PAGEPAGE2/3下載文檔可編輯把小鼠喉嚨處皮膚剪開， 用鑷子把氣管周圍的組織分離開，氣管暴露出來。注射器 7號針頭，針尖剪掉，再磨平，把動物仰位固定，針頭從嘴巴里進去，伸到氣管里。和平時灌胃一樣，只是現在伸到氣管。在甲狀腺（氣管顯得稍寬處）下面針頭就伸到這里， 大約甲狀腺過 3毫米處。然后拿一根線，從氣管下穿過，把針頭和氣管一起結扎了，其實就是把針頭固定在里面，不讓它跑出來。打結時用點力， 手撥動針頭時明顯感覺針頭動不了就可以了。然后注射器吸取液體推進氣管，第一次一般吸不完全，沒關系，第二次的液體推進去后就能吸出來很多了。 我基本能全部出來的。 希望能幫上忙。標題：小鼠肺泡灌洗標準操作規程關鍵詞： 肺泡灌洗；細胞分類計數；細胞因子目的：檢查小鼠各種病理生理狀態 (特別是肺部疾病 )下，肺部 出現的各種病理改變。例：哮喘模型中檢測嗜酸細胞的分類數有否提高，灌洗 液中各種細胞因子，如IL-4,IL-5,IL-10,IFN-r 等水平。 主體內容（操作步驟實驗的準備實驗的器材、儀器、藥品： 遇冷的單純 和4℃遇冷的含 1%BSA的PB； 手術器械：眼科剪，眼科鑷，穿刺針或 4號半頭 皮針；細胞計數板；低溫離心機實驗操作規程：灌洗分單側和雙側。單側一般為頸部和胸部解剖，氣管和一側肺葉結扎。再用穿刺針插入氣管上端，0.3mlPBS反復沖洗,一般為3遍，每遍沖洗次數根據需要決定，一般3-5次即可。雙側灌洗則只需要進行頸部解剖，暴露氣管進行插管。灌洗量增高到0.8ml.灌洗次數同上。結果判定：1回收的灌洗液離心10分鐘，回收上清置于-20℃等待進行細胞因子檢測；.用l含有的PB重懸細胞沉淀，取 l 重懸液進行細胞計數。余液再次 4℃離心，參數同上； 3. 離心后去上清，不需太徹底可根據第二步細胞計數所得結果和需要涂片張數決定需要殘留多少上清重懸細胞沉淀。一般如果細胞總數有 10*6 次方/ml 的話，80-100ul 重懸可以涂三張片，這樣玻片上細胞密度比較適中。4.涂片后待玻片自然晾干，然后置于 中性甲醛溶液中固定 10鐘以上，隨后就可以進行常規 HE染色。5。染色后就可以進行細胞分類計數，計算 300個以上細胞，結果就比較可靠了。使用靜脈留置針，頸部解剖顯露氣管，插入留置針，用細線打結固定，PAGEPAGE4/3下載文檔可編輯拔出針芯。鏈接注射器，即可開始灌洗！本實驗室是這么做的，很方便，效果很好1 總則1.1 為了加強公司的環境衛生管理，創造一個整潔、文明、溫馨的購物、辦公環境，根據《公共場所衛生管理條例》的要求，特制定本制度。1.2 集團公司的衛生管理部門設在企管部，并負責將集團公司的衛生區域詳細劃分到各部室，各分公司所轄區域衛生由分公司客服部負責劃分，確保無遺漏。2 衛生標準2.1 室內衛生標準2.1.1 地面、墻面：無灰塵、無紙屑、無痰跡、無泡泡糖等粘合物、無積水，墻角無灰吊、無蜘蛛網。2.1.2 門、窗、玻璃、鏡子、柱子、電梯、樓梯、燈具等，做到明亮、無灰塵、無污跡、無粘合物，特別是玻璃，要求兩面明亮。2.1.3 柜臺、貨架：清潔干凈，貨架、柜臺底層及周圍無亂堆亂放現象、無灰塵、無粘合物，貨架頂部、背部和底部干凈，不存放雜物和私人物品。2.1.4 購物車（筐）、直接接觸食品的售貨工具（包括刀、叉等）：做到內外潔凈，無污垢和粘合物等。購物車（筐）要求每天營業前簡單清理，周五全面清理消毒；售貨工具要求每天消毒，并做好記錄。2.1.5 商品及包裝：商品及外包裝清潔無灰塵（外包裝破損的或破舊的不得陳列）。