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文檔簡介
課題2
月季的花藥培養
一、基礎知識(一)被子植物的花粉發育花瓣雄蕊雌蕊花萼花托花柄柱頭花柱子房花藥花絲雄蕊雌蕊
花粉是由花粉母細胞經過減數分裂形成的,是單倍體的生殖細胞。
被子植物花粉的發育要經歷小孢子四分體時期、單核期和雙核期等階段。(花粉母細胞)減數分裂有絲分裂營養細胞(控制花粉萌發,提供營養)生殖細胞有絲分裂2個精子(小孢子四分體時期)彼此分離(一)被子植物的花粉發育(雙核期)(二)產生花粉植株的兩種途徑花藥中的花粉花藥中的花粉①②胚狀體愈傷組織叢芽叢芽脫分化脫分化分化再分化生根移栽誘導幼小植株形成之后才需要光照
兩種途徑之間沒有絕對的界限,主要取決于培養基中激素的種類及其濃度配比。(三)影響花藥培養的因素1、材料的選擇
①采集花藥:月季的初花期②花粉發育時期:一般選單核期,
細胞核由中央移向細胞一側的時期;③花蕾:完全未開放的花蕾
(易選到單核期的花藥)
主要是材料的選擇和培養基的組成2、培養基的組成3、其他因素:
親本植株的生長條件、材料的低溫預處理以及接種密度等MS培養基相應的激素二、實驗操作(一)材料的選取1.選擇花藥時,一般通過鏡檢來確定花粉是否處于適宜的發育期。2.最常用的方法有醋酸洋紅法,將花粉細胞核染成紅色。3.某些植物的花粉細胞核不易著色,需采用焙花青-鉻礬法,這種方法能將花粉細胞核染成藍黑色。(二)材料的消毒1、花蕾用體積分數70%的酒精浸泡30秒2、無菌水清洗3、無菌吸水紙吸干花蕾表面的水分4、放入質量分數為0.1%的氯化汞溶液中2~4分鐘(也可質量分數為1%的次氯酸鈣溶液或飽和漂白粉溶液)5、無菌水沖洗3~5次
(用于培養的花藥,實際上多數未熟,由于它的外面有花萼、花瓣或穎片保護,通常處于無菌狀態,所以只要將整個花蕾或幼穗消毒即可。)(三)接種和培養1.剝離花藥(盡量不損傷花藥)2.接種(每瓶7~10個)4.分化培養基培養
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