精品文檔李保界2012.1至2016.81歡迎下載。精品文檔一、關鍵科學問題及研究內容擬解決的關鍵科學問題基于MSC廣譜的疾病治療應用前景，針對目前對MSC的微環境、自我更新、感謝閱讀分化機理等缺乏系統研究的現狀,本課題擬解決以下關鍵科學問題:謝謝閱讀通過建立脂肪細胞、成骨細胞、骨髓HSC缺乏及血管再生受阻的動物模型，感謝閱讀探討這幾種細胞是否作為骨髓MSC的微環境調節MSC謝謝閱讀精品文檔放心下載子在抵抗組織衰老、促進組織再生與損傷修復中的作用。通過在體研究PTHrP-Bmi1BMP-MAPK和通路等在調控MSC自我更謝謝閱讀MSC自我更新與分化的關鍵信號分子在抵抗組精品文檔放心下載感謝閱讀聯系。通過系統地分析MSC自我更新、分化過程中表觀遺傳學的改變，尋找受感謝閱讀甲基化、組蛋白修飾、non-codingRNA調控的目標基因。結合基因表達圖謝謝閱讀譜，闡釋在MSC的維持、自我更新及分化中的新表觀遺傳學基礎。利用基感謝閱讀因敲除小鼠，研究若干關鍵表觀遺傳調控基因在MSC自我更新與分化中的精品文檔放心下載作用及機制，并研究其與信號通路的關系。通過對骨折愈合、HSC造血和神經損傷修復的在體研究，闡釋MSC及其分精品文檔放心下載化細胞在這些過程中的作用和機制，以期為MSC的臨床應用提供理論依據謝謝閱讀和指導。探討兩種活性分子通過促進MSC增殖及向成骨細胞分化，加速骨謝謝閱讀形成和骨折愈合以及促進HSC造血和神經再生與修復的應用前景。精品文檔放心下載主要研究內容．建立可識別和分離體內骨髓MSC的基因工程小鼠體系精品文檔放心下載擬建立Gt(ROSA)26Sor-YFP；Nestin-Cre小鼠、Gt(ROSA)26Sor-YFP；謝謝閱讀PrxI-Cre小鼠、Gt(ROSA)26Sor-YFP；Dermo-Cre小鼠，用于觀察體內MSC精品文檔放心下載的狀況以及通過流式分選這些細胞。．建立可特異性殺死MSC、成骨細胞或者其他細胞的基因工程小鼠體系謝謝閱讀2歡迎下載。精品文檔利用細胞特異性的CreER(T)和Cre表感謝閱讀達的細胞。．MSC的骨髓微環境中的細胞成分和活性分子鑒定特異性地的殺死脂肪細胞/成骨細胞，利用生物活性分子促進HSC從骨髓遷謝謝閱讀MSC感謝閱讀用細胞共培養體系探討脂肪細胞、成骨細胞、血管內皮細胞及HSC對MSC精品文檔放心下載精品文檔放心下載HSCMSC的感謝閱讀調控作用。．MSC在組織再生與損傷修復中的作用特異性殺死或成骨細胞，比較MSC和成骨細胞作為造血微環境在改善感謝閱讀HSCBMPRIA和TGF受體特異敲除對HSC造血的影響；謝謝閱讀研究MSC的減少或缺失對SSRIs（抗抑郁癥藥物）引起的NSC神經元分化精品文檔放心下載的可能作用；研究MSC的減少或缺失對引起神經損傷修復的影響。精品文檔放心下載．MSC自我更新與定向分化的信號調控機制研究Bmi1在MSC增殖、分化以及衰老中的作用；研究和在Bmi1精品文檔放心下載引起的MSC衰老及分化中的作用以及與過氧化物的關系；研究感謝閱讀BMP-BMPRIA-MAPK在調節MSC增殖和分化中的作用及分子機理。精品文檔放心下載．