主要內(nèi)容藥理毒理研究核查要點(diǎn)21藥理毒理研究概要背景介紹4其他33核查方法、技巧及存在的問(wèn)題35第一頁(yè)，共83頁(yè)。《藥品注冊(cè)現(xiàn)場(chǎng)核查管理規(guī)定》藥品注冊(cè)現(xiàn)場(chǎng)核查分為研制現(xiàn)場(chǎng)核查和生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)檢查。分為“常規(guī)”和“有因”核查。研制現(xiàn)場(chǎng)核查：是藥監(jiān)部門(mén)對(duì)所受理藥品注冊(cè)申請(qǐng)的研制情況進(jìn)行實(shí)地確證，對(duì)原始記錄進(jìn)行審查，確認(rèn)申報(bào)資料真實(shí)性、準(zhǔn)確性和完整性的過(guò)程。生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)檢查，是藥監(jiān)部門(mén)對(duì)所受理藥品注冊(cè)申請(qǐng)批準(zhǔn)上市前的樣品批量生產(chǎn)過(guò)程等進(jìn)行實(shí)地檢查，確認(rèn)其是否與核定的或申報(bào)的生產(chǎn)工藝相符合的過(guò)程。研制現(xiàn)場(chǎng)核查：臨床前（藥學(xué)、藥理毒理）

臨床

第二頁(yè)，共83頁(yè)。3背景介紹藥品注冊(cè)現(xiàn)場(chǎng)核查管理規(guī)定，2008年5月頒布實(shí)施核查工作的開(kāi)展，顯著促進(jìn)了藥品研發(fā)、生產(chǎn)過(guò)程的規(guī)范性、真實(shí)性、符合性。隨著GLP、GCP、GMP的嚴(yán)格執(zhí)行，以注冊(cè)為目的藥品研發(fā)和生產(chǎn)水平顯著提高。第三頁(yè)，共83頁(yè)。形勢(shì)依然嚴(yán)峻，責(zé)任依然重大食品藥品監(jiān)管新形勢(shì)的要求審評(píng)審批制度改革弄虛作假的現(xiàn)象仍然存在部分檢查人員責(zé)任心不強(qiáng)，技術(shù)手段能力不足，不能發(fā)現(xiàn)問(wèn)題第四頁(yè)，共83頁(yè)。四個(gè)最嚴(yán)要切實(shí)加強(qiáng)食品藥品安全監(jiān)管，用最嚴(yán)謹(jǐn)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)、最嚴(yán)格的監(jiān)管、最嚴(yán)厲的處罰、最嚴(yán)肅的問(wèn)責(zé)，加快建立科學(xué)完善的食品藥品安全治理體系，嚴(yán)把從農(nóng)田到餐桌、從實(shí)驗(yàn)室到醫(yī)院的每一道防線。

——習(xí)近平第五頁(yè)，共83頁(yè)。國(guó)務(wù)院關(guān)于改革藥品醫(yī)療器械審評(píng)審批制度的意見(jiàn)

國(guó)發(fā)〔2015〕44號(hào)

（十三）嚴(yán)肅查處注冊(cè)申請(qǐng)弄虛作假行為。加強(qiáng)臨床試驗(yàn)全過(guò)程監(jiān)管，確保臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)可靠。申請(qǐng)人、研究機(jī)構(gòu)在注冊(cè)申請(qǐng)中，如存在報(bào)送虛假研制方法、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、藥理及毒理試驗(yàn)數(shù)據(jù)、臨床試驗(yàn)結(jié)果等情況，對(duì)其藥品醫(yī)療器械注冊(cè)申請(qǐng)不予批準(zhǔn)，已批準(zhǔn)的予以撤銷(xiāo)；對(duì)直接責(zé)任人依法從嚴(yán)處罰，對(duì)出具虛假試驗(yàn)結(jié)果的研究機(jī)構(gòu)取消相關(guān)試驗(yàn)資格，處罰結(jié)果向社會(huì)公布。第六頁(yè)，共83頁(yè)。全國(guó)藥品審評(píng)審批制度改革工作會(huì)議在上海召開(kāi)

2015年08月25日發(fā)布

要堅(jiān)持問(wèn)題導(dǎo)向和底線思維，時(shí)刻聚焦風(fēng)險(xiǎn)，研究防范措施和消除隱患的具體辦法；要端正態(tài)度和正視問(wèn)題，以發(fā)現(xiàn)問(wèn)題、防范風(fēng)險(xiǎn)作為主要的工作評(píng)價(jià)指標(biāo)，形成敢于揭露問(wèn)題的風(fēng)氣和氛圍；要扎實(shí)做好每一項(xiàng)工作，確保尺度不放松，標(biāo)準(zhǔn)不降低，確保工作質(zhì)量。總局要加強(qiáng)督導(dǎo)檢查，發(fā)現(xiàn)問(wèn)題要嚴(yán)肅處理。各級(jí)食品藥品監(jiān)管部門(mén)要?jiǎng)訂T各方力量，形成合力，認(rèn)真落實(shí)各項(xiàng)工作措施，堅(jiān)決貫徹黨中央、國(guó)務(wù)院的決策部署，以改革的實(shí)際成效取信于民，為保障公眾健康、促進(jìn)產(chǎn)業(yè)升級(jí)做出新的貢獻(xiàn)。第七頁(yè)，共83頁(yè)。國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局關(guān)于開(kāi)展藥物臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)自查核查工作的公告（2015年第117號(hào)）

2015年07月22日發(fā)布

CFDA在行動(dòng)第八頁(yè)，共83頁(yè)。藥物臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)自查核查工作

