..章末檢測1．下列有關人胰島素基因表達載體的敘述,正確的是<>A．表達載體中的胰島素基因可通過人肝細胞mRNA反轉錄獲得B．表達載體的復制和胰島素基因的表達均啟動于復制原<起>點C．借助抗生素抗性基因可將含胰島素基因的受體細胞篩選出來D．啟動子和終止密碼子均在胰島素基因的轉錄中起作用2．某科學家從細菌中分離出耐高溫淀粉酶<Amy>基因a,通過基因工程的方法,將基因a與載體結合后導入馬鈴薯植株中,經檢測發現Amy在成熟塊莖細胞中存在。下列有關這一過程的敘述不正確的是<>A．獲取基因a的限制酶的作用部位是圖中的①B．連接基因a與載體的DNA連接酶的作用部位是圖中的②C．基因a進入馬鈴薯細胞后,可隨馬鈴薯DNA分子的復制而復制,傳給子代細胞D．通過該技術人類實現了定向改造馬鈴薯的遺傳性狀3．以下甲、乙兩圖表示從細菌細胞中獲取目的基因的兩種方法,以下說法中錯誤的是<>A．甲方法可建立該細菌的基因組文庫B．乙方法可建立該細菌的cDNA文庫C．甲方法要以脫氧核苷酸為原料D．乙方法需要逆轉錄酶參與4．在判斷抗蟲基因是否成功轉入棉花基因組的方法中,不屬于分子檢測的是<>A．觀察害蟲吃棉葉是否死亡B．檢測目的基因片段與DNA探針能否形成雜交帶C．檢測目的基因轉錄形成的mRNA與DNA探針能否形成雜交帶D．檢測目的基因表達產物蛋白質能否與特定抗體形成雜交帶5．右圖表示細胞膜上乙酰膽堿<一種神經遞質>受體基因的克隆技術操作過程,下列相關分析中正確的是<>A．獲得該mRNA的最佳材料是受精卵B．構建基因表達載體最可能使用的載體是大腸桿菌C．完成過程①②必不可少的酶分別是逆轉錄酶、DNA聚合酶D．探針篩選的目的是淘汰被感染的細菌,獲得未被感染的細菌6．應用基因工程技術診斷疾病的過程中,必須使用基因探針才能達到檢測疾病的目的。這里的基因探針是指<>A．用于檢測疾病的醫療器械B．用放射性同位素或熒光分子等標記的DNA分子C．合成β－珠蛋白的DNAD．合成苯丙氨酸羥化酶的DNA片段7．下列關于蛋白質工程的敘述,正確的是<>A．將一種生物的基因轉移到另一種生物體內,使生物表現出新的性狀B．干擾素是動物體內的一種蛋白質,可用于治療病毒的感染和癌癥C．由于賴氨酸抑制天冬氨酸激酶和二氫吡啶二羧酸合成酶的活性,所以賴氨酸產量難以提高D．蛋白質工程能產生自然界已有的蛋白質8．下圖表示一項重要的生物技術,對圖中物質a、b、c、d的描述,正確的是<>A．通常情況下,a與d需要用同一種限制酶進行切割B．b能識別特定的核苷酸序列,并將A與T之間的氫鍵切開C．c連接雙鏈間的A和T,使黏性末端處堿基互補配對D．b代表的是限制性核酸內切酶,c代表的是RNA聚合酶9．下列關于限制酶的敘述中,錯誤的是<>A．它能在特殊位點切割DNA分子B．同一種限制酶切割不同的DNA產生的黏性末端能夠很好地進行堿基配對C．它能任意切割DNA,從而產生大量DNA片段D．每一種限制酶只能識別特定的核苷酸序列10．現有一長度為1000堿基對<bp>的DNA分子,用限制性核酸內切酶EcoRⅠ單獨酶切后得到的DNA分子仍是1000bp,用KpnⅠ單獨酶切得到400bp和600bp兩種長度的DNA分子,用EcoRⅠ、KpnⅠ同時酶切后得到200bp和600bp兩種長度的DNA分子。該DNA分子的酶切圖譜正確的是<>11．下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是<>①從基因文庫中獲取目的基因②利用PCR技術擴增目的基因③反轉錄法④通過DNA合成儀利用化學方法人工合成目的基因A．①②③④B．①②③C．②③④D．②③12．