1.抗蟲棉的培育過程是什么？依據原理是？2.限制酶的作用特性是？黏性末端的讀法？如何判斷兩個基因片段能否被連接？如何判斷兩個基因片段是否由同種酶切割得到？3.基因組文庫和cDNA文庫構建方法是？4.將目的基因導入動、植、微生物細胞常用的方法有哪些？目的基因的檢測內容及方法有哪些？5.運載體必須具備的條件有哪些？6.基因工程的基本步驟有？獲取目的基因的方法有哪三種？基因表達載體的組成是？該過程所需的酶有哪些？1.3基因工程的應用§1.3基因工程的應用1、植物基因工程碩果累累2、動物基因工程前景廣闊3、基因工程藥物異軍突起4、基因治療曙光初照一.抗蟲轉基因植物抗蟲害的玉米優點—基因Bt毒蛋白基因蛋白酶抑制劑基因淀粉酶抑制劑基因植物凝集素基因消化不良不吸收避免化學殺蟲劑的污染Bt毒蛋白水解成有毒多肽轉黃瓜抗青枯(細菌)病基因的馬鈴薯二.抗病轉基因植物Bt毒蛋白水解成有毒多肽抗病毒—病毒外殼蛋白基因

—病毒的復制酶基因抗真菌—幾丁質酶基因

—抗毒素合成基因基因基因抗煙草花葉病毒的轉基因煙草抗細菌—裂解肽基因

—溶菌酶基因三.抗逆轉基因植物基因調節細胞滲透壓的基因魚的抗凍蛋白基因抗除草劑基因抗旱、抗鹽堿耐寒煙草，番茄抗除草劑大豆、玉米我國科學家在實驗田觀察轉魚抗凍蛋白基因的番茄轉基因抗除草劑玉米富含賴氨酸的轉基因玉米不會引起過敏的轉基因大豆富含胡蘿卜素的“金大米”。糧食問題難保鮮解決控制番茄成熟的基因（延遲番茄成熟）果蔬問題大豆、玉米、大麥、小麥解決①導入含必需AA多Pro的編碼基因②改變AA合成過程中關鍵酶活性四.利用轉基因改良植物的品質轉基因龍膽花轉基因藍豬耳觀賞花卉問題解決顏色單調，變色困難花青素有關調節基因四.利用轉基因改良植物的品質抗逆性抗病抗蟲改善品質抗逆糧食觀賞花卉植物基因工程問題難保鮮解決控制番茄成熟的基因（延遲番茄成熟）果蔬問題解決顏色單調，變色困難花青素有關調節基因問題大豆、玉米、大麥、小麥解決①導入含必須AA多Pro的編碼基因②改變AA合成過程中關鍵酶活性抗病毒—病毒外殼蛋白/復制酶基因抗真菌—幾丁質酶/抗毒素合成基因基因Bt毒蛋白基因蛋白酶抑制劑基因淀粉酶抑制劑基因植物凝集素基因一.用于提高動物生長速度生長速度生長激素成功案例綿羊：生長速度提高30%，體積增加50%鯉魚：9個月后，體重增1.5kg解決方法導入生長激素基因問題喝牛奶過敏敏、嘔吐、、腹瀉原因乳糖不消化化腸乳糖酶基基因對策正常牛轉基因牛導入顯微注射技技術牛奶中乳糖糖含量減少少，

其他他營養成分分不受影響響構建表達載載體二.用于改善畜畜產品的品品質乳腺生物反反應器對策設想：讓牛牛奶中產出出生長素、、抗凝血蛋蛋白、血清清白蛋白、、α-抗胰蛋白酶酶等（把哺乳動動物變成成成“批量生生產藥物的的工廠）藥用蛋白基基因+乳腺蛋白基基因啟動子子（只在乳腺腺中且在泌泌乳期表達達）構建基因表表達載體導入______細胞受精卵顯微注射技技術送回母體發發育成新個個體新個體泌乳乳期乳汁中中產藥三.用轉基因動動物生產藥藥物乳汁中含有人生長激素的轉基因牛(阿根廷)產量高、質質量好、成成本低、易易提取四.用轉基因動動物作器官官移植的供供體具特殊用途的豬和小鼠器官移植問問題—1、供體器官官少2、排斥反應應強1、抑制抗原原決定基因因表表達的調控控因子用豬的器官官做供體抑制抗原決決定基因表表達2、去除抗原原決定基因因（受精卵））克隆技術導入豬受精精卵培育出沒有有免疫排斥斥反應的轉基因克隆隆豬例2、英國科學學家已經研研究用動物物的器官作作為器官移移植的器官官來源，科科學家發現現豬的內臟臟器官與人人的內臟器器官大小、、形態均差差不多，他他們從20世紀80年代就開始始研究。研研究的重點點是改造豬豬細胞膜。。（1）豬細胞膜膜的基本結結構和人的的細胞膜是是相同的，，但其上的的和人細胞膜膜有很多是是不同的。。（2）改造豬細細胞膜主要要是通過技術進行，，具體操作作步驟：糖蛋白基因工程第一步，獲獲得控制目目的基因（（人體細胞胞膜上蛋白白質合成的的基因），，所用的方方法有。第二步，將將目的基因因與結合；第三步，將將目的基因因導入受體體細胞，對對豬來說，，應導入其其細胞最有效效。在這項技術術中，必須須使用的兩兩種工具酶酶是和。從基因文庫庫中獲取、、PCR法、人工合合成法運載體受精卵限制酶DNA連接酶小結觀賞花卉抗逆性抗病抗蟲改善品質抗逆糧食果蔬植物基因工工程作器官移植植供體提高生長速速度改善產品品品質動物基因工工程生產藥物三、基因工工程藥物異異軍突起第一種基因工程藥藥物—基因工程制制藥重組人胰島島素傳統提取