第二次電視電話會(huì)議吳湞要求，省局要加強(qiáng)對(duì)藥物臨床試驗(yàn)的監(jiān)管。要督促轄區(qū)內(nèi)申請(qǐng)人抓緊時(shí)間進(jìn)行自查和填報(bào)，對(duì)行政區(qū)域內(nèi)申請(qǐng)人的自查工作進(jìn)行監(jiān)督檢查并報(bào)告總局。要對(duì)藥品注冊(cè)現(xiàn)場(chǎng)核查結(jié)論進(jìn)行復(fù)核，對(duì)已完成的藥品注冊(cè)現(xiàn)場(chǎng)核查結(jié)論進(jìn)行有重點(diǎn)的回顧性審查；對(duì)總局在核查中發(fā)現(xiàn)資料造假且地方現(xiàn)場(chǎng)核查敷衍了事、走過(guò)場(chǎng)的，除依法處理相關(guān)申請(qǐng)人外，還要追究承擔(dān)現(xiàn)場(chǎng)核查工作的相關(guān)責(zé)任人的責(zé)任。要加強(qiáng)現(xiàn)場(chǎng)核查能力建設(shè)，在藥品注冊(cè)現(xiàn)場(chǎng)核查方面，省局必須有責(zé)、有崗、有人、有手段，切實(shí)履行監(jiān)管職責(zé)和檢驗(yàn)職責(zé)，確保按時(shí)限完成核查、確保不委托核查、確保有能力完成核查。今后，總局將把各地履行現(xiàn)場(chǎng)核查職責(zé)的情況納入對(duì)地方政府食品藥品監(jiān)管工作的年度考核。第九頁(yè)，共83頁(yè)。銀杏葉提取物事件

自今年5月以來(lái)，因企業(yè)擅自改變銀杏葉提取物生產(chǎn)工藝而起的“銀杏葉事件”持續(xù)發(fā)酵。6月22日，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局就90家銀杏葉提取物和銀杏葉藥品生產(chǎn)企業(yè)自檢情況發(fā)布通告稱，經(jīng)過(guò)自檢，不合格產(chǎn)品批次為2335批，占全部批次的45%。“銀杏葉”風(fēng)波牽涉到至少48家銀杏葉制劑生產(chǎn)企業(yè)和銀杏葉提取物生產(chǎn)企業(yè)，查處問(wèn)題主要為用3%鹽酸代替稀乙醇制備銀杏葉提取物。國(guó)家食藥監(jiān)總局通報(bào)稱，擅自改變提取工藝，存在“分解藥品有效成分，影響藥品療效”風(fēng)險(xiǎn)。第十頁(yè)，共83頁(yè)。11藥理毒理研究概要藥理毒理研究的重要性

安全、有效、質(zhì)量可控，藥理毒理研究工作是創(chuàng)新藥物安全有效的最直接體現(xiàn)。藥理毒理研究?jī)?nèi)容多樣性藥理藥理毒理研究方法技術(shù)的多樣性藥理學(xué)、毒理學(xué)、藥學(xué)、免疫學(xué)、生物學(xué)、細(xì)胞、細(xì)菌、分析化學(xué)、分子生物學(xué)新型藥物的藥理毒理評(píng)價(jià)的特殊性生物技術(shù)藥、納米技術(shù)藥、生物制品、脂質(zhì)體、微球等等

核查人員需要更多的專(zhuān)業(yè)知識(shí)背景第十一頁(yè)，共83頁(yè)。12藥理毒理研究主要內(nèi)容附件2表中藥理毒理研究項(xiàng)目藥效、一般藥理、急性毒性、長(zhǎng)期毒性、過(guò)敏性、溶血性、局部刺激性、致突變、生殖毒性、致癌性、依賴性、藥代動(dòng)力學(xué)第十二頁(yè)，共83頁(yè)。化學(xué)藥品注冊(cè)分類(lèi)申報(bào)資料要求（三）藥理毒理研究資料

16.藥理毒理研究資料綜述。

17.主要藥效學(xué)試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。

18.一般藥理學(xué)的試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。

19.急性毒性試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。

20.長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。

21.過(guò)敏性（局部、全身和光敏毒性）、溶血性和局部（血管、皮膚、粘膜、肌肉等）刺激性等特殊安全性試驗(yàn)資料和文獻(xiàn)資料。

22.復(fù)方制劑中多種成份藥效、毒性、藥代動(dòng)力學(xué)相互影響的試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。

23.致突變?cè)囼?yàn)資料及文獻(xiàn)資料。

24.生殖毒性試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。

25.致癌試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。

26.依賴性試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。

27.非臨床藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)資料及文獻(xiàn)資料。第十三頁(yè)，共83頁(yè)。藥物非臨床安全性評(píng)價(jià)（GLP）單次、多次給藥毒性試驗(yàn)（嚙齒類(lèi)、非嚙齒類(lèi)）生殖毒性試驗(yàn)遺傳毒性試驗(yàn)致癌試驗(yàn)局部毒性試驗(yàn)免疫原性試驗(yàn)安全性藥理試驗(yàn)毒代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)第十四頁(yè)，共83頁(yè)。藥品質(zhì)量檢查中生物學(xué)檢查項(xiàng)目生物檢查法

