疫病引起的經濟損失約占總產值的20%，300億元以上。目前三頁\總數三十五頁\編于十二點重大食品安全事件1988年上海，貝類，甲肝。短短一個月里，有30多萬人感染，其中11人死亡。1996年歐洲，牛肉，瘋牛病。90人死于該病，歐盟在1996年財政年度向各成員國總共提供高達17.796億美元的巨額補貼。宰殺了63.2萬頭牛。

1999年中國香港，禽流感，殺雞11萬只，共發現23例人類禽流感患者,其中20例為H5N1型高致病禽流感，3例為H9N2型。有7例死亡,均為H5N1型。1999年，比利時、荷蘭、法國、德國，二惡英污染導致畜禽類產品及乳制品含高濃度惡英的事件，事件造成的直接損失達3.55億歐元，如果加上與此關聯的食品工業，損失超過10億歐元。2000年英國、法國，口蹄疫，造成630萬頭動物被殺。造成直接經濟損失4億美元，間接損失超過36.5億美元。2004年中國，SARS暴發流行，嚴重威脅人民的生命，北京市消耗費用達20多億元人民幣，據估計全世界損失達300多億美元。2005年四川豬鏈球菌病，累計報告人感染豬鏈球菌病例204例，其中死亡38人目前四頁\總數三十五頁\編于十二點2005年上海肯德雞蘇丹紅2006年大閘蟹呋喃藥物殘留2006年北京鴨蛋檢出蘇丹紅2006年多寶魚呋喃藥物殘留、孔雀石綠2007年思念湯圓金黃色葡萄球菌超標2008年中國，三鹿奶粉“三聚氰胺”事件，導致數以萬計的“腎結石寶寶”，引起整個乳制品行業的混亂，嚴重影響了國家的聲譽。2008年中國香港，禽流感再襲，撲殺疫區內兩個雞場及長沙灣家禽批發市場共約九萬只活雞。2009年1月5日北京確診一例人感染高致病性禽流感，這是2009年中國首例病例。2010美國沙門氏菌雞蛋，2000人感染發病2011年5月份德國爆發了大規模的大腸桿菌疫情，并蔓延至歐洲以及北美地區。葫蘆巴種子、銷毀。2012“毒膠囊”地溝油................................................目前五頁\總數三十五頁\編于十二點食品安全？？？？動物疫病60%微生物、寄生蟲、生物毒素等生物污染違禁藥物5%藥物殘留20%農藥與獸藥殘留

15%環境污染：無機污染物如汞、鎘、鉛等，有機污染物中的二惡英、多環芳烴、多氯聯苯等

目前六頁\總數三十五頁\編于十二點人畜共患病禽流感，豬鏈球菌病、口蹄疫、乙型腦炎、包蟲病對畜牧業生產和人類生活影響巨大。受到了國家的極大關注，目前七頁\總數三十五頁\編于十二點H1NIA型流感病毒，包含有禽流感、豬流感和人流感三種流感病毒的基因片斷，同時擁有亞洲豬流感和非洲豬流感病毒特征。H1N1流感病毒是禽流感和人類流感經過“洗牌效應”產生的新病毒。