MSC自我更新與分化的表觀遺傳學調控MSC自我更新與分化中的精品文檔放心下載MSC自我更新與分化過程中被表觀遺傳修飾的靶基因譜精品文檔放心下載以及與上述關鍵調控基因的關系；搜尋MSC自我更新與分化過程中新的精品文檔放心下載和microRNA分子，并闡釋其調控成骨分化的功能；建立調控MSC自感謝閱讀精品文檔放心下載系。．篩選可調節體內MSC更新、定向分化以及促進組織損傷修復的活性分子精品文檔放心下載改造BMP蛋白分子以及篩選BMPs的小分子激動劑，在體研究BMPs激動劑謝謝閱讀在體內MSC自我更新、分化、骨再生/骨折愈合以及造血和神經損傷修復中謝謝閱讀的作用；探討BMP是否通過MSC或成骨細胞促進造血。謝謝閱讀3歡迎下載。精品文檔二、預期目標總體目標：利用多種動物模型，通過研究正常生理狀況下、衰老、骨折愈合、造血、神精品文檔放心下載經損傷修復過程中MSCMSC謝謝閱讀MSC感謝閱讀小分子化合物通過調節MSC的增殖與分化，在促進骨再生、HSC造血和神經再生謝謝閱讀修復中的應用，為MSC廣泛的臨床應用提供堅實的實驗依據。最終促使我國在謝謝閱讀MSC相關領域形成自己的特色，達到國際領先水平。同時，以本項目為紐帶，促感謝閱讀進多學科、多院校的合作和交流，培養一批優秀的干細胞研究人才。感謝閱讀五年預期目標：HSC謝謝閱讀MSC精品文檔放心下載MSC增殖與分化的調控作用精品文檔放心下載以及機制。以骨骼代謝的重要調節分子BMPs入手，闡釋BMPs在MSC的維持、自我更新以及衰老中的作用。．利用Bmi1p16p38Tak1等基因敲除小鼠模型，研究MSC體內自我精品文檔放心下載MSC感謝閱讀協調MSC精品文檔放心下載MSC衰老、抑制MSC脂肪分化、促進其成骨分化的關鍵信號分子，為延緩骨感謝閱讀骼衰老、促進骨再生及損傷修復提供理論基礎。．通過研究分離出的MSC、培養的MSC、以及分化出的成骨細胞、脂肪細胞等謝謝閱讀MSC的維謝謝閱讀持、增殖及分化為不同細胞的表觀遺傳學機制，尋找在此過程中起重要作用精品文檔放心下載MSC感謝閱讀分化。MSC及其分化的細胞對感謝閱讀程中正常或者BMP/TGFB信號受阻的MSC和成骨細胞等對HSC微環境的貢獻以精品文檔放心下載4歡迎下載。精品文檔及對神經損傷修復的作用。改造BMP蛋白分子以及篩選BMPs的小分子激動感謝閱讀劑，研究它們對體內MSC的維持、自我更新和分化、以及HSC造謝謝閱讀血、骨及神經再生與修復中的作用。,預期在國內外專業期刊上發表一批高水平論精品文檔放心下載文。其中在國際一流學術刊物（IF>10）上發表論文篇以上，在有影響力感謝閱讀的雜志（IF>5）上發表論文篇以上。另外，申請專利5項以上。謝謝閱讀．預計培養博士后25-35人，博士研究生50-80人及一批學術水平高、創新能感謝閱讀力強的中青年學術骨干,為研究打造一支具有國際影響力的高水平研究感謝閱讀隊伍。5歡迎下載。精品文檔三、研究方案學術思路：感謝閱讀MSC的穩態感謝閱讀的活動與謝謝閱讀功能，以達到預期的治療效果，嚴重阻礙了MSC的臨床應用。此外，人們尚不清精品文檔放心下載楚骨骼以外的修復功能是否也是內源性MSC精品文檔放心下載MSC感謝閱讀觀遺傳學機制、MSC精品文檔放心下載MSC命運的關鍵環節特別精品文檔放心下載是關鍵分子靶點及信號網絡進行系統的研究。