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文檔簡介
微生物檢驗與感染控制檢驗科微生物室何倩標本的采集與運送微生物報告單的解讀臨床微生物標本的采集與運送
我們應該追求:
“準確的病原學診斷”
“針對性病原學治療”
正確的微生物標本采集和運送,是準確的病原學診斷的前提!
微生物讓人類步步為營,基本原則1.及時采集微生物標本作病原學檢查2.在抗菌藥物使用前采集標本3.采樣時嚴格執行無菌操作4.采樣后立即送檢5.棉拭子標本宜用運送培養基6.混有正常菌群污染標本,不可置肉湯培養7.標本容器須滅菌處理,但不得使用消毒劑。8.送檢標本應注明來源和檢驗目的如何提高細菌陽性檢出率?標本采集時機標本采集方法標本的質與量標本的運送與保存鏡檢篩選合格標本(退檢制度)高質量、多種分離培養基培養環境血培養標本采集與運送最新的指導原則山東省臨床實驗室血培養指導原則和操作指南山東省衛生廳醫政處山東省臨床檢驗中心血培養的采集時間對懷疑菌血癥、真菌血癥的患者,在考慮使用抗菌藥物之前,應立即采集血培養標本。必須同時或間隔短時間內采集2套以上血培養標本。血培養的采集次數患者:推薦同時采集2-3套(不同部位)血培養標本。(即雙瓶雙臂同時采集血培養標本。)嬰幼兒患者:推薦同時采集2次(不同部位)血培養標本。血培養的采血量成年患者:推薦采血量為每套不少于10ml,每瓶不少于5ml。嬰幼兒患者:推薦采血量每瓶不少于2ml。(少于病人總血容量的1%)血液標本在需氧瓶和厭氧瓶中的分配常規血培養組合:一個需氧瓶和一個厭氧瓶作為一套血培養。當被用來做培養的采血量少于推薦值時,血必須首先接種需氧瓶,然后將剩余的血液接種入厭氧瓶。皮膚消毒推薦使用碘町、洗必泰或碘伏作為皮膚消毒劑。碘町作用1min碘伏作用1.5-2min洗必泰作用時間與碘町一樣(但不能用于少于2個月嬰兒皮膚消毒)采集部位推薦從外周靜脈采集血液標本。不推薦動脈血,因其診斷價值沒有比靜脈血更大。不推薦靜脈留置導管,因其常伴有高污染率。如果必須從留置導管內采血,也應同時從外周靜脈采集另外一個血培養標本以幫助陽性結果的判讀提供解釋。采集方法在采血之前,血培養瓶的橡皮塞需使用70%酒精消毒并干燥。然后再進行穿刺部位的皮膚消毒。嚴格按照“酒精、含碘消毒劑、酒精”的消毒步驟操作,并等待足夠的消毒時間。嚴格無菌操作,不允許在皮膚消毒后用手接觸靜脈,除非帶有無菌手套。不推薦采血和接種血培養瓶更換注射器針頭。血培養標本的運送采集后的血培養瓶應在1小時之內送往實驗室。血培養瓶在采血接種后在室溫不超過數小時。血培養瓶在接種前和接種后均不得冷藏或冷凍。血培養標本的拒收瓶子上帖的標簽錯誤或未帖標簽。血培養瓶打破的、損壞的或滲漏。血液凝固。培養基的選擇推薦使用商品化的培養基使用添加抗菌藥物吸附劑的血培養瓶有助于提高已接受抗菌藥物治療患者血培養的檢出率,增加細菌的分離率和分離速度,但同時也會增加污染菌的檢出率。嬰幼兒血培養推薦同時采集2次(不同部位)血培養標本。采血量每瓶不少于2ml。(少于病人總血容量的1%)推薦采用兒童專用血培養瓶。分枝桿菌血培養必須采用特殊的商品化分枝桿菌血培養瓶。所有培養基都必須孵育至少4周。