PAGE學科分類號：082702本科學生畢業論文學號院(系)生命科學與化學工程系食品質量與安全2009級指導教師本人鄭重聲明：所呈交的本科畢業論文，是本人在指導老師的指導下，獨立進行研究工作所取得的成果，成果不存在知識產權爭議，除文中已經注明引用的內容外，本論文不含任何其他個人或集體已經發表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律結果由本人承擔畢業論文任務書課題名稱：超聲波輔助提取江永香柚皮多糖的優化工藝學生姓名：系別：生命科學與化學工程系專業：食品質量與安全指導教師：2013年01月02日關鍵詞：柚皮多糖；超聲波輔助法；熱水浸提2、畢業論文內容要求：1）試驗要求(1)以湖南科技學院附近各個超市購買的江永香柚柚皮為材料，(3)保證兩個月的試驗工作量。2）論文要求(1)認真查找資料保證論文論據、數據的真實性。(2)在分析影響因素時要有實例支持，歸納論點時要有理有據。(3)行文結構合理，層次分明，格式規范。(4)符合畢業論文寫作規范。3）能力要求(1)通過畢業論文的撰寫工作，掌握科研工作中文獻資料的查閱、試驗方案的設計、突發問題的處理以及實驗數據的分析整理能力。(2)通過畢業論文的撰寫工作掌握，掌握WORD、EXCEL、PPT等辦公軟件的操作。(3)通過實驗的實施，形成獨立思考的能力、科學嚴謹的學術態度和認真塌實的學習工作習慣。4）主要研究方法：熱水浸提法單因素試驗法正交試驗法對比分析數據法討論總結查閱文獻。5）主要研究任務：研究出江永香柚皮多糖的最佳提取工藝。6）查閱文獻篇數：15篇以上，至少1篇為外文文獻，論文字數10000字以上。文獻查閱指引：通過湖南科技學院圖書館中的中國學術期刊網、中國萬維網、萬方數據庫、學士論文網、食品伙伴網等網絡資源，以輸入關鍵字或關鍵詞的形式，找出相關資料，并根據所查閱資料后面的文獻繼續追蹤查找相關資料，根據文獻資料，參照與本實驗相關的實驗方法，按照本課題的相關要求完成實驗方案設計和論文撰寫工作。參考文獻：[1]韋巍，李雪華.多糖的研究進展[J].國外醫學藥學分冊，2005,32(3):179-184.[2]吳華振.植物多糖的藥理作用及應用進展[J].實用醫技雜志，2005,12(7):1803-1804.[3]賈冬英，姚開，譚敏，等.柚果皮中生理活性成分研究進展[J].食品與發酵工業，2001,27(11):7478.[4]鄧婷婷，劉素純，賀建華.柚皮提取物有效成分的研究概況[J].中國食物與營養，2008,6:16-19.[5]張婧萱，廖保寧，貞榮，等.柚子皮中總黃酮的提取及對羥自由基的清除作用[J].廣東微量元素科學，2006,13(7):4852.[6]羅春，黃建軍.柚皮苷二氫查爾酮工藝研究[J].精細化工中間體，2011,4:62-65.[7]楊麗華，程曉光.天然色素的資源開發和運用研究進展[J].中國食物與營養，2010,6:13-15.[8]李艷輝，王琦.真菌多糖的生物活性與構效關系的研究評介[J].吉林農業大學學報，2002,24(2):70-74.[9]俞建瑛，蔣宇，王善利.生物化學實驗技術[M].北京：科學出版社，2005:137-1381.[10]陳美珍，王欣，余杰.龍須菜多糖的提取、分離及抗氧化活性的研究[J].汕頭大學學報，2005,20(2):38-42.[11]王立娟，馮清偉.香蕉皮多糖提取條件研究[J].食品科學，2006,27(08):159-161.[12]朱開梅，顧生玖，唐世錠，等.超聲波法提取香蕉皮多糖的條件優化及其生物活性[J].安徽農業科學，2011,39(25):15779-15782.[13]王衛國，趙永亮.香菇多糖分離最佳工藝及最佳工藝原料探討[J].