MSC的體內自我更新與分化有一個謝謝閱讀MSCPTH改變骨髓微環境中的感謝閱讀MSCBMP以及BMP小分子激動劑的感謝閱讀MSC謝謝閱讀謝謝閱讀產權的、具有國際競爭力的新技術、新產品，服務于我國經濟發展與人民健康。感謝閱讀創新點與特色首次利用多種基因工程小鼠（團隊擁有幾十種基因工程小鼠的資源）對MSC精品文檔放心下載謝謝閱讀泌的活性生物分子進行系統而全面的分析以及功能驗證，對骨髓MSC的微精品文檔放心下載環境提供一個全面的認識。本項目研究的是科學前沿問題、具體目標明確，謝謝閱讀有很強的創新性。利用Prx1-CreER(T)和Dermo-Cre轉基因小鼠和感謝閱讀MSCMSC謝謝閱讀MSC的臨床應用具有重要的意義。精品文檔放心下載這有別于以往的MSC的局部注射或者靜脈注射，所用的MSC未經過體外擴謝謝閱讀6歡迎下載。精品文檔增，因此可以探討MSC真正的體內功能。率先利用MSC特異性Bmi1或Sirt1精品文檔放心下載MSC謝謝閱讀作用；率先揭示PTHrP經介導抑制和通路活性，抑制氧化謝謝閱讀BM-MSC精品文檔放心下載細胞分化而發揮抗衰老和抗骨質疏松的作用機制。率先研究若干關鍵表觀遺傳調控基因在MSC自我更新與分化中的作用及其謝謝閱讀機制分析；確立在MSC分化過程中被表觀遺傳修飾的靶基因譜及搜尋新的精品文檔放心下載和microRNA分子并闡釋其調控成骨分化的功能。精品文檔放心下載謝謝閱讀代BMPs的小分子激動劑，并取得了很大的進展，將為骨質疏松以及骨損傷感謝閱讀修復的治療提供一種新的途徑。精品文檔放心下載精品文檔放心下載有很高的研究起點和可行性，預期結果必將在國際MSC研究領域中占領新謝謝閱讀高地，促進我國干細胞研究整體水平和地位的進一步提升。感謝閱讀課題設置課題一：成體MSC的骨髓微環境研究目標:1.明確脂肪細胞、成骨細胞、HSC及血管內皮細胞是否作為骨髓MSC的微環境調謝謝閱讀節MSC的干性維持、自我更新與分化。2.鑒定骨髓MSC微環境的旁分泌活性分子在調節MSC的干性維持、自我更新與分感謝閱讀化中的作用。3.明確BMPs是否作為MSC微環境中的重要活性因子。感謝閱讀研究內容:1.利用脂肪特異的Adipoq-CreER(T)（Cre和tamoxifen-responsiveestrogen感謝閱讀receptoriDTR2個月和感謝閱讀胞，觀察脂肪細胞缺乏對Nestin+細胞、PDGFR+及CAR細胞數目及其增殖和感謝閱讀7歡迎下載。精品文檔分化的影響。2.利用Osx-CreER(T)；小鼠（2個月和謝謝閱讀觀察成骨細胞缺乏對Nestin+細胞、PDGFR+及CAR細胞數目及其增殖和分化感謝閱讀的影響。3.利用生物活性分子促進HSC從骨髓遷徙到外周血，觀察HSC缺乏對Nestin+謝謝閱讀細胞、PDGFR+及CAR細胞數目及其增殖和分化的影響。精品文檔放心下載4.利用bevacizumab和carboxyamidotriazole抑制血管再生，觀察血管再生精品文檔放心下載損傷對Nestin+細胞、PDGFR+及CAR細胞數目及其增殖和分化的影響。精品文檔放心下載5.