感染性細菌性心內膜炎急性:在經驗性抗生素用藥前30min之內采集血培養。在30分鐘至1小時之內連續抽取數套血培養。最初采集3套血培養。假如這些血培養在24小時之內結果是陰性的,再采集2套血培養,總共5套。導管相關的血流感染短期外周導管:通過靜脈穿刺獲得病人的兩套外周血培養。無菌操作拔去導管并半定量培養。中心靜脈導管及靜脈留置口:至少兩套血培養,其中至少一套采集自外周血靜脈,另一套應該從導管口或VAP隔膜無菌采集,兩套血培養采集時間應相近。痰培養標本采集與運送病原體種類繁多而復雜使下呼吸道感染病原診斷成為難題細菌(包括放線菌與奴卡菌,厭氧菌與分枝桿菌)真菌(包括肺孢子菌)病毒支原體、衣原體與立克次體原蟲寄生蟲咳痰途經口咽部唾液中口咽部定植菌的濃度可達108-109/ml。研究顯示,國內常規痰標本中約半數存在唾液嚴重污染現象。不可避免地受到污染我國痰細菌培養現狀標本送檢率低苛養菌檢出率極低結果重復性差報告速度慢感染菌與污染菌不易區分藥敏結果與治療反應存在差距下呼吸道感染病原學診斷注意事項痰標本的正確采集(包括導痰)痰標本及時運送和處理的重要性痰標本的洗滌與勻化痰涂片:質量評估和細菌、真菌初步報告接種平板:質量與質控,血、巧克力、麥康凱、沙保弱培養環境:CO2培養時間:24h,48h菌落觀察要點結果報告:所有菌種(群),包括半定量臨床意義判定其他病原體的檢測:結核、真菌、厭氧菌、非典型病原體咳痰標本的采集標本采集方法醫師或護士直視下采集標本病人先漱口,去除表面的菌群教育病人深咳,收集從下呼吸道咳出的痰液臨床上約半數咳痰標本不合格!關于咳痰標本在抗生素應用前采集痰標本;標本采集后1~2h內必須立即進行實驗室處理;咳痰標本應用最早且廣泛,但也是最受爭議的標本;取標本前應摘去牙托,清潔口腔如刷牙和漱口;深咳,采集標本過程中要有專業的醫務人員指導;無痰可用3%~5%NaCl5ml霧吸約5min導痰;也可用物理療法、體位引流、鼻導管抽吸等法取痰;咳痰標本不合格如果低倍視野下鱗狀上皮細胞大于25個,白細胞小于10個,標本不合格。報告中注明“標本不合格”。幾種下呼吸道直接采集的標本經氣管穿刺吸引(transtrachealaspiration,TTA)經胸壁針刺吸引(transthoracicneedleaspiration,TNA)經支氣管鏡采樣支氣管肺泡灌洗(bronchoalveolar
lavage,BAL)經支氣管鏡直接吸引防污染樣本毛刷(protectivespecimenbrush,PSB)開胸肺活檢(open-lungbiopsy,OLB)經人工氣道吸引分泌物(endotrachealaspirates,ETA)痰培養的送檢次數對于普通細菌性肺炎,痰標本送檢每天1次,連續2~3天。不建議24h內多次采集,除非痰液外觀性狀出現改變;懷疑分枝桿菌感染者,應連續收集3天清晨痰液送檢;懷疑深部真菌感染,痰標本理想的送檢次數尚無定論。痰培養的運送和保存盡快(<2h)送至實驗室。如不能及時送達,應將標本暫存于4℃,但放置時間不可超過24h。厭氧培養標本的最佳運送時間取決于標本量。被口咽部菌群污染的標本如咳痰等不可用于厭氧菌培養。痰培養的拒收光學顯微鏡細胞學檢查發現口咽分泌物污染明顯。沒有標簽或貼錯標簽。運送容器選擇不當或有滲漏。標本采集不符合要求。