中草藥，2000,31(8):584-585.[14]張德華.夏德枯草多糖分離純化與抗氧化活性研究[J].云南植物研究，2006,28(4):410-414.[15]王曉波，何曉燕，王梅，等.火龍果皮總黃酮提取與體外抗氧化作用研究[J].食品工業設計，2011,32(11):156-163.[16]IrakozePierreClaverOptimizationofUltrasonicExtractionofPolysaccharidesfromChineseMaltedSorghumUsingResponseSurfaceMethodology[J].PakistanJournalofNutrition,2010,9(4):336-342.4、畢業論文進度安排：(1)2012年12月8日—2013年01月05日查閱相關資料，初步制定調查方案，填寫開題報告書、任務書，申請參加開題報告。(2)2013年01月05日—2013年01月12日參加開題報告，開題后進一步查閱有關文獻資料，完善調查方案，準備實驗材料、試劑、設備。(3)2013年01月12日—2013年3月20日按照實驗方案進行實驗，分析總結結論。(4)2013年4月中旬，準備論文答辯教研室意見：負責人簽名：注：作者姓名劉小文講師預計字數10000開題日期2013.01.1277選題的根據：1)說明本選題意義 2)綜述國內外有關本選題研究進展和擬研究內容一、選題意義多糖是自然界和生物體中廣泛存在的物質，它是生物體內除蛋白質和核酸以外的又一類重要的信息分子。它具有多種生物活性,與生物機能的維持密切相關，與蛋白質、脂類形成的糖蛋白、脂多糖在細胞的識別、分泌以及在蛋白質的加工、轉移方面起著不容忽視的作用。近年來，植物、海洋生物及菌類等來源的多糖已作為有生物活性的天然產物中的一個重要類型出現，多糖所具有的抗腫瘤、免疫、抗凝血、降血糖和抗病毒活性已相繼被發現[1,2]。柚皮為蕓香科Rutaceae植物柚Citrusgrandis(L.)Osbecd的果皮。別名柚子皮、氣柑皮、橙子皮。柚皮呈對折的七角或展開的五角星狀，單片呈柳葉形。完整者展開后直徑15～28cm，厚0.2～0.5cm。氣芳香，味苦、微辛。中醫學認為，柚子味甘酸、性寒，有健胃化食、下氣消痰、輕身悅色等功用。柚皮約占整個柚子總量40%，每年都有大量的柚皮被扔掉，造成資源的極大浪費,且污染環境[3]。江永香柚為永州特產之一，味美色香，深受人們喜愛，但柚皮卻一直得不到很好的利用。柚皮中除含有水分、維生素、礦物質這些人體必需的營養素外，還含有多種對人體健康有益的非營養性生理活性成分，如黃酮類化合物、類檸檬苦素、香精油、天然色素、膳食纖維等，這些成分高于柚果實[4]。因此，對柚皮的深加工和綜合利用開發具有潛在的價值和前景。目前柚皮的深加工方式主要是提取香精油、黃酮類化合物、果膠和色素等。但其開發利用價值還遠不止如此[5]。本研究提高柚皮原料綜合利用率，降低生產成本，提高附加值和經濟效益，減少環境污染提供方法依據。二、研究進展及研究內容目前柚皮的深加工方式主要是提取香精油、黃酮類化合物、果膠和色素等[5]。柚皮中黃酮類化合物含量約為1％-6％，二氫黃酮類化合物是柚皮中黃酮類合物的主要成分，所包含的二氫黃酮類化合物的主要種類有：柚皮苷(naringin)、新橙皮苷、柚皮蕓香苷等，其中柚皮苷占80％以上。柚皮苷主要以天然著色劑和風味改良劑的形式廣泛運用于食品工業中。此外，柚皮苷用在飲料以及高級糖果中還具有增強風味的作用。柚皮苷還可作為合成新型甜味劑的原料，如高甜度、無毒、低能量的新型甜味劑二氫柚苷查耳酮和新橙皮苷二氫查耳酮[6]。柚皮中的色素品質優良，作為天然色素安全可靠?？