質粒是基因工程中最常用的載體,它存在于許多細菌體內,某細菌質粒上的標記基因如圖所示,通過標記基因可以推知外源基因<目的基因>是否轉移成功。外源基因插入的位置不同,細菌在培養基上生長情況也不同,如圖所示外源基因在質粒中可插入的位置有a、b、c三點。某同學根據實驗現象對其插入的位點進行分析,其中分析正確的是<>實驗現象實驗推論在含青霉素培養基上生長情況在含四環素培養基上生長情況目的基因插入的位置A能生長能生長aB不能生長能生長bC能生長不能生長cD不能生長不能生長c13．下列關于蛋白質工程的敘述,錯誤的是<>A．蛋白質工程操作的實質是改造基因B．蛋白質工程在設計蛋白質結構時的依據是現有基因的脫氧核苷酸序列C．蛋白質工程的基礎是基因工程D．蛋白質工程遵循的原理包括中心法則14．科學家為提高玉米中賴氨酸含量,計劃將天冬氨酸激酶的第352位的蘇氨酸變成異亮氨酸,將二氫吡啶二羧酸合成酶中104位的氨基酸由天冬酰胺變成異亮氨酸,就可以使玉米葉片和種子中的游離賴氨酸含量分別提高5倍和2倍。下列對蛋白質的改造,操作正確的是<>A．直接通過分子水平改造蛋白質B．直接改造相應的mRNAC．對相應的基因進行操作D．重新合成新的基因15．基因工程技術也稱DNA重組技術,其實施必須具備的4個必要條件是<>A．工具酶、目的基因、載體、受體細胞B．重組DNA、RNA聚合酶、限制性核酸內切酶、DNA連接酶C．模板DNA、信使RNA、質粒、受體細胞D．目的基因、限制性核酸內切酶、載體、受體細胞16．在基因工程中,為將目的基因導入受體細胞常采用土壤農桿菌轉化法,在土壤農桿菌中常含有一個Ti質粒。某科研小組欲將某抗蟲基因導入某植物,下列分析錯誤的是<>A．Ti質粒含有對宿主細胞生存具有決定性作用的基因,是基因工程中重要的載體B．用Ca2＋處理細菌是重組Ti質粒導入土壤農桿菌中的重要方法C．重組Ti質粒的土壤農桿菌成功感染植物細胞,可通過植物組織培養技術將該細胞培養成具有抗蟲性狀的植物D．若能夠在植物細胞中檢測到抗蟲基因,則說明將重組質粒成功地導入到了受體細胞17．下圖表示基因工程中獲取水稻某目的基因的不同方法。下列相關敘述中正確的是<>A．這三種方法都用到酶,都是在體外進行B．①②③堿基對的排列順序均相同C．圖示a、b、c三種方法均屬于人工合成法D．方法a不遵循中心法則18．某研究小組為了研制預防禽流感病毒的疫苗,開展了前期研究工作。其簡要的操作流程如下圖。下列有關敘述錯誤的是<>A．步驟①所代表的過程是反轉錄B．步驟②需使用限制性核酸內切酶和DNA連接酶C．步驟③可用CaCl2處理大腸桿菌,使其從感受態恢復到常態D．檢驗Q蛋白的免疫反應特性,可用Q蛋白與患禽流感康復的雞的血清進行抗原—抗體特異性反應實驗19.20XX3月在上海和XX首次發現H7N9禽流感病例,現在我國多地出現禽流感疫情,為此某研究小組為了研制預防H7N9禽流感病毒的疫苗,開展了前期研究工作。其簡要的操作流程如下圖。下列有關敘述錯誤的是<>A.步驟①所代表的過程是反轉錄B.步驟②需使用限制酶和DNA連接酶C.步驟③可用CaCl2處理大腸桿菌,使其從感受態恢復到常態D.檢驗Q蛋白的免疫反應特性,可用Q蛋白與患禽流感康復的雞的血清進行抗原—抗體特異性反應實驗20.甲、乙兩圖均為DNA測序儀顯示的圖像,已知甲圖顯示的堿基順序為TCGAAT,則乙圖顯示的堿基順序為<>A.TCGCAC B.ACCGTG C.ATTCAG D.TCCGGA21.某科學家從細菌中分離出耐高溫淀粉酶<Amy>基因a,通過基因工程的方法,將基因a轉移到馬鈴薯植株中,經檢測發現Amy在馬鈴薯成熟塊莖細胞中存在。下列說法正確的是<>A.基因a只有導入到馬鈴薯受精卵中才能表達B.