同一天同一試驗重復送檢2次。延時送至實驗室的標本。尿培養標本采集與運送你知道嗎?尿液通常是無菌的或一過性有少量微生物,但是尿道內或尿道周圍皮膚的菌群會污染尿液標本,從而可能導致錯誤的培養結果。診斷癥狀明顯的病人(如尿急、尿頻、尿痛),一份標本就已足夠,治療48-72小時后再采集第二份標本。對于癥狀不明顯的病人,需采集2-3份標本。懷疑腎結核時,應連續3天采集晨尿。多次收集或24小時尿不能用作培養。室溫都有利于病原菌和污染菌會生長繁殖,因此若30min內不能及時培養尿液則必須冷藏,但也不能超過24小時。尿培養標本清潔中段尿導尿導管尿經恥骨上皮膚穿刺采集膀胱內尿液送檢標本以晨起第一次尿液為佳不能立即送檢者,可暫存4℃冰箱,但保存不超過8h清潔中段尿液盡量取早晨第一次尿液棄去開始流出的尿液,以沖刷尿道口的細菌,取能代表膀胱部位病原菌的中段尿詳細告知病人以下操作步驟女性病人收集標本前用清洗液沖洗干凈,從前向后仔細擦洗尿道區域分開陰唇,開始排尿排出幾毫升后,不停止尿流,采集中段尿男性病人回縮包皮并清洗龜頭排出幾毫升后,不停止尿流,采集中段尿導尿管尿液集尿袋內的尿液不能用作培養;導尿管末端的尿液也不能用于培養,因為很難避免沒有尿道菌群污染。留置導管尿液標本常通過專門的采樣端口采集,不能把導尿管與尿袋拔開后收集尿液。采樣端口用酒精消毒;必要時,可先夾住導尿管但不能超過30分鐘;將注射器針頭插入采樣端口,抽吸出尿液;注入無菌杯或試管中恥骨上穿刺吸取尿液常用于患兒、泌尿道厭氧菌感染或脊柱損傷病人等。可避免尿道或會陰細菌的污染,但對膀胱內少量尿液的小兒難以實施。方法:消毒自臍以下至尿道之間區域的皮膚,局麻穿刺點部位;在恥骨聯合與臍連線上,高于恥骨聯合2cm處進針刺入膀胱;取20ml尿液;置于無菌容器中并送往實驗室??捎糜趨捬蹙鷻z測集尿法采集尿液懷疑結核分枝桿菌感染時,可用一清潔容器留24h尿液取其沉渣10-15ml送檢。糞便培養標本采集與運送糞便標本的采集方法自然排便采集標本時,取有膿血、粘液、組織碎片部份的糞便1~3g。液體糞便則取絮狀物,一般取1~3ml,直接裝入糞便容器或運送培養基中送檢。直腸拭子采集糞便標本:先以肥皂、水和70%酒精,將肛門周圍洗凈,然后用經無菌鹽水濕潤的棉拭子插入肛門超越肛門括約肌約2-4cm,與直腸粘膜表面接觸,輕輕旋轉,必須將棉拭子置于運送培養基中送檢。糞便標本的運送一般糞便標本裝于無菌封閉廣口塑料杯;直腸拭子置于Cary-Bair拭子轉運系統。做霍亂弧菌檢查的糞便標本置于堿性蛋白胨水試管中。糞便標本:室溫1小時內送至。直腸拭子:室溫1小時內送至。高度懷疑霍亂弧菌感染的標本室溫1小時內送至,運送必須符合特殊標本的安全要求。你知道嗎?住院超過3d或入院診斷不是胃腸炎的患者不做常規糞便培養。除嬰兒和有活動性腹瀉癥狀的患者外不推薦用拭子做常規病原檢測。有腹部痙攣的患者在發病6h內采集到的血便或液狀便的效果最好。對于弧菌的培養需要提出特別申請。腦脊液標本采集與運送腦脊液標本的采集方法以70%酒精或2%碘酊消毒背部下方,并麻醉之;然后以一特制通管針,輕輕的由第三與第四腰椎間的中線部位穿刺入脊髓蛛網膜,采集約3-5ml腦脊液于3支無菌試管中,每支試管至少1-2ml;然后馬上將第2支(或第1支)送至實驗室。