蓮V泛用于食品工業，如飲料、酒類、糕點、糖果、酒類、水產品等。還可以作為營養添加劑用于功能性食品的生產[7]。柚皮中的果膠多糖由于具有優良的乳化性和穩定性而在食品行業中被廣泛用作穩定劑、增稠劑、乳化劑等。目前國內外對于柚皮多糖的提取方法有很多：溶劑提取法、酸提法、堿提法、酶解法、超濾法、超聲波強化法、微波輔助法等。但是酸提、堿提及提取溫度過高的水提均會對于具有一定生物活性的多糖等生物大分子物質的功能活性造成一定的影響。多糖鏈中的糖苷鍵在酸性條件下會發生一定程度的水解，因此在酸性條件下提取多糖會影響多糖的結構和活性。堿能解聚多糖組織細胞壁的聚合物從而使不溶性纖維素、半纖維素、木質素與可溶性多糖間的糖苷鍵斷裂，最終使多糖的提取率提高。同時在堿性條件下提取的多糖(特別是酸性果膠多糖)的結構依然會由于堿的脫脂作用和堿性條件下的半乳糖醛酸糖苷鍵的β-消去反應而發生變化[8]。本研究利用超聲波輔助熱水浸提法直接從江永香柚柚皮中提取多糖，探討其最佳工藝。三、主要內容：1、實驗原理[9]苯酚—硫酸法，采用苯酚-濃硫酸法測定多糖含量。多糖成分在硫酸作用下，先水解成單糖,單糖迅速脫水生成糠醛衍生物，然后和苯酚縮合成有色化合物，該化合物在490nm波長處有特征吸，計算多糖含量。采用苯酚-硫酸顯色法測定總的多糖含量。取0.1g/L的標準葡萄糖溶液各0.05、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50、0.60、0.80mL，用蒸餾水補至1.00mL,再加入6%苯酚溶液各1ml，搖勻，然后加入濃硫酸各5.0ml，搖勻。另取1.0ml水，同上操作，作為參比溶液，置于40℃水浴中恒溫30min，取出，冷卻15min后，在490nm處進行比色,以吸光度為縱坐標，糖濃度為橫坐標，繪制標準曲線，求出回歸方程。3、江永香柚柚皮預處理[12].將柚皮洗凈，切碎加適量乙醇在恒溫水浴中浸泡2h脫脂，真空干燥，粉碎得柚子皮粉。4、香柚皮粗多糖的提取及測定[12]。準確稱取1.0g香柚皮粉,按一定料液比加入蒸餾水，按一定提取溫度和提取時間進行提取，將提取液冷卻后抽濾，用旋轉蒸發器將濾液濃縮。取濃縮液5ml置于燒杯中加入20ml無水乙醇離心過濾得沉淀為多糖和蛋白質的混合物，用蒸餾水復溶，取一定量的水溶液，置于分液漏斗中，按照提取液體積的1/5量加入Sevag試劑(氯仿/正丁醇)，震蕩靜置分離，收集上清液，加足量活性炭，過濾得多糖溶液，在490nm下測定吸光度并根據標準曲線，并計算出香柚皮多糖的提取率。5、香柚皮多糖的提取條件影響多糖浸提的因素主要有超聲波處理時間、浸提溫度、浸提時間、料水比(香柚皮粉末與加水量的比例)等，針對這些因素對香柚皮多糖的提取條件進行研究[10-15]。1)料液比對柚皮多糖提取率的影響準確稱取柚皮粉末樣品1.0g，采用不同的料液比(1:15、1:20、1:25、1:30、1:35)，超聲波處理時間為4min，水浴溫度為70℃，水浴提取時間為2h，對柚皮粉末樣品進行處理，然后用可見光分光光度計于490nm波長處測定多糖的提取率，繪制曲線圖，然后根據曲線圖確定最佳料液比。2)超聲波處理時間對柚皮多糖提取率的影響準確稱取柚皮粉末樣品1.0g，在提取時間為2h、提取溫度為70℃、料液比為1:20的情況下，采用不同的超聲波處理時間（2min、3min、4min、5min、6min），對柚皮粉末樣品進行處理，然后用可見光分光光度計于490nm波長處測定多糖的提取率，繪制曲線圖，然后根據曲線圖確定最佳超聲波提取時間]。