微生物檢查

安全性檢查生物活性測(cè)定法生物制品相關(guān)檢查第十五頁(yè)，共83頁(yè)。安全性檢查項(xiàng)目異常毒性檢查法熱原檢查法/細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法升壓物質(zhì)檢查法降壓物質(zhì)檢查法/組胺類(lèi)物質(zhì)檢查法過(guò)敏反應(yīng)檢查法溶血與凝聚檢查法第十六頁(yè)，共83頁(yè)。17核查要點(diǎn)及判定原則1．研究條件1.1是否建立實(shí)驗(yàn)研究相關(guān)的管理制度，并在研究中予以執(zhí)行。1.2研究人員是否從事過(guò)該項(xiàng)研究工作，并與申報(bào)資料的記載一致。1.3研究現(xiàn)場(chǎng)是否具有與研究項(xiàng)目相適應(yīng)的場(chǎng)所、設(shè)備和儀器。1.4研究期間的儀器設(shè)備是否校驗(yàn)合格，是否具有使用記錄，記錄時(shí)間與研究時(shí)間是否對(duì)應(yīng)一致。記錄內(nèi)容是否與申報(bào)資料一致。第十七頁(yè)，共83頁(yè)。18核查要點(diǎn)及判定原則2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物2.1是否具有購(gòu)置實(shí)驗(yàn)所用動(dòng)物的確切憑證。2.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物購(gòu)置時(shí)間和數(shù)量是否與申報(bào)資料對(duì)應(yīng)一致。2.3購(gòu)置實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種系、等級(jí)、合格證號(hào)、個(gè)體特征等是否與申報(bào)資料對(duì)應(yīng)一致。2.4實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)單位應(yīng)具備相應(yīng)的資質(zhì)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為本單位飼養(yǎng)繁殖的，是否能提本單位具有飼養(yǎng)動(dòng)物的資質(zhì)證明及動(dòng)物飼養(yǎng)繁殖的記錄。第十八頁(yè)，共83頁(yè)。19核查要點(diǎn)及判定原則3.原始記錄3.1各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)原始記錄是否真實(shí)、準(zhǔn)確、完整，是否與申報(bào)資料一致。3.2原始記錄中的實(shí)驗(yàn)單位、人員、日期、數(shù)據(jù)、以及實(shí)驗(yàn)結(jié)果等是否與申報(bào)資料一致。3.3原始資料中供試品、對(duì)照品的配制、儲(chǔ)存等記錄是否完整，是否和申報(bào)資料中反映的情況相對(duì)應(yīng)。3.4原始圖表(包括電子圖表)和照片是否保存完整，與申報(bào)資料一致。3.5組織病理切片、病理報(bào)告及病理試驗(yàn)記錄是否保存完整并與申報(bào)資料一致；若病理照片為電子版，是否保存完好。第十九頁(yè)，共83頁(yè)。20核查要點(diǎn)及判定原則4.委托研究其他部門(mén)或單位進(jìn)行的研究、試制、檢測(cè)等工作，是否有委托證明材料。委托證明材料反映的委托單位、時(shí)聞、項(xiàng)目及方案等是否與申報(bào)資料記載一致。被委托機(jī)構(gòu)出具的報(bào)告書(shū)或圖譜是否為加蓋其公章的原件。必要時(shí)，可對(duì)被委托機(jī)構(gòu)進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)核查，以確證其研究條件和研究情況。第二十頁(yè)，共83頁(yè)。核查過(guò)程及技巧核查組成員提前確定好行程、主要分工首次會(huì)議現(xiàn)場(chǎng)核查

