（2）細胞生化得到了快速發展；70年代以來，科學家們將分子生物學的概念與技術引進了細胞 （2（3（5）（6）胞基本知：DNA構成，緣何生物的主要代表是細菌和藍藻。問答題，原核細胞的共同特征為：沒有核膜，遺傳信息載體僅僅是一個露的環狀DNA分子，除核上述的根本差異，真核細胞的體積也相應增大結構更趨復雜化，生命活動的時間與空，（2）（3），毒都是專性活細胞內寄生的，離開了細胞是不能生活和繁殖。因此可以說只有細胞才，代謝機制相同（如糖酵解和TCA循環具有相同的化學能貯能機制，如ATP合成酶（原核位于細胞 胞生物學研究方resovingpower25cm明視距離處，能分辨被檢物體細微結構冰凍蝕刻freezeetchingmicroautoradiography：是將放射性分子引入機體或細胞,使其滲入生物大密度梯度離心densitygradientcentrifugation:是細胞組分通過某些梯度密度溶液離心使得differentialcentrifugation:是利用不同速度離心所產生的不同離心力將各亞細胞組熒光原位雜交fluorescentinsituhybridization,FISH：是在細胞保持基本形態的情況下將熒光探針注入細胞內與DNA或RNA雜交，通過觀察熒光標記物的雜交位置來定位或DNA-DNA、RNADNARNA雜交、洗脫等步驟。細胞株cellstrain和細胞系cellline:10代左右就不易傳下去了，50代后又要出現及細胞核、線粒體等構屬于顯微結構。三維影影像微差微鏡與差顯微相比其標本略厚一點射率差更大故影的更強分微鏡使的結構特是一些大的細器如核線體等感別強適合于微操前像入移植轉的顯微操作常這種顯鏡下進。相差微鏡最的點是可以察色的標和活細胞。生線性偏振。在聚光器中則安裝了石英Wollaston棱鏡，即微分顯微鏡棱鏡，此棱鏡可將一束光分解成偏振方向不同的兩束光（xy），二者成一小夾角。聚光器將兩束光調整細胞融合與細胞雜交有何區別細胞融合（cellfusion）又稱細胞雜交（cellhybridization），是指兩個或兩個以上的所做習題中的第五項為何選C?掃描電鏡觀察的不是已經的細胞嗎?STM與(電子顯微鏡三維成像與X射線衍射技術及核磁技術)的用途是否等同?若不絡。X-射線衍射技術是目前在原子水平上分析蛋白（重構變為頻函數。樣一個維信息壓到一個二平面上,就是電的0-70胞進行照相,進行不同角度傾斜,同樣由于視錐問題,70-90X-射線衍射技術是目前在原子水平上分析蛋白XX-射線通過結晶樣品形成的衍射樣式成X-射線衍射技術是目前在原子水平上分析蛋白質、核酸和其他生物分子的惟一方法。WatsonCrickDNAFranklinDNA核磁衍射技術同樣具有高分辨率的特點,僅次于X-射線晶體學技術,另外可以在50KD只達到3埃米,這是很難達到的,而X-射線晶體學技術分辨率是1埃米,核磁衍射技術分20.1nmDNA、RNA和蛋白質等生物大分子及生物膜、（3）（4）的分析和序列測定；核酸的雜交、PCR、的克隆與表達以及的剔除、RNA干擾技（2）（3）（4）a.電子顯微鏡三維成像與X射線衍射及核磁技術；b.southern雜交；c.掃描電鏡技術；d.細胞顯微分光光度法；e.免疫熒光技術；f.電子顯微鏡超薄技術；g.Northern雜交；h.放射自顯影技術；I.超離心技術；j.DNA序列分析；k.原位雜交技術；l.Western雜交技術；m.問題：1.高等動物克隆的制作（T。2.某種抗癌藥物的作用機制是腫瘤細胞的DNA復制還是蛋白質合成(H)。3.已克隆了雞卵清蛋白的，如何證明在雛雞的中該不轉錄而在產雞中活躍的轉錄（G。4.已克隆了人的rDNA，問rDNA分（K（A（Q面的亞單位-衣粒形態與排列方式（N。10.研究酵母菌在無氧和有氧條件下生長時，其線粒體形態結構的變化（F胞膜與細胞表液態鑲嵌模型 細胞連接錨定連接細胞黏附分 光脫色恢復技術成斑成帽實驗透明質酸纖粘連蛋白層２.影響膜蛋白、膜脂流動的因素３.連接類 功 緊密連接封閉細胞空間沿著嵴進行膜連接無 細胞膜細胞膜是由膜脂和膜蛋白構成的。膜蛋白可分為內在膜蛋白與外在膜蛋白。脂雙（1）（2）（3）細胞外被與胞外基質細胞外被是指與細胞表面質膜的膜脂或膜蛋白共價結合的糖鏈形成20%~30%。70~80%。有30nm1~0nm5000個二糖單位重復排列構成。脂筏:脂筏（lipidraft）是質膜上富含膽固醇和鞘磷脂的微結構域（micro。大小約70nm左右，是一種動態結構，位于質膜的外小頁。由于鞘磷脂具有較長的飽和脂肪酸鏈，orderedmmbranesDRMsacylatedprotein）Src、GGα亞基、血管內皮細胞的一氧（allergen）IgEGorter界面的表面張力低得多，已知脂滴表面吸附有蛋白成分則表面張力降低，因此，Davson和danielli推測,質膜中含有蛋白質的成分并提出蛋白質-脂質-蛋白質的三明治式的紙膜結構模型.20年之久.1959年,oern,---(--暗,在此基礎上Sgr和con于172(1,2)在多細胞內,除了胞之外,有一些細胞物質它們是在體發育由胞分泌,能DNA。同樣細胞外基質對細胞分化的誘導作用已有大量的實驗證明，胚胎發育的不..類固醇..１.存在于細胞表面，能夠介導細胞粘連的糖蛋白。２.Ca2+的粘連分子（Ca2+的粘連分３.能夠優先介導同種類型細胞間的粘連。