3)水浴溫度對柚皮多糖提取率的影響準確稱取柚皮粉末樣品1.0g，在超聲波提取時間為4min，料液比為1:20、提取時間為2h，采用不同的水浴溫度(60℃、70℃、80℃、90℃、100℃)，對柚皮粉末樣品進行處理，然后用可見光分光光度計于490nm波長處測定多糖的提取率，繪制曲線圖，然后根據曲線圖確定最佳提取溫度。4)水浴時間對柚皮多糖提取率的影響準確稱取柚皮粉末樣品1.0g，在超聲波提取時間為4min，提取溫度為70℃、料液比1:20，采用不同的水浴時間(1h、1.5h、2h、2.5h、3h)，對柚皮粉末樣品進行處理，然后用可見光分光光度計于490nm波長處測定多糖的提取率，繪制曲線圖，然后根據曲線圖確定最佳提取時間。6、正交試驗在單因素研究的基礎上，設計L9(34)正交試驗，本試驗選取了料液比(m/V)、超聲波提取時間（t）、提取溫度(T)和提取時間(t)和4個影響因素，通過以上單因素試驗，每個因素取最好的3個水平研究它們對柚皮水溶性多糖的提取率的影響。7、穩定性實驗最佳工藝條件下進行4次穩定實驗。四、研究方法：(一)理論分析法：通過查詢和閱讀相關的文獻資料，在原有的基礎上將已有的結論進行引用加強。(二)實際討論法：和做相近領域實驗的同學進行討論，對于討論仍有疑難的問題請教指導老師。(三)實驗驗證法：按照實驗方案開展實踐研究，驗證實驗猜想，記錄實際結果，比較與理論分析的異同之處。(四)圖表分析法：運用圖表處理實驗數據，分析實驗結果。五、完成期限和采取的主要措施：填寫開題報告書、任務書，申請參加開題報告。(4)開題后進一步查閱有關文獻資料，完善試驗方案，按照實驗方案進行實驗，分析實驗結果(5)2013年4月撰寫論文，準備答辯。(6)2013年4月底參加論文答辯。為在規定的時間內出色地完成實驗操作與論文寫作，定將嚴格要求自己，以嚴謹的科學研究態度進行實驗，多查閱有關文獻，多思考多與老師和同學們交流。2、主要措施：(1)通過向圖書館借閱各種相關書籍，學術期刊查閱(2)通過網絡搜索有關文獻資料和有用信息，然后整理，展開論述(3)與指導老師及同學共同探討有關本題的相關知識六、參考文獻[1]韋巍，李雪華.多糖的研究進展[J].國外醫學藥學分冊，2005,32(3):179-184.[2]吳華振.植物多糖的藥理作用及應用進展[J].實用醫技雜志，2005,12(7):1803-1804.[3]賈冬英，姚開，譚敏，等.柚果皮中生理活性成分研究進展[J].食品與發酵工業，2001,27(11):7478.[4]鄧婷婷，劉素純，賀建華.柚皮提取物有效成分的研究概況[J].中國食物與營養，2008,6:16-19.[5]張婧萱，廖保寧，貞榮，等.柚子皮中總黃酮的提取及對羥自由基的清除作用[J].廣東微量元素科學，2006,13(7):4852.[6]羅春，黃建軍.柚皮苷二氫查爾酮工藝研究[J].精細化工中間體，2011,4:62-65.[7]楊麗華，程曉光.天然色素的資源開發和運用研究進展[J].中國食物與營養，2010,6:13-15.[8]李艷輝，王琦.真菌多糖的生物活性與構效關系的研究評介[J].吉林農業大學學報，2002,24(2):70-74.[9]俞建瑛，蔣宇，王善利.生物化學實驗技術[M].北京：科學出版社，2005:137-1381.[10]陳美珍，王欣，余杰.龍須菜多糖的提取、分離及抗氧化活性的研究[J].汕頭大學學報，2005,20(2):38-42.[11]王立娟，馮清偉.香蕉皮多糖提取條件研究[J].食品科學，2006,27(08):159-161.[12]朱開梅，顧生玖，唐世錠，等.超聲波法提取香蕉皮多糖的條件優化及其生物活性[J].安徽農業科學，2011,39(25):15779-15782.[13]王衛國，趙永亮.香菇多糖分離最佳工藝及最佳工藝原料探討[J].中草藥，2000,31(8):584-585.