1、學習植物根尖有絲分裂制片技術；2、了解和辨別有絲分裂各個時期的染色體特征；3、掌握染色體的觀察和計數方法。一、實驗目的當前1頁，總共47頁。植物根尖的分生細胞的有絲分裂，每天都有分裂高峰時間，此時經過適當取材處理，加以固定、離析、染色、壓片等步驟，可以迅速地將細胞分散附著于載玻片和蓋玻片之間，再置于顯微鏡下觀察，可以看到大量處于有絲分裂各個時期的細胞和染色體。細胞由第一次有絲分裂結束到第二次有絲分裂結束所經歷的過程為一個細胞分裂周期，包括間期、前期、中期、后期和末期。間期：一般持續時間比較長，是核內染色體DNA合成的過程，能看到核的變化，如核和其內的核仁體積增大，核內存在染色質，一般情況看不到染色體。二、實驗原理當前2頁，總共47頁。前期：細胞核內染色體呈細絲狀，在核內互相纏繞成團。核仁開始消失，核膜隨之破裂。此時染色體已由兩條染色單體所組成，只在著絲點處連結。中期：各染色體的著絲點排列在赤道面上，兩臂伸向赤道面的兩旁。紡錘體完全形成，其一端與染色體的著絲點相連結，另一端集中于細胞的極處。中期染色體高度濃縮，具有各物種染色體的典型形態，是染色體計數的最好時期。后期：每一染色體的著絲點分裂，兩條染色單體彼此分開成兩個子染色體，子染色體在紡錘絲的牽引下，分別移向兩極。末期：移向兩極的染色體，逐漸松散成染色質，紡錘絲逐漸消失，在赤道面上開始出現細胞板，把一個細胞分隔成兩個子細胞，核膜重新形成，核仁出現，逐漸進入間期狀態。當前3頁，總共47頁。當前4頁，總共47頁。三、儀器與材料1、材料：小麥的根尖。2、用具及藥品：顯微鏡、恒溫箱、載玻片、蓋玻片、染色缸、試劑瓶、酒精燈、鑷子、剪刀、紗布、吸水紙；無水乙醇、45%醋酸、卡諾固定液（無水乙醇∶冰醋酸=3∶1）、1N鹽酸、蒸餾水、1%醋酸洋紅、改良品紅。當前5頁，總共47頁。四、實驗程序（1）取材：選取小麥種子浸泡于溫水中，使種子吸脹，再置于墊有濕濾紙的培養皿中，于25℃條件下發芽，待根長約1-2cm在大量細胞進行分裂時剪根。（2）預處理：剪取的根尖放入盛有蒸餾水的小瓶，置于冰水溶液中，0-3℃處理24小時。（3）固定：主要是殺死細胞，盡可能保持生活時的真實狀態并便于染色。將經過預處理的根尖沖洗干凈后，用濾紙吸去沾著的水滴，以卡諾固定液固定24小時。（4）解離：將固定好的根尖移入鹽酸酒精離析液中，在35℃下離析8分鐘，或在1N鹽酸中，60℃下離析15分鐘。當前6頁，總共47頁。（5）染色：將離解好的根尖用蒸餾水沖洗幾次，在1%醋酸洋紅中染色2-4小時；或置于染色缸里，加改良品紅溶液，靜置染色10-15分鐘。（6）壓片：取已染色的根尖，置于載玻片上，在分生組織處切取一小塊，加45%醋酸（或改良品紅）一滴，蓋上蓋玻片，用刀片架起蓋玻片一角，用鑷子尖輕敲幾下，使材料分散，移去架起的刀片，再輕敲幾下，在酒精燈上微微加熱，吸去多余的染液，用手指垂直壓片（切勿移動蓋玻片），即可鏡檢。（7）觀察：在顯微鏡下觀察上述制片，先用低倍鏡找到分裂相后轉高倍鏡，可清楚觀察到有絲分裂各個時期的圖象。當前7頁，總共47頁。當前8頁，總共47頁。當前9頁，總共47頁。當前10頁，總共47頁。當前11頁，總共47頁。當前12頁，總共47頁。當前13頁，總共47頁。當前14頁，總共47頁。當前15頁，總共47頁。當前16頁，總共47頁。當前17頁，總共47頁。當前18頁，總共47頁。當前19頁，總共47頁。當前20頁，總共47頁。當前21頁，總共47頁。當前22頁，總共47頁。當前23頁，總共47頁。當前24頁，總共47頁。當前25頁，總共47頁。當前26頁，總共47頁。當前27頁，總共47頁。當前28頁，總共47頁。當前29頁，總共47頁。當前30頁，總共47頁。當前31頁，總共47頁。當前32頁，總共47頁。當前33頁，總共47頁。當前34頁，總共47頁。當前35頁，總共47頁。當前36頁，總共47頁。當前37頁，總共47頁。當前38頁，總共47頁。當前39頁，總共47頁。當前40頁，總共47頁。