目的基因來自細菌,可以不需要載體直接導入受體細胞C.基因a導入成功后,將抑制細胞原有的新陳代謝,開辟新的代謝途徑D.目的基因進入受體細胞后,可隨著馬鈴薯DNA分子的復制而復制,傳給子代細胞并表達22．下圖是利用基因工程技術生產可食用疫苗的部分過程,其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ為四種限制性核酸內切酶。下列有關說法,正確的是〔A．一種限制性核酸內切酶不只識別一種特定的脫氧核苷酸序列B．表達載體構建時需要用到SmaⅠ、PstⅠ限制性核酸內切酶C．抗卡那霉素基因的主要作用是促進抗原基因在受體細胞表達D．除圖示標注的結構外表達載體中還應有啟動子和終止子等23．已知生物體內有一種蛋白質<P>,該蛋白質是一種轉運蛋白,由305個氨基酸組成。如果將P分子中158位的絲氨酸變成亮氨酸,240位的谷氨酰胺變成苯丙氨酸,改變后的蛋白質<P1>不但保留P的功能,而且具有了酶的催化活性?；卮鹣铝袉栴}。<1>從上述資料可知,若要改變蛋白質的功能,可以考慮對蛋白質的_________________進行改造。<2>以P基因序列為基礎,獲得P1基因的途徑有修飾________基因或合成________基因。所獲得的基因表達是遵循中心法則的,中心法則的全部內容包括_______________________的復制；以及遺傳信息在不同分子之間的流動,即：___________________________________。<3>蛋白質工程也被稱為第二代基因工程,其基本途徑是從預期蛋白質功能出發,通過________________________和____________________________,進而確定相對應的脫氧核苷酸序列,據此獲得基因,再經表達、純化獲得蛋白質,之后還需要對蛋白質的生物________進行鑒定。24．將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因導入棉花細胞中,可獲得抗棉鈴蟲的轉基因棉,其過程如圖所示<注：農桿菌中Ti質粒上只有TDNA片段能轉移到植物細胞中>。<1>過程①需用同種________酶對含Bt基因的DNA和Ti質粒進行酶切。為將過程②獲得的含重組質粒的農桿菌篩選出來,應使用________培養基。<2>過程③中將棉花細胞與農桿菌混合后共同培養,旨在讓________進入棉花細胞；除盡農桿菌后,還須轉接到含卡那霉素的培養基上繼續培養,目的是______________________。<3>若過程④僅獲得大量的根,則應在培養基中增加________以獲得芽；部分接種在無激素培養基上的芽也能長根,原因是______________________________________________。<4>檢驗轉基因棉的抗蟲性狀,常用方法是________。種植轉基因抗蟲棉能減少________的使用,以減輕環境污染。25．酵母菌的維生素、蛋白質含量高,可生產食品和藥品等。科學家將大麥細胞的LTP1基因導入啤酒酵母菌中,獲得的啤酒酵母菌可產生LTP1蛋白,并釀出泡沫豐富的啤酒?；静僮鬟^程如圖所示,請據圖回答下列問題：<1>該技術定向改變了酵母菌的性狀,這種可遺傳變異屬_______________。<2>從大麥細胞中可直接分離獲得LTP1基因,還可采用__________方法獲得目的基因。本操作中為了將LTP1基因導入酵母菌細胞內,所用的載體是___________________________。<3>要使載體與LTP1基因連接,首先應使用__________進行切割。