關于抗菌藥物敏感性試驗(藥敏試驗)第一頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日目的指導臨床醫生針對各類臨床感染患者選擇最佳抗菌藥物一定區域內積累對公共衛生有關的重要耐藥的微生物流行病學資料根據細菌對藥物敏感譜進行菌種鑒定第二頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日藥敏試驗原理把含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種測試細菌的瓊脂平板上紙片中藥物吸收瓊脂水分溶解后通過彌散作用形成遞減的濃度梯度紙片擴散法第三頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日紙片周圍一定距離范圍內試驗菌生長受抑制，從而形成無菌生長的透明圈即抑菌環。抑菌環大小反映測試菌對測定藥物的敏感程度抑菌環大小除與細菌的敏感性有關外還與其它諸因素相關。第四頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日定量測定抗菌藥物活性抗菌藥物與肉湯或瓊脂培養基混合稀釋后種入試驗細菌，孵育過夜。以能抑制細菌生長的最低濃度為最低抑菌濃度（MIC）將MIC與機體血清或體液中可獲得藥物濃度相比較來確定恰當的臨床療效稀釋法

第五頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日MIC的對數與抑菌環直徑關系——近似線性負相關第六頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日CLSI藥物選擇原則A組

常規和首選藥物，其結果應常規報告B組

首選試驗選擇性報告。包含一些臨床上重要的、特別針對醫院感染的藥物C組

替代性和補充性藥物U組

補充性試驗，僅用于治療泌尿道感染的抗菌藥物。第七頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日表中小框內是一組類似藥物，其結果解釋和臨床效力相似，不必個個試驗。“或”字表示一群相關藥物，其抗菌譜和解釋結果幾乎完全相同，交叉耐藥性和交叉敏感性也完全相同，通常只選擇一種藥進行試驗。藥物選擇第八頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

菌種代表藥物苯唑西林葡萄球菌屬所有β-內酰胺類包括酶抑制劑復合藥和碳青霉烯類四環素除葡萄球菌和不動桿菌以外的所有菌屬多西環素、米諾環素、金霉素、地美環素、土霉素、美他環素紅霉素革蘭陽性球菌羅紅霉素、克拉霉素、阿齊霉素、地紅霉素藥敏試驗中常用試驗藥及其代表的藥物所有菌屬試驗藥物林可霉素克林霉素第九頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日青霉素G葡萄球菌屬淋病奈瑟菌苯氧甲基青霉素、苯氧乙基青霉素、氨芐西林、阿莫西林、巴氨西林、氨環己西林、海他西林、羧芐西林、美洛西林、阿洛西林、替卡西林、哌拉西林頭孢噻吩腸桿菌科

頭孢匹林、頭孢拉啶、頭孢氨芐、頭孢克羅、頭孢羥氨芐氨芐西林所有菌屬阿莫西林、巴氨西林、氨環己西林、海他西林第十頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日磺胺異惡唑所有菌屬所有磺胺類萘啶酸（敏感）腸桿菌科所有喹諾酮類敏感頭孢噻吩/頭孢唑啉（敏感）腸桿菌科所有頭孢菌素敏感萬古霉素革蘭陽性桿菌替考拉寧氨芐西林腸球菌屬青霉素第十一頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日B組藥物細菌對A組同類藥物耐藥，可選擇性報告報告指征特定的標本來源多種細菌感染多部位感染對A組藥過敏、耐受或無效以流行病學調查為目的向感染控制部門報告第十二頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日C組藥物某些醫院潛在局部或廣泛流行的耐藥菌株對數種手選藥物（特別是同類的如β-內酰胺類或氨基糖甙類）耐藥治療對基本藥物過敏的患者治療少見菌的感染流行病學調查為目的向感染控制部門報告第十三頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日試驗方法—紙片擴散法改良Kirby-Bauer法(K-B法)第十四頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日培養基非苛氧菌用Mueller-Hinton（M-H）瓊脂藥物紙片直徑6mm紙片，每片吸水量約20μl菌液比濁管0.5號麥氏（McFarland）標準比濁管，菌液濃度為1.5×108/ml質控菌株金黃色葡萄球菌ATCC25923大腸埃希菌ATCC25922銅綠假單胞菌ATCC27853試驗材料第十五頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日操作方法第十六頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日菌液制備挑取已純化的4~5個菌落制備菌懸液

