動物細胞培養和1植物細胞工程常用的技術手段有哪些？那么動物細胞常用的技術手段呢？回憶暢想植物組織培養,

植物體細胞雜交

2動物細胞工程：動物細胞培養、動物細胞核移植、動物細胞融合、生產單克隆抗體等

動物細胞培養技術是其他動物細胞工程技術的基礎教學過程3

從動物機體中取出相關的組織，將它分散成單個細胞，然后，放在適宜的培養基中，讓這些細胞生長和增殖。原理：細胞增殖動物細胞培養4注意關鍵詞:細胞貼壁接觸抑制原代培養傳代培養細胞株細胞系閱讀課文44--46面相關內容5動物細胞培養的過程:6動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細胞懸浮液10代細胞50代細胞傳代培養無限傳代單個細胞加培養液（分解彈性纖維）原代培養胰蛋白酶剪碎過程：細胞株細胞系動物組織細胞間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質，將細胞網絡起來形成具有一定彈性和韌性的組織和器官。遺傳物質未改變遺傳物質已改變7

細胞株：原代細胞一般傳至10代左右細胞生長停滯，大部分細胞衰老死亡，少數細胞存活到40~50代，這種傳代細胞為細胞株。

細胞系：細胞株傳代至50代后又出現細胞生長停滯狀態，只有部分細胞由于遺傳物質的改變，使其在培養條件下可以無限制傳代，這種傳代細胞為細胞系。

細胞株和細胞系的區別：細胞系的遺傳物質改變，具有癌細胞的特點，失去接觸抑制，容易傳代培養。解答概念8原代培養：從機體取出后立即培養的細胞為原代細胞。培養的第1代細胞與傳10代以內的細胞稱為原代細胞培養。傳代培養：將原代細胞從培養瓶中取出，配制成細胞懸浮液，分裝到兩個或兩個以上的培養瓶中繼續培養，稱為傳代培養。解答概念9無菌操作培養箱10培養器皿動物細胞培養瓶內表面為什么要光滑、無毒？111、無菌、無毒的環境（添加一定量的抗生素，定期更換培養液）2、營養（葡萄糖、氨基酸、無機鹽、微量元素、動物血清、血漿等。）3、溫度和PH

36.5+0.5度；PH為7.2-7.4。4、氣體環境：O2和CO2（95%空氣和5%CO2）補充合成培養基中缺乏的物質動物細胞培養條件12（1）生產蛋白質生物制品：病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。（2）獲得大量自身的皮膚細胞，用于植皮。（3）用于檢測有毒物質（4）用于生理、病理、藥理等方面的研究，為治療和預防疾病提供理論依據動物細胞培養技術的應用132、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細胞培養材料？1、動物細胞培養液的主要成分是什么？較植物組培培養基有何獨特之處？3、為什么培養前要將組織細胞分散成單個細胞？4、動物細胞培養能否像綠色植物組織培養那樣最終培養成新個體？主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。獨特之處有：1、液體培養基2、成分中有動物血清等因為這些組織或器官上的細胞生命力旺盛，分裂能力強成塊組織不利培養，分散了做成細胞懸浮液利于培養不能，動物細胞培養只能使細胞數目增多，不能發育成新的動物個體練一練14細胞的全能性細胞株、細胞系植物體或組織培養結果獲得細胞或細胞分泌蛋白快速繁殖、培育無病毒植株等培養目的葡萄糖、動物血清蔗糖、植物激素培養基特有成分液體培養基固體培養基培養基性質細胞增殖原理動物細胞培養植物組織培養比較項目試一試15

動物細胞特點？分化潛能變窄：隨著細胞分化程度的提高而逐漸受到限制，分化潛能變窄，這是指整體細胞而言。細胞核仍具有全能性：細胞核，它含有保持物種遺傳性所需的全套基因，而且并沒有因細胞分化而丟失基因，因此高度分化細胞的細胞核仍具有全能性想一想16

根據動物細胞核仍具有全能性的特點,怎樣將動物細胞的全能性表達?