禽流感全世界各種家禽和野生禽類中，已分離出上千株禽流感病毒。97年出現在香港的致人感染發病甚至死亡的H5N1毒株,

目前八頁\總數三十五頁\編于十二點

——1992年，新疆托里縣某連官兵，食用了一頭自養的病仔豬肉及內臟后，導致了以胃腸道癥狀為主的集體食物中毒，經證實為鏈球菌所致?！?995年，首例鑒定證實Ⅱ型豬鏈球菌在我國存在?！?998年7-8月，江蘇省海安、泰興、通州等地25人感染人豬鏈球菌病，14人死亡。8萬多生豬發病死亡?！?000年4月，岐山縣種豬繁育場仔豬流行關節炎及敗血癥，經實驗室分離鑒定證實為Ⅱ型豬鏈球菌?！髞?，上海、浙江、湖南、湖北、北京、廣東及東北均有報道。——2005年四川資陽發生豬鏈球菌疫情，死亡生豬近千頭，205人感染、37人死亡。豬鏈球菌病目前九頁\總數三十五頁\編于十二點防治措施1、不屠宰、不加工、不經營、不售購、不食用，病死豬肉。2、根據當地豬病流行的主要菌株，選擇針對性的菌苗，豬鏈球菌Ⅱ型滅活苗。半月內注兩次，保護期4個月。3、抗生素青霉素、金霉素、紅霉素、先鋒霉素等有效,可以根據藥敏實驗選擇敏感藥物。4、用5～10％石灰乳，1～2％燒堿，1%有效氯，0.5%過氧乙酸等進行噴灑或擦拭消毒。目前十頁\總數三十五頁\編于十二點口蹄疫病毒粒子空氣、污染物空氣污染物口蹄疫病毒傳播目前十一頁\總數三十五頁\編于十二點乙型腦炎傳播目前十二頁\總數三十五頁\編于十二點包蟲病傳播目前十三頁\總數三十五頁\編于十二點2010年5月開始，美國2000多人感染沙門氏菌，藥物治療效果不好，FDA最終確定是因為食用了感染沙門氏菌的雞蛋引起的，美國召回5.5億枚問題雞蛋，造成了嚴重的經濟損失，和不良社會影響。沙門氏菌的感染和耐藥性問題受到關注！目前十四頁\總數三十五頁\編于十二點食品安全保障措施1、建立統一、高效的食品安全管理機構。進一步調整食品安全監管體制，理順和明晰各部門監管職能。在目前食品安全分段監管的基礎上，進一步壓縮監管部門數量，合并監管職能。按照“從田野到餐桌”的食物鏈再造食品安全管理流程，組建相對獨立的食品安全機構，實行項目制與全流程管理模式。對從原材料、生產、包裝、標識到流通、銷售的每一個節點進行控制，建立食品安全每個環節的記錄、追蹤體系，確保產品質量可控性及責任的可追溯性。目前十五頁\總數三十五頁\編于十二點2、《食品安全法》、多部法律、法規相互補充來對食品安全的不同方面進行規范管理。

3、切實強化企業的主體責任，國家應盡快制定全國統一的食品衛生、產品質量和安全標準及全國統一檢驗方法的標準。4、加強食品生產全過程的安全控制技術研究與示范推廣目前十六頁\總數三十五頁\編于十二點四川大學動物疫病防控與食品安全四川省重點實驗室一、病毒基因工程疫苗研究二、動物源細菌耐藥性研究進展三、不同品種豬腸道微生物多樣性研究進展四、動物病原流行病學調查研究五、抗病的地方特有品種資源研究六、食品生產過程安全控制技術研究目前十七頁\總數三十五頁\編于十二點國家“863”高科技發展計劃重大課題項目“家禽重要病毒病基因工程疫苗研究和創制”

國家自然科學基金：禽冠狀病毒（IBV）H120，M41、SAIBK株反向遺傳操作和毒力相關基因研究一、病毒基因工程疫苗研究目前十八頁\總數三十五頁\編于十二點國家科學技術進步獎申報材料主要完成人：主要完成單位：

王紅寧等四川大學、重慶大學、天津瑞普生物技術股份有限公司、洛陽惠中獸藥有限公司、中國農業大學、四川農業大學豬雞病原細菌耐藥性研究及其在安全高效新獸藥研制中的應用二、動物源細菌耐藥性研究進展目前十九頁\總數三十五頁\編于十二點通過對豬雞病原細菌耐藥基因研究發現了6種新耐藥基因（注冊48條）創新基因芯片等5種分子檢測方法研制耐藥快速多重PCR檢測試劑盒5個建立了14萬條耐藥數據庫

實現檢測的準確、快速和傳播評價創新點1目前二十頁\總數三十五頁\編于十二點揭示了我國規?；i雞養殖場病原菌感染及耐藥性變化基本規律制定了“豬雞安全用藥規范”等地方標準3個

為新獸藥研制和使用提供了科學依據創新點2目前二十一頁\總數三十五頁\編于十二點創新點3基于耐藥性檢測方法和變化規律開發了系列產品動物專用抗生素原料藥3個抗生素新制劑4個非抗生素免疫增強劑4種新型消毒劑1種解決抗生素人畜共用、產品工藝落后、生物利用率低和產品藥物殘留等問題目前二十二頁\總數三十五頁\編于十二點

腸道微生物特點種類繁多，數量龐大：約有30個屬500多種，近1014個活細菌功能復雜：促進新陳代謝、免疫激活、生長發育等80%以上為厭氧菌，多數不可培養三、不同品種豬腸道微生物多樣性研究進展目前二十三頁\總數三十五頁\編于十二點Eckburg等(2005)，Gill等(2006)，Ley等(2008)，Neish等(2009)等相繼在《Science》上發表了有關于人腸道微生物多樣性及功能研究的成果。