建立并利用細胞共培養體系探討脂肪細胞、成骨細胞、血管內皮細胞及HSC謝謝閱讀對MSCBio-Plex系統）分析謝謝閱讀脂肪細胞、血管內皮細胞、HSC以及成骨細胞所分泌的生長因子及活性分子，謝謝閱讀并研究它們對體內MSC的調控作用。6.研究微環境中活性分子在年輕和衰老小鼠的MSC更新與分化中的作用感謝閱讀經費比例：承擔單位：課題負責人：李保界學術骨干：李旌、賈德永、樂黃鶯課題二：MSC自我更新與分化的信號調控機制研究目標:明確Bmi-1在調節BM-MSC自我更新和分化中的作用及機制。精品文檔放心下載明確和通路在PTHrP和Bmi-1調節BM-MSC自我更新和分化中的作謝謝閱讀用及機制。明確Bmi1是否通過抑制氧化應激反應，刺激BM-MSC自我更新，促進其向成謝謝閱讀骨細胞分化，抑制其向脂肪細胞分化而發揮在抗衰老和骨質疏松中的作用。謝謝閱讀明確BMP-MAPK信號通路在MSC自我更新、衰老、成骨細胞的定向分化中的感謝閱讀作用機制。研究內容：1.通過在Bmi1缺失小鼠MSC特異性高表達Bmi1或Sirt1，研究MSC特異性高精品文檔放心下載表達Bmi1或能否通過促進BM-MSC謝謝閱讀8歡迎下載。精品文檔抑制其向脂肪細胞分化，而糾正Bmi1基因敲除引起的成熟前骨質疏松的表精品文檔放心下載型。2.通過在PTHrPKI或Bmi1-/-小鼠敲除或基因，經表型差異分析，研究謝謝閱讀和通路在PTHrP-Bmi1調節BM-MSC自我更新和分化中的作用及機制。謝謝閱讀3.通過飲水中添加抗氧化劑NAC喂養Bmi1-/-Bmi1是否經過抑制氧化謝謝閱讀BM-MSC精品文檔放心下載胞分化而發揮它們在抗衰老和骨質疏松中的作用。4.將利用特異性敲除Tak1或p38MAPKBMP-MAPK通路在調精品文檔放心下載節MSC增殖和分化中的相互作用及分子機理。5.以上通路與課題一鑒定的微環境中信號分子的聯系。感謝閱讀經費比例：22.5%承擔單位：南京醫科大學、中國科學院深圳先進技術研究院、同濟大學感謝閱讀課題負責人：苗登順學術骨干：陳寧、楊帆、張磊課題三：MSC自我更新與分化的表觀遺傳學調控研究目標:1.驗證若干表觀遺傳關鍵調控基因在MSC自我更新與分化中的作用及其機制精品文檔放心下載2.確立在自我更新與分化過程中被表觀遺傳修飾的靶基因譜，包括甲感謝閱讀基化模式和組蛋白修飾模式等，并研究其與（）關鍵基因的關系。精品文檔放心下載3.搜尋MSC自我更新與分化過程中新的和microRNA分子，并闡釋其調謝謝閱讀控成骨分化的功能。建立調控自我更新與分化的表觀遺傳網絡，并與其信號調控網絡和基因精品文檔放心下載表達圖譜建立聯系。研究內容:利用加氧酶1-3，methyl結合蛋白Mbd5，PcG復合物組分MPc2及謝謝閱讀Chromobox蛋白等基因敲除小鼠，研究這些表觀遺傳關鍵調控基因在精品文檔放心下載MSC自我更新與分化中的作用及機制。2.確立在自我更新與分化過程中被表觀遺傳修飾的靶基因譜，包括甲謝謝閱讀基化模式和組蛋白修飾模式等，以及與上述關鍵調控基因的關系。感謝閱讀9歡迎下載。精品文檔3.搜尋MSC自我更新與分化過程中新的和microRNA分子，并闡釋其調謝謝閱讀控成骨分化的功能。4.建立調控自我更新與分化的表觀遺傳網絡，并與其信號調控網絡和基因精品文檔放心下載表達圖譜建立聯系。