假如載體被切割后,得到的分子末端序列為AATTCG,則能與該載體連接的LTP1基因分子末端是____________。A．GCTTAAB．TAATTCCC．CTTTAGD．AAATCT<4>切割完成后,采用____________酶將載體與LTP1基因連接,連接后得到的DNA分子稱為__________。<5>此操作中可以分別用含有青霉素、四環素的兩種選擇培養基進行篩選,則有C進入的酵母菌在選擇培養基上的生長情況是____________________________________________。<6>除了看啤酒泡沫豐富與否外,還可用什么方法檢測LTP1基因在啤酒酵母菌中是否表達？________________________________________________________________________。26．下面是口蹄疫疫苗生產過程示意圖,請據圖回答下列問題：<1>首先從口蹄疫病毒中提取部分合成病毒蛋白的RNA,而不是用口蹄疫病毒的全部RNA,原因是合成病毒蛋白的RNA控制合成的病毒蛋白質,具有________________________________特性,又不會使動物致病。以合成病毒蛋白的RNA產生病毒蛋白的DNA,需用到的工具酶是_______________________________________________。<2>構建基因表達載體所需要的工具酶是____________________________。基因表達載體除目的基因外,還應包括______________________________。<3>導入大腸桿菌前需先將大腸桿菌處理為______________________細胞。<4>為檢測目的基因是否導入受體細胞,常常要借助載體上______________的表達,更準確的方法是利用放射性同位素標記的______________作探針與基因組DNA雜交。最后還要檢測目的基因是否翻譯成了病毒蛋白質,利用的技術是_________________________________________。27．科學家將動物體內的能夠合成胰島素的基因與大腸桿菌的DNA分子重組,并且在大腸桿菌體內表達成功。請據圖回答下列問題：<1>圖中①DNA是以________________為模板,____________形成單鏈DNA,在酶的作用下合成雙鏈DNA,從而獲得了所需要的基因。<2>圖中②代表的是__________________,在它的作用下將質粒<______________DNA>切出________末端。<3>圖中④表示將____________________。⑤表示____________隨大腸桿菌的繁殖而進行________________________________________________________________________。<4>采用蛋白質工程可以對胰島素進行改造,使之起效時間縮短,保證餐后血糖高峰和血液中胰島素高峰一致。如果你是科研工作者,請寫出研制速效胰島素的思路。_____________________________________________________________________。<5>下列關于蛋白質工程的說法不正確的是<>A．蛋白質工程能將人抗體某些區段替代鼠單克隆抗體的區段,降低鼠單克隆抗體免疫原性B．蛋白質工程可對酶的催化活性、底物專一性、抗氧化性、熱變性、堿變性等加以改變C．理論上通過對關鍵氨基酸的轉換與增刪是進行蛋白質工程的唯一方法D．蛋白質工程的崛起主要是工業生產和基礎理論研究的需要28．通過基因工程的方法,科學家采用花粉管通道法將毒蛋白基因轉入棉花植株并獲得成功表達。