可以先聽(tīng)取研究機(jī)構(gòu)對(duì)該項(xiàng)目的簡(jiǎn)介末次會(huì)議結(jié)果反饋，認(rèn)可后填寫(xiě)報(bào)告表，雙方簽字蓋章第二十一頁(yè)，共83頁(yè)。核查過(guò)程及技巧主要技術(shù)手段：“三看”看與問(wèn)結(jié)合相互交叉合理分工合理安排時(shí)間研究條件申報(bào)資料實(shí)驗(yàn)記錄第二十二頁(yè)，共83頁(yè)。核查過(guò)程及技巧申報(bào)資料（報(bào)告）：《藥品研制情況申報(bào)表》，《藥品注冊(cè)生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)檢查申請(qǐng)表》最好是核查人員從省局?jǐn)y帶的資料（如何確定研究單位保存的報(bào)告與申報(bào)資料的一致性？）首先要熟悉試驗(yàn)內(nèi)容，看明白整個(gè)試驗(yàn)的設(shè)計(jì)、方法、主要實(shí)驗(yàn)條件、主要耗材（動(dòng)物、細(xì)胞株等）、主要結(jié)論，做到心中有數(shù)，帶著關(guān)鍵點(diǎn)去核查。看資料：試驗(yàn)原始記錄、人員資質(zhì)證書(shū)、設(shè)備設(shè)施證書(shū)、儀器使用登記、實(shí)驗(yàn)室出入記錄、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境監(jiān)測(cè)記錄、動(dòng)物購(gòu)買(mǎi)使用憑證。。。看研究條件：人員、場(chǎng)所、設(shè)備第二十三頁(yè)，共83頁(yè)。24核查技巧－研究條件配套的實(shí)驗(yàn)室管理制度，如實(shí)驗(yàn)室日常管理規(guī)范，SOP，毒理學(xué)研究執(zhí)行GLP的情況組織機(jī)構(gòu)、人員配備是否滿足申報(bào)資料中反應(yīng)的研究需要申報(bào)資料、原始記錄上的實(shí)驗(yàn)人員名單以及簽名情況和研究人員現(xiàn)場(chǎng)溝通，了解研究人員對(duì)實(shí)驗(yàn)的熟悉、掌握程度實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所：動(dòng)物飼養(yǎng)室、手術(shù)室、解剖室、觀察室、切片室、細(xì)胞培養(yǎng)室等，能飼養(yǎng)的動(dòng)物數(shù)和實(shí)驗(yàn)所需動(dòng)物數(shù)（多個(gè)實(shí)驗(yàn)同時(shí)進(jìn)行時(shí)）核查主要儀器設(shè)備型號(hào)和申報(bào)資料一致性第二十四頁(yè)，共83頁(yè)。25核查技巧－研究條件儀器購(gòu)入時(shí)間（從發(fā)票、固定資產(chǎn)登記儀器使用記錄、儀器使用說(shuō)明中獲悉）與實(shí)驗(yàn)時(shí)間的銜接性儀器使用記錄的原始性，還是后來(lái)補(bǔ)填的，儀器校驗(yàn)標(biāo)簽儀器使用登記、儀器校準(zhǔn)：承擔(dān)法定計(jì)量工作的單位、通過(guò)計(jì)量認(rèn)證、國(guó)家實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可的單位、GLP管理的實(shí)驗(yàn)室相對(duì)較規(guī)范。核查過(guò)程中注意“不規(guī)范”與“不符合”“不真實(shí)”的區(qū)別界限。實(shí)驗(yàn)器材的量程、精度與實(shí)驗(yàn)的匹配性第二十五頁(yè)，共83頁(yè)。核查技巧－原始記錄《藥品研究實(shí)驗(yàn)記錄暫行規(guī)定》2000藥品研究實(shí)驗(yàn)記錄：是指在藥品研究過(guò)程中，應(yīng)用實(shí)驗(yàn)、觀察、調(diào)查或資料分析等方法，根據(jù)實(shí)際情況直接記錄或統(tǒng)計(jì)形成的各種數(shù)據(jù)、文字、圖表、聲像等原始資料。實(shí)驗(yàn)記錄的基本要求：真實(shí)、及時(shí)、準(zhǔn)確、完整，防止漏記和隨意涂改。不得偽造、編造數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)記錄應(yīng)妥善保存，避免水浸、墨污、卷邊，保持整潔、完好、無(wú)破損、不丟失。第二十六頁(yè)，共83頁(yè)。27核查技巧－原始記錄試驗(yàn)中產(chǎn)生的所有記錄都在原始記錄的范圍原始記錄的原始性核查最原始的實(shí)驗(yàn)記錄：如儀器本身保存的圖譜原始記錄中，研究探索性過(guò)程的記錄情況，不是對(duì)申報(bào)資料的簡(jiǎn)單謄抄原始資料的完整性：原始圖表，照片，病理切片，實(shí)驗(yàn)記錄原始記錄的修改與不可修改：實(shí)驗(yàn)記錄不得隨意刪除、修改或增減數(shù)據(jù)。如必須修改，須在修改處劃一斜線，不可完全涂黑，保證修改前記錄能夠辨認(rèn)，并應(yīng)由修改人簽字，注明修改時(shí)間及原因。第二十七頁(yè)，共83頁(yè)。稽查軟件：液相色譜儀等，開(kāi)啟相關(guān)功能，就可以知道該臺(tái)儀器什么時(shí)候修改過(guò)什么內(nèi)容。數(shù)據(jù)取舍與重復(fù)測(cè)定的問(wèn)題：是否對(duì)于不符合研究目的的數(shù)據(jù)反復(fù)測(cè)量，選取“合適的”數(shù)值？數(shù)據(jù)的取舍：不是不可以，要有依據(jù)，要保留所有的記錄。以前我們主要看申報(bào)的資料是否有來(lái)源，認(rèn)為申報(bào)資料與原始記錄一致就可以了，但以后應(yīng)該關(guān)注數(shù)據(jù)產(chǎn)生過(guò)程的真實(shí)性、可靠性！第二十八頁(yè)，共83頁(yè)。29核查技巧－委托研究委托證明材料包括委托協(xié)議，合同及委托證明等委托協(xié)議或合作合同可以允許有2-3份原件，主要看是否加蓋印章（公章是否為掃描，打印？）委托協(xié)議簽訂時(shí)間是否和實(shí)驗(yàn)時(shí)間矛盾；整體各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)時(shí)間銜接性，如長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)取材、指標(biāo)檢測(cè)時(shí)間協(xié)議金額和所作研究實(shí)際費(fèi)用的對(duì)應(yīng)性對(duì)被委托單位進(jìn)行的現(xiàn)場(chǎng)核查，其要點(diǎn)和核查技巧可以更為針對(duì)性第二十九頁(yè)，共83頁(yè)。30藥理毒理研究委托研究現(xiàn)象普遍，多數(shù)生產(chǎn)單位或研制單位都是委托科研機(jī)構(gòu)、安評(píng)中心等完成，還可能委托多家單位進(jìn)行藥理毒理研究，存在跨省、跨多個(gè)單位的可能性。同一個(gè)試驗(yàn)在不同的場(chǎng)所：如藥物代謝研究，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)在一個(gè)研究機(jī)構(gòu)，取血后至另一個(gè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)，甚至是不同的城市間。核查人員要如實(shí)記錄你所看過(guò)的部分，沒(méi)有看到的不要寫(xiě)。第三十頁(yè)，共83頁(yè)。核查技巧：

利用好幾個(gè)邏輯軸線，

抓住幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)第三十一頁(yè)，共83頁(yè)。1時(shí)間軸（關(guān)鍵點(diǎn)：時(shí)間邏輯性）合同簽訂、供試品接收等、SD任命、方案制定和審核、試驗(yàn)過(guò)程、報(bào)告日期。各種登記日期與實(shí)驗(yàn)日期是否一致？?jī)x器設(shè)備購(gòu)入時(shí)期是否在試驗(yàn)開(kāi)展之前？試劑試藥的生產(chǎn)日期與實(shí)驗(yàn)日期的銜接性？（所用試劑耗材批號(hào)（生產(chǎn)日期）是否在試驗(yàn)開(kāi)展之后？）實(shí)驗(yàn)中采用的對(duì)照藥物氯化鈉注射液生產(chǎn)日期在實(shí)驗(yàn)日期之后。