細胞與細胞接觸形成和破壞能夠影響細胞的遷移 Ａ溫度升 Ｂ卵磷脂／鞘磷脂比值 Ｄ不飽和脂肪 Ｂ膠 Ｃ纖粘連蛋 Ｄ蛋白聚細胞內中間纖維通過（C Ａ粘合帶Ｂ粘合斑Ｃ橋粒 Ｄ半橋粒 膜脂中，卵磷脂／鞘磷脂的比值高低對膜的流動性有極大的影響，一般來說（B Ｂ比值高，流動性大Ｃ比值低，流動性大 Ｄ比值低，流動性小。１.（Ｖ）２.（Ｖ）.４.粘著帶和粘著斑的區別在于粘著帶是細胞之間的連接，粘著斑是細胞與外基質之間的連５.橋粒半橋粒的形態結構不同但功能相同６.彈性蛋白與膠原極為相似，其氨基酸組含有Gly-X-Y序列（Ｘ）７.（Ｘ）８.９.間隙連接和緊密連接都是脊椎動物的通訊連接方式 連接類 功 膜間間隙 封閉細胞空間沿著嵴進行膜連接 粘著帶細胞與細胞形成連續的粘著帶20～25與肌動蛋白纖維連接粘著斑細胞與EMC 20～25與肌動蛋白纖維連接 細胞與細胞形成局部的粘著點 半橋粒細胞與基膜形成局部的粘著點 間隙連接動物細胞間 胞間連絲植物細胞間的兩細胞間形成直徑為無間隙內質網穿過兩 30～60nm通道 關于膜的分子結構：由于質膜太薄光鏡下看不到，所以首先從膜的通透性開始研究。19世紀后期研究膜的通透性提出細胞表面有一類脂層。1925年通過實驗提出膜是由雙層脂類構由于技術的發展又提出了許多新的模型。其中1972年液態鑲嵌模型受到廣泛地支合的脂類基團與脂雙層結合④通過與膜蛋白非共價結合的相互作用。第五章細胞與信號轉-細胞通訊，細胞識別，G第五章物質的跨膜與信號轉導：。和生長是至關重要的。物質的跨膜可分為和主動兩類方式包括簡單擴散和載體介導的協助擴散，物質的方向是由高濃度向低濃度，不消耗ATP。：。某種釋放能量的過程相偶聯。主動可分為由ATP直接供能和間接供能以及光驅動的三CDNA或Hsp90（1）（2）G（3）G7次跨膜形成的受體，該信號通路是指配體-G蛋白的中介，并在細胞內產生第二信使，才將細胞外信號跨膜傳遞到細胞內影響細胞的行為。GcAMP信號通改變。該信號通路為：配體→受體酪氨酸激酶→adaptor←GRF→Ras→Raf(MAPKKK)→ MAPKK→ →進入細胞核→其他激酶或調控蛋這種現象稱為極化。在多數細胞中，極化狀態主要由Na+、K+在膜內側的不同濃度分布所決定（膜外Na+多Na+的通透性的大幅度增加，在瞬間有大量Na+流入細胞內，使膜電位減少甚至，這種現象就稱如動物細胞常通過Na+-H+對向的方式，以調節細胞內的pH.網格蛋白被小泡是飲泡或高爾基形成的小泡當配體膜上受體結合后,網蛋白在膜下側,逐漸成徑50~0nm的質凹陷,為網格白有被窩一種小分子TP,T,引起.細胞通訊.G蛋白耦聯受體：指配體-受體復合物與靶蛋白(酶或離子通道)GTP結合的調節蛋白(G蛋白),才能將外界信號跨膜傳遞到細胞內影信號轉導.或信使傳入胞質因直接活進入細核內,導特的激和表達過程.信使)與受體作用后在胞內最早產生的信號分子.現已知道的有:camp、cGMP、IP3、GD等。GGTP結合調節蛋白，是耦聯受體接受信號與第二信使的產生之間的膜上信號轉換系統，故又稱耦聯蛋白質或信號轉換蛋白。由α、β和γ三個亞基組成。GGTPGGTPGTPGDP后，GGTPGTPGDPGCPIP21，4，5-三磷酸和二酯酰甘油兩種胞內信號，因此又稱為雙信號系統，白質產物c-src是細胞膜上的酪氨酸蛋白激酶，其中其它蛋白質與Src具有同源性的Na+-K+泵存在于一切動物細胞的細胞膜上，是由α和β二種亞基組成的跨膜多次的膜整合蛋aNa+ATP，aaNa+K+aATP3Na+2K+.由此可以看出，主動的機理是在膜載體的協助下，由ATP功能，直接或間接將所有轉運物質逆濃度梯度運H+-ATPH+ATPH+Na+-K+Ca2+類似，在轉運H+的過涉及磷酸化和去磷酸化，存在于真核細胞的細胞膜上，稱為P型質子泵。P型質（1）pHpH7.0～7.5（2）pH第二種存在于動物細胞溶酶體膜和植物細胞液泡膜上，轉運H+過不形成磷酸化的中間pH.i（1）i3（3）（4）NO-抑制。3H+ATPcAMPcGMP1)cGMPcAMPcAMP2)催化他們產生的酶及方式不同:cAMPGcGMP3)兩者的效應器不同,cAMPA，cGMPG，所以，他們引起的細胞效應也不同，cAMPcGMPcAMPcGMPcAMPcGMP胞收縮；cAMP對細胞增殖起伏調控作用，而cGMP則為細胞增殖的鄭調控因子，等等。所以曾經有人將其與我國中醫理論的陰陽學說聯系（4）使cAMP和cGMP滅活的磷酸二酯酶（1）（2）（3）基。由此誘導相似的信號轉導；一個配體與受體結合可誘發多種信號轉導途徑；G蛋白與受PLCcAMP和磷脂酰肌醇答謝兩種信號通路。第五，多是相持久地如細胞、化過程。雖胞內信分子的壽G根據G蛋白的結構和性質可將其分為兩大，其中一大是三聯體，它是由三個亞單位組成，α、β和γ，a亞單位結合GDP或GTP。當信號刺激受體時，改變了的受體促使G蛋白發生變化：GDP從a亞單位上游解離下來，GTP則取代他的位置。此變化促使a亞單位aAGTPβ、GG（Gs）G（Gi）兩類。GADP-核糖從煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）GADP-核糖基化。某些情況下，ADP-GGG蛋白的另一個由單個亞單位組成這些單體G蛋白也被稱為Ras蛋白或小G蛋白。Ras（H-、K-、N-RasRacRho。