挑選瓊脂平板上3~5個形態特征一致的菌落，用接種環接觸每個菌落頂部轉移至4~5mL適宜的液體培養基中（如胰酶消化大豆胨肉湯）生長法

第十七頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日置35℃孵育2-6h用無菌生理鹽水或肉湯校正，使其濁度至0.5號麥氏管第十八頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

從孵育16-24h的非選擇性瓊脂培養基上用接種環挑取單個新鮮菌落，懸浮于生理鹽水或肉湯中震蕩混勻與標準比濁管比濁，以有黑字的白紙為背景調整其濁度相當于0.5號麥氏管。直接調制菌懸液法生長法的簡便替代法第十九頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日第二十頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日用無菌棉拭子蘸取菌液在管壁上方旋轉擠壓幾次去掉過多水分用拭子涂布整個M-H培養基表面，反復幾次，每次將平板旋轉60°最后沿平皿周邊繞兩圈以保證涂布均勻平板接種第二十一頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日制備好的菌液必須在15min內使用貼紙片前可將培養皿蓋半開3-5min以使表面過多水分被吸收但不超過15min第二十二頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日將接種好的平板敞開蓋子倒置在室溫下干燥3-5min使平板上的水分被瓊脂完全吸收。用鑷子取紙片一張貼在瓊脂平板表面，輕壓使其與瓊脂完全接觸。紙片中心間距≥24mm,紙片中心距平皿邊緣≥15mm。直徑90mm的平板最好貼6張。加貼紙片第二十三頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日15min內將平板倒置放溫箱孵育。紙片一旦貼下就不可再挪動位置，因紙片中的藥物已擴散到瓊脂中。需要時應在適當的地方貼新紙片注意第二十四頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

必須用35℃孵箱（苛氧菌藥敏平板應置于5%CO2環境）箱內平板最好單獨擺放，不超過兩個疊在一起，否則中間的平板因達不到孵箱溫度而產生預擴散的作用。孵育第二十五頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日平板孵育規定時間（一般為18-24h）后讀取結果，葡萄球菌和腸球菌必須孵育24h以檢測苯唑西林和萬古霉素的耐藥性。第二十六頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日孵育16-18h后檢查每一塊平板如果劃線滿意，接種物準確無誤，抑菌圈應為正圓形，菌落應融合生長出現明顯單個菌落表示接種量太少重復試驗第二十七頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日可用直尺或游標卡尺，讀取最接近的整毫米數測量時應將尺子置于倒置的平板上，置平板在黑色無反射光背景上方幾厘米處并用反射光照明。含血的藥敏瓊脂應移去平板蓋后用反射光照明平板，于表面上方測量抑菌環。抑菌環直徑測量第二十八頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日測量抑菌環直徑時抑菌環邊緣以見不到細菌明顯生長為限，測量的是完全抑制的區域直徑（包括紙片直徑）按抑菌環直徑判斷細菌的敏感性，應依據CLSI的解釋標準，報告細菌對測試藥物敏感、中介、耐藥。第二十九頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日在清楚抑菌環內有獨立的菌落生長提示接種的菌落不純，需要重新分離、鑒定和藥敏試驗抗菌藥物選擇出的高頻突變耐藥株結果判斷第三十頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日變形桿菌屬的菌株可擴散到某些抗菌藥物的抑菌環內，故在明顯抑菌環內有薄膜狀爬行生長可以忽略。鏈球菌應檢測其生長抑制圈而非溶血抑制圈。第三十一頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日對于甲氧芐啶和磺胺，拮抗物使細菌輕微生長故抑菌圈直徑應忽略細微生長的菌落。來自血瓊脂菌落可能帶有足夠的甲氧芐啶或磺胺拮抗物，在SXT抑菌圈內細菌可沿敏感菌株周圍產生模糊生長。第三十二頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日檢測苯唑西林和萬古霉素對葡萄球菌和腸球菌的抑菌環需要用透射光（平板對著光源），抑菌環的邊緣用放大鏡才可發現小菌落可以忽略。在紙片周圍的抑菌環內有任何可辨的菌落或生長薄膜（包括針尖樣菌落）提示耐藥。第三十三頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日報告方式敏感