做腦脊液培養時,建議同時做血培養。腰穿時必須作徹底消毒和無菌操作。腦脊液標本的運送常溫立即送檢,實驗室收到標本后應立即接種。腦脊液標本送檢的理想時間為15分鐘內,半小時送檢是可接受的,如果送檢時間超過1小時,則會影響結果,在結果報告時,在備注處注明此情況。如不能及時送檢,可使用血培養瓶(懷疑腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌感染時,請勿使用血培養瓶)穿刺液標本采集與運送穿刺液標本的采集方法由臨床醫生進行。膽汁的采集方法有三種:十二指腸引流法(以“B”管—來自膽囊,做細菌培養意義較大)、膽囊穿刺法及手術采取法,由臨床醫生采取,約2ml左右放入無菌密封容器立即送檢。其它穿刺液的采集方法:2%碘酊消毒要穿刺的皮膚后,由臨床醫生穿刺采集標本(2ml左右),裝入無菌密封容器立即送檢。穿刺液標本的送運采集后應正確蓋好,防止泄漏或容器外部留有殘留物。保溫立即送檢,保證在≤15min內送至實驗室,實驗室收到標本后應立即接種。為提高陽性率,像胸腹水等標本,可接種到血培養瓶中送檢。手術切口與軟組織感染標本采集與運送皮膚組織標本標本的選擇更大程度上依賴于感染的程度和性質而不是可疑的病原體。對大多數開放傷口,采集前應先去除表面菌群。除非有滲出物,干燥、結痂傷口一般不做培養。閉合膿腫應取滲出物和膿腫壁標本。開放膿腫處理同開放傷口。燒傷傷口應在廣泛清洗和清創術后采集培養。建議取活檢標本,傷口表面定量培養不一定有意義。代表性的標本應采自病灶活動區域或基底部有而不僅僅是膿液。采集方法未破裂膿腫:不能用拭子。消毒覆于膿腫表面的皮膚,用注射器將膿腫內容物吸出。然后切開膿腫、引流,取部分膿腫壁送檢。送檢時,標本都置于厭氧培養基中。開放病灶和膿腫:盡量去除表面菌群,用拭子采集病灶及底部或邊緣的標本,置于需氧培養基中。也可對滲出液作厭氧培養。開放病灶不能做厭氧培養。燒傷傷口:清創,出現滲出液后以拭子用力采集,僅作需氧培養。也可送檢活檢組織標本。膿皰或水皰:酒精消毒使之干燥,對于患兒用23號針頭挑破膿皰,拭子采集膿皰液和基底部標本。標記:不要只寫“傷口”標記標本,應有專門的描述和解剖來源。注明滲出液來自開放傷口還是閉合傷口。注意事項迅速送往實驗室,1小時內不能培養應將標本冷藏。皮膚消毒對培養結果至關重要。革蘭染色對標本進行評估。涂片中如出現上皮細胞提示標本已被污染。沒有上皮細胞而有白細胞說明標本采集正確。不要僅送檢膿液。膿液不能代表傷口特點,應在病灶活動區域或基底部采集標本。小兒要求:小兒感染常出現皮疹如水泡等,應在這些地方仔細采集標本培養以發現病原體。創傷標本如沒有炎性細胞可能說明采集了表皮正常菌群,與疾病過程無關,應重新采集。生殖道標本采集與運送生殖道標本的采集方法推薦使用男性或女性專用拭子。男性前列腺:用肥皂和水清洗陰莖頭,通過直腸按摩前列腺,用無菌拭子收集液體或使液體進入無菌管內。男性尿道:用泌尿生殖道拭子插入尿道腔2~4cm,旋轉拭子,至少停留20s,而使之容易吸收。女性陰道:擦除過多的分泌物和排出液,用2支無菌拭子從陰道穹隆部黏膜處獲取分泌物。1支需要涂片,1支拭子做培養。