第三十二頁(yè)，共83頁(yè)。采用技術(shù)手段核查時(shí)間一致性：文件屬性中的時(shí)間邏輯相機(jī)拍照的時(shí)間儀器內(nèi)部的時(shí)間第三十三頁(yè)，共83頁(yè)。2動(dòng)物軸（關(guān)鍵點(diǎn)：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物）

動(dòng)物申請(qǐng)、購(gòu)買(mǎi)、接收、檢疫、使用、處死生產(chǎn)許可證、使用許可證、合格證實(shí)驗(yàn)所用動(dòng)物的購(gòu)置憑證，包括發(fā)票、出貨單、動(dòng)物合格證等申報(bào)資料上有相關(guān)購(gòu)置憑證復(fù)印件的，核查其原件憑證上顯示的動(dòng)物數(shù)量、購(gòu)置時(shí)間和申報(bào)資料的對(duì)應(yīng)性（購(gòu)買(mǎi)數(shù)量與使用數(shù)量、剩余動(dòng)物的處理）一段時(shí)間內(nèi)進(jìn)行多個(gè)實(shí)驗(yàn)的，統(tǒng)計(jì)所需動(dòng)物總數(shù)和購(gòu)置動(dòng)物總數(shù)是否對(duì)應(yīng)第三十四頁(yè)，共83頁(yè)。個(gè)體特征：動(dòng)物的體重、性別、周齡、月齡（實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與動(dòng)物生長(zhǎng)規(guī)律、基礎(chǔ)數(shù)值的一致性）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物清潔級(jí)別與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證的符合情況問(wèn)題：1某局部用藥的品種進(jìn)行陰道刺激實(shí)驗(yàn)時(shí)，原始記錄中采用動(dòng)物為雌雄各半，這時(shí)需要認(rèn)真核查各種憑證，看是否為筆誤。2某單位實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證屏障系統(tǒng)包括SPF級(jí)豚鼠，但實(shí)際試驗(yàn)均為普通環(huán)境普通級(jí)豚鼠。3某企業(yè)質(zhì)檢部門(mén)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室有使用許可證，但研發(fā)部門(mén)在自己的實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行藥效學(xué)、藥代學(xué)研究，所寫(xiě)許可證號(hào)就是公司的研發(fā)部門(mén)的號(hào)（單位門(mén)牌號(hào)不同）。第三十五頁(yè)，共83頁(yè)。3樣品軸

樣本接收、留樣、領(lǐng)用、配制、銷(xiāo)毀、返還等記錄。總數(shù)符合性。試驗(yàn)用樣品的來(lái)源，規(guī)格、批號(hào)、保存條件等是寄送的樣品：保留快遞單據(jù)、過(guò)程中如何保證儲(chǔ)存條件？是否有補(bǔ)送樣品：長(zhǎng)期試驗(yàn)可能采用不同批次的樣品是否采用不同的樣品：如藥物制劑的某項(xiàng)毒理學(xué)試驗(yàn)是采用原料進(jìn)行的（與申報(bào)資料一致）第三十六頁(yè)，共83頁(yè)。要在報(bào)告中說(shuō)明，采用XXX樣品進(jìn)行了XXX試驗(yàn)。不同規(guī)格的樣品如果進(jìn)行了一個(gè)規(guī)格的試驗(yàn)研究，也要在報(bào)告中寫(xiě)明。注意核查的針對(duì)性：舉例：由于主要原料、輔料或生產(chǎn)工藝改變，補(bǔ)充藥理毒理資料的，一定要全過(guò)程追溯是否用新原輔料、新工藝生產(chǎn)、研究。如果受試品不是采用新的原輔料或工藝生產(chǎn)的則毫無(wú)意義。第三十七頁(yè)，共83頁(yè)。藥物非臨床安全性評(píng)價(jià)供試品檢測(cè)要求的Q&A（核查新難點(diǎn)）