棉鈴蟲吃了這種轉基因棉花的植株后就會死亡?；ǚ酃芡ǖ婪ㄊ侵福豪弥参锘ǚ勖劝l時形成的花粉管通道將毒蛋白基因送入胚囊,進而導入尚不具備細胞壁的合子或早期胚體細胞中,借助天然的種胚系統,形成含有目的基因的種胚。請回答下列問題：<1>下列所示的黏性末端是由________種限制性核酸內切酶作用產生的。<2>利用花粉管通道法將毒蛋白基因導入棉花細胞,此過程是基因工程操作步驟中的第三步,即________。獲取目的基因時,如果基因比較小,核苷酸序列又已知,則可以通過DNA合成儀用化學方法直接________。<3>該目的基因在導入受體細胞前需要與載體結合,目前經常使用的載體是________。<4>基因工程操作的第四步是目的基因的檢測與鑒定,其中分子水平的檢測又分三步：首先要檢測轉基因生物的DNA上是否插入了目的基因,采用的技術是________；其次還要檢測________,方法同樣是采用分子雜交技術；最后檢測________,方法是________雜交。29.有一種單基因遺傳病——α1-抗胰蛋白缺乏癥,患者會出現肺氣腫及其他疾病。注射α1-抗胰蛋白酶可治療該病。圖甲表示獲取人α1-抗胰蛋白酶基因的兩種方法,圖乙表示獲取α1-抗胰蛋白酶的方法。據圖回答：<1>圖甲表示的是基因工程中的________________步驟。完成a過程的酶的作用特點是___________________________________________________。<2>c過程需要的原料是____________________,遺傳信息的傳遞方向是______________。<3>圖乙中的d表示__________________。<4>GEP<綠色熒光蛋白>基因的作用是_____________________________。30.轉基因草莓中有能表達乙肝病毒表面抗原的基因,由此可獲得用來預防乙肝的一種新型疫苗,其培育過程如下圖所示<①至④代表過程,A至C代表結構或細胞>：<1>在圖中①基因表達載體的構建過程中,為了使目的基因正常表達,目的基因的首端必須有____________識別和結合的部位。若選擇的限制酶切出的DNA片段是平末端,應選擇______________進行連接。<2>將目的基因導入受體細胞的方法很多,在該題中涉及的方法是__________________,之所以要把目的基因插入Ti質粒的T-DNA中,這是利用T-DNA__________________的特點。<3>過程②的具體操作是：先用____________處理農桿菌,使其處于感受態；再將含乙肝病毒表面抗原基因的重組Ti質粒溶于緩沖液中與經處理的農桿菌混合,完成轉化過程。<4>圖中③和④過程分別叫做______________,將葉盤培養成草莓幼苗所依據的原理是__________________________。<5>乙肝病毒表面抗原的基因能否在草莓植株體內維持穩定遺傳的關鍵是_____________,通常采用___________________的方法進行檢測。31.應用轉基因技術可獲得人們需要的生物新品種或新產品。請據圖回答下列問題。<1>要獲得抗蟲基因,可采用______________________________等方法,基因工程的核心是______________________。<2>如果要獲得一只含目的基因的小鼠,則選擇的受體細胞通常是____________,原因是___________________。若用大腸桿菌儲存目的基因,則需先將其處理為__________細胞。<3>在培育轉人生長激素基因牛的過程中,②過程常用的方法是_________。