女性尿道:患者排尿1h后采集,拭去尿道口的滲出物,用拭子通過陰道,靠著恥骨聯合,按摩尿道,采集尿液。宮頸:用無潤滑劑的擴陰器使宮頸可見,用拭子從宮頸上拭去黏液和分泌物,丟掉拭子,用新的無菌拭子緊帖宮頸內道輕輕采樣。后穹窿:送抽吸液。生殖道標本的運送標本采集后應正確蓋好,防止泄漏或容器外部留有殘留物。常溫2h內送至。眼、耳、鼻、喉標本采集與運送采集方法眼結膜標本:預先沾濕拭子,在結膜上滾動采集標本。眼角膜標本:在麻醉下,用刮勺在潰瘍或創傷邊緣刮取碎屑,立即送檢。眼部感染所獲得的標本量很少,建議醫師取樣后直接接種在培養基平板上培養。內耳:接觸耳鼓室先用肥皂水清洗耳道再用注射器收集液體,對破裂的鼓室,借助耳科診視器,用拭子收集液體。外耳:用濕拭子將耳道的任何碎屑或痂皮拭去,在外耳道用力旋轉拭子取樣。采集方法鼻標本:用一根無菌棉拭子伸進一側鼻孔約2.5cm,與鼻黏膜接觸,輕輕旋轉拭子,蘸取黏膜上分泌物,緩慢取出,直接送檢。鼻咽:用無菌拭子經鼻輕輕插入鼻咽后部,慢慢旋轉拭子5s以吸收分泌物,放入無菌管中。咽部檢體,與采集前患者應用清水反復漱口,由檢查者將舌向外拉,使腭垂盡可能向外牽引,將棉拭子通過舌根到咽后壁或腭垂的后側,涂抹數次,但拭子要避免接觸口腔和舌粘膜。標本的運送標本采集后應正確蓋好,防止泄漏或容器外部留有殘留物。眼、耳、鼻、喉標本采集后應立即送檢,防止干燥,禁止冷藏。耳部標本常溫2h內送至。眼部標本應≤15min送至。如何解讀細菌學檢驗報告病原菌的分類病原菌致病菌(種類少,毒力強)條件致病菌(種類多并在不斷增加,毒力弱)臨床上常將病原菌和致病菌稱謂混用。但前者包含的范圍顯然較后者為廣,或者可認為通常所說的致病菌是廣義的概念。病原菌:是指能入侵宿主引起感染的微生物,包括細菌、真菌、病毒等。病原菌按致病性分類如下:條件致病菌與菌群失調條件致病菌:某些細菌在正常情況下并不致病,當在某些條件改變的特殊情況下可以致病,這樣的細菌稱為條件致病菌或機會致病菌。這種特定的條件大致有以下幾種:寄居部位的改變、免疫功能低下、菌群失調。
菌群失調:是宿主部位正常菌群各類菌間的比例發生較大幅度變化而超出正常范圍的狀態。由此產生的一系列表現,稱為菌群失調癥或菌群交替癥。條件致病菌的主要特點毒力弱或無明顯毒力;常為耐藥菌或多重耐藥菌;引起感染的對象是長期使用抗生素,
機體免疫功能下降的患者。條件致病菌的幾種身份病原菌:會于宿主體內繁殖并侵入或破壞組織,引起感染的微生物。患者由這類菌引起感染,用細菌報告提示的抗生素治療,療效明顯。定植菌:(定植:細菌或真菌在人體的某個部位定居下來形成相對穩定的寄生狀態,不會隨外界機械沖擊而完全離開原來寄居部位。)會于體內繁殖但不會入侵或破壞組織的微生物。以下現象提示報告的細菌為定植菌:①用細菌報告提示的抗生素治療,該菌消失,感染癥狀依然存在。②或是由于該菌泛耐藥,臨床憑經驗聯合用藥,感染癥狀好轉,但該菌依然存在。污染菌:留取標本過程中,污染了非感染部位的細菌。按其治療無效,多次送檢可排除。二、藥敏試驗與報告解讀
基本概念藥敏試驗的臨床價值報告解讀與相關問題藥敏試驗概念:
測定抗感染藥物在體外對病原微生物有無抑菌或殺菌作用的方法稱為藥物敏感性試驗,簡稱藥敏試驗。目的:檢測可能引起感染的細菌對一種或多種抗菌藥的敏感性。方法:紙片法、稀釋法、Etest法結果判斷標準:
目前我國藥敏試驗判斷標準參照CLSI標準文件,CLSI文件是我國的衛生部部頒文件。CLSI簡介臨床最常用到CLSI標準文件是抗菌藥物敏感性試驗標準文件。本文件是針對需氧菌藥敏的標準指南。其主要內容包括需氧菌紙片法和稀釋法藥敏試驗的選藥(抗菌藥物分組)、結果判斷標準(折點)和質量控制。CLSI根據細菌學、藥動學和臨床資料設定并定期修訂抗生素對不同細菌敏感折點,通過折點將細菌分為敏感(S)、中介(I)、耐藥(R)。CLSI最新版本M100-S19敏感:
最高血藥濃度>4倍MIC,使用常規劑量有效;中介:最高血藥濃度≈MIC,加大劑量或藥物濃縮部位有效;耐藥:最高血藥濃度<MIC,無效。CLSI推薦的藥敏試驗藥物分組抑菌環直徑和最低抑菌濃度(MIC)分界值標準腸桿菌科菌抑菌環直徑和MIC解釋標準抑菌環直徑與MIC抑菌環直徑:是指含抗菌藥物的紙片能夠抑制所有肉眼可見細菌生長的范圍。
MIC(minimalinhibitoryconcentration,最小抑菌濃度):是指在體外試驗中,抗菌藥物能抑制培養基中細菌生長的最低藥物濃度。是抗菌藥抗菌活性指標,顯示出藥物抑制病原微生物的能力??股氐牡刃钥股氐牡刃裕菏侵赣靡环N相關抗生素的試驗結果預測同類抗生素體內抗菌活性。如頭孢噻吩與其他一代頭孢具有等效性,可用頭孢噻吩結果預測其他一代頭孢。此特性允許檢測少數幾種抗生素而不影響臨床對其他抗生素的廣泛選擇。細菌的耐藥性細菌耐藥性:是細菌抵抗抗菌藥物殺菌、抑菌作用的一種防御能力,一種生物學的表型。天然耐藥(固有耐藥):耐藥性為某種細菌固有的特點稱細菌的天然或固有耐藥性。天然耐藥非常穩定,據此就可預測某一細菌或可能存在的細菌對某種抗生素是否耐藥。獲得性耐藥:由于細菌獲得耐藥基因,使原來敏感的細菌變為耐藥稱細菌的獲得性耐藥。獲得性耐藥是目前臨床面臨的最主要的耐藥問題。由天然敏感菌基因突變或獲得一段基因片段,使其基因型改變而產生耐藥。獲得性耐藥不斷在變化(其變化頻率與抗生素應用相關),不能預測,需要做藥敏試驗。2.藥敏試驗的臨床價值評價抗菌藥物敏感性,新抗菌藥物的藥效學評價。評價指標:MIC、抑菌環直徑、MIC50、MIC90指導細菌感染治療時的抗菌藥物選擇。鑒于獲得性耐藥不斷在變化,天然抗菌譜已無法指導對多數細菌治療時的抗菌藥物選擇。因此,病原學檢查和藥敏試驗對臨床抗感染治療具有重要意義。監測細菌耐藥性變化,為醫院制訂預防措施提供依據。3.報告解讀與相關問題報告單簡介藥敏試驗藥物選擇特殊耐藥機制的解讀陰性報告結果的解讀各種標本陽性結果的解讀相關問題與臨床可能的抱怨藥敏試驗藥物選擇
藥敏試驗藥物選擇原則代表藥物在藥敏試驗中的作用藥敏試驗藥物選擇原則代表性:所選藥物應具有代表性及對同類藥物有提示作用,同類藥物通常只選擇一種或幾種代表品種;預報性:選擇藥物可對抗菌藥物使用或耐藥機制有提示作用。如金葡菌對苯唑西林耐藥提示對所有β-內酰胺類耐藥;革蘭陽性球菌耐慶大霉素提示對氨基糖苷類耐藥;肺炎鏈球菌選擇苯唑西林提示青霉素耐藥性。如大腸和克雷伯菌藥敏中選三代頭孢(頭孢他啶、頭孢噻肟)或氨曲南可提示細菌是否產ESBLs;在腸球菌藥敏中選高濃度慶大霉素或鏈霉素可提示能否采用聯合用藥方案。特殊性:選擇感染部位有較高濃度的抗菌藥。如尿路感染的尿液標本可選擇呋喃妥因,中樞神經系統感染的腦脊液可選氯霉素、頭孢呋辛等(能通過血腦屏障)。代表藥物在藥敏試驗