菌株能被使用推薦劑量在感染部位達到的抗菌藥物濃度所抑制常規報告第三十四頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日中介被測菌株對該藥物的MIC接近于血液、組織中通常可達到的濃度而治療反應率可能低于敏感株。意味著可通過提高劑量或在藥物被生理濃集的部位發揮臨床效力。第三十五頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日被測菌不能被該抗菌藥物的常用劑量在組織或血液內達到的濃度所抑制其MIC落在某些范圍內提示該菌可能存在特定的耐藥機制（如β-內酰胺酶）而且治療研究表明其臨床療效不可靠。耐藥第三十六頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日當藥物對菌株的MIC高于或抑菌圈直徑低于敏感折點時報告為非敏感。非敏感并不意味著菌株攜帶某種耐藥機制。由于耐藥菌株缺失或稀少因而僅確立了敏感性解釋標準。對于“不敏感”菌株，鑒定和藥敏結果需再次確認。不敏感（NS）M100-S20定義第三十七頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日解釋性報告

某些菌種或菌群對抗菌藥物的選擇和報告有特殊要求大腸埃希菌和克雷伯菌屬中產ESBLs菌株應報告對所有青霉素類、頭孢菌素類及氨曲南耐藥。第三十八頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日對沙門菌屬和志賀菌屬的分離株只有氨芐西林、一種喹諾酮類藥物和磺胺異惡唑/甲氧芐啶可用于常規試驗和報告第一、二代頭孢菌素和氨基糖甙類藥物體外可能有活性但臨床無效故不應報告敏感第三十九頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日沙門菌屬的腸道外分離株應測試并報告氯霉素和一種三代頭孢菌素的敏感性腸球菌對頭孢菌素類、氨基糖甙類、磺胺甲惡唑/甲氧芐啶和克林霉素在體外可能有活性但臨床耐藥，不能報告敏感。第四十頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日MRS應報告耐受所有β-內酰胺類藥物（包括其復合藥）從威脅生命的感染（腦膜炎、菌血癥、會厭炎和面部蜂窩組織炎）患者的血和腦脊液中分離的流感嗜血桿菌常規應報告氨芐西林、一種三代頭孢菌素和氯霉素的藥敏結果。第四十一頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日“警告”

下列抗生素/微生物組合，在體外可出現活性但在臨床上無效，不應報告敏感細菌不作為敏感報告的抗微生物藥產ESBL肺炎克雷伯菌、產酸克雷伯菌、大腸埃希菌和奇異變形桿菌青霉素類、頭孢菌素類和氨曲南沙門菌屬、志賀菌屬Ⅰ、Ⅱ代頭孢菌素、頭霉素和氨基糖苷類苯唑西林耐藥葡萄球菌屬所有青霉素類，頭孢菌素類、β-內酰胺/β-內酰胺抑制劑、碳青霉烯類腸球菌屬氨基糖苷類(除外高濃度)、頭孢菌素類、克林霉素和甲氧芐啶/磺胺甲噁唑第四十二頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日苛養菌藥敏試驗第四十三頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日培養基為HTM（嗜血桿菌試驗培養基）常規試驗并不推薦用M-H巧克力瓊脂過高的接種濃度對某些β-內酰胺類抗生素可造成假耐藥的結果相當于0.5號麥氏管含菌1~4×108CFU/mL嗜血桿菌第四十四頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日HTM氯化血紅素母液氯化血紅素50mg溶于100ml0.01mmol/L的NaOH，加熱攪拌至完全溶解。NAD母液NAD50mg溶解于10ml蒸餾水，過濾除菌。第四十五頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日HTM30ml氯化血紅素母液加至1L含5g酵母粉的M-H瓊脂中高壓滅菌冷卻后用無菌手續加入3ml的NAD母液第四十六頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日淋病奈瑟菌培養基