這RasRas放因子（GRF）GTP（GAP）GTPGDPGDPGTPRasRas制產物如人類神經纖維瘤類型-1蛋白反向調節。NF-1產物刺激Ras蛋白GTP酶活GTPGDPPiRasRasGRasG蛋白直接影響的酶主要有腺苷酸環化酶和磷酸酯酶。這些酶通過催化產生第二信cAMP、IP3DG，擴大微弱信號，所以他們在信號通路中非常重要。號C（PLC）A（PLA）GC催化膜結（DGPIP2是真核生物質膜內常見的磷脂酰肌醇合成。少量此磷脂被一個膜激酶轉變成磷脂酰肌（PIP（PIP29C(PLC)，PLC的激活使質膜上二磷酸磷脂酰肌醇(PIP2)水解成三磷酸肌醇(IP3)和二酰基甘油(DG)兩個第二信使。二酰基甘油（DG）激活蛋白激酶C(PKC)IP3Ca2+Ca2+從鈣庫中釋放到細胞溶質IP3-Ca2+DG-PKC途徑，實現細胞對外界信號的應答。該信號系統也成鈉鉀泵是由α、βa（B）磷酸化才可能引起aA甘氨 B天冬氨 C丙氨 D胱氨（CA磷脂和 IP3和 DG和 DG和磷（BA鳥苷酸環化酶系 C腺苷酸環化酶系 D肌醇磷脂系（A B D（B （BA抑制 激活 抑制三聯體G蛋D激活三聯體G蛋 E以上均不（AA抑制 激活 抑制三聯體G蛋D激活三聯體G蛋 E以上均不（B B.磷酸烯醇式酸 膜兩側Ｎa+電化學梯度D.膜兩側H+電化學梯 C胰島素 E以上均不是是非題：A抑制Ras 激活Ras 抑制三聯體G蛋白D激活三聯體G蛋白 E以上均不是載體蛋白相當于結合在細胞膜上的酶，它與酶相似的特點是:只轉運特定類型的分子或 .內吞作用又可分為胞飲作用和吞噬作用兩種方式,兩者的內吞泡形成的機制不同,如果用藥物細胞松弛素B處理細胞,可吞噬泡的形成。協同是間接消耗ATP的主動方式,可分為共和對向兩種方式.小腸上皮細胞吸收葡萄糖或氨基酸等有機物的過程屬于共。NO的生成需要一氧化氮合酶的催化. NO生成后,擴散到鄰近細胞,通過活化鳥苷酸環血管擴張。磷脂酰肌醇信號通路的關鍵反應是PIP2水解生成IP3和DG兩個第二信使,催化這一反應的酶是磷脂酶C .DG的信使作用可通過如下兩條途徑來終止:轉化磷脂酸和水解成單酯酰甘油RasRas蛋白RasGTP水解而失活。P型質子泵和V型質子泵在結構上與Ca2+泵相似，在轉運H+的過，涉及磷酸化和動物細胞內低Na+、高K+的離子環境主要是通過質膜的離子通道來完成第六章細胞內膜系統基本概念題學matrix內膜系統(endomembranesystem):指真核細胞內在結構、功能乃至發生上相關的由膜圍易位子（translocon）:指內質網膜上的一種蛋白質復合體，8.5nm,2nm的通道，其功能 高爾基體（Golgibody）:是由一些堆疊的扁平囊所組成。主要功能是分泌活動、蛋白溶酶體（lysosome）:是由單層膜圍繞、內含多種酸水解酶類的囊泡狀細胞器，其主要Hsp70Hsp60在多肽的折疊中起重要作用。前導肽序列（leadersequence）:N-20~80個氨基酸序sorting折疊和亞細胞結構間的轉移，HSP90Raf-1活性的調節和糖膜泡（euarranport）胞通過吞作用外派作用成大分與顆粒物質的跨膜方式和內蛋白通過不的轉運泡內質網轉到高爾體進而選運至細胞不同部的式由于在運過物質在雙層膜繞的囊中，故稱泡。protein信號肽（signalsequencesignalpeptideN-端的一個肽段，可指導氨基酸殘基，其中包括疏水區、信號肽的C端和N端等三個部分。逃逸蛋白（escapedprotein）:指帶有內質網居留信號的蛋白質伴隨著其輸出蛋白質的出endosome來自質膜的細胞內小泡，是一種含有游離受體與配體的酸性非溶酶體小pH呈酸性，具有分揀作用，能夠分選與配體結合的受初級溶酶體primarylysosome有高爾基體膜囊出芽形成的新生溶酶體，體積較小次級溶酶體conaryysooe 類溶酶中含水解酶和應的底，是一將要或正在消作用的酶根據消化物的來為自噬性酶體與噬性溶體信號識別顆粒signalrecognitionpartical,SRP是一種核糖白體，與信號肽、核糖體相結合形成SRP-信號肽-SRP介導引向內質網膜上的SRP受體，并與80個氨基酸左右時，NN端損傷和成GTP的耗能過程。與此同時，腔面1978年Laskey等在研究核質蛋白時首先提出來的一個名詞。1987Ellis便把復合物。分子伴侶是進化上相當保守的一些蛋白質，目前已被確認的有熱激蛋白60、70、90等。它們廣泛分布于原核細胞和真核細胞的細胞質、線粒體和內質網中，屬于細胞（位和如某些子伴侶新生多與核糖體合成時與其結合協助該6SNA一級結構。由此可見，內質網的特定區域在將合成的蛋白質包裝成膜泡時，對具爾德菌素A所抑制；而高爾基復合體向內質網方向的反向，則可被nocodazole阻結果表爾基復合體中有G蛋白的存在，此G蛋白對高爾基復合體膜泡具有（1）（2）（3）上合成，并結合在內質網膜上或送入腔中，經N-連接糖基化修飾后轉運至高爾基體。N-乙酰葡萄糖胺磷酸轉移酶將單糖核苷酸AcGlc-Nac-P轉移到高甘露糖寡糖鏈上的a-1,6-甘露糖殘基上，再將第二個Ac-P加到a-1,3-甘露糖殘基上，接著在高爾基中間膜囊中的磷酸葡萄糖苷酶的作用下，除去末端的Ac，出磷酸，形成M6P標志。中的分布在TGN末的某些部位，使溶酶體酶與其它蛋白質分離并得到局部濃縮，從而程需要網格蛋白的幫助。小泡形成后，網格蛋白脫離，隨后M6P受體也從小DNA。