中的作用——代表性代表性藥物在藥敏試驗中的作用不僅僅局限于該藥物本身,還代表與其相關的抗菌藥物類似藥物,藥敏結果可用于解釋相關藥物頭孢孟多、頭孢尼西和頭孢呋辛亞胺培南和美洛培南環丙沙星和左氧氟沙星洛美沙星、諾氟沙星和氧氟沙星頭孢噻肟和頭孢曲松青霉素G和氨芐西林阿奇霉素、克拉霉素和紅霉素萬古霉素、替考拉寧代表藥物在藥敏試驗
中的作用——預報性特殊耐藥機制的解讀常見特殊耐藥表型ESBLs(產超廣譜β內酰胺酶)MRS(耐甲氧西林葡萄球菌)包括MRSA(耐甲氧西林金黃色葡萄球菌)和MRSCN(耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌)BL(產β內酰胺酶)HLAR(高水平氨基糖苷類耐藥腸球菌)AMPC酶碳青酶烯酶特殊耐藥機制的解讀CLSI規定不能報敏感的抗菌藥和細菌組合CLSI.PerformanceStandardsforAntimicrobialSusceptibilityTesting;NineteenthInformationalSupplement.M100-S19ed.2009,28(1):23.陰性報告結果的解讀陰性報告提示以下可能非感染性疾病感染已治愈感染未治愈,但各種原因導致病原體未檢測出來采樣運送不當:標本采集、送檢、保存不當,導致病原菌死亡,污染菌大量增殖;抗生素影響:經抗菌治療,標本中含大量抗生素,病原菌受到傷害,不能正常生長;苛養菌:如嗜血桿菌、軍團菌、淋球菌等因培養基營養成份不佳或培養條件限制,導致漏檢;特殊病原體:常規培養無法檢測的病原體如厭氧菌、結核桿菌、衣原體、支原體、病毒等。檢驗技術受限:實驗室條件和人員技術影響。血培養陽性結果的解讀臨床因素–病史、體征、白細胞計數、影像學、病程、其它部位的培養結果實驗室因素–微生物鑒定–血培養陽性率(陽性瓶/總數)–每套血培養陽性的瓶數–微生物陽性檢出時間–菌株種類(如凝固酶陰性葡萄球菌)?傳統方法(生化、抗菌譜)痰培養陽性結果的解讀痰培養結果包括:涂片染色結果、分離致病菌的鑒定結果、藥敏試驗結果。痰涂片革蘭染色報告的內容白細胞和鱗狀上皮細胞數量。包括白細胞和鱗狀上皮細胞數/低倍鏡、細胞內是否含有細菌和胞內細菌染色及形態學特性。細菌學鏡檢的描述性報告。痰標本直接涂片的目的和意義評價標本質量。判別標本是否適合做細菌培養。初步判定病原菌。判斷病原菌的有無、數量及其類別。有助于初步報告、選擇培養基和對培養結果的綜合分析。痰培養陽性結果分析常見有三種情況第一種情況:患者有典型的呼吸道感染癥狀,按細菌報告選抗生素療效明顯這類患者的痰標本共同特征:痰涂片革蘭染色:見大量的白細胞,并見白細胞吞噬或伴行大量形態一致的非上呼吸道正常菌;痰培養:生長大量非上呼吸道正常菌,痰培養與痰涂片所見一致結論:報告的細菌為病原菌。痰培養陽性結果分析第二種情況:患者有典型的呼吸道感染癥狀,按細菌報告選用的抗生素治療無效,改為憑經驗聯合用藥這類患者痰細菌檢驗時有如下特征:痰涂片:大量白細胞,吞噬或伴行的是革蘭陽性球菌(形似葡萄球菌)、革蘭染色陰陽不定的小球菌或桿菌(形似厭氧菌)、出芽的念珠菌,偶見革蘭陰性桿菌;痰培養:生長大量陰性桿菌,痰涂片所見的大量細菌不生長或少量生長,痰涂片鏡檢與痰培養結果不一致。