<4>轉人生長激素基因?？赏ㄟ^分泌的乳汁來生產人生長激素,在基因表達載體中,人生長激素基因的首端必須含有_________________。參考答案：1.[解析]人肝細胞中胰島素基因不表達,通過人肝細胞mRNA反轉錄不能得到胰島素基因,A項錯誤；基因表達載體的復制原點和啟動子是不同的位點,基因表達載體的復制開始于復制原點,胰島素基因的表達開始于啟動子,B項錯誤；抗生素抗性基因可作為基因工程中的標記基因,可將含有目的基因的受體細胞篩選出來,C項正確；啟動子在基因表達的轉錄中起作用,終止密碼子在基因表達的翻譯中起作用,D項錯誤。[答案]C2.[解析]限制酶和DNA連接酶的作用部位都位于①,但兩者作用相反。載體具有在宿主細胞中復制的能力,與目的基因結合后,目的基因也會在宿主細胞中一起復制?；蚬こ痰哪康木褪嵌ㄏ蚋脑焐锏倪z傳性狀。[答案]B3.[解析]甲方法是從細菌的DNA中直接提取,故可以建立該細菌的基因組文庫；乙方法是由mRNA反轉錄的目的基因,故可以建立該細菌的cDNA文庫。乙方法需要逆轉錄酶和脫氧核苷酸為原料。[答案]C4.[解析]A項屬于個體生物學水平的鑒定,不是分子檢測；B、C兩項為分子檢測,利用分子雜交技術,觀察目的基因及目的基因轉錄形成的mRNA能否與DNA探針進行雜交形成雜交帶；D項也為分子檢測內容,利用抗原－抗體雜交的原理,檢測基因表達產物能否與特定抗體形成雜交帶。[答案]A5.[解析]該受體基因在神經細胞中表達,獲得該mRNA的最佳材料是神經細胞。構建基因表達載體最可能使用的載體是質粒。探針篩選的目的是檢測是否存在cDNA。[答案]C6.[解析]基因探針是用放射性同位素或熒光分子等標記的DNA分子。[答案]B7.[解析]蛋白質工程崛起的緣由是為了得到符合人類生產和生活需要的特定的蛋白質。如玉米生產過程中將天冬氨酸激酶的第352位的蘇氨酸變成異亮氨酸,將二氫吡啶二羧酸合成酶中第104位的天冬酰胺變成異亮氨酸,就可以使玉米葉片和種子中的游離賴氨酸分別提高5倍和2倍。[答案]C8.[解析]b是限制性核酸內切酶,能識別特定的核苷酸序列并使DNA分子的每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,而不是使氫鍵斷開；c是DNA連接酶,能連接兩個DNA片段。[答案]A9.[解析]限制酶是基因工程的重要工具之一。每種限制酶只能識別特定的核苷酸序列,并在特定的位點上切割DNA分子。同一種限制酶切割不同的DNA產生的黏性末端能進行互補配對。[答案]C10.[解析]由題干條件可知用EcoRⅠ酶切后,并不能將DNA分為兩段,故可判斷為環狀DNA,再根據"用EcoRⅠ、KpnⅠ同時酶切后得到200bp和600bp兩種長度的DNA分子"可得到答案D。[答案]D11.[解析]PCR利用的是DNA雙鏈復制原理。即將雙鏈DNA之間的氫鍵打開,變成單鏈DNA,作為聚合反應的模板鏈。反轉錄法則是以目的基因轉錄成的信使RNA為模板,在反轉錄酶的作用下,先反轉錄形成互補的單鏈DNA,再合成雙鏈的DNA。①④則均不需要模板。[答案]D12.[解析]若質粒上插入的位置在c點,那么抗四環素基因和抗青霉素基因都沒有被破壞,導入該重組質粒的細菌在含青霉素的培養基和在含四環素的培養基上均能生長。[答案]B13.[解析]蛋白質工程是在基因工程的基礎上延伸出來的第二代基因工程。它的目標是依據人們對蛋白質功能的特定需求,對蛋白質的結構進行分子設計,最終用人工合成的方法合成相應的基因,而改造的基因須按照中心法則才能合成人類需要的蛋白質。[答案]B14.[解析]蛋白質工程的目的是對蛋白質進行改造,從而使蛋白質功能可以滿足人們需求。