高中生物課件多聚酶鏈式反應擴增片段第一頁，共四十七頁，2022年，8月28日㈠.DNA分子的結構C、H、O、N、P1.元素組成：脫氧核苷酸2.基本單位:知識回顧脫氧核苷酸脫氧核苷磷酸脫氧核糖含氮堿基嘌呤嘧啶腺嘌呤（A）鳥嘌呤（G）胞嘧啶（C）胸腺嘧啶（T）第二頁，共四十七頁，2022年，8月28日一個核苷酸上的磷酸基團上的“－OH”和另一個核苷酸分子的第3位碳原子上的羥基之間失去一分子水，形成磷酸二酯鍵，即在相鄰的兩個脫氧核苷酸的3’和5’碳原子之間形成磷酸二酯鍵。數量龐大的四種脫氧核苷酸通過3’、5’、磷酸二酯鍵彼此連接起來形成脫氧核苷酸鏈。通常將DNA的羥基“－OH”末端稱為3’端，而磷酸基團的末端稱為5’端3.多脫氧核苷酸鏈的形成多脫氧核苷酸鏈結構簡圖第三頁，共四十七頁，2022年，8月28日OOPOHO堿基OOHOOPOHOOH堿基5’3’3’5’堿基脫氧核糖磷酸基團堿基脫氧核糖堿基脫氧核糖5’3’多脫氧核苷酸鏈結構簡圖第四頁，共四十七頁，2022年，8月28日連接ATGC第五頁，共四十七頁，2022年，8月28日連接ATGCATGC5'端含磷酸基團3'端（含羥基）第六頁，共四十七頁，2022年，8月28日連接ATGCATGC5'端含磷酸基團3'端（含羥基）3'端5'端第七頁，共四十七頁，2022年，8月28日第八頁，共四十七頁，2022年，8月28日3.DNA分子的雙螺旋結構⑴DNA分子是由

的脫氧核苷酸長鏈盤旋而成的規則

結構。⑵

與

交替連結，排列在外側，構成基本骨架；

排列在鏈的內側。⑶兩條鏈上的堿基通過

連結起來，形成堿基對。堿基對的組成有特定的規律：即腺嘌呤一定與

配對，

一定同胞嘧啶配對。雙螺旋兩條反向平行脫氧核糖磷酸堿基氫鍵胸腺嘧啶鳥嘌呤第九頁，共四十七頁，2022年，8月28日㈡.DNA的復制2.時期有絲分裂間期減數第一次分裂前的間期。3.場所細胞核（主要）、線粒體、葉綠體。1.概念由一個DNA形成兩個完全相同的DNA的過程。4.基本條件酶:解旋酶、DNA聚合酶能量:ATP原料:四種脫氧核苷酸模板:DNA的兩條鏈第十頁，共四十七頁，2022年，8月28日⑴.邊解旋邊復制(過程）5.復制特點⑵.半保留復制（結果）6.遵循原則：堿基互補配對原則7.精確復制的原因8.復制的意義DNA分子通過復制使遺傳信息從親代傳給了后代，從而保持了遺傳信息的連續性⑴規則的雙螺旋結構為復制提供了精確的模板⑵堿基互補配對能力保證了復制準確無誤的進行第十一頁，共四十七頁，2022年，8月28日參與的組分在DNA復制中的作用解旋酶DNA母鏈4種脫氧核苷酸DNA聚合酶引物總結：胞內DNA復制的基本體系打開DNA雙鏈提供DNA復制的模板合成子鏈的原料催化合成DNA子鏈使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始連接脫氧核苷酸第十二頁，共四十七頁，2022年，8月28日第十三頁，共四十七頁，2022年，8月28日第十四頁，共四十七頁，2022年，8月28日第十五頁，共四十七頁，2022年，8月28日第十六頁，共四十七頁，2022年，8月28日第十七頁，共四十七頁，2022年，8月28日第十八頁，共四十七頁，2022年，8月28日第十九頁，共四十七頁，2022年，8月28日第二十頁，共四十七頁，2022年，8月28日第二十一頁，共四十七頁，2022年，8月28日第二十二頁，共四十七頁，2022年，8月28日第二十三頁，共四十七頁，2022年，8月28日第二十四頁，共四十七頁，2022年，8月28日第二十五頁，共四十七頁，2022年，8月28日1.DNA