結論:報告的細菌為定植菌痰培養陽性結果分析第三種情況:患者的感染已基本治愈,做痰檢的目的是希望得到一張陰性報告作為停止治療、出院的憑證這類患者的痰做細菌檢驗時的特征:痰涂片:顯示標本來自上呼吸道,大量上皮細胞,大量陰性桿菌,少量白細胞。痰培養:生長大量陰性桿菌,較常見的是綠膿桿菌和不動桿菌結論:報告的細菌為定植菌。肺部細菌性感染病原診斷:確定意義①血或胸液培養到病原菌②纖支鏡或人工氣道吸引標本 細菌>105cfu/ml(2+)
BALF(支氣管肺泡灌洗液):細菌≥104cfu/ml(1-2+)
PSB(防污染樣本毛刷)、PBALF(防污染灌洗):細菌>103cfu/ml(1+)肺部細菌性感染病原診斷:有意義①合格痰標本培養致病或條件致病菌≥3+②少量生長,但與鏡檢結果一致 (肺球、流感、卡他莫拉菌)③入院3天內多次培養到相同細菌肺部細菌性感染病原診斷:無意義①痰培養到上呼吸道正常菌 草鏈、表葡、非致病奈瑟菌、類白喉桿菌等②多種病原菌少量(<+++)生長③不符上述“確定”和“有意義”條款尿培養陽性結果的解讀正常情況下的尿液是無菌的,但膀胱中的尿液經尿道排出體外時可受到下尿道中正常菌群的污染而出現細菌。因此對不同方法獲取的尿液標本培養結果需正確評價,才能有效指導臨床合理治療。尿培養應同時做菌落計數才有意義。一般認為,清潔中段尿標本中單種細菌菌落數>105CFU/ml可能為感染;<5×104CFU/ml可能為污染,在兩者之間需要根據具體情況進行評估。有文獻推薦:革蘭陰性菌>105CFU/ml,革蘭陽性菌>104CFU/ml,念珠菌>103cfu/ml為診斷尿路感染的標準。尿培養陽性結果的解讀尿培養陽性結果的解讀以下因素可使尿液中細菌數量減少,判斷結果時應予以注意:使用抗生素治療,細菌生長受到抑制;尿液稀釋,尿比重<1.003,營養成分減少,細菌生長遲緩;尿pH<5.0或>8.5,細菌生長受阻;尿頻時,膀胱內細菌停留時間短,菌落數減少;尿道口消毒液混入標本中,影響細菌繁殖,菌落數減少;不同種類的細菌生長速度不同、營養要求不同,菌落計數有所不同。相關問題1—如何正確應用藥物敏感結果?正確運用藥敏試驗結果應考慮以下3個方面:首先要確定病原菌,如未找到真正的致病菌,藥敏實驗不但不能指導用藥甚至可能誤導臨床;重視耐藥監測,這是經驗用藥的一個重要的參考;考慮到藥敏試驗的局限性:體外報告敏感的藥物體內治療不一定有效,而體外報告耐藥的藥物體內治療不一定無效。原因:1.分離的細菌不是真正的致病菌。污染菌?定植菌?2.藥敏標準的局限性,CLSI制定的藥敏折點不能全面考慮到藥物在體內的代謝,導致藥敏標準有時和療效標準不一致。
3.體外藥敏條件較單一而恒定,而體內環境比較復雜。根據藥敏報告治療可能存在90/60原則即藥敏報告敏感的藥物90%治療有效,但報告耐藥的仍有60%有效。解決方法:1.實驗室應與臨床密切配合確定真正的致病菌。
2.根據藥動學和藥效學參數(
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