而蛋白質功能與其高級結構密切相關,蛋白質高級結構又非常復雜,所以直接對蛋白質改造非常困難,而蛋白質是由基因控制合成的,對基因進行操作就容易得多。另外,改造后的基因可以遺傳,如對蛋白質直接改造,即使成功也不能遺傳。[答案]C15.[解析]基因工程是按照人們的意愿,把一種生物的個別基因<目的基因>復制出來,加以修飾改造,然后放到另一種生物的細胞<受體細胞>里,定向地改造生物的遺傳性狀?；虿僮鞯墓ぞ呙甘窍拗菩院怂醿惹忻负虳NA連接酶,基因進入受體細胞的運輸工具是載體。[答案]A16.[解析]Ti質粒是基因工程中重要的載體,不含有對宿主細胞生存具有決定性作用的基因；用Ca2＋處理細菌可增加細胞壁的通透性,是重組Ti質粒導入土壤農桿菌中的重要方法；轉基因成功的植物細胞,可通過植物組織培養技術獲得轉基因植物。在植物細胞中檢測到抗蟲目的基因,說明目的基因已成功導入,但不能證明其能表達。[答案]A17.[解析]由圖示可知a為反轉錄法獲得目的基因,用到逆轉錄酶；b為直接從生物體獲得目的基因,用到限制酶；c為用PCR技術擴增獲取目的基因,用到Taq酶,且三種方法均在生物體外進行,故A正確。[答案]A18.[解析]由圖可知,步驟①所代表的過程是反轉錄；步驟②需使用限制性核酸內切酶和DNA連接酶；步驟③可用CaCl2處理大腸桿菌,使其細胞從常態轉化為感受態；檢驗Q蛋白的免疫反應特性,可用Q蛋白與患禽流感康復的雞的血清進行抗原—抗體特異性反應實驗。[答案]C19.[解析]由圖可知：步驟①是由RNA合成DNA的過程,表示反轉錄,選項A正確；步驟②是把目的基因與質粒連接,構建重組質粒的過程,該過程需使用限制酶和DNA連接酶,選項B正確；步驟③可用CaCl2處理大腸桿菌,使其從常態轉化為感受態,選項C錯誤；檢驗Q蛋白的免疫反應特性,可用Q蛋白與患禽流感康復的雞的血清進行抗原-抗體特異性反應實驗,選項D正確。[答案]C20.[解析]由第一幅圖給出的條件可知,從左到右看依次為ACGT,但解題時應從上向下看,這樣就可得出乙圖顯示的堿基順序為ACCGTG。[答案]B21.[解析]植物基因工程的受體細胞可以是受精卵,也可以是體細胞。目的基因需要構建基因表達載體才能導入受體細胞。基因a導入成功后,不會抑制細胞原有的新陳代謝。基因a進入受體細胞后,會整合到馬鈴薯細胞的DNA分子上,可以隨著馬鈴薯DNA分子的復制而復制,并能傳給子代細胞并表達。[答案]D22.[解析]限制酶具有特異性,即一種限制性核酸內切酶只能識別一種特定的脫氧核苷酸序列并在特點的位點切割,A錯誤；用SmaⅠ酶切割會破壞目的基因,因此表達載體構建時需要用到EcoRⅠ、PstⅠ限制性核酸內切酶,B錯誤；抗卡那霉素基因的主要作用是篩選含有目的基因的受體細胞,C錯誤；基因表達載體的組成包括啟動子、標記基因、目的基因和終止子等,因此除圖示標注的結構外表達載體中還應有啟動子和終止子等,D正確。[答案]D23.[解析]本題考查蛋白質工程和基因工程的原理及操作流程。<1>由題干信息可知,改造蛋白質的功能可通過改變蛋白質的結構實現。<2>依據蛋白質工程的定義及題中信息可知,獲得P1基因的途徑有修飾現有<P>基因或合成新<P1>基因。中心法則的全部內容包括DNA的復制、RNA的復制、轉錄、逆轉錄和翻譯。<3>蛋白質工程的基本途徑：從預期的蛋白質功能出發→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到相應的脫氧核苷酸序列。通過蛋白質工程合成的蛋白質還需要進行生物活性的鑒定即功能鑒定,看是否達到人們的需求。