C端（1）基體的P體識別結合，而被揀出來。酶體的類在內網上合成，跨進入內網的腔再順面爾基體上露糖--磷酸記后在高爾基體網絡形溶酶體泌小泡最后經脫磷酸為溶酶。溶酶具有異性N-連接與O-N-原子O-原子。N-連接糖蛋白合成的第一步在糙面內質網上進行，一RER中的酶類、高爾基復合體的酶、溶酶體酶；ER膜蛋白、高爾基體膜糖蛋白、溶酶體膜糖蛋白、質膜合膜糖蛋白、6-12個連續的疏水殘基。起始轉移信號：NSRP識別，還具有起始穿膜轉移作用，其附近有信內含信號序列：并不位于蛋白質N端，也可被SRP識別并具有起始穿膜轉移作用，但停止轉移肽：停止轉運信號可以a核糖體與內質網的結合受制于mRNA中特定的子序列（可翻譯為信號肽。信號序列與SRP結合，引導核糖體與內質網結合；并通過信號序列的疏水性引導新生肽鏈跨膜轉運。主（1）（2）顆粒（SRP）（3）SRP通過第三個位點與內質網中的受體（停靠蛋白，DP）（4）SRP的釋放與轉運通道的打開，使核糖體（5（6）（7）SRP以及DP的概念。過氧化物酶體和溶酶體均為抑制性細胞器；而高爾基體則不是（v2M6P是高爾基體TGN的特有蛋白質,參與溶酶體蛋白的分選 x 導肽是游離核糖體上合成的新生肽鏈N端一段氨基酸序列,其組成特點是含有較多的堿性氨基酸,基本不含酸性氨基酸,具有形成兩性a螺旋的傾向.( ｘ（氨基酸序列Leu-Arg-Leu-Asp-Ala-Gln-Ser-Lys-Leu-Ser-Ser是一個信號序列，引導蛋白質定位到ER.(x （ｘ）（Ａ．（Ｃ．Ｂ．是N端的一段氨基酸序列（Ｄ． B.銜接蛋白 （Ｂ）C.–Pro-Pro-Lys-Lys-Arg-Lys-Val-（Ｄ） 體和葉綠子通過膜來驅動從ADPATP。化學滲透假說：是1961年由Mitc等，用來解釋氧化磷酸化耦連機理學說。該假說的主要內容是：呼吸鏈的各組分粒體內膜中的分布式不對稱的，當高能電子在膜中沿H+從膜基質側泵至膜間隙，由于膜對質子是不通透的，H+濃度高于基質，因而在內膜的兩側形成電化學質子梯度。在這個梯度驅ATP中的過程。，組編碼，在細胞質核糖體上合成后轉運至之，即兩種細胞器的自主性是有限的在轉錄，酸和酸氧化的酶類也都存在于基質中此外還含有線粒體DNA線粒體核糖體tRNA、rRNA以及線粒體表達的各種酶，基質的標志酶是蘋果酸脫氫酶。100g1克線粒體。使剩下內膜和基質收縮；另一種是使用兩種去污劑lubrol.毛地黃苷可使完整Lubrol又可以進一步使線粒體內,用分離的電子傳遞體進行體外重組試驗。NADHNADH脫氫酶還原，但不能直b、c、aa3NADH脫氫酶也不能直接與細胞色素c起CoQb和細胞色素c1后才能在與細胞色素c起作用。用靈敏的分光光度計測出呼吸光譜的變化。測定結果表明，在呼吸鏈的NADH一端，電子aa3幾乎全部處于氧化狀態。如將O2aa3首先被氧化，其次是細胞色素c，b,依次往前推，直至使NADH氧化為止。蛋白質和N（1）含有豐富的（3）（4）既具親水性又具疏水性的a-螺旋結構，這種結構有利于穿越線粒體的雙層膜。導肽內不僅含在跨膜運送時，首先被線粒體表面的受體識別，同時還需要位于外膜上的GIP蛋白的參與，質在解折疊與重折疊的過都需要某些被稱為分子伴侶的分子參與Hsp對蛋白質跨膜運 。轉運過程是單向進行的，這是因為線粒體基質Hsp70可與進入線粒體腔的導肽交聯，其作Hsp70結合上去，這樣就防止了前導肽退回到細胞質，隨著導肽進一步線粒體腔，肽鏈會結合的Hsp70分子。Hsp70分子可拖拽肽鏈，要拖拽肽鏈，Hsp70Hsp70通過改變構象結合前導孔道融合實驗證明，導肽的不同片段含有不同的導向信息。不同的導肽所含的信息不N端帶有正電荷，含有導向基質的信息。在跨膜轉運時，首先在Hsp70的參與下解折疊為伸展狀態，然后與膜受體結合并在接觸點處通過線粒體膜。N端也含有一個額外的氨基酸序列稱為轉運肽，如捕光色素蛋白前體，它的轉運肽35個氨基酸殘基。能引導其穿過葉綠體膜進入基質，在基質中由特定的蛋白酶加工切色素蛋白整合到類囊體膜上的信息是在成熟蛋白CATP中的蛋白質，其前體NN端含有導向C端含有導向類囊質內，一次在類囊體腔中。定位于基質中的蛋白，其前體蛋白N端的轉運肽僅具有導向基1．NADHO2所接受；2.電子傳遞鏈中的載氫體和電子傳遞體相間排列，每當電子由載氫體傳向電子傳遞體時，載氫體的氫即以H+的形式釋放到內膜外，一對電子在呼吸鏈中三次穿膜運外室排放了三對質子；3.內膜對H+OH-具有不可透性，所以隨著電子傳遞過程的進行，H+在膜間隙中積累，造成了內膜兩H+F1—F0復合物進入基質時，ATPATP；5.F1—F0復合物ATP分子。6.此學說的特點是強調末的完整性。K+K+穿過內膜脂雙層進入ATP的合成卻受到抑制，而且在一定氧耗情況下，ATP的合成Stoekenius等人（1974）曾用鹽細菌做過一個很好的試驗。鹽細菌的質膜上戴有紫斑，紫pH和電梯度，按照化學滲透假說，這種梯度可用來驅動ADP磷酸化。為了驗證這一梯度是否Stoekenius當這種小泡受到照射時，ADPPiATPATP酶利用了電化學梯度使ADP磷酸化。 Q循環把第二次和第三次合并在一起。因此，細胞色素氧化酶只起電子傳遞的作用。Q細胞色素c還原酶（III）和細胞色素氧化酶（IV80S核糖體上合成的。這些蛋白質在ATP以提供能量。蛋白質運送到基質和葉綠體DNA所需的DNA聚合酶由和DNA編碼。