2.1.6 收款臺、服務臺、辦公櫥、存包柜：保持清潔、無灰塵，臺面和側面無灰塵、無灰吊和蜘蛛網。桌面上不得亂貼、亂畫、亂堆放物品，用具擺放有序且干凈，除當班的購物小票收款聯外，其它單據不得存放在桌面上。2.1.7 垃圾桶：桶內外干凈，要求營業時間隨時清理，不得溢出，每天下班前徹底清理，不得留有垃圾過夜。2.1.8 窗簾：定期進行清理，要求干凈、無污漬。2.1.9 吊飾：屋頂的吊飾要求無灰塵、無蜘蛛網，短期內不適用的吊飾及時清理徹底。2.1.10 內、外倉庫：半年徹底清理一次，無垃圾、無積塵、無蜘蛛網等。2.1.11 室內其他附屬物及工作用具均以整潔為準，要求無灰塵、無粘合物等污垢。2.2 室外衛生標準2.2.1 門前衛生：地面每天班前清理，平時每一小時清理一次，每周四營業結束后有條件的用水沖洗地面（冬季可根據情況適當清理），墻面干凈且無亂貼亂畫。2.2.2 院落衛生：院內地面衛生全天保潔，果皮箱、消防器械、護欄及配電箱等設施每周清理干凈。垃圾池周邊衛生清理徹底，不得有垃圾溢出。2.2.3 綠化區衛生：做到無雜物、無紙屑、無塑料袋等垃圾。3 清理程序3.1 室內和門前院落等區域衛生：每天營業前提前10分鐘把所管轄區域內衛生清理完畢，營業期間隨時保潔。下班后5-10分鐘清理桌面及衛生區域。3.2 綠化區衛生：每周徹底清理一遍，隨時保持清潔無垃圾。4 管理考核4.1 實行百分制考核，每月一次（四個分公司由客服部分別考核、集團職4.2 集團堅持定期檢查和不定期抽查的方式監督各分公司、部門的衛生工作。每周五為衛生檢查日，集團檢查結果考核至各分公司，各分公司客服部的檢查結果考核至各部門。把小鼠喉嚨處皮膚剪開， 用鑷子把氣管周圍的組織分離開，氣管暴露出來。注射器 7號針頭，針尖剪掉，再磨平，把動物仰位固定，針頭從嘴巴里進去，伸到氣管里。和平時灌胃一樣，只是現在伸到氣管。在甲狀腺（氣管顯得稍寬處）下面針頭就伸到這里， 大約甲狀腺過 3毫米處。然后拿一根線，從氣管下穿過，把針頭和氣管一起結扎了，其實就是把針頭固定在里面，不讓它跑出來。打結時用點力， 手撥動針頭時明顯感覺針頭動不了就可以了。然后注射器吸取液體推進氣管，第一次一般吸不完全，沒關系，第二次的液體推進去后就能吸出來很多了。 我基本能全部出來的。 希望能幫上忙。標題：小鼠肺泡灌洗標準操作規程關鍵詞： 肺泡灌洗；細胞分類計數；細胞因子目的：檢查小鼠各種病理生理狀態 (特別是肺部疾病 )下，肺部 出現的各種病理改變。例：哮喘模型中檢測嗜酸細胞的分類數有否提高，灌洗 液中各種細胞因子，如IL-4,IL-5,IL-10,IFN-r 等水平。 主體內容（操作步驟實驗的準備實驗的器材、儀器、藥品： 遇冷的單純 和4℃遇冷的含 1%BSA的PB； 手術器械：眼科剪，眼科鑷，穿刺針或 4號半頭 皮針；細胞計數板；低溫離心機實驗操作規程：灌洗分單側和雙側。單側一般為頸部和胸部解剖，氣管和一側肺葉結扎。再用穿刺針插入氣管上端，0.3mlPBS反復沖洗,一般為3遍，每遍沖洗次數根據需要決定，一般3-5次即可。雙側灌洗則只需要進行頸部解剖，暴露氣管進行插管。灌洗量增高到0.8ml.灌洗次數同上。結果判定：1回收的灌洗液離心10分鐘，回收上清置于-20℃等待進行細胞因子檢測；.用l含有的PB重懸細胞沉淀，取 l 重懸液進行細胞計數。余液再次 4℃離心，參數同上； 3. 離心后去上清，不需太徹底可根據第二步細胞計數所得結果和需要涂片張數決定需要殘留多少上清重懸細胞沉淀。一般如果細胞總數有 10*6 次方/ml 的話，80-100ul 重懸可以涂三張片，這樣玻片上細胞密度比