毒理試驗(yàn)報(bào)告中應(yīng)該含有（1）供試品的基本理化性質(zhì)檢驗(yàn)報(bào)告單：包含來(lái)源、批號(hào)、純度、濃度、處方組成包括輔料、穩(wěn)定性、溶解性、有效期、保存條件等信息。（2）若供試品需經(jīng)溶解后（混合、混懸、溶解）給藥，應(yīng)提供供試品在溶劑中的穩(wěn)定性、均一性（非溶液體系）等檢測(cè)報(bào)告（濃度范圍需能覆蓋全部毒理試驗(yàn)的濃度范圍），以及配制后的供試品濃度分析報(bào)告。（3）針對(duì)檢測(cè)供試品濃度和含量分析的方法學(xué)驗(yàn)證報(bào)告。報(bào)告中上述信息應(yīng)完整，但在格式方面無(wú)嚴(yán)格要求。第三十八頁(yè)，共83頁(yè)。4病理方面的核對(duì)組織病理切片是否整理歸類(lèi)，明確標(biāo)示，保存規(guī)范完整，必要時(shí)進(jìn)行顯微鏡下核對(duì)確認(rèn)。病理學(xué)檢查是毒理學(xué)評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)，標(biāo)本保存的重要性。如長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)中、低劑量組可能沒(méi)有進(jìn)行制片，但要看濕標(biāo)本數(shù)量是否符合濕標(biāo)本、蠟塊、切片的數(shù)量的編號(hào)病理照片：是否有相同的照片小技巧：查看蠟塊與切片的輪廓一致性第三十九頁(yè)，共83頁(yè)。病理過(guò)程解剖-取材-脫水-包埋-切片-染色-封片-閱片儀器包埋機(jī)、脫水機(jī)、切片機(jī)、顯微鏡等抽查儀器使用記錄，與試驗(yàn)過(guò)程的時(shí)間一致性，閱片記錄與病理照片拍攝時(shí)間的一致性等案例：某單位由于開(kāi)展毒理學(xué)評(píng)價(jià)項(xiàng)目過(guò)多（超出了單位規(guī)模容量），國(guó)家局組織飛行檢查，首先就看病理標(biāo)本數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于試驗(yàn)動(dòng)物數(shù)量，直接就判定為虛假報(bào)告。第四十頁(yè)，共83頁(yè)。正確處理真實(shí)性、規(guī)范性與科學(xué)性的關(guān)系科學(xué)性不是核查的內(nèi)容（技術(shù)審評(píng)）核查時(shí)間緊，任務(wù)重，避免耽誤太多時(shí)間與被核查單位探討試驗(yàn)技術(shù)等內(nèi)容明顯不科學(xué)的數(shù)據(jù)會(huì)隱藏真實(shí)性問(wèn)題！有些實(shí)驗(yàn)資料根據(jù)科學(xué)性可初步判斷真實(shí)性：如被動(dòng)皮膚過(guò)敏試驗(yàn)，采用大鼠在不加佐劑的情況下獲得良好的結(jié)果；某局部刺激作用明顯的抗生素肌肉刺激研究結(jié)果為陰性。第四十一頁(yè)，共83頁(yè)。核查記錄和報(bào)告的書(shū)寫(xiě)1主要內(nèi)容要全面：時(shí)間、地點(diǎn)、參加人員、研究單位條件等關(guān)鍵點(diǎn)一定要看到、有記錄2認(rèn)真做好記錄和取證：2.1發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題、查看、核對(duì)的數(shù)據(jù)，符合的不符合的都要認(rèn)真記錄；2.2必要時(shí)要拍照、復(fù)印取證2.3記錄要詳實(shí)、具體不要模糊描述，“如抽查2個(gè)圖譜，原始記錄與液相色譜電腦中數(shù)據(jù)一致”。要寫(xiě)明：時(shí)間、組別、編號(hào)等詳細(xì)信息。第四十二頁(yè)，共83頁(yè)。3按要求采用表格：全表簽名別遺漏4報(bào)告中要包括關(guān)鍵信息，而不是簡(jiǎn)單下一個(gè)“未發(fā)現(xiàn)真實(shí)性問(wèn)題”的結(jié)論。5結(jié)論明確：

通過(guò)（責(zé)任）不通過(guò)（證據(jù)充分，經(jīng)得起質(zhì)疑甚至訴訟）第四十三頁(yè)，共83頁(yè)。其他問(wèn)題1核查員的組織紀(jì)律性廉政要按照省局、中心的要求進(jìn)行核查；2尊重被檢查單位和人員不要高高在上，盛氣凌人學(xué)會(huì)與被檢查單位的正確溝通詢問(wèn)和取證的技巧：發(fā)現(xiàn)不合理的地方，如果直接問(wèn)為什么這樣，會(huì)有很多理由。合理安排，不要想起什么看什么，能一次解決的，別讓研究機(jī)構(gòu)人員來(lái)回跑第四十四頁(yè)，共83頁(yè)。3遇到特殊問(wèn)題及時(shí)跟派出機(jī)構(gòu)聯(lián)系，請(qǐng)示、匯報(bào)；4不要把精力放在與核查無(wú)關(guān)的事件上：業(yè)務(wù)探討、交流等5勿流于形式：看看核查規(guī)定中的要點(diǎn)都看了嗎？第四十五頁(yè)，共83頁(yè)。藥物刺激性、過(guò)敏性和溶血性研究試驗(yàn)方法簡(jiǎn)介山東省食品藥品檢驗(yàn)研究院祝清芬2015.11第四十六頁(yè)，共83頁(yè)。定義也稱特殊安全性試驗(yàn)刺激性、過(guò)敏性、溶血性是指藥物制劑經(jīng)皮膚、粘膜、腔道、血管等非口服途徑給藥，對(duì)用藥局部產(chǎn)生的毒性（如刺激性和局部過(guò)敏性等）和/或?qū)θ懋a(chǎn)生的毒性（如全身過(guò)敏性和溶血性等），為臨床前安全性評(píng)價(jià)的組成部分。GLP基本原則：重復(fù)、隨機(jī)、對(duì)照整體性、綜合性原則Casebycase第四十七頁(yè)，共83頁(yè)。研究依據(jù)2014年5月:藥物刺激性、過(guò)敏性和溶血性研究技術(shù)指導(dǎo)原則(適用于中藥、天然藥物、化學(xué)藥物)。相關(guān)指導(dǎo)原則建審評(píng)中心網(wǎng)站舊的指導(dǎo)原則:化學(xué)藥物刺激性、過(guò)敏性和溶血性研究技術(shù)指導(dǎo)原則,2005年3月中藥、天然藥物局部刺激性和溶血性研究技術(shù)指導(dǎo)原則,2005年3月第四十八頁(yè)，共83頁(yè)。第四十九頁(yè)，共83頁(yè)。第五十頁(yè)，共83頁(yè)。第五十一頁(yè)，共83頁(yè)。刺激性試驗(yàn)

