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文檔簡介
尿液理學(xué)蛋白本周蛋白尿糖檢測試驗(yàn)第1頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四尿液形成過程示意圖第2頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四■容器1、
一般檢查:清潔干燥2、
細(xì)菌培養(yǎng):有蓋無菌大試管3、24小時(shí)尿:清潔干燥的大口瓶常規(guī)檢查可隨時(shí)留取,但晨尿較濃縮、偏酸性,病理成分多且完整,可提高檢查的陽性率。■尿液保存1、
冷藏2、
立即送檢,夏季<1h,冬季<2h3、不能及時(shí)送檢,以4℃6~8小時(shí)冷藏為宜尿液的容器要求保存條件第3頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四第一節(jié)尿液理學(xué)檢查尿量
(有刻度的容器)顏色及透明度(肉眼觀察)比重(尿比重計(jì))第4頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四一、尿量測定第5頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四一、尿量取決于腎小球的濾過率和腎小管的重吸收正常成人:1000-2000ml/24h
兒童:大約為成人3~4倍二、幾個(gè)重要概念
多尿:>
2500ml/24h少尿:<400
ml/24h無尿:<100
ml/24h第6頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四
【注意事項(xiàng)】
1.每次留取標(biāo)本必須排空膀胱。
2.氣溫過高時(shí)注意防腐。
3.測定尿量需準(zhǔn)確,精確至毫升,誤差不得超過20ml。第7頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四
二、尿顏色和透明度
第8頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四第9頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四■異常■濃茶色或醬油色(血紅蛋白尿)
疾病:見于血型不合輸血反應(yīng)、急性溶血性貧血、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿(PNH)等、■黃色
膽紅素定性(+)時(shí),稱膽紅素尿
疾病:
阻塞性或肝細(xì)胞性黃疸■乳白色混濁
1、菌尿或膿尿:泌尿系統(tǒng)感染,如腎盂腎炎、膀胱炎2、脂肪尿:腎病、擠壓傷、骨折、腎病綜合征等
3、乳糜尿:絲蟲病、腫瘤、腹部創(chuàng)傷等所致淋巴循環(huán)受阻第10頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四
【注意事項(xiàng)】1.盛尿液的容器:必須干燥、清潔、透明。2.標(biāo)本:新鮮尿液。3.鑒別渾濁尿:新鮮尿液含鹽類濃度過高,尤其是尿酸鹽排出時(shí)遇冷易析出結(jié)晶,使尿液渾濁。4.尿液顏色:易受某些食物或藥物的影響。第11頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四
三、尿液比重測定
(一)比重計(jì)法
【原理】尿比重計(jì)是一種液體比重計(jì),可測定出規(guī)定溫度下的尿液比密。尿液比重與所含溶質(zhì)成正比,溶質(zhì)越多,尿比重越高,對(duì)浮標(biāo)的浮力就越大,浸入尿液中的比重計(jì)部分則越小,讀數(shù)越大;反之,浸入部分越大,讀數(shù)越小。第12頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四【操作】
1.加尿
2.放浮標(biāo)
3.讀數(shù)
第13頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四■參考值①晨尿>1.020,隨機(jī)尿1.003~1.030②新生兒:1.002~1.004
■臨床意義:反映腎小管的濃縮稀釋功能比重慢性腎衰竭、尿崩癥急性腎小球腎炎、心力衰竭、高熱、脫水、出汗過多尿少尿多糖尿病第14頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四
【注意事項(xiàng)】
1.尿比重計(jì)通過校正后才能使用。
2.尿液要求新鮮;尿液過少不足以浮起比重計(jì)時(shí)。
3.因低溫所致的尿酸或其他鹽類沉淀可水浴(37℃)使其溶解,待尿液溫度降至比重計(jì)所標(biāo)定的溫度時(shí)即可測定。
4.尿液面應(yīng)消除泡沫;比重計(jì)浮標(biāo)要垂直懸浮于尿液中;讀取比密值要準(zhǔn)確。
5.校正結(jié)果要進(jìn)行蛋白尿、糖尿和溫度的校正。
6.每次測定完畢都需用純凈水沖洗比重計(jì),若有蛋白質(zhì)及鹽類物質(zhì)沉積時(shí),需用清潔液洗凈后使用。第15頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四
【原理】pH廣泛試紙是多種指示劑混合的試帶,靈敏度約為pH1.0,顯色范圍為棕紅至深黑色,試帶蘸取尿液后即可顯色,然后與標(biāo)準(zhǔn)色板比較即可測得尿液pH近似值
四、尿酸堿度pH試紙法測定第16頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四【操作】
1.取試紙2.浸尿
3.讀取結(jié)果
4.報(bào)告方式第17頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四■參考值①
新鮮晨尿pH值在5.5~6.5,平均值6.0②新鮮隨機(jī)尿pH值在4.5~8.0③久置可變堿性■臨床意義PH值酸中毒、發(fā)熱、糖尿病、痛風(fēng)或服用氯化銨等藥物后堿中毒、尿潴留、腎小管酸中毒、服用堿性藥物后第18頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四
