實驗十一

人群中PTC味盲基因頻率分析1、通過對PTC味盲基因頻率的分析，了解基因在群體水平上的傳遞規(guī)律，加深對群體遺傳學(xué)中遺傳平衡定律的認(rèn)識。一、實驗?zāi)康谋搅螂?phenylthiocarbamide,PTC)是一種人工合成化合物，呈白色晶體，因具有硫化酰胺基而呈苦味，不同的人對其溶液的苦味有不同的嘗味能力。這種嘗味能力是由一對等位基因（Tt）所決定的遺傳形狀，其中T對t為不完全顯性。正常嘗味者的基因型為TT，能嘗出1/750000-1/6000000mol/L的PTC溶液的苦味；具有Tt的基因型的人嘗味能力較低，只能嘗出1/480000—1/380000mol/L的PTC溶液的苦味；而基因型為tt的人只能嘗出1/24000mol/L以上濃度PTC溶液的苦味。個別人甚至對PTC的結(jié)晶也嘗不出苦味。這一類個體在遺傳學(xué)上稱為PTC味盲。

二、實驗原理測驗對象：本班同學(xué)。1、溶液配制：稱取PTC結(jié)晶1.3克，加蒸餾水1000ml，置室溫下1-2天即可完全溶解。其間應(yīng)不斷搖晃以加快溶解過程。由此配成的溶液濃度為1/750mol/L，稱為母液，也就是1號液。2-14號溶液均由上一號液比稀釋而制成，具體配制方法見下表。編號配制方法濃度M基因型11.3gPTC+蒸餾水1000毫升1/750tt21號液100毫升＋蒸餾水100毫升1/1500tt32號液100毫升＋蒸餾水100毫升1/3000tt43號液100毫升＋蒸餾水100毫升1/6000tt54號液100毫升＋蒸餾水100毫升1/12000tt65號液100毫升＋蒸餾水100毫升1/24000tt76號液100毫升＋蒸餾水100毫升1/48000Tt87號液100毫升＋蒸餾水100毫升1/96000Tt98號液100毫升＋蒸餾水100毫升1/192000Tt109號液100毫升＋蒸餾水100毫升1/384000Tt1110號液100毫升＋蒸餾水100毫升1/768000TT1211號液100毫升＋蒸餾水100毫升1/1536000TT1312號液100毫升＋蒸餾水100毫升1/3072000TT1413號液100毫升＋蒸餾水100毫升1/6144000TT三、實驗程序（1）讓受試者坐在椅子上，仰頭張口，用滴管滴5－10滴14號液于受試者舌根部，讓受試者徐徐咽下品味，然后用蒸餾水做同樣的試驗。（2）詢問受試者能否鑒別此兩種溶液的味道，若不能鑒別或鑒別不準(zhǔn)，則依次用13號、12號溶液重復(fù)實驗，直到能明確鑒別出來為止。（3）當(dāng)受試者鑒別出來某一號溶液時，應(yīng)當(dāng)用此號溶液重復(fù)嘗試3次，三次結(jié)果相同時才是可靠的。（4）測定時，應(yīng)將PTC溶液與蒸餾水反復(fù)交替給受試者，以免由于受試者的猜想及其它心理作用而影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。（5）tt基因型的閾值范圍為1－6號液，Tt基因型的閾值范圍為7－10號液，TT基因型的閾值范圍為11－14號液，根據(jù)受試者最初的覺察苦味溶液的編號，而查出相應(yīng)的基因型。[實驗注意事項]

：在于溶液的配制一定要嚴(yán)格、準(zhǔn)確，使用的器皿要干凈，水可以用市場買的純凈水來代替蒸餾水；在品嘗試劑的時候最好能做雙盲測試，排除心理因素，這樣的數(shù)據(jù)更可靠。[作業(yè)]

：1、根據(jù)一個實驗班的測定結(jié)果，求出基因T和t的頻率以及群體TT、Tt、tt基因型頻率。T的基因頻率p=(2xTT+Tt)/(2x個體總數(shù))t的基因頻率q=(2xtt+Tt)/(2x個體總數(shù))根據(jù)Hardy-Weinberg定律公式：p2+2pq+q2=1TT=p2

Tt=2pqtt=q21.結(jié)果統(tǒng)計：

tt基因型的范圍為1-6號，

Tt基因型的范圍為7-10號，TT基因型為11-14號。

2.T和t的基因頻率計算

T基因頻率：p＝（３２＋１５＊２）／２＊（７＋３２＋１５）＝０．５７４ｔ基因頻率：q＝（７＊２＋３２）／２＊（７＋３２＋１５）＝０．４２６

3.平衡群體基因型頻率的計算

按Hardy-Weinberg定律公式：p2+2pq+q2=1,得：

TT:p2=0.574*0.574=0.33

Tt:2pq=2*0.574*0.426=0.49

tt:q2=0.426*0.426=0.18

4.卡方（χ2）檢驗

假設(shè)我們所在班級的群體是一個遺傳平衡群體，檢測各基因型的理論預(yù)期值與實際測得值之間的吻合程度進行