也就是說線粒體和葉綠體的自主兩者遺傳體系的特點是它們的DNADNA與細菌的DNA相似，一個線粒體中可有一個或數個DNA分子，其時間主要在細胞周期的S期及G2期。線粒體遺傳體系的另一個特點是其遺傳有些與細胞核遺傳不共用，葉綠體DNA比線粒體DNA分子大，每個葉綠體中約含有12個ctDNA分子。其時間在G1期。葉綠體DNA中也有子、轉錄后形成多順反子mRNA，但葉綠體的系統與核系統是通mtDNA13I7個亞基，復合物III中1個亞基。復合物IV中3個亞基和ATP酶復合體中2個亞基。這些也都是粒體成酶等都是由和編碼。此外雖然線粒體rRNA是從mtDNA轉錄而來。但是組成線粒體傳系統，mtDNA就不能和表達。送到線粒體，而線粒體不輸出蛋白質，此外，線粒體與細胞質之間沒有DNARNA分子N端信號序列稱為前導肽或導向信號。線粒體前導肽也叫線粒體轉運肽，是新生蛋白質N20~80氨基酸殘基的肽鏈，引導新生肽定ATP合成有關。定位的過程是,前體蛋白在游離核糖體合成釋放之后,在細胞質分子伴侶Hsp70的班主下解折疊,然后通過N端轉運肽與線粒體外膜上的受體蛋白識別,并在受體附近的內外膜接觸動穿過內膜,進入線粒體基質.在基質中由線粒體分子伴侶Hsp70繼續維持前體蛋白的解折疊狀態.接著在Hsp60的幫助下,前體蛋白進入正確折疊,最后由導肽酶切除引導序列,成為成熟如果沒有可利用的O2,線粒體傳遞鏈中的所有組分將以其氧化/還式積累.如果突加入O2,細胞色素氧化酶中的電子載體將在NADH脫氫酶中的電子載體之前/之后變成還原/如果沒有可利用的O2，線粒體電子傳遞鏈的所有組分將會以其還式積累。這是因為來源于NADHO2，電子傳遞鏈因此而停止運轉，所O2NADH脫氫 Ca2+B.C.cAMPD. NADH-Q還原 B琥珀酸-Q還原酶C細胞色素還原酶D細胞色素氧化下列哪種不是電子傳遞鏈中的電子載體（ A黃素蛋 C鐵硫蛋 D氧化 ）不是質子遞氫體復合物 B復合物 C復合物 線粒體基質的標志酶為（ A單胺氧化 B蘋果酸脫氫 C活化磷酸二酯酶D細胞色素氧化是非題 在代謝旺盛的細胞中,線粒體、高爾基體及核仁的數量都較多（X（X）通常所有的線粒體都含有多拷貝的環狀雙鏈DNA分子（ 作業：設計一個實驗，證明NADH電子傳遞鏈位于線粒體內膜，而氧化磷酸化（ATP第八章細胞核與復習學 核質蛋白對DNA與組蛋白組裝成核小體是必不可少的。若缺少核質蛋白質，DNA與組蛋DNADNA與組蛋白間因強靜電吸引而形成非特異性結合的不溶性染色質：建起細胞核中的DNA與蛋白質形成的復合物，其基本單位是以組蛋白八聚體為核心、DNA環繞其外兩周所形成的核小體結構。他在有絲時濃縮成。內的一段特殊氨基酸序列。第一個被確定序列的NLS來自猴腎（SV40）的T抗原。成的復合物中進行的。這種RNA與蛋白質形成的復合物統稱核糖白顆粒。ALU：是人類和哺乳動物組中一組約300bp長、散在的短重復序列，此序列內常含有ALU內切酶的切點在人類組中約有50~70萬個ALU拷貝,相當平均大約每隔4kb就有一個ALU序列.ALU序列具有種屬特異性.小DNA:由幾十個核苷酸順序重復組成的一種多態性簡單序列,重復3000次之多,也叫可變數目的串聯重復順序,常用作鑒定的DNA圖譜基礎.另外發現小序列的改變微DNA：由前后排列的二、三或四個核苷酸重復單位順序排列組成的簡單串聯重復序列，串聯簇長度多為50~100bp。人類組中至少有30000個不同的微位點，呈高度結合的結構域不是拉鏈區，而是與拉鏈區相鄰的N端帶正電荷的堿性區。DNA30個氨基酸殘基的一段肽鏈中每個鋅指單位是一個DNACaDNA結合。骨架：是指中由非組蛋白構成的結構支架。骨架四周是DNA放射環；DNA放射環的根部結合在骨架上非組蛋白骨架在維持中期的基本形狀和將DNA組織成方面起重要作用。染色質Loop結構域：在蛋白質形成的軸上，由直徑30nm的螺旋管環化形成一系列Loop結構域，每個Loop結構域含有3X104~1X105bpDNA,這種結構域又稱為DNA環,端粒：端粒是線性端部的特化結構，由端粒DNA和端粒蛋白構成，端粒DNA含有短的富含G的串聯重復序列，端粒蛋白主要是端粒酶，為一種核糖白，具有反轉錄酶的性質，可保證DNA完全。端粒的生物學作用在于維持的穩定與其在核端粒酶：又稱端粒蛋白，由RNA和蛋白質構成的一種核糖白，該酶能夠識別端GDNACRN段為模版，使端粒富含G的DNA鏈按5‘---3’方向延長，從而解決端粒序列伴隨而不斷縮短的問題自主DNA序列：是中能保證DNA分子順利自我的特殊核苷酸序列，他首能在酵母中獨立于宿主而存在。根據不同來源的ARS的DNA序列分析，發現它們200bp左右的區域是ARS功能所必需的。三種DNA關鍵序列相互搭配或改造而構成的微小。B：B又稱超數，是指在有些動植物細胞中數目不等的比A小負超螺旋指DNA雙鏈的空間方向與其雙螺旋結構中兩條DNA鏈間的折疊方向相反。：多線持續過由于產物未彼此分離所致。例如，果蠅唾液腺染色 ：RNA的轉錄。別的重要形態特征之一，有隨體的稱為SAT。期結束時隨著染色質凝集，核仁，所有RNA合成停止；在有絲末期，rRNAG1完成核仁重建。這一動態過程稱為核仁周DNAI超敏感位點：指用很低濃度DnaseI處理染色質時,切割將首先發生在少數特異性位點,這樣的位點即稱為DNA酶I超敏感位點.