再想一想利用動物體細胞核移植技術17動物核移植：

將動物的一個細胞的細胞核，移入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發育為動物個體。

用核移植的方法得到的動物。克隆動物：記一記18卵細胞C母綿羊子宮Ａ母綿羊Ｂ母綿羊乳腺細胞細胞質細胞核細胞核移植胚胎移植早期胚胎多莉羊分娩卵裂融合后的卵細胞細胞拆合技術妊娠多莉羊的培育過程無性生殖1920供體細胞（供核）細胞培養體細胞卵巢卵母細胞（MⅡ中期：供質）去核無核卵母細胞注入細胞融合重組細胞構建重組胚胎胚胎移植代孕母體生出與供體奶牛遺傳基礎相同的犢牛歸納:1.共分成兩大階段：核移植和胚胎移植2.取卵細胞作受體細胞的原因是:它是最大的細胞,易操作,它發育可直接表達性狀3.嚴格來說新個體有卵巢母細胞的細胞質所以有兩個親本的性狀核移植過程212.體細胞核移植技術的應用前景22克隆動物的研究意義1.克隆動物作為生物反應器，生產醫用蛋白2.改良動物品種3.治療人類疾病，作為供體4.保護瀕危動物體細胞核移植技術存在的問題1.許多克隆動物表現出遺傳和生理缺陷，如體型過大，異常肥胖，發育困難，免疫失調等。2.成功率非常低及克隆動物食品的安全性問題。23知識結構動物細胞培養和核移植技術動物細胞培養細胞培養的應用和概念細胞培養的過程細胞培養的條件細胞培養技術的應用動物體細胞核移植技術和克隆動物核移植技術和克隆動物的概念體細胞核移植技術的過程體細胞核移植技術的應用前景體細胞核移植技術存在的問題24

1、在動物細胞培養過程中遺傳物質發生改變的細胞（）

A．細胞系B．細胞株C．原代細胞D．傳代細胞

2、動物細胞工程技術的基礎是-----（）A.動物細胞融合B.單克隆抗體C.胚胎移植D.動物細胞培養

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3.動物細胞培養與植物細胞培養的重要區別在于----（）A.培養基不同；B.動物細胞培養不需要在無菌條件下進行；C.動物細胞可以傳代培養，而植物細胞不能；D.動物細胞能夠大量培養，而植物細胞只能培養成植株。A教學反饋251.動物細胞培養要經過脫分化嗎？為什么？2.體細胞核移植方法生產的克隆動物是對體細胞供體動物進行了100%的復制嗎？為什么？課后習題26教學參考1.進行動物細胞傳代培養時用胰蛋白酶分散細胞，說明細胞間的物質主要是什么成分？用胃蛋白酶行嗎？細胞間的成分主要是蛋白質。胃蛋白酶適宜的PH約為2，當PH>6時，胃蛋白酶就會失去活性，而胰蛋白酶作用的適宜環境PH為7.2----8.4，多數動物細胞培養的適宜PH為7.2----7.4，胃蛋白酶在此環境中沒有活性。胰蛋白酶在此環境中活性較高，因此胰蛋白酶適宜用于細胞培養時的消化。2.胰蛋白酶真的不會把細胞消化掉嗎？為什么？胰蛋白酶除了可以消化細胞間的蛋白質外，長時間的作用也會消化細胞膜蛋白，對細胞有損傷作用，因此必須控制好胰蛋白酶的消化時間。3.單層細胞培養：1957年，科學家采用胰蛋白酶消化處理和應用液體培養基的方法，獲得了單層細胞培養。單層培養法的出現，對細胞培養的發展起了很大的推動作用。27

4.為什么對動物細胞進行培養時通常要添加血清？血清中含有蛋白質、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中蛋白質為白蛋白和球蛋白；氨基酸有多種，是細胞合成蛋白質的基本成分，有些動物細胞不能合成，必須由培養液提供；激素有胰島素、生長激素等促進細胞的生長、增殖、貼附。因此，細胞培養要保證細胞能順利生長和繁殖，一般要添加10%----20%的血清。5.無血清培養：在科學研究中，有時需要明確界定培養液的成分，而血清中由于含有許多未知成分，會對研究結