胰島島素、干干擾素提取部位—細胞、組織織、血液等等提取量—少缺點—材料少、提提取難、成成本高改進—“工程菌””提取部位—“工程菌”（大腸桿菌菌、酵母菌菌）提取量—多優點—高效、高質質量、低成成本菌優點：繁繁殖快單單細胞遺遺傳物質質少構建重組質粒基因工程藥藥物異軍突突起轉基因抗乙乙肝西紅柿柿，雖然不不能治愈乙乙肝，但一一年只吃幾幾個抗乙肝肝西紅柿，，就完全能能代替注射射乙肝疫苗苗。抗乙肝肝西紅柿屬屬于轉基因因食品，就就是將乙肝肝疫苗植入入西紅柿內內，經過多多代繁殖，，使轉入的的基因穩定定化。這種種西紅柿培培育歷時十十年，先是是在實驗室室生長，等等各種安全全因素達標標后，才移移至戶外，，進行封閉閉種植。例3、1997年，科學家家將動物體體內的能夠夠合成胰島島素的基因因與大腸桿桿菌的DNA分子重組，，并且在大大腸桿菌中中表達成功功。如右圖圖，請據圖圖回答問題題。(1)此圖表示的的是采取_____合成基因的的方法獲取取________基因的過程程。(2)圖中①DNA是以____________為模板，_______形成單鏈DNA，在酶的作作用下合成成雙鏈DNA，從而獲得得了所需要要的_______________。人工胰島素（目目的）胰島素mRNA逆轉錄胰島素（目目的）基因因(3)圖中②代表表的是________________酶，在它的的作用下將將質粒切出出_______末端。(4)圖中③代表表重組DNA，含_______________基因。(5)圖中④表示示的過程是是_____________________。為使此過過程順利進進行，一般般需將大腸腸桿菌用______________處理，以增增大其細胞胞壁的______________。（6）圖中⑤表表示______________隨大腸桿菌菌的繁殖而而進行增殖殖，此基因因在大腸桿桿菌內表達達的標志是是____________________________。限制性核酸酸內切酶黏性胰島素基因因重組DNA導入受體細細胞鈣離子通透性目的基因大腸桿菌能能產生人的的胰島素基因治療的的概念：將正常基因因導入病人人體內，使使該基因的的表達產物物發揮功效效，從而達達到治療疾疾病的目的的免疫系統發發揮正常作作用的必須須物質腺苷酸脫氨氨酶腺苷酸脫氨氨酶基因基因治療曙曙光初照1990年，美國醫醫學家安德德森對一例例患腺苷脫氨酶酶(ADA)缺乏癥的4歲女孩謝德德爾進行基基因治療。。該女孩由由于先天缺缺乏ADA基因，自身身不能生產產ADA，先天免疫疫功能不全全，只能生生活在無菌菌的隔離帳帳里。他們們將含有這這個女孩自自己的白血血球的溶液液輸入她左左臂的一條條靜脈血管管中，這種種白血球都都已經過改改造，有缺缺陷的基因因已經被健健康的基因因所替代。。在以后的的10個月內她又又接受了7次這樣的治治療，同時時也接受特特定抗體的的治療。經經治療后，，免疫功能能日趨健全全，能夠走走出隔離帳帳，過上了了正常人的的生活。美國醫學家安德森謝德爾，1999體外基因治治療：從病病人體內獲獲取某種細細胞進行培培養，然后后，在體外外完成基因因轉移，再再篩選成功功轉移的細細胞擴大培培養，最后后重新輸入入患者體內內。例4、基因治療療是指（））A、把健康的的外源基因因導入有基基因缺陷的的細胞中，，達到治療療目的B、對有缺陷陷的細胞進進行修復，，從而使其其恢復正常常，達到治治療的目的的C、運用人工工誘變的方方法，使有有基因缺陷陷的細胞發發生基因突突變，從而而恢復正常常D、運用基因因工程技術術，把有缺缺陷的基因因切除，達達到治療疾疾病的目的的A例6、應用基因因工程技術術診斷疾病病的過程中中必須使用用基因探針針才能達到到檢測疾病病的目的。。這里的基基因探針是是指（））A、用于檢測疾疾病的醫療器器械B、用放射性同同位素或螢光光分子等標記記的DNA分子C、合成球蛋白白的DNAD、合成苯丙羥羥化酶的DNA片段B基因治療是根根本性的治療療導入能增強人人體免疫能力力的基因體外基因治療療復合型免疫缺缺陷癥體內基因治療療遺傳性囊性纖纖維化病基因治療植物方面提高植物的抗抗蟲、抗病、、抗逆性改良植物的品品質動物方面提高動物生長長速度改善畜產品的的品質用轉基因動物物生產藥物用轉基因動物物作器官移植植的供體研制藥物——工程菌基因治療——體內、體外基因工程的應應用小結例5、患者缺乏正正常的人體免免疫功能，只只要稍被細菌菌或病毒感染染，就會患病病死亡。經過過研究證實，，SCID病人細胞的一一個常染色體體上編碼腺苷苷酸脫氨酶的的基因發生了了突變。（1）請你利用所所學知識，設設想一個治療療SCID病的方案。第一步：用人人體正常ada基因來替換反反轉錄病毒的的原有基因，，構建重組載載體；第二步：從SCID病人體內分離離出免疫系統統有缺陷的T淋巴細胞第三步：；第