分子的熱變性原理DNA雙鏈單鏈變性（加熱80-100℃）復性（緩慢冷卻）變性的目的：復性的目的：解開雙鏈有利于引物與兩條單鏈結合

在80~100℃的溫度范圍內，DNA的雙螺旋結構將解體，雙鏈分開，這個過程稱為變性總結第二十六頁，共四十七頁，2022年，8月28日PCR技術總結利用DNA分子的熱變性原理，通過控制溫度來控制雙鏈的解旋與結合，從而完成體外DNA分子的擴增。

四種脫氧核苷酸、耐熱的DNA聚合酶、引物、DNA模板、緩沖溶液和控制溫度的溫控設備。子鏈的5’端向3’端延伸

具有特異、敏感、產率高、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出。原理條件方向特點第二十七頁，共四十七頁，2022年，8月28日5/3/3/5/5/3/引物Ⅰ5/3/引物Ⅱ變性95oC復性55oC5/3/3/5/第二十八頁，共四十七頁，2022年，8月28日5引物15引物2第二次復制第一次復制55

55

5

5模板DNA55

555

5

55經n次循環（復制）后，DNA的含量理論上可以擴大到

倍。2n延伸72oC第二十九頁，共四十七頁，2022年，8月28日每次循環分為：PCR的反應過程總結變性——復性——延伸②DNA聚合酶只能特異性地復制處于兩個引物之間的DNA序列，使這段固定長度的序列呈指數擴增。①從第二輪循環開始，上一次循環的產物也作為模板參與反應，并且由引物Ⅰ延伸而成的DNA單鏈會與引物Ⅱ結合，進行DNA的延伸PCR的反應結果第三十頁，共四十七頁，2022年，8月28日第三十一頁，共四十七頁，2022年，8月28日第三十二頁，共四十七頁，2022年，8月28日第三十三頁，共四十七頁，2022年，8月28日第三十四頁，共四十七頁，2022年，8月28日第三十五頁，共四十七頁，2022年，8月28日第三十六頁，共四十七頁，2022年，8月28日第三十七頁，共四十七頁，2022年，8月28日第三十八頁，共四十七頁，2022年，8月28日第三十九頁，共四十七頁，2022年，8月28日第四十頁，共四十七頁，2022年，8月28日第四十一頁，共四十七頁，2022年，8月28日第四十二頁，共四十七頁，2022年，8月28日第四十三頁，共四十七頁，2022年，8月28日4.下列屬于PCR擴增區別于

DNA體內復制的是()①需要解旋酶②需要引物③常溫常壓下進行④以四種脫氧核苷酸為原料⑤需要耐高溫的TaqDNA聚合酶⑥邊解旋邊復制⑦可以短時間得到大量拷貝⑧需要模板A．①②③④⑤⑥⑦⑧C．⑤⑦B．②③④⑤⑥⑦D．③④⑥⑧第四十四頁，共四十七頁，2022年，8月28日

【名師點撥】：體內復制與PCR擴增既有區別又有聯系，PCR體外擴增概念很明確，在體外，加熱解旋，因此需要耐高溫的TaqDNA聚合酶，它能以極少量的DNA為模板，在幾小時內復制出上百萬份的DNA。【答案】：C第四十五頁，共四十七頁，2022年，8月28日【配對練習1】真核生物細胞質中也有DNA，例如葉綠體、線粒體等，關于細胞質DNA復制不正確的是()

A．需要解旋酶

B．需要DNA聚合酶

C．兩條鏈同時復制只有一個起點

D．不是半保留復制

解析：真核生物細胞質中DNA復制需要解旋酶、DNA聚合酶、兩條鏈同時復制只有一個起點，是半保留復制。

答案：D第四十六頁，共四十七頁，2022年，8月28日【配對練習