[14]張德華.夏德枯草多糖分離純化與抗氧化活性研究[J].云南植物研究，2006,28(4):410-414.[15]王曉波，何曉燕，王梅，等.火龍果皮總黃酮提取與體外抗氧化作用研究[J].食品工業設計，2011,32(11):156-163.[16]IrakozePierreClaverOptimizationofUltrasonicExtractionofPolysaccharidesfromChineseMaltedSorghumUsingResponseSurfaceMethodology[J].PakistanJournalofNutrition,2010,9(4):336-342.指導教師意見：指導教師簽名：教研室意見：簽名：年月日開題報告會紀要時間2013/01/12地點逸夫樓323與會人員姓名職務（職稱）姓名職務（職稱）姓名職務（職稱）林和成教授董加寶講師鄧勝國講師李玲講師劉小文講師會議主持人：記錄人： 年月日負責人簽名：年月日系部意見負責人簽名：年 月 日指導小組意見負責人簽名:年月日系部意見負責人簽名:年月日注：此表由學生本人填寫，一式三份，一份留系里存檔，指導老師和本人各保存一份湖南科技學院畢業設計指導過程記錄表畢業論文題目超聲波提取江永香柚皮多糖的優化工藝學生姓名唐麗娟學號200907003214專業班級指導教師職稱系（教研室）生化系指導過程記錄指導內容記錄(一)1、論文的選題。2、主要研究內容和大致方向。學生簽名：20年月日指導教師簽名：20年月日指導內容記錄(二)1、點評論文的意義。2、分析選取的實驗方法是否可行。學生簽名：20年月日指導教師簽名：20年月日指導內容記錄（三）1、對開題報告的書寫進行指導。2、對開題報告提出修改意見。學生簽名：20年月日指導教師簽名：20年月日指導內容記錄(四)1、對試劑的選用提出相關意見。2、指導使用復雜儀器。學生簽名：20年月日指導教師簽名：20年月日指導過程記錄指導內容記錄(五)1、幫忙分析實驗過程中出現的問題。2、實驗過程中的注意事項。學生簽名：20年月日指導教師簽名：20年月日指導內容記錄(六)對論文整體結構做出修改，督促按照格式完成。對論文內容進行有必要的增刪。學生簽名：20年月日指導教師簽名：20年月日指導內容記錄(七)1、論文再次修改，指出結構方面的錯誤。2、對摘要、參考文獻、標點符號等提出重點修改意見。學生簽名：20年月日指導教師簽名：20年月日指導內容記錄(八)1、指出論文仍存在的格式問題。2、論文終稿審查，仔細翻閱論文終稿，對其進行最后的審查。學生簽名：20年月日指導教師簽名：20年月日答辯小組組長意見(對情況是否屬實做出意見)組長(簽名)：20年月日注：本表與畢業論文一起裝訂存檔。湖南科技學院畢業論文答辯申請暨資格審查表畢業論文題目超聲波輔助提取江永香柚皮多糖的優化工藝內容綜述（對畢業論文的研究步驟和方法、主要內容及創新之處進行綜述，提出答辯申請）：實驗內容：本研究提高柚皮原料綜合利用率，提高附加值和經濟效益，減少環境污染提供依據。實驗結果：在提取料液比(m/V)1:25，超聲波處理時間(t)4min，水浴溫度為(T)70℃，水浴時間(t)3h的條件下，提取效果最佳，此條件下柚皮中水溶性多糖的平均提取率為5.629%。創新之處：江永香柚為永州本地特色水果，香柚資源豐富，但對香柚皮的研究也限于香油、色素等方面的提取，而以用超聲波處理提取柚皮多糖的研究幾乎沒有，因而利用香柚皮為原料提取多糖，可充分利用資源，變廢為寶，充分發揮柚皮的經濟價值，提高經濟效益和環境效益，適應可持續發展的時代要求。答辯申請：經過一段時間的試驗和論文寫作及修改，我的論文已初步定稿，在全部試驗與論文修改中劉老師給予了全面的指導。