高中生物選修蛋白質工程的崛起第一頁，共二十四頁，2022年，8月28日2002年１２月３０日，

兩場籌備了10年的“太空婚禮”首次在神舟四號飛船上舉行，植物細胞“新人”—黃花煙草和革新一號煙草葉肉細胞原生質體，動物細胞“新人”是小鼠B淋巴細胞和骨髓瘤細胞，兩批新人同時在“產房”—電融合儀內孕育新生命。一段時間后，我國首批”太空娃娃”終于順利誕生。對照實驗結果表明，細胞融合率大大提高。STS“太空婚禮”第二頁，共二十四頁，2022年，8月28日“太空婚禮”科研項目一：“太空婚禮”科研項目二：

植物體細胞雜交技術動物細胞融合技術第三頁，共二十四頁，2022年，8月28日(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物體細胞雜交過程示意圖第四頁，共二十四頁，2022年，8月28日物理法的融合效率較高,且對細胞（原生質體）的傷害小,易操作、控制和觀察。太空中處于失重狀態，不同種細胞（原生質體）更容易親近；為什么在太空中細胞（原生質體）融合率會大大上升？為什么選用物理法誘導？第五頁，共二十四頁，2022年，8月28日閱讀課本P52動物細胞融合內容問題：什么是動物細胞融合？它相當于植物體細胞雜交過程的哪一步？它們的過程、基本原理、誘導融合方法和意義是否相同？

第六頁，共二十四頁，2022年，8月28日一、動物細胞融合的概念第七頁，共二十四頁，2022年，8月28日一、動物細胞融合（細胞雜交）1、概念：指兩個或多個動物細胞結合形成一個細胞的過程。第八頁，共二十四頁，2022年，8月28日2、過程：動物細胞A動物細胞B滅活病毒誘導有絲分裂（膜融合、質融合、核融合）雜交細胞2個完整的雜交細胞AB（篩選）第九頁，共二十四頁，2022年，8月28日為什么滅活的病毒能作誘導劑？滅活喪失感染性保留融合活性細胞核病毒顆粒細胞核第十頁，共二十四頁，2022年，8月28日5、結果：形成單核的雜交細胞3、原理：細胞膜的流動性4、誘導方式物理法:離心、振動、電激化學法:聚乙二醇（PEG)生物法:滅活的病毒仙臺病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒第十一頁，共二十四頁，2022年，8月28日6、意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交（種間、屬間、科間、動植物之間）成為可能。7、應用：成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段

特別是利用雜交瘤技術制造單克隆抗體第十二頁，共二十四頁，2022年，8月28日植物體細胞雜交和動物細胞融合的比較比較項目植物體細胞雜交動物細胞融合細胞融合原理細胞膜的流動性細胞膜的流動性細胞融合的方法去除細胞壁后誘導原生質體融合使細胞分散后誘導細胞融合誘導方法物理（離心、振蕩、電刺激）化學（聚乙二醇）物理、化學方法（同左）滅活的病毒用途獲得雜種植株制備單克隆抗體第十三頁，共二十四頁，2022年，8月28日二、單克隆抗體傳統的抗體生產辦法及缺陷是什么？抗體由什么細胞產生？效應B淋巴細胞（漿細胞）第十四頁，共二十四頁，2022年，8月28日抗體的傳統生產方法從血清中分離抗體該法制備抗體的特點：

產量低、純度低，且抗體的特異性差、靈敏度低。多種效應B細胞動物體內多種抗體抗原抗體第十五頁，共二十四頁，2022年，8月28日每個效應B細胞只分泌一種化學性質單一、特異性強的抗體

思考與探究：如何獲得大量化學性質單一、特異性強的抗體？提示：第十六頁，共二十四頁，2022年，8月28日單克隆抗體:單個細胞克隆產生的化學性質單一特異性強的抗體單:單個細胞克隆:無性繁殖1.單克隆抗體的概念提示1：對效應B細胞進行細胞培養可行嗎？提示2：我們所學的哪種細胞是可以無限增殖的？問題：如何大量生產單克隆抗體？第十七頁，共二十四頁，2022年，8月28日一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體骨髓瘤細胞能無限增殖雜交瘤細胞動物細胞培養技術設計方案：動物細胞融合技術單克隆抗體

既能產生特異性抗體，又能大量繁殖的細胞第十八頁，共二十四頁，2022年，8月28日1975年英國科學家米爾斯坦和柯勒的實驗2.制備單克隆抗體第十九頁，共二十四頁，2022年，8月28日注射抗原效應B淋巴細胞骨髓瘤細胞融合多種雜交細胞選擇性培養基篩選1專一抗體檢測克隆化培養單克隆抗體

篩選21.注射抗原的目的是什么？培養骨髓瘤細胞2.誘導細胞融合的手段有哪些？3.若細胞兩兩融合后，有幾種融合情況？4.第一次篩選出的雜交瘤細胞為何需進行克隆化培養和專一抗體檢測？第二十頁，共二十四頁，2022年，8月28日特異性強、純度高、靈敏度高，產量大、容易標準化生產。3、單克隆抗體的優點第二十一頁，共二十四頁，2022年，8月28日4、單克隆抗體的應用１、可用于作為診斷試劑：

有準確，高效，簡易、快速的優點２、可用于疾病治療

主要用于癌癥治療３、可用于運載藥物（作為運載對應疾病的藥物的“生物導彈”。）（“生物導彈”＝單克隆抗體＋藥物）治療癌癥第二十二頁，共二十四頁，2022年，8月28日

下圖為某同學根據雜交瘤技術的方法，設計的生產破傷風桿菌抗體的實驗方案2、該方案能達到預期效果嗎？為什么？4、圖中B為________過程，常用_________作為誘導劑，該細胞繼承___________的遺傳特性，既能__________,又能___________。1、該實驗方案的目的是__________3、A是從小鼠的脾臟中取得_______,該細胞能夠產生______5、C過程指細胞培養，該過程包括_____培養和_____培養兩個階段，其中_____代以內的的細胞屬于細胞株。制備單克隆抗體B淋巴細胞抗體細胞融合滅活病毒雙親細胞分泌抗體無限增殖原代傳代50B體外培養骨髓瘤細胞