它是活性染色質的特點,實際上,DNA酶I超敏感位點是一段100~200bp的DNA序列特異的染色質區域.RNA聚合酶在模板上滑動.限制性片段長度多態性（RFLP）:指組中特定的或相對保守的DNA序列上,由于、DNA的差異而在限制性酶酶解時產生不同長度酶解片段，通常指并不引起表型差異的遺傳多態性。在某些疾病狀態下，與疾病相關或脆性位點上的DNA正巧與某種屬間印跡：用Southern印跡法檢測某一種屬的DNA探針與來自多個種屬組DNA雜rRNA是產生核仁的部位人類rRNA位于5對的隨體內（13，14，15，21，22構與功能區域；DNA、RNA轉錄和加工在核內進行，蛋白質翻譯則局限在細胞質中，DNA是間期細胞核遺傳物質存在的形式是指細胞在有絲活減數過由染色質間是以染色質形態而存在的，染色質中的DNA分子攜帶著遺傳信息，染色質中的蛋白質負責DNA遺傳信息的組織、和閱讀，其中組蛋白是基本結構蛋白，與DNA非特異性結合；非組蛋白是序列特異性DNA結合蛋白，是重要的調控蛋白，它們具有不同的結構模式，形成不同的DNA結合蛋白。粒組分。新近比較一致的看法是纖維中心是rRNA存在的位點，轉錄主要發生纖維中心rRNA的轉錄物首先出現在致密纖維組分中，在那里加工；rRNA和核糖體蛋白裝配成核糖體亞單生,rRNA合成\加工和核糖體亞單位的裝配.即核基質，這一結構體系與DNA、表達和包裝與構建有密切關系。8條細長的纖維，向核內深入，并在末端形成一直60nm8個顆粒組成，這樣整個核質環就像一個捕魚籠養的結構。三是transporter。由上述可見，核孔復合體對于垂直于核膜通過核孔中心得軸呈輻射狀八重對：向性的親水性核質交換通道。雙功能表現在它有兩種方式和主動。雙向性表現在既介導蛋白質的入核運轉，又介導RNA、核糖白顆粒的出核轉運（1）核孔復合體作為擴散的親水通道，其有效直徑為9~10nm，離子、小分子以及直徑在10nm：和核輸出。它既能把、轉錄、構建和核糖體蛋白等到核內；t同時又能將翻RNA、裝配好和核糖體亞單位從核內送到細胞質。到目前為止已鑒別的DNA結合蛋白基于他與DNADNA結合蛋白中最大的一類是具有折疊成螺旋-轉角-螺旋域（Helix-turn-helix,HTH）的氨基酸序列。HTH域稱為同源域，而編碼HTH域DNA結合時，形成對成的同型二聚體結構模20a螺旋-轉角-a螺旋結構，兩個a螺旋相互連接構成βa螺旋為識別螺旋，第二類NA與Zn2.每個鋅指單位是一個DA結合結構域由其C的a螺旋負責與DA結合轉錄因子TA和SI—.第三類DNA,在每35個氨基酸殘基形成a,每兩圈(7),,在a,兩個蛋白肽鏈的.與DNA,而是與拉鏈區相鄰的N真核生物啟動NA和活NA成的轉激活物屬這類NA結合蛋白如,Mc、os和。第四類屬于螺旋-環-螺旋結構域（helix-loop-helixmotif,HLH）,這一結構模式廣DNA結合中。HLH40~50個氨基酸組成兩個兩性a螺旋，a螺旋中間被一個或幾個βa15~16個氨基酸組成，并含有幾個保守的氨基酸殘基。具有疏水面和親水面的兩性a螺旋有助于二聚體的形成。A螺旋鄰近的肽鏈N端也有帶正電荷的氨基酸堿性區與靶DNA大溝結合具有螺旋-環-螺旋結構的蛋白成員之間形成同源或異DNAa螺旋的二聚體不能牢第五類具有HMG框基序（HMG-boxmotifa螺旋組成boomerang-shapedDNADNA、促HMGSRY屬于這類蛋白質。富含Arg、Lys等堿性氨基酸DNA序列相結合 在增殖的真核細胞中，對于DN段的增殖、維持和正確分配需要什么特殊的DNA序任何DN段增殖和維持需要一個或多個的起始位點和特殊的末端，即端粒。復制位置起點是特殊的DNA序列，在此起始DNA的。端粒是保護線形末端，以分子就能平均分配進入子代細胞。因此上述三種DN段被稱為DNA的三種功能通過加上自主序列、端粒和著絲粒，任何DN段都可被構建成人工。大量的酵母人工以此方式被構建。這些人工最小尺寸似乎約為100000堿基對。‘TTGGGG3此蛋白質部分以該RNA的一段作為模版反轉錄為端粒的重復DN段）構成。進而延伸出端粒的一條鏈，與此鏈互補的另一條鏈是由DNA聚合酶以此鏈為模板合5RNA引物被外切核酸酶消化。端粒酶通過其所含的AAACCCCAACUA55‘TTGGGG3作為新的引物其作用。這個多段能形成非Watson-Crick堿基配對。即形成A=T和G=C什么是常染色質和異染色質？在DNA和表達的過，他們的作用是什么？在哺乳動物中，雌性動物的細胞有兩個X，而雄性動物中的細胞中有一個XX常被稱為Barr體，由于像大多數那樣高度濃縮，Barr體上的幾乎不被表達。對于細胞具有一個高濃縮X，一個可能的解釋是，這是為了保持雌性細胞中試述從DNA到的包裝過程在真核細胞內，DNA與蛋白質等構成的包裝過程如下：由直徑為2nm的DNA與組蛋白八聚體結合構成核小體，在組蛋白H1的介導下核小體彼此連接10nm0m10nm630n，內徑10n，距1nm的構。螺管是的級結構。這兩級構目前取得一致的看法對30nm螺線管何進一包裝成尚有同意見極螺線型認為0.4。而骨-放射結構模認為，線管進一包裝成時時形成超螺線管而是形成DA，每18個放射狀平排列，合在核質上形成微帶。帶是高級構的單，大約16微帶沿縱購建成。（1）（2）活性染色質的4種組蛋白雖然以常量存在。