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文檔簡介
培養液中酵母菌種群數量的變化探究:討論探究:1.探究實驗的一般步驟是什么?2.本實驗的實驗材料有哪些?3.實驗步驟有哪些?4.該實驗的注意事項有哪些?5.影響酵母菌種群數量增長的因素有哪些?探究11.提出問題:2.作出假設:3.設計實驗:4.進行實驗:5.分析結果:
6.得出結論:培養液中酵母菌種群的數量是怎樣隨時間變化的?酵母菌在開始一段時間呈“J”型增長,隨著時間的推移,由于資源和空間有限,呈“S”型增長。連續培養7天,每天用顯微鏡和血球計數板計數出酵母菌種群密度各小組匯報實驗結果,結合前4天的結果,畫出酵母種群增長的曲線圖并進行分析。酵母菌在開始一段時間呈“J”型增長,但隨著時間的推移,由于資源和空間有限,將呈“S”型增長,并最終將全部死亡。實驗材料:1.無菌培養液2.酵母菌3.血球計數板4.顯微鏡酵母菌:1.酵母菌是原核生物還是真核生物?與乳酸菌的主要區別是什么?2.酵母菌的生長特點是什么?3.酵母菌的呼吸方式是?寫出相關的方程式?4.酵母菌的生殖方式是什么?酵母菌1.酵母菌是單細胞真核生物,2.生長周期短,增殖速度快,3.既可有氧呼吸,又可無氧呼吸,還可以用酵母菌作為實驗材料研究(探究酵母菌的呼吸方式,判斷細胞的死活探究膜的透性:)4.主要是出芽生殖(有絲分裂)酵母菌的計數(1)計數工具——血球計數板
每個計數板有兩個計數室(1個計數室即一個大格)。血球計數板:一種專門計數較大單細胞微生物的儀器計數室計數室(中間大方格)的長和寬各為1mm,深度為0.1mm,其體積為______mm3,合_________mL。1mm0.11×10-4血球計數板:一種專門計數較大單細胞微生物的儀器計數室計數室分為25中格(雙線邊)每一中格又分為16小格計數室是由___________個小格組成25×16=400計數室計數室分為16中格(雙線邊)每一中格又分為25小格計數室是由___________個小格組成16×25=400取樣方法:25個中格每個中格有16個小格16個中格每個中格有25個小格*********抽樣檢測(書上68頁)5×16=80個小格抽樣檢測:4×25=100個小格實驗步驟:①將10mL無菌馬鈴薯培養液或肉湯培養液加入3支試管中;②將酵母菌接種入試管中的培養液中混合均勻;③將試管在28℃條件下連續培養7d;④每天固定時間(即相同時間)取樣計數酵母菌數量,每個樣品計數三次,取平均值,連續7天;怎樣計數?估算公式?⑤分析結果,得出結論。酵母菌的計數的操作震蕩試管:使酵母菌在培養液中分布均勻。稀釋:將酵母菌培養液進行適當的稀釋;若菌液不濃,可不必稀釋。加樣品:在清潔干燥的血球計數板上先蓋上蓋玻片,再用無菌滴管將稀釋的酵母菌液滴于蓋玻片邊緣,讓培養液沿縫
隙自行滲入計數室。注意不可有氣泡產生。多余培養液用濾紙吸去。稍待片刻,待酵母菌細胞全部沉降到計數室底部。再將血球計數板置于顯微鏡下進行計數。顯微計數:根據血球計數板的規格,每個計數室選取5個(或4個中方格中的菌體進行計數。當菌體數太多,數不清時,事先要稀釋培養液)例1:血球計數板計數室(大方格)規格為1mm*1mm,蓋玻片下培養液厚度為0.1mm,若一個小方格內酵母菌有a個,則10ml培養液中有多少個酵母菌?若稀釋10倍后,一個小方格中的酵母菌有b個,則10ml培養液中有多少個酵母菌?提示:先算每毫升培養液中的酵母菌細胞數是多少?酵母菌的計數(2)計算:
每毫升培養液中的酵母菌細胞數是多少?
