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文檔簡介

cfDNA樣本及文 流Comet介流CometComet介流CometComet設開發原2CometCometComet基于Firefly技術進行開發設計；（專利號：US20160304954AlComet是以cfDNA為樣本的擴增子建3Comet設計開發原RandomerrorsdonotcreaterepetitivevariantsintandemsequencesCancermutationscreaterepetitivevariantsintandemsequencesFirefly-ConcatemersequencingforNGSRandomerrorsdonotcreaterepetitivevariantsintandemsequencesCancermutationscreaterepetitivevariantsintandemsequencesRollingCircle4CometComet基于Firefly原理設計開發的Comet具有更高的

CYP2C19SNV(nucleotide681inexon

NucleotidePosition5Comet

ysis&Day

Day

Day1- Day2-

Day5day<2hrhands-on6CfDNA樣本及文 流

7 流采

Streck 常 采血

采血

低溫高速離 轉移血漿混 -80℃保存或注意事項：1.不同采血管低速離心溫度不一2.兩個轉移血漿的步驟，注意不要吸到分界面以下成分或者沉淀抽提cfDNA（一類備案試劑盒MagicPureTMCell-FreeDNA產物cfDNA質片段分布質控標

8文 流試劑 試劑高溫處理冰浴（cfDNA+試劑

恒溫孵

恒溫孵環化連接產注意事項：1.操作過程保持在冰上高溫處理過程恒溫孵育采用PCR文 流試劑 試劑不同溫度孵 PCR擴環化連接產

擴增產注意事項：1.操作過程保持在冰上不同溫度孵育處理結束后立即放入冰浴多個樣本操作時，試劑6文 流純化目的片段，目的片段加barcode磁珠

PCR擴擴增產

吸 乙 洗脫樣 洗脫

擴增文注意事項：1.磁珠提前室溫平衡，純化過程保持室溫操作棄上清，乙醇，轉移洗脫液過程中不要碰到磁乙醇第二 后干燥時間根據實驗環境溫濕度進行適當調整，避免過度干燥文 流磁珠

室溫育 磁珠

室溫孵 吸 乙

洗 純化文注意事項：1.磁珠提前室溫平棄上清，乙醇，轉移洗脫液過程中不要碰到磁乙醇第二 后干燥時間根據實驗環境溫濕度進行適當調整，避免過度干燥文 流單個文庫濃度>0.5ng/uL（Qu

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