GC瓊脂+1%的特定生長添加劑不推薦用高營養的巧克力瓊脂作藥敏若10μg青霉素紙片抑菌圈≤19mm，表示產生β-內酰胺酶。β-內酰胺酶試驗更為迅速，為確認質粒介導耐藥性的好方法。第四十七頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日培養基

含5%脫纖維羊血的M-H瓊脂肺炎鏈球菌用苯唑西林測定對青霉素的敏感性，抑菌環直徑≤19mm應測其MIC而不是直接報告對青霉素中介或耐藥肺炎鏈球菌和其他鏈球菌第四十八頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日肺鏈以外的鏈球菌不推薦用苯唑西林試驗對于草鏈，青霉素（或苯唑西林）紙片擴散試驗是不可靠的，無菌部位分離的草鏈應測其青霉素的MIC。第四十九頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日適用于腸桿菌科細菌等快速生長的致病菌無論哪種接種方式，只要質控菌種的抑菌環在預期范圍內，均可按同一解釋標準報告藥敏結果為WHO推薦藥敏方法專性厭氧菌及酵母樣菌等某些特殊菌種藥敏試驗不能用紙片法特點第五十頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日技術簡單，試劑量低，不需要特殊設備，可自由選擇抗菌藥物，可重復，易于由人判斷，故必須標準化。紙片法藥敏試驗必須標準化第五十一頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日影響因素第五十二頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日M-H培養基批間重復性較好含有磺胺、甲氧芐啶和四環素的抑制物很少絕大多數非苛養菌生長良好已積累大量的數據和經驗第五十三頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日按商用脫水培養基說明制備高壓滅菌后水浴冷卻至45-50℃水平臺面上傾注平皿，厚度均勻一致約4mm，150mm平皿倒60-70mL，100mm平皿倒25-30mL培養基配制第五十四頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日冷卻至室溫，若當天不使用應貯存于2-8℃冰箱制備后7天內使用完畢每批平板均應進行抽樣進行無菌試驗，30-35℃孵育24h或更長時間。第五十五頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日檢查每批M-H瓊脂的pH，膠化后室溫下為過低、過高會使某些藥物失去效力（如氨基糖甙類和大環內酯類）或活性可能增強（如青霉素類）。pH第五十六頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日若使用前瓊脂表面過分潮濕，應放35℃孵箱或在室溫下敞開蓋子倒置，直至多余水分蒸發。瓊脂表面應保持濕潤在接種后瓊脂表面或平板的蓋子表面不應有可見的潮濕水珠濕度第五十七頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日過量胸腺嘧啶核苷或胸腺嘧啶可逆轉磺胺類和甲氧芐啶的抑菌效應而使抑菌環變小、模糊甚至消失而導致假耐藥的報告，應使用胸腺嘧啶核苷含量盡可能低的M-H瓊脂。評價新的M-H瓊脂可用甲氧芐啶/SMZ紙片對糞腸球菌ATCC29212或糞腸球菌ATCC33186進行試驗胸腺嘧啶核苷或胸腺嘧啶影響第五十八頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日不合格培養基沒有抑菌圈抑菌圈內有菌生長抑菌環直徑＜20mm合格培養基培養基上出現邊緣清楚的抑菌環直徑為20mm或更大第五十九頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日主要指鎂和鈣影響氨基糖甙類、多粘菌素和四環素對假單胞菌的試驗結果含量過高抑菌圈變小含量過低抑菌圈變大甚至不可接受鋅離子主要影響細菌對碳青霉烯的敏感性二價陽離子含量的影響第六十頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日培養條件非苛氧菌解釋標準的基礎是在空氣中孵育。某些藥物（氨基糖甙類、大環內酯類和四環素）受CO2影響抑菌環直徑會有較大改變，非苛氧菌不能在CO2濃度較高的環境中孵育。苛氧菌應在CO2環境孵育中第六十一頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日紙片的貯存裝有紙片的容器應置于非無霜冰箱中，≤8℃冷藏或≤-14℃冷凍至使用前某些不穩定藥物（如亞胺培南、頭孢克洛、克拉維酸復合藥等）也應冷凍保存直至使用當天，以盡量保持其穩定性。第六十二頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日裝有紙片的密封容器應于使用前1-2h移出冰箱，平衡至室溫后才能打開以防熱空氣接觸冷紙片時產生冷凝水。裝有紙片的塑膠管從密封包裝中取出后應置于密封的干燥容器中β-內酰胺類藥物紙片應密封包裝并冷凍，少量正在使用的紙片可冷藏至少一周第六十三頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日使用紙片分配器應上緊蓋子并配備足量干燥劑，分配器打開前應平衡至室溫；指示劑變色時應更換干燥劑以防過于潮濕。裝有紙片的分配器不用時應冷藏過期紙片不得使用，應廢棄。