刺激性是指非口服給藥制劑給藥后對(duì)給藥部位產(chǎn)生的可逆性炎癥反應(yīng)，若給藥部位產(chǎn)生了不可逆性的組織損傷則稱為腐蝕性。刺激性試驗(yàn)是觀察動(dòng)物的血管、肌肉、皮膚、粘膜等部位接觸受試物后是否引起紅腫、充血、滲出、變性或壞死等局部反應(yīng)。第五十二頁(yè)，共83頁(yè)。1．給藥部位一般應(yīng)選擇與臨床給藥相似的部位，并觀察對(duì)可能接觸到受試物的周?chē)M織的影響。2．給藥途徑一般應(yīng)與臨床用藥途徑一致，否則應(yīng)加以說(shuō)明。3．對(duì)照組以溶媒和/或賦形劑作為陰性對(duì)照，必要時(shí)采用已上市制劑作對(duì)照。第五十三頁(yè)，共83頁(yè)。4．給藥濃度、劑量與體積可選擇幾種不同濃度，至少應(yīng)包括臨床擬用最高濃度。如果技術(shù)上難以達(dá)到臨床擬用最高濃度，如皮膚刺激性試驗(yàn)，在給藥面積不變的情況下，可通過(guò)改變給藥頻次進(jìn)行劑量調(diào)整，而不應(yīng)通過(guò)增加厚度來(lái)達(dá)到增加給藥量的目的。設(shè)計(jì)給藥濃度、劑量與體積時(shí)，應(yīng)根據(jù)臨床用藥情況，并考慮受試動(dòng)物給藥部位的解剖和生理特點(diǎn)，保證受試物在給藥部位的有效暴露。第五十四頁(yè)，共83頁(yè)。5．給藥頻率與周期應(yīng)根據(jù)臨床用藥情況，一般給藥周期最長(zhǎng)不超過(guò)4周。建議進(jìn)行恢復(fù)期觀察，同時(shí)評(píng)價(jià)給藥局部及周?chē)M織毒性反應(yīng)的可逆性。6．觀察指標(biāo)6.1肉眼觀察應(yīng)詳細(xì)描述局部反應(yīng)，包括紅斑、水腫、充血程度及范圍，計(jì)分表示。同時(shí)觀察動(dòng)物的一般狀態(tài)、行為、體征等。6.2組織病理學(xué)檢查應(yīng)詳細(xì)描述給藥部位的病理變化，并半定量分析、判斷。提供相應(yīng)的組織病理學(xué)照片。第五十五頁(yè)，共83頁(yè)。7．試驗(yàn)方法具體可參考附錄中常用方法和相關(guān)文獻(xiàn)。8．統(tǒng)計(jì)方法根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ秃驮囼?yàn)方法選擇合適的統(tǒng)計(jì)方法。第五十六頁(yè)，共83頁(yè)。（一）刺激性試驗(yàn)方法1．血管刺激性試驗(yàn)2.肌肉刺激性試驗(yàn)3．皮膚刺激性試驗(yàn)4.粘膜刺激性試驗(yàn)4.1眼刺激性試驗(yàn)4.2滴鼻劑和吸入劑刺激性試驗(yàn)4.3陰道刺激性試驗(yàn)4.4直腸刺激性試驗(yàn)4.5口腔用藥、滴耳劑等刺激性試驗(yàn)5．皮膚給藥光毒性試驗(yàn)第五十七頁(yè)，共83頁(yè)。血管刺激性1．血管刺激性試驗(yàn)通常選兔，每組不少于3只。設(shè)生理鹽水和/或溶媒對(duì)照，可采用同體左右側(cè)自身對(duì)比法。給藥部位根據(jù)臨床擬用途徑確定，一般選用耳緣靜脈。可設(shè)多個(gè)給藥濃度，至少包括臨床最大擬用濃度，給藥容積、速率和期限一般根據(jù)臨床擬用法用量，并根據(jù)動(dòng)物情況進(jìn)行調(diào)整，給藥體積不可太低。多次給藥時(shí)間一般不超過(guò)7天。第五十八頁(yè)，共83頁(yè)。根據(jù)受試藥物的特點(diǎn)和刺激性反應(yīng)情況選擇觀察時(shí)間和剖檢時(shí)間，至少觀察72小時(shí)。應(yīng)對(duì)部分動(dòng)物進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。恢復(fù)期動(dòng)物根據(jù)受試物的特點(diǎn)和刺激性反應(yīng)情況，繼續(xù)觀察14～21天進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。根據(jù)肉眼觀察和組織病理學(xué)檢查結(jié)果綜合判斷受試物的血管刺激性及刺激性恢復(fù)情況。第五十九頁(yè)，共83頁(yè)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：兔數(shù)量：每組不少于3只（不宜過(guò)少，實(shí)驗(yàn)結(jié)束和恢復(fù)期各解剖幾只？）左右側(cè)自身對(duì)照：供試品濃度：一般為臨床使用濃度（高、低劑量）給藥途徑：臨床給藥途徑（靜注、靜滴），可使用注射泵等設(shè)備。給藥劑量：一般為臨床劑量的數(shù)倍給藥速度：靜注、靜滴第六十頁(yè)，共83頁(yè)。上市藥物對(duì)照：存在刺激性要與上市藥物對(duì)照組比較恢復(fù)期設(shè)置：有的研究機(jī)構(gòu)給藥期結(jié)束如無(wú)刺激性，不設(shè)恢復(fù)期（不合理）第六十一頁(yè)，共83頁(yè)。肌肉刺激性：通常選兔，也可選用大鼠。反應(yīng)級(jí)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)、刺激性判斷標(biāo)準(zhǔn)股四頭肌的位置皮膚刺激性：評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)通常選兔、小型豬正常皮膚和破損皮膚粘膜刺激性：眼刺激性：裂隙燈顯微鏡等口腔粘膜，常用倉(cāng)鼠吸入裝置皮膚光毒性：第六十二頁(yè)，共83頁(yè)。過(guò)敏性試驗(yàn)過(guò)敏性又稱超敏反應(yīng)，指機(jī)體受同一抗原再刺激后產(chǎn)生的一種表現(xiàn)為組織損傷或生理功能紊亂的特異性免疫反應(yīng)。過(guò)敏性試驗(yàn)是觀察動(dòng)物接觸受試物后的全身或局部過(guò)敏反應(yīng)。第六十三頁(yè)，共83頁(yè)。1．試驗(yàn)方法進(jìn)行何種過(guò)敏性試驗(yàn)應(yīng)根據(jù)藥物特點(diǎn)、臨床適應(yīng)癥、給藥方式、過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生機(jī)制、影響因素等確定。通常局部給藥發(fā)揮全身作用的藥物（如注射劑和透皮吸收劑等）需考察Ⅰ型過(guò)敏反應(yīng)，如注射劑需進(jìn)行主動(dòng)全身過(guò)敏試驗(yàn)（ActiveSystemicAnaphylaxis,ASA）和被動(dòng)皮膚過(guò)敏試驗(yàn)（PassiveCutaneousAnaphylaxis,PCA），透皮吸收劑需進(jìn)行主動(dòng)皮膚過(guò)敏試驗(yàn)（ActiveCutaneousAnaphylaxis,ACA）。吸入途徑藥物應(yīng)采用豚鼠吸入誘導(dǎo)和刺激試驗(yàn)。第六十四頁(yè)，共83頁(yè)。粘膜給藥應(yīng)結(jié)合受試物的特點(diǎn)參照經(jīng)皮給藥過(guò)敏性試驗(yàn)方法進(jìn)行。如受試物的化學(xué)結(jié)構(gòu)與文獻(xiàn)報(bào)道產(chǎn)生其他過(guò)敏反應(yīng)的化合物相同或相似者建議考慮采取適當(dāng)?shù)脑囼?yàn)方法以考察其是否能引起其他過(guò)敏反應(yīng)（如光過(guò)敏性反應(yīng)等）。Ⅱ和Ⅲ型過(guò)敏反應(yīng)可結(jié)合在重復(fù)給藥毒性試驗(yàn)中觀察，如癥狀、體征、血液系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)及相關(guān)的病理組織學(xué)改變等。經(jīng)皮給藥制劑（包括透皮劑）應(yīng)進(jìn)行IV型過(guò)敏反應(yīng)試驗(yàn)，包括豚鼠最大化試驗(yàn)（Guinea-PigMaximizationTest,GPMT）或豚鼠封閉斑貼試驗(yàn)（BuehlerTest）或其他合理的試驗(yàn)方法如小鼠局部淋巴結(jié)試驗(yàn)（MurineLocalLymphNodeAssay,LLNA）等。第六十五頁(yè)，共83頁(yè)。2．劑量設(shè)計(jì)建議選擇多個(gè)劑量，至少應(yīng)包括臨床最高給藥濃度。3．對(duì)照組應(yīng)設(shè)立陽(yáng)性對(duì)照組和陰性對(duì)照組，必要時(shí)采用已上市制劑作對(duì)照。第六十六頁(yè)，共83頁(yè)。（二）過(guò)敏性試驗(yàn)方法1．主動(dòng)全身過(guò)敏試驗(yàn)（ASA）2．主動(dòng)皮膚過(guò)敏試驗(yàn)（ACA）3．被動(dòng)皮膚過(guò)敏試驗(yàn)（PCA）4．豚鼠Buehler試驗(yàn)（BT）和最大化試驗(yàn)（GPMT）5．皮膚光過(guò)敏反應(yīng)試驗(yàn)第六十七頁(yè)，共83頁(yè)。1．主動(dòng)全身過(guò)敏試驗(yàn)（ASA）