但是與非活性染色質相比較，活性染（3）（4）H2A在許多物中包括果蠅和人的活性染色質中很少有變（5）HMG14HMG17DNA10個核小體中有一個核小體是與HMG14和HMG17DnaseI100~700bp的DNA序列特異的染色質區域，它在啟動子附近，并與啟動子功能有關。，，，折疊或凝聚狀態的異染色質中表達是不活躍的。真核生物可以通過異染色質化關閉些的表達。在間期核中，伸展和疏松的常染色質部分是轉錄的的部位。DNaseI超敏位另一個特點是其DNA分子上具有低水平的甲基化的非活化狀態可能是由于染色質上的起始位點被甲基化所造成。染色質中組蛋白八聚體的N-端都在核小體之外，某些特殊的氨基酸殘基會發生乙酰化、甲基化、磷酸化和ADP和糖基化等修飾。這些修，，由復雜的DNA序列和特定的蛋白質共同構成了著絲粒。發育的面包酵母的著絲粒長度約為220個堿基對，并且通過多種與其余DNA結合組蛋白有明顯區別的蛋白質共同保護其免受索債原因。著絲粒的220對堿序兩側是限制性內切核酸酶敏感位點，該位點的功能也許DNA的斷裂，有助于染色單體在后期的相互分離。染色單體分離所必需的（8個堿基對長90%的A=T堿基對構成，它是微管與動粒結合所必需的（85個堿基對；第三個是微管與動粒結合所必需的。40000——80000之間。這些著絲粒由與有絲和減數著絲區域有的蛋白復物稱為動。動粒紡錘體管束結240~60nm內層與2530nm4~60nm外層他與微的末端連微管貫這三層粒通過用處理間細胞可動粒從離在多數較級的真生物有1~35個微與一個粒的外相連例15酵母人工是20世紀80年代后期發展起來并于1990年底逐步完善的大片段外源DNA克隆體系是用具有完整著絲粒端粒和自主序列功能的DN段組成的人造。YAC載體中除含有酵母4號的著絲粒和自主序列成分以及來自四膜蟲的可用作端粒的序列之外，還有從轉化酵母菌群中篩選含YAC的酵母菌株時使用的選擇標記URA3、TRP1和SUP4。SUP4為TrptRNA的一個赭石突變抑制。在ade-2赭石突變宿主中，沒有外源時，抑制表達，受體菌為ade+,形成白色菌落；外源時，抑制遭破壞，為ade-,形成紅色菌落。URA3TRP1YAC的左右兩臂。這樣只YAC的受體菌才可以在選擇培養基上形成赭石色菌落。YAC載體上的外源DN 段通常可達200~1000kb,甚至并能在酵母中穩定， 具有與天然酵母一樣的穩定性。因此，YAC技術現在已成為構建復雜組文庫的有力和最好體系。YAC克隆成為組結構分析和 要確保在細胞世代中的穩定性必須具有ARS、CEN和三種關鍵序列已有證明，核仁FC中的染色質沒有組蛋白，也不形成核小體（V）在間期不解凝聚的DNA異染色質在間期不解凝聚的X（Barr體以螺旋-轉角-DNA結合的和決定一個動物節片特征的DNA結合蛋白質（同源編碼某些DNA結合蛋白質螺旋-轉角-DNA（同源框胞骨7nm的骨架纖維，參支架是指中由非組蛋白構成的骨架，與高級結構有關，DNA放射環的纖層由1~3種核纖層蛋白多肽組成。核纖層蛋白是中間纖維蛋白的成員。學了解核基質、支架和核纖層的構成概況以及它們之間的關系（考核內容）核基質的功能以及支架與結構的關系。核基質的構成、功能以及與支架的關系。細胞骨架指真核細胞中的蛋白纖維網架體系。細胞骨架概念有狹義和廣義之分。狹義7nm的骨架纖維，是踏車現象指像微絲、微管這樣的極性細胞結構，在一定條件下，表現出在其一端因加鬼筆環肽是一種由毒蕈產生的雙桿肽與微絲有強親和力作用使肌動蛋白纖定，FG肌動蛋白結合，熒光標記的鬼筆環肽可清應力纖維是真核細胞內廣泛存在的由微絲束構成的較為穩定的纖維結構。電子顯微鏡觸相連，另一端則到細胞質中的另一個點狀接觸或與中間絲結合。應力纖維在細胞胞質環是有絲末期，兩個即將的子細胞之間產生的一個收縮環，他由大量平行排列的微絲組成，是末期胞質中肌動蛋白裝配成的。他在胞質過起重要作用，在胞質完成后，此收縮環即。阿米巴運動指像變形蟲或哺乳動物的吞噬細胞那樣，在運動時，不斷地伸出和收回長變皺膜運動體外培養的脊椎動物的成纖維細胞在基質表面的位移，過去一直認為是阿24nm，微管組織中心指微管在生理狀態或實驗處理解聚后重新裝配的發生處。它不但決定微(10nm)介于粗肌絲和細肌絲之間的一種纖維結構,其成分比細胞核骨架是存在于真核細胞核內的以蛋白質成分為主的纖維網架體系，細胞核骨架。骨架指中由非組蛋白構成的結構支架。骨架四周是DNA放射環；DNA放射環的根部結合在骨架上骨架的功能是在維持中起的基本形狀和將DNA組織成方面起重要作用。。年，Klotzoff提出了細胞骨架的原始概念。40年代后期，有人從原生質膠態轉變的現象推測，在細胞質可能存在著一種蛋白質纖維的網架。1954年，在超薄切片的電鏡觀察中首次看到了微0~4℃固定材料，這使得骨架系統的特異性藥物的應用等技術也提供了可貴的資料。近年來發展的增強反差纖維鏡技術是將微分顯微鏡、相差顯微鏡或熒光顯微鏡獲得的圖像經放大提高亮度后，用高靈敏度機攝動同樣樣能改細胞的狀。動胚在其形態生過，有80微米/秒。經研究發現，在外質靠近內質的一側存在有大量平行B1h內胞質環流便停止;當B后,胞質又恢復了環流.而用秋水仙素處理時,胞質環流不受影F肌動蛋白的凝膠和溶膠狀態之間的相互轉變有關。a2的連接成網架使外質凝膠狀；一種是凝膠蛋白屬戴帽蛋白，當a21X0-6oL并結合斷絲的端而其組從而微絲架的黏下降a+TPa+濃度調節在低a+濃度絨毛白可使絲成束，而高a2濃度下a+10Ka蛋,1的TP,.向連接。的點狀接相另一則細胞質的另一點狀接觸與中間結合a胞質。