目前二十四頁\總數三十五頁\編于十二點1、豬腸道微生物DNA提取方法研究2、DGGE、16SrDNA克隆文庫及DNA指紋圖譜分析對相同條件下榮昌豬（純系，B系，CB系）、長白、杜洛克豬腸道微生物多樣性研究3、DGGE、16SrDNA克隆文庫及DNA指紋圖譜分析對相同飼養條件下8個不同品種豬腸道微生物DNA指紋圖譜及多樣性分析4、DGGE、16SrDNA克隆文庫及DNA指紋圖譜分析對不同海拔藏豬腸道菌多樣性研究研究內容目前二十五頁\總數三十五頁\編于十二點大部分榮昌豬腸道細菌為不可培養的細菌種類，且約50%的克隆序列與GenBank中已有序列的相似性小于97%，表明這些序列相對應于一個新的或未識別的菌種或屬。梭菌屬(Clostridia)是榮昌豬腸道的絕對優勢菌，其次是Bacilli和Lactobacillales；這些細菌都為腸道益生菌，對腸道中潛在有害菌具有控制作用。在同一生存環境和相同飼料條件下，榮昌豬不同品系（純系，B系，CB系）腸道微生物具有明顯的差異，豬腸道微生物區系具有明顯的品種特異性。小結目前二十六頁\總數三十五頁\編于十二點1.在同一生存環境和相同飼料條件下，8個不同品種豬（成華豬、大約克、杜洛克、長白、PIC、托佩克、內江豬和藏豬）糞樣菌群結構和多樣性具有明顯的差異，豬腸道微生物區系具有明顯的品種特異性。2.部分DGGE圖譜條帶的序列比對和系統發育分析表明，8個不同品種和不同海拔豬的腸道菌群主要由厚壁菌門（Firmieutes)、擬桿菌門（Baeteroidetes)、變形菌門（Proteobaeteria）和螺旋體門（Spirochaetes）組成；其中，不可培養菌是豬腸道的主要微生物。小結目前二十七頁\總數三十五頁\編于十二點小結生活在理塘（4100m）、稻城（3700m）、甘孜（3400m）、爐霍（3200m）、鄉城（2900m）、康定（2600m）、得榮（2400m）和成都（400m）不同海拔藏豬腸道微生物組成和豐度存在明顯的差異，說明藏豬腸道微生物的結構及豐度受高原環境的影響。飼養條件、海拔等對腸道微生物的結構組成起到次要作用，但會引起腸道優勢微生物物種的變化。同一品種在不同飼養條件下條帶差異較小。豬腸道微生物組成主要由豬的遺傳因素即豬的品種決定；不同品種之間組成差異明顯。目前二十八頁\總數三十五頁\編于十二點技術路線實驗豬分組抗生素的投用樣品采集細菌計數耐藥性動態監測材料方法規模化豬場健康豬群藥物組（頭孢噻呋鈉、丁胺卡那霉素，乳酸環丙沙星），對照組新鮮豬糞便樣品，采樣時間表平板計數瓊脂（PCA），Pfrier腸球菌選擇培養基，伊紅美蘭瓊脂可培養指標菌的純化與PCR鑒定樣品預處理抗生素的MICs測定投藥與停藥周期抗生素使用后豬腸道菌變化研究目前二十九頁\總數三十五頁\編于十二點1.通過對可培養指標菌計數,分析了3種抗生素（頭孢噻呋鈉、丁胺卡那霉素和乳酸環丙沙星）使用對細菌菌數量的影響，其中頭孢噻呋鈉使用后豬腸球菌數量顯著增高。2.耐藥性研究表明規?；i場使用頭孢噻呋鈉、丁胺卡那霉素和乳酸環丙沙星進行治療和預防時，連續用藥最好應控制在3天以內，超過3天就能引起高水平耐藥產生。另外，耐藥性的恢復逆轉很慢，豬場在投藥后需經過一個月時間才能再次使用同種藥物進行治療，否則很可能繼續加重該種藥物耐藥性，降低治療效果。小結目前三十頁\總數三十五頁\編于十二點四、動物病原流行病學調查研究

目前三