通常選用體重為300～400克的豚鼠。每組動(dòng)物數(shù)至少6只。設(shè)陰性、陽(yáng)性對(duì)照組和受試物不同劑量組，至少包括臨床擬用最高劑量或濃度。陰性對(duì)照組給予同體積的溶媒，陽(yáng)性對(duì)照組給予牛血清白蛋白或卵白蛋白或已知致敏陽(yáng)性物質(zhì)。第六十八頁(yè)，共83頁(yè)。選擇容易產(chǎn)生抗體的給藥途徑，如腹腔、靜脈或皮下注射，隔日一次，共給藥3次，給藥體積0.5ml，末次注射后第14天、第21天分別快速靜脈注射致敏劑量的2倍進(jìn)行攻擊。即刻觀察動(dòng)物反應(yīng)至30分鐘，包括癥狀的出現(xiàn)及消失時(shí)間，一般應(yīng)觀察3小時(shí)。致敏期間每日觀察動(dòng)物的癥狀，首末次致敏和激發(fā)當(dāng)日測(cè)定動(dòng)物體重。按表9判斷過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生程度，計(jì)算發(fā)生率。第六十九頁(yè)，共83頁(yè)。表9全身致敏性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)表8過(guò)敏反應(yīng)癥狀第七十頁(yè)，共83頁(yè)。存在問(wèn)題：普通級(jí)豚鼠飼養(yǎng)期間易出現(xiàn)死亡14