[答案]<1>氨基酸序列<或結構><2>PP1DNA和RNA<或遺傳物質>DNA→RNA、RNA→DNA、RNA→蛋白質<或轉錄、逆轉錄、翻譯><3>設計蛋白質的結構推測氨基酸序列功能24.[解析]<1>過程①需用同種限制性核酸內切酶對含Bt基因的DNA和Ti質粒進行酶切。篩選含重組質粒的農桿菌應使用選擇培養基。<2>將棉花細胞與農桿菌混合后共同培養,旨在讓TDNA進入棉花細胞；除盡農桿菌后,還須轉接到含卡那霉素的培養基上繼續培養,篩選出含TDNA片段的棉花細胞。<3>增加細胞分裂素濃度,使生長素用量與細胞分裂素用量的比值降低,有利于芽的分化；部分接種在無激素培養基上的芽也能長根,原因是芽頂端合成的生長素向基部運輸,促進下端生根。<4>檢驗轉基因棉的抗蟲性狀,常用方法是投放棉鈴蟲,看食用轉基因棉的棉鈴蟲是否死亡。種植轉基因抗蟲棉能減少農藥的使用,以減輕環境污染。[答案]<1>限制性核酸內切選擇<2>TDNA篩選獲得TDNA片段的植物細胞<3>細胞分裂素濃度芽頂端合成的生長素向基部運輸,促進根的分化<4>投放棉鈴蟲農藥25.[解析]基因工程從變異角度分析應屬于基因重組,獲取目的基因可采用直接從物種中分離或人工合成等方法,常用的載體是質粒。[答案]<1>基因重組<2>人工合成質粒<3>限制酶A<4>DNA連接重組DNA<重組質粒><5>能在含有青霉素的培養基上存活,但不能在含有四環素的培養基上存活<6>檢驗轉基因啤酒酵母菌能否產生LTP1蛋白26.[解析]<1>病毒由核酸和蛋白質組成,其蛋白質外殼具有免疫特性,故口蹄疫疫苗生產過程只需提取口蹄疫病毒中控制合成病毒蛋白的RNA部分。以RNA為模板合成DNA的過程屬于反轉錄,需要逆轉錄酶。<2>基因表達載體的組成：目的基因、啟動子、終止子、標記基因。構建基因表達載體一般用一定的限制酶切割質粒,使其出現一個有黏性末端的切口,再用同種限制酶切割目的基因,產生相同的黏性末端。將切下的目的基因片段,插入質粒的切口處,在DNA連接酶的作用下使質粒與目的基因結合形成重組質粒。<3>將目的基因導入微生物細胞前,常用Ca2＋處理使其成為感受態細胞。<4>標記基因的表達可檢測目的基因是否導入受體細胞,除此之外還可以用DNA雜交法和抗原—抗體雜交技術進行檢測。[答案]<1>抗原逆轉錄酶<2>限制性核酸內切酶和DNA連接酶啟動子、終止子、標記基因<3>感受態<4>標記基因病毒蛋白基因<目的基因>抗原—抗體雜交技術27.[解析]蛋白質工程的類型主要有兩種：一是從頭設計,即完全按照人的意愿設計合成蛋白質。從頭設計是蛋白質工程中最有意義,也是最困難的操作類型,目前技術尚不成熟,但理論上可行。二是定位突變與局部修飾,即在已有蛋白質基礎上,只進行局部的修飾。通過造成一個或幾個堿基定位突變,以達到修飾蛋白質分子結構的目的。"從頭設計"的方法：確定蛋白質的功能→蛋白質應有的高級結構→蛋白質應具備的折疊狀態→應有的氨基酸序列→應有的堿基序列,可以創造自然界不存在的蛋白質。蛋白質工程的崛起是因為天然蛋白質不能滿足人類的需求,例如多數酶雖然在自然狀態下有活性,但在工業生產中沒有活性或活性很低。[答案]<1>原胰島素mRNA反轉錄<2>特定的限制性核酸內切酶環狀黏性<3>目的基因導入受體細胞重組DNA擴增<4>確定蛋白質的功能→蛋白質應有的高級結構→蛋白質應具備的折疊狀態→應有的氨基酸序列→應有的堿基序列<5>C28.[解析]<1>限制性核酸內切酶能識別特定的核苷酸序列,并在特定的位點切割磷酸二酯鍵。題圖顯示的黏性末端有4種,因此是由4種限制性核酸內切酶作用產生的。<2>基因工程操作步驟中的第三步是：將目的基因導入受體細胞。獲取目的基因時,如果基因比較小,核苷酸序列又已知,可以通過DNA合成儀用化學方法直接人工合成。<3>質粒是基因