第六十四頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日接種物的濁度使用BaSO4濁度標準管或其光學等同物（如乳膠顆粒懸液）相當于0.5號麥氏標準管(配制方法見后）第六十五頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日使用前將濁度標準管取出置于旋轉混勻器上劇烈振動，目測其外觀濁度應均勻一致出現大顆粒濁度管應更換每月應更換硫酸鋇濁度管或核實其濁度第六十六頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日0.048mol/L的BaCL20.5mL（1.175%w/vBaCl2·H2O）加入到99.5mL0.18mol/L的H2SO4（1%v/v），并不斷攪動以維持混懸狀態。0.5號麥氏標準管配制第六十七頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日按每管4-6mL分裝于帶螺帽的試管，其口徑應與稀釋菌所用一致。密封并貯存于室溫黑暗處可使用分光光度計核實濁度標準管的濁度，光徑1cm，625nm吸光度值者即為0.5號麥氏標準管。第六十八頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日注意事項對每種可能致病的細菌進行藥敏試驗時，使用的單個菌落應選自原始瓊脂平板多種不同型細菌的混合物不能在同一藥敏試驗平皿上進行試驗直接用臨床標本藥敏試驗須經分純菌種藥敏試驗復核第六十九頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日接種物濃度避免過濃或過稀禁止用未稀釋的過夜肉湯或其他非標準接種物進行平板劃線必須應用標準化操作方法并測量抑菌環直徑，絕對不允許只憑環的有無而不考慮環的大小判斷結果。第七十頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日試驗方法—稀釋法第七十一頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日瓊脂稀釋法重復性好同時測定多種細菌可觀察被檢菌落生長情況、發現污染菌可應用機械化手段、提高效率第七十二頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日微量肉湯稀釋法一塊板可以同時測定多種抗菌藥物操作規范、簡便、結果可信藥物不一定適合實際工作需要第七十三頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日試驗方法—Etest第七十四頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日是一種抗菌藥物濃度梯度法直接測量MIC的藥敏試驗結合了稀釋法和擴散法原理、特點并克服兩者缺點結果準確、重復性好、操作簡便第七十五頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日原理E試條為5mm*50mm的長條，一面固定有預先制備的稀釋度呈指數級連續增長的抗菌藥物；另一面有讀數和判別刻度。抗菌藥物梯度可覆蓋20個等倍稀釋度試條貼在涂有細菌的瓊脂平板上孵育后其周圍可見橢圓形抑菌環，邊緣與試條交點的刻度稱為抑制濃度（IC）。第七十六頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日方法培養基和菌種同紙片法貼試條確保已接種細菌的平板干燥用鑷子將試條刻度面朝上放入使之與瓊脂緊密接觸藥物最高濃度處應靠平板邊緣輕壓以驅趕其下方氣泡孵育時間和環境要求參考說明書第七十七頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日結果解釋無抑菌環，IC≥最大濃度；抑菌環延伸至試條下方、與試條無交點，IC≤最小濃度應排除薄霧狀和散在菌落，讀取完全抑制處數值。IC與CLSI的MIC高度相關、直接對應。第七十八頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日聯合藥敏試驗第七十九頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日為確定兩種藥物之間是否存在拮抗或協同作用，需用聯合敏感試驗進行測定，以便臨床選擇有效的抗生素方法紙片法平板紙條交錯法梯度紙條試驗法第八十頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日紙片法與單片紙片擴散法相類似即將兩種含藥紙片貼于已接種被檢菌株的平板上，相距2~3mm。置于35‘C培養18~24小時根據呈現的抑菌圖形報告“協同”、“無關”或“拮抗"作用。第八十一頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日協同作用第八十二頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日相加作用第八十三頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日拮抗作用第八十四頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日無關作用第八十五頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日CLSI2010更新內容簡介第八十六頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日表1A“建議分組”