經費比例：22.5%承擔單位：中國科學院上海生命科學研究院、同濟大學、上海交通大學感謝閱讀課題負責人：徐國良學術骨干：郭熙志、劉海亮、李明發課題四：MSC在組織（造血、神經）再生以及損傷修復中的作用感謝閱讀研究目標：明確、成骨細胞、及其BMP/TGF信號通路是否作為微環境改善HSC的造謝謝閱讀血。明確PTH能否通過調節MSC及其分化的成骨細胞，改善造血微環境，激活感謝閱讀Notch通路，發揮糾正Bmi1缺失引起的造血障礙。精品文檔放心下載利用基因工程小鼠模型，明確內源性在神經組織再生以及損傷修復中的謝謝閱讀作用。明確BMP小分子激動劑在骨/HSC造血/神經再生與修復中的作用。謝謝閱讀研究內容：利用Prx1-CreER(T)iDTROsx-CreER(T)小鼠，特異性殺死MSC或精品文檔放心下載成骨細胞，比較MSC和成骨細胞作為造血微環境在改善HSC造血中的作用；感謝閱讀利用Prx1-CreER(T)以及Dermo-Cre小鼠特異敲除BMPRIA和TGF精品文檔放心下載究MSC中這兩個通路對HSC造血的影響。通過感謝閱讀通路，發揮糾正Bmi1缺失引起的造血障礙的作用。并利用Prx1-CreER(T)；感謝閱讀iDTR、Osx-CreER(T)；小鼠驗證這兩種細胞對PTH促造血的影響。謝謝閱讀利用Prx1-CreER(T);iDTR小鼠以及Dermo-Cre;iDTR小鼠研究MSC感謝閱讀缺失對SSRIsNSC謝謝閱讀利用Prx1-CreER(T);iDTR小鼠以及Dermo-Cre;iDTR小鼠研究MSC感謝閱讀缺失對引起神經損傷修復的影響。10歡迎下載。精品文檔改造蛋白分子以及篩選BMPs2個月小感謝閱讀鼠，研究BMPs激動劑在體內MSC自我更新、分化、骨再生/骨折愈合以及造精品文檔放心下載血和神經損傷修復中的作用。經費比例：承擔單位：同濟大學、中國人民解放軍軍事醫學科學院課題負責人：孫奮勇學術骨干：劉兵、張玲、楊冠各課題間相互關系謝謝閱讀前期工作，本項目設置4個課題：、MSC的骨髓微環境；2.MSC自我更新與分精品文檔放心下載化的信號調控機制；、MSC自我更新與分化的表觀遺傳學調控;4.在組織謝謝閱讀MSC精品文檔放心下載感謝閱讀11歡迎下載。精品文檔感謝閱讀了長期的原創性研究，相互間已有多年合作研究的基礎。MSC感謝閱讀控，旨在闡明體內MSC的維持、自我更新與分化的整體調控網絡。課題四研究謝謝閱讀MSC在幾種組織的再生（生理狀態）以及損傷修復（病理狀態下）中的作用及其感謝閱讀MSC精品文檔放心下載精品文檔放心下載精品文檔放心下載謝謝閱讀感謝閱讀終落腳點。12歡迎下載。精品文檔四、年度計劃研究內容預期目標；MSCMSC；謝謝閱讀謝謝閱讀精品文檔放心下載–YFP。感謝閱讀MSC或感謝閱讀精品文檔放心下載ncRNA第達轉基因小鼠模型，并分別與。

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、和年MSCncRNA表的感謝閱讀8個的13歡迎下載。精品文檔研究內容預期目標2感謝閱讀精品文檔放心下載2究感謝閱讀和在和謝謝閱讀感謝閱讀節中第感謝閱讀精品文檔放心下載和