標準解讀

《GB/T 40251-2021 牡蠣單孢子蟲病診斷規程 原位雜交法》是一項國家標準,旨在規范使用原位雜交技術對牡蠣中單孢子蟲病進行檢測的方法。該標準適用于海洋養殖環境中牡蠣的單孢子蟲病監測及研究工作。

標準詳細描述了從樣品采集到結果分析的全過程。首先,在樣品準備階段,規定了如何正確收集、保存以及處理待檢牡蠣樣本,確保后續實驗能夠準確無誤地進行。接著,對于探針的設計與合成也給出了明確指導,要求選擇特異性高且能有效識別目標序列的DNA或RNA片段作為探針,并通過化學方法將其標記上可以被顯微鏡觀察到的顏色或熒光物質。

在操作流程部分,標準列出了具體的實驗步驟,包括但不限于組織切片制備、脫蠟復水、預雜交處理、加標有探針的雜交液并保溫一定時間以促進結合反應發生等環節。此外,還強調了洗滌條件的選擇對于去除非特異性結合的重要性,并提供了推薦參數供參考。


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  • 現行
  • 正在執行有效
  • 2021-05-21 頒布
  • 2021-12-01 實施
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GB/T 40251-2021牡蠣單孢子蟲病診斷規程原位雜交法_第1頁
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文檔簡介

ICS6502030

CCSB.41.

中華人民共和國國家標準

GB/T40251—2021

牡蠣單孢子蟲病診斷規程

原位雜交法

CodeofdiagnosisforMSXdiseaseofoysters—Insituhybridizationmethod

2021-05-21發布2021-12-01實施

國家市場監督管理總局發布

國家標準化管理委員會

GB/T40251—2021

前言

本文件按照標準化工作導則第部分標準化文件的結構和起草規則的規

GB/T1.1—2020《1:》

定起草

請注意本文件的某些內容可能涉及專利本文件的發布機構不承擔識別專利的責任

。。

本文件由中華人民共和國農業農村部提出

本文件由全國水產標準化技術委員會歸口

(SAC/TC156)。

本文件起草單位中國水產科學研究院黃海水產研究所全國水產技術推廣總站

:、。

本文件主要起草人白昌明楊冰王崇明黃倢李清萬曉媛辛魯生李晨余衛忠

:、、、、、、、、。

GB/T40251—2021

牡蠣單孢子蟲病診斷規程

原位雜交法

1范圍

本文件規定了牡蠣單孢子蟲病診斷規程中病原定位方法的要求針對主要病原尼氏單孢子蟲

,

Halosoridiumnelsoni給出了原位雜交檢測法所需試劑或材料儀器設備樣品試驗步驟和結果

(pp),、、、

判定

本文件適用于尼氏單孢子蟲在牡蠣中感染程度的評估和確診其他貝類也可參照執行

;。

2規范性引用文件

下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款其中注日期的引用文

。,

件僅該日期對應的版本適用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于

,;,()

本文件

牡蠣包納米蟲病診斷規程第部分組織印片的細胞學診斷法

SC/T7205.1—20071:

3術語和定義

本文件沒有需要界定的術語和定義

4縮略語

下列縮略語適用于本文件

堿性磷酸酶

AP:(alkalinephosphatase)

溴氯吲哚磷酸甲苯胺鹽

BCIP:5--4--3--(5-bromo-4-chloro-3-indolylphosphatep-toluidinesalt)

戴維森氏乙醇福爾馬林乙酸固定液

DAFA:--(davidson’salcohol-formalin-aceticacidfixative)

地高辛

DIG:(digoxigenin)

二水合乙二胺四乙酸二鈉

EDTA-Na2·2H2O:(Ethylenediaminetetraaceticacid,disodiumdi-

hydrate)

六水合氯化鎂

MgCl2·6H2O:(magnesiumchloridehexahydrate)

氯化鈉

NaCl:(sodiumchloride)

十二水合磷酸氫二鈉

Na2HPO4·12H2O:(sodiumphosphatedibasicdodecahydrate)

二水合檸檬酸三鈉

Na3C6H5O7·2H2O:(sodiumcitratedihydrate)

氯化硝基四氮唑藍

NBT:(4-Nitrobluetetrazoliumchloride)

磷酸二氫鉀

KH2PO4:(potassiumphosphatemonobasic)

氯化鉀

KCl:(potassiumchloride)

磷酸鹽緩沖液

PBS:(phosphatebuffersalinebuffer)

枸櫞酸鈉緩沖液

SSC:

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