在此，我向老師申請參的答辯，望批準。資格審查項目是否01工作量是否達到所規定要求02文檔資料是否齊全（任務書、開題報告、答辯申請、定稿論文及其相關附件資料等）03文檔是否符合規范化要求04是否按時向指導教師提交全部正式材料05是否剽竊他人成果或者直接照抄他人設計（論文）06是否為已公開發表的個人論著備選是否多人設計一個系統或者合作一個課題（多人設計一個系統或者合作一個課題）內容是否雷同系畢業論文（設計）工作領導小組意見：符合答辯資格，同意答辯□不符合答辯資格，不同意答辯□（公章）年月日注：此表為學生畢業論文定稿后申請答辯，及系領導小組對申請答辯學生進行資格審查時用；資格審查項目由指導教師填寫。湖南科技學院本科畢業論文評審表論文題目超聲波提取江永香柚皮多糖的優化工藝作者姓名唐麗娟所屬系、專業、年級生命科學與化學工程系食品質量與安全專業09級指導教師劉小文（講師）字數10000定稿日期2013.4.21中文摘要本文以江永香柚皮為原料，采用超聲波輔助熱水浸提法提取香柚皮多糖。在單因素試驗基礎上選取影響提取率的主要因素：料液比，超聲波處理時間，水浴溫度，水浴時間。通過4因素3水平L9(34)正交試驗設計，對柚皮多糖的提取條件進行優化設計。結果表明，在提取料液比(m/V)1:25，超聲波處理時間(t)4min，水浴溫度為(T)70℃，水浴時間(t)3h的條件下，提取效果最佳，此條件下柚皮中水溶性多糖的平均提取率為5.629%。關鍵詞柚皮多糖；超聲波輔助法；熱水浸提英文摘要Inthispaper,investigatedtheextractiontechnologyofjiangyonggrapefruitpeelpolysaccharidesbyultrasonicassistantmethod.Theeffectfactors,includingmass/volumeratio,ultrasonictreatmenttime,extractiontemperatureandtime,wereoptimizedthroughorthogonaltestsL9(34)onthebasisofsinglefactorexperiment.Theresultshowedthattheoptimalextractingconditionsofultrasonicassistanttechnologyweremass/volumeratio1:25,ultrasonictreatmenttime4min,followedextractiontemperature70℃for3h.underoptimalconditions,theaverageextractionrateofpolysaccharidesproductwasabout5.629%.關鍵詞grapefruitpeelpolysaccharides;ultrasonicextractiontechnology;extractionwithhotwater指導教師評定成績評審基元評審要素評審內涵滿分選題質量25%目的明確符合要求選題符合專業培養目標，體現學科、專業特點和教學計劃的基本要求，達到畢業論文（設計）綜合訓練的目的。10理論意義或實際價值10選題恰當題目規模適當，難易度適中；有一定的科學性。5能力水平40%查閱文獻資料能力能獨立查閱相關文獻資料，歸納總結本論文所涉及的有關研究狀況及成果。10綜合運用知識能力10研究方案的設計能力5研究方法和手段的運用能力10外文應用能力5論文質量35%文題相符5寫作水平15寫作規范10論文篇幅5實評總分成績等級指導教師評審意見：指導教師簽名：說明：評定成績分為優秀、良好、中等、及