酵母細胞個數/mL=所數小方格中細胞總數x400x104x稀釋倍數所數的小方格數例3:酵母菌的計數通常用血球計數板進行,血球計數板每個大方格容積為0.1mm3,由400個小方格組成。現對某一樣液進行檢測,如果一個小方格內酵母菌過多,難以計數,應先
后再計數。若多次重復計數后,算得每個小方格中平均有5個酵母菌,則10mL該培養液中酵母菌總數有
個。例2:在用血球計數板(2mm×2mm方格)對某一稀釋50倍樣品進行計數時,發現在一個計數室內(蓋玻片下的培養液厚度為0.1mm)酵母菌平均數為16,據此估算10mL培養液中有酵母菌
個。2x1072×108稀釋例4
檢測員將1mL水樣稀釋10倍后,用抽樣檢測的方法檢測每毫升藍藻的數量;將蓋玻片放在計數室上,用吸管吸取少許培養液使其自行滲入計數室,并用濾紙吸去多余液體。已知每個計數室由25×16=400個小格組成,容納液體的總體積為0.1mm3。現觀察到圖中該計數室所示a、b、c、d、e5個中格80個小格內共有藍藻n個,則上述水樣中約有藍藻
個/mL。5n×105
第1天第4天第6天第7天死亡第1天第2天第3天第4天第5天第6天第7天第1組第2組第3組------第n組平均值酵母菌數量變化記錄表酵母菌數量變化記錄表計數時有哪些注意事項?①從試管中吸出培養液進行計數之前,要將試管輕輕震蕩幾次;如果酵母菌濃度過大,應先稀釋。②對于壓在中格界線上的酵母菌,一般只取相鄰兩邊及夾角計數;③對于已經出芽的酵母菌,芽體達到母細胞大小一半時,即可作為兩個菌體計算;已死亡的酵母菌不計數※。④每個樣品一般計數三次,取其平均值。培養液中酵母菌種群數量的變化該實驗的注意事項:1.每天計數的時間要固定(即相同)。2.進行計數前,應先將試管搖勻,目的是使酵母菌在培養液中混合均勻,以減少計數誤差。(即不能直接從靜置的試管中取樣計數)3.顯微鏡計數時,對于壓在小方格界線上的酵母菌,應取相鄰兩邊及頂角計數。4.若一個小方格內酵母菌數量過多,難以數清時,則可將培養液稀釋一定倍數后再計數。5.本實驗無對照實驗,酵母菌每天的數量變化在時間上已形成前后對照。6.本實驗需要重復實驗或重復組,使結果更準確。7.血球計數板使用后的清洗,切勿用硬物洗刷,可采用浸泡和自來水沖洗的方法清洗,然后自行晾干。死亡在計數前,還應有哪些步驟?需注意些什么?培養液配制滅菌接種培養無菌操作培養條件影響酵母菌種群數量的變化因素有:
種群數量的變化包括增長、波動、穩定、下降等“S”型曲線有一個K值,即環境容納量。
種群數量的增長也受到許多環境因素(如溫度、培養液的pH、培養液的養分種類和濃度、代謝產物等)的影響。試管編號培養液/mL無菌水/mL酵母菌母液/mL溫度(℃)A10—0.128B10—0.15C—100.128針對“培養液中酵母菌種群數量的動態變化”,有人提出了新的問題,某同學按下表完成了有關實驗。溫度、營養物質對酵母菌生長的影響試管編號培養液/mL無菌水/mL酵母菌母液/mL溫度(℃)A10—0.128B10—0.15C—100.128以計數酵母菌為例
(1)用血球計數板計數酵母菌懸液的酵母菌個數.
(2)樣品稀釋的目的是便于酵母菌懸液的計數,以每小方格內含有4-5個酵母細胞為宜,一般稀釋10倍即可.
(3)將血球計數板用擦鏡紙擦凈,在中央的計數室上加蓋專用的厚玻片.
(4)將稀釋后的酵母菌懸液,用吸管吸取一滴置于蓋玻片的邊緣,使菌液緩緩滲入,多余的菌液用吸水紙吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球計數室內.
血球計數板的使用(5)計數時,如果使用16格×25格規格的計數室,要按對角線位,取左上,右上,左下,右下4個中格(即100個小格)的酵母菌數.如果規格為25格×16格的計數板,除了取其4個對角方位外,還需再數中央的一個中格(即80個小方格)的酵母菌數.
(6)當遇到位于大格線上的酵母菌,一般只計數大方格的上方和左方線上的酵母細胞(7)對每個樣品計數三次,取其平均值,按下列公式計算每1ml菌液中所含的酵母菌個數.3.計算公式
(1)16格×25格的血球計數板計算公式:
酵母細胞數/ml=100小格內酵母細胞個數/100×400×104×稀釋倍數
(2)25格x16格的血球計數板計算公式:
酵母細胞數/ml=80小格內酵母細胞個數/80×400×104×稀釋倍數
怎樣進行酵母菌的計數?
對一支試管中的培養液(可定為10ml)中的酵母菌逐個計數是非常困難的,可以采用抽樣檢測的方法:先將蓋玻片放在計數室上,用吸管吸取培養液,滴于蓋玻片邊緣,讓培養液自行滲入,多余培養液用濾紙吸去,稍待片刻,待酵母菌細胞全部沉降到計數室底部,將計數板放在載物臺的中央,計數一個小方格內的酵母菌數量,再以此為根據,估算計算中的酵母菌總數,蓋玻片下,培養液厚度為0.1mm,可算出10ml培養液中酵母菌總數的公式:2.5×104x(x為小方格內酵母菌數)
從試管中吸出培養液進行計數之前,建議你將試管輕輕振蕩幾次。這是為什么?本探究需要設置對照嗎?如果需要請討論對照組應怎樣設計和操作;如果不需要,請說明理由。需要做重復實驗嗎?目的是使培養液中的酵母菌均勻分布,以保證估算的準確性,減少誤差。不需要,本實驗旨在探究培養液中酵母菌在一定條件下的種群數量變化,只要分組實驗,獲得平均數值即可。
不用重復,只要分組實驗獲得平均值即可。5、怎樣記錄結果?記錄表怎樣設計?如果一個小方格內酵母菌過多,難以計數,應采取怎樣的措施?第1天第2天第3天第4天第5天第6天第7天第1組第2組第3組------第n組平均值搖勻試管取1mL酵母菌培養液稀釋n倍后,再用血球計數板計數,所得數值乘以n×2.5×104,即為10mL酵母菌液中酵母菌個數。只計數相鄰兩邊及其頂角的酵母菌數。7對于壓在小方格界線上的酵母菌,應當怎樣計數?設計實驗:A組為實驗組,裝培養液10mL,酵母菌母液0.1mL,環境溫度28℃。B組裝培養液10mL,酵母菌母液0.1mL,環境溫度5℃,與A組形成溫度條件對照。C組不裝培養液,只裝無菌水10mL,酵母菌母液0.1mL,環境溫度28℃,
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