【注意事項(xiàng)】1.試帶應(yīng)避光,密封與干燥保存,遠(yuǎn)離酸性和堿性物質(zhì),以防失效2.標(biāo)本應(yīng)新鮮,放置過久會(huì)因揮發(fā)性酸喪失或細(xì)菌繁殖而使pH增高,標(biāo)本不能使用防腐劑,否則可能會(huì)影響檢測結(jié)果3.比色時(shí)間應(yīng)在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)比色第19頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四第二節(jié)尿蛋白定性檢查
【原理】生物堿試劑磺基水楊酸,在酸性條件下,其磺酸根陰離子與蛋白質(zhì)氨基酸陽離子結(jié)合,形成不溶性蛋白鹽沉淀。磺基水楊酸法第20頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四
【操作】
1.調(diào)pH:使尿液PH值在5~6
2.加尿液:取2支試管,加入1ml尿液
3.加試劑:第一支試管加試劑2滴,輕混
勻,另一支試管不加做對(duì)照
4.判斷結(jié)果:1min內(nèi)觀察結(jié)果
1第21頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四①優(yōu)點(diǎn):簡便快速,靈敏度高0.05-0.1g/L;
缺點(diǎn):與清/球/本周蛋白反應(yīng);假陽性。②干化學(xué)法的參考方法,NCCLS推薦的確證實(shí)驗(yàn)。【評(píng)價(jià)】①尿液中蛋白質(zhì)含量>150mg/24h尿中蛋白質(zhì)濃度>100mg/L②蛋白定性為陽性,即蛋白尿。1.蛋白尿
(proteinuria,PRO)
第22頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四【干擾因素】
干擾因素假陽性①高濃度尿酸、尿酸鹽、草酸鹽②碘造影劑、大劑量青霉素③混入生殖系統(tǒng)分泌物假陰性pH>9或<3第23頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四
【注意事項(xiàng)】1.標(biāo)本:①尿液明顯混濁,先離心或過濾。
②患者應(yīng)用大劑量青霉素鉀鹽、慶大霉素、磺胺、含碘造影劑時(shí),應(yīng)告知結(jié)果可能產(chǎn)生假陽性。
③正確采集中段尿,避免混有生殖系統(tǒng)分泌物。2.調(diào)pH
本法在尿液偏堿或偏酸時(shí)(pH>9,pH<3)可呈假陰性,檢測前先測試尿pH(5~6).3.掌握好結(jié)果判斷時(shí)間,對(duì)于微弱陽性的判斷,可選用黑色襯紙作背景,以提高分辨力。第24頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四第三節(jié)尿本周蛋白定性檢查一、凝溶法【原理】
本周蛋白在pH4.9±0.1條件下,加熱至40℃~60℃時(shí)可發(fā)生凝固,溫度升至90℃~100℃時(shí)沉淀消失,當(dāng)溫度降低恢復(fù)至40℃~60℃時(shí)又可重新凝固。第25頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四【操作】(詳見實(shí)驗(yàn)課本P90)
1.標(biāo)本處理
2.加入試劑
3.觀察結(jié)果
4.驗(yàn)證結(jié)果
第26頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四
【注意事項(xiàng)】
1.收集已診斷輕鏈疾病患者的尿液做此試驗(yàn)。尿液新鮮,減少清蛋白、球蛋白分解變性產(chǎn)生的干擾。混濁尿液須先離心取上清液。
2.嚴(yán)格控制或調(diào)節(jié)pH,凝溶法最適pH為4.5~5.5。
3.煮沸過濾時(shí),動(dòng)作迅速,保持高溫,不要振蕩,防止BJP夾雜于其他沉淀蛋白中被過濾除掉而造成假陰性。過濾用漏斗、濾紙、試管等用品,需保持高溫狀態(tài),以避免溫度降低使BJP凝固。
4.凝溶法特異性高,操作繁瑣、費(fèi)時(shí),靈敏度低(0.3~2.0)g/L。
5.操作時(shí)一定注意安全!!
第27頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四二、對(duì)-甲苯磺酸法
【原理】
對(duì)-甲苯磺酸能沉淀相對(duì)分子質(zhì)量較小的本周蛋白,而對(duì)相對(duì)分子質(zhì)量較大的清蛋白和球蛋白不起反應(yīng)。第28頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四【操作】
1.加尿液:取2支試管,分別加尿液1ml
2.加試劑:測定管加0.5ml試劑,對(duì)照管加0.5ml冰醋酸,輕混勻靜置5min
3.觀察結(jié)果:
①陽性:測定管渾濁加重或有沉淀,對(duì)照管清晰透明或輕度渾濁
②陰性:測定管清晰透明或與對(duì)照管相似第29頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四
【注意事項(xiàng)】
1.收集已診斷輕鏈疾病患者的尿液做此試驗(yàn)。尿液應(yīng)新鮮,混濁尿液須先行離心取上清液。服用利福平類抗結(jié)核藥物患者可能出現(xiàn)周蛋白假陽性。
2.尿液中其他球蛋白>5.0g/L可出現(xiàn)假陽性,需進(jìn)行驗(yàn)證。如果尿液中本周蛋白含量低,則需先對(duì)尿液進(jìn)行濃縮。第30頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四第四節(jié)尿葡萄糖班氏法定性檢查【原理】Cu2+-----------→Cu+藍(lán)色
黃色至磚紅色.△簡易步驟:班氏試劑1ml(煮沸不變色)+尿4滴→煮沸1-2min→冷卻后觀察.堿性條件+葡萄糖第31頁,共33頁,2023年,2月20日,星期四?操作:1ml班氏試劑,加熱試管底部,煮沸,觀察,再加尿液2滴,繼續(xù)煮沸1~2min,冷卻后觀察結(jié)果。?結(jié)果判斷:1.藍(lán)色不變:
-2.藍(lán)中略帶綠無沉淀:+/-3.綠色有少許黃綠色沉淀:+4.較多黃綠色沉淀:++5.土黃色渾濁,大量沉淀
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