腸桿菌科細菌

頭孢噻吩CLSIM100-S20.2010GroupUCLSIM100-S19.2009GroupA第八十七頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日為什么頭孢噻吩被移動位置在美國，注射頭孢噻吩已經無效口服頭孢噻吩主要用于腸桿菌科細菌尿路感染的治療；僅尿路感染分離株報告頭孢噻吩結果。頭孢噻吩敏感性測試可以代表其他口服頭孢菌素類–頭孢羥氨芐,頭孢泊肟,頭孢氨芐,氯碳頭孢第八十八頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日腸桿菌科

折點已修正(MICμg/ml)藥物CLSIM100-S192009CLSIM100-S202010SIRSIR頭孢唑啉<=816>=32<=12>=4頭孢噻肟<=816-32>=64<=12>=4頭孢唑肟<=816-32>=64<=12>=4頭孢曲松<=816-32>=64<=12>=4頭孢他啶<=816>=32<=48>=16氨曲南<=816>=32<=48>=16CLSIM100-S20.Table2A.第八十九頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日腸桿菌科細菌

折點未修正，有待評估(MICμg/ml)

藥物CLSIM100-S202010SIR頭孢呋辛（非口服）<=816>=32頭孢吡肟<=816>=32頭孢替坦<=1632>=64頭孢西丁<=816>=32CLSIM100-S20.Table2A.第九十頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日腸桿菌科折點修正(紙片法mm)藥物CLSIM100-S192009CLSIM100-S202010SIRSIR頭孢唑啉>=1815-17<=14NANANA頭孢噻肟>=2315-22<=14>=2623-25<=22頭孢唑肟>=2015-19<=14>=2522-24<=21頭孢曲松>=2114-20<=13>=2320-22<=19頭孢他啶>=1815-17<=14>=2118-20<=17氨曲南>=2216-21<=15>=2118-20<=17第九十一頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日為什么頭孢唑啉沒有紙片法折點？所研究地區范圍內頭孢唑啉MIC折點無可靠結果需要進一步深入研究紙片藥物濃度有待修正第九十二頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日為什么CLSI降低腸桿菌科細菌頭孢菌素和氨曲南的折點？先前的折點是20多年前制定的加強了對以往的和新β-內酰胺酶耐藥機制的認識，以及加上ESBLs的加入確定折點有了新方法藥代動力學和藥效動力學（PK/PD)第九十三頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日

折點無需再評估在美國，大多藥物都買不到或者沒有批準使用對于E.coli，Klebsiellaspp.和Proteusmirabilis，檢測他們中的任何一個，都必須繼續完成ESBLs篩選和確證實驗如果ESBLs陽性，要把cephalosporins、penicillins、aztreonam敏感的結果改為耐藥頭孢孟多頭孢尼西頭孢哌酮拉氧頭孢第九十四頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日腸桿菌科修正后的碳氫酶烯類折點

（MICug/ml）藥物CLSIM100-S192009CLSIM100-S202010SIRSIR多利培南---<=12>=4厄他培南<=24>=8<=0.250.5>=1亞胺培南<=48>=16<=12>=4美羅培南<=48>=16<=12>=4第九十五頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日ESBLs檢測（1）最初的方法來源于：某些分離株在敏感范圍內提高了MIC值得到關于病人的產ESBLs的分離菌株的數據結果有限對大腸埃希氏菌，克雷伯均屬，奇異變形桿菌進行ESBLs的篩選和確證實驗第九十六頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日ESBLs檢測（2）ESBLs表型檢測不是最理想的在做確證實驗時，多重耐藥機制的出現會掩蓋ESBLs

例如

-ESBLs+AmpC-ESBLs+porinmutationESBLs出現在除E.coli，Klebsiellaspp.，Proteusmirabilis之外的其他腸桿菌科細菌某些種時確證實驗并不可行一些實驗室不做檢測相對于耐藥機制的認識，MIC與統計輸出結果關系更密切第九十七頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日ESBLs檢測（3）目的如果使用……舊的折點M100-S19修正過的折點M100-S20用于標本處理ESBL篩選和確證實驗YesNo把頭孢菌素類，青霉素類，氨曲南由“S”改為“R”YesNo用于感染控制ESBL篩選和確證實驗Yes(如果要求做…..)Yes（如果要求做…..)把頭孢菌素類，青霉素類，氨曲南由“S”改為“R”YesNo第九十八頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日非腸桿菌科細菌第九十九頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日不動桿菌屬將黏菌素和多粘菌素B從實驗報告C組中刪除。

第一百頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日刪除銅綠假單胞菌

—關于青霉素類的解釋對這類藥物敏感的種類提示需要一個高濃度治療銅綠假單胞菌引起的嚴重感染。針對這些感染，單一療法往往造成臨床治療失敗。應考慮加入體外實驗對銅綠假單胞菌有抗菌活性的抗生素，例如喹諾酮類和氨基糖苷類第一百零一頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日葡萄球菌屬第一百零二頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日萬古霉素MICCLSIM100-S20(2010)萬古霉素紙片擴散法無抑菌環(=6mm)可檢測含VanA的金黃色葡萄球菌分離株萬古霉素抑菌環>=7mm，必須檢測其MIC值紙片擴散法測萬古霉素不可靠檢測到萬古霉素MIC>=8ug/ml的任何金黃色葡萄球菌，應送往參考實驗室第一百零三頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日增加Linezolid耐藥折點Linezolid不敏感的S.aureus罕見0.05%(7/15,280isolates)CLSIagendabookJune2009耐藥機制已經確定

–rRNA突變、介導耐藥（能被質粒編碼）Mendesetal.2008.AntimicrobAgentsChemother.52:2244.第一百零四頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日增加MRSA的定義MRSA就是金葡的某些菌株表達mecA基因或是其他耐甲氧西林機制，比如與青霉素結合蛋白親和力的改變。第一百零五頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日關于mecA陰性MRSA機制修飾青霉素結合蛋白位點(PBPs)1,2,4(MOD-SA)編碼blaZ的青霉素酶過度表達Methicillinase？罕見文獻里臨床資料有限

re:有關β-內酰胺類藥物的治療

Croes,Setal.2009.ClinMicrobiolInfect.Epub.10/09Chambers,H.1997.ClinMicrobiolRev.10:781.第一百零六頁，共一百一十八頁，2022年，8月28日S.aureusorS.Lugdunensis

苯唑西林和頭孢西丁的檢測頭孢西丁取代苯唑西林檢測耐藥報告苯唑西林敏感或耐藥必須以頭孢西丁為準如果頭孢西丁和苯唑西林同時耐藥或任一耐藥，應報告苯唑西林耐藥。第一百零七頁，共一百一十八頁，2022