在有末，核完成后在將分離的2個子細之間絲平行列而成收縮環在胞質始臨時形，束后很快便的一種時性結該過十分快成所時間均為na輔肌蛋白與其外質膜相，因此逐漸收，形成，使細一分為二。-GTPase通過與多種靶蛋白相互作用，對的表達和粘著等其他細胞活動的（1：4ATPMg2+、Ca2+時，肌球蛋白復合物發生收縮，可縮短1/3，ATP隨之水解成ADPPi.5個步驟：電位沿肌膜傳到肌纖的小系統。橫管兩側肌質Ca2+的釋放。在肌肉處于舒張狀態時肌漿中的Ca2+濃度極低10-7~10-8mol/L，這一濃度不足以引起肌肉收縮，肌質網端池中Ca2+濃度可a2a21-~10-5oL，10-6oL2狀態，一旦TnCCa2+，立即引起肌球蛋白分子發生構象變化，三個亞基彼此緊密靠攏，TnC亞基同肌動蛋白的連接減弱，并肌動蛋白上的原結合部肌球蛋白合物的成。由原肌球白的位，肌動蛋白出部位TP使TP分解為ADP和ADP和i,頭,而向著M,肌球蛋白釋放了DP和i產物后,可與另一個TP,.,.每一次滑動消耗1個T移動10n,5~100次循環,如無TP供應,,.死后TP耗盡之故,肌球蛋白結合ATP后,可分為兩種狀態,起先處于低能狀態.ATP水解后,則處于高個橫梁的活動是密切配合的.肌纖維收縮最充分時,65%.(5)Ca2+的回收.神經沖動傳導后,肌質網的透性降低,Ca2+-TP酶與肌漿中的Ca2+結合,利用水解ATP釋放能量,通過主動方式,把Ca2+又抽回到肌質網腔中.10-7mol/LCa2+，同肌質43個鈣離子，從而降ATPATP的備用量不足以維持長時間肌肉收縮活ATPATP得到補充。ATP水平既要下降，這時通過一系列反饋過程，調節呼吸和糖酵解的速率，加ATPATP50100米短跑時不要求呼吸，而Hα和β11～120KdpH6.4℃37℃0℃GTPMg2+和Mg2GTPMg2+和βGTPTPGPGTPGDP管的裝。內質具有鈣離子功。內質網泡釋放回收鈣離子可部胞基質鈣離子濃度，釋鈣離子時局部細基質，α和微管蛋白形成管蛋白聚體；二聚體彼此首相，形成雙環螺旋13根原在有一性微管結，如纖和毛等。h體是主的微管織中心但非所有微組織中都有中心體，小鼠細胞的錘體中根本鑒不中心體的在，盡在發的生長夜具有極性。經研究發現，微管的生長是通過向其遠端（遠離MTOC的一（+極，微管的延長主要靠在“+”極組裝GTP微管蛋白。由于微管在結構和生長上 （+GTPGTP，軸質為快速的速度為100~400mm/d。與膜更新有關的蛋白質如軸突，性，可沿管“+端向“”端移，為膜和胞器的胞和毛運動提38Kda80mTP酶，可沿管由“”向+”端動，在內物質中具有要作用。由于動力蛋白和動蛋白微管的動方向反因注膜泡或細器等的也具有兩個方向即動力白街道膜泡或胞器是原中心體一端（）向近中心體的一端（—）運，而動蛋白導的由近中心的一端-）遠中（+。998年N.Hrkwa74Kd中等鏈、554KDP150P135、動態蛋白、肌動蛋白相關蛋白1-肌動蛋白短絲及錨蛋白-血影蛋白網同被膜泡或細胞器膜上的受（1）根真核細胞的鞭毛由9+2的微管束構成即兩個一組的9組微管圍繞在，中心喲一對微ATP酶活性的是一個被稱為轉運的過程，整個過程是由ATP間接功能的。（2）RNA和組蛋白被抽提，最終核內呈現一個驚喜發達的核骨架網絡（4）結合非樹脂包埋-去 C紫杉 鬼筆環Ａ 蛋白質和ＤＡＣＲＮＡＤ（DA冰凍蝕刻電子顯微 C暗場電子顯微鏡技 （ABD Aa-輔肌動蛋 細絲蛋 6.下列有關核基質敘述正確的是RNA和驅動蛋白介導小泡向微管（+）端運動（VCa2+對于微管裝配是必須的細胞遷移和運動時，片足中的actin纖維比其他部位更為有序，微絲的爭端與細胞運動（X軸突頂端運向胞體；二是驅動蛋白，介導小泡由胞體運向軸突頂端。幾乎所有細胞均有中間纖維蛋白表達，但其表達具有嚴格的組織特異性；中間纖維蛋白表達的組織和發育調節主要在轉錄和轉錄后水平。14第十一 細胞增殖及其調控復習G1期、S期、G2M在一個細胞周期中，DNA只一次，發生在S期。在M期，的DNA伴隨其他M細胞在成熟過發生減數。其特點是，DNA一次，然后發生兩次連續的有絲，導致最終生成的子細胞中數目減半。減數I的前期I時間長，過程CDK8CDKCDK1CDK8。CDKCDK蛋白。周期蛋白為其調節亞單位，CDK蛋白為其催化亞單位。周期蛋白也有多種，在哺乳動物細胞中激酶在細胞周期中期調節作用的時期不同。CDK激酶通過磷酸化其底物而對細胞周期進行調控。CDKCDK激酶及其直接活性調節因子外，DNA起始調控是近十年細胞周期調控研究中的又一大進展DNA起始并不僅僅是在G1期末的起始點處才決定的。早在G1期開始時，許多與DNA有關的物質即已表達并與染色質結合，開始了DNA的起始調控。目前已經知道，Orc、Cdc6、Cdc45、Mcm等蛋白參與了DNA起始調控過程。這一調控過程也需要某些CDK激酶參與，尤E-CDK2激酶。后期促進因子APC的發現是細胞周期研究領域的又一重大進展。到達中期后，周細胞由中期向后期轉化。APC的成份至少分為8種，分別稱為APC1—APC8。APC活性也受到多種因素的綜合調控。其中Cdc20為APC有效的正調控因子。在中期之前，解除對Cdc20的抑制作用，促使APC活化，細胞除核外，還要進行胞質。至本章的學細胞周期指連續進行有絲的細胞從一次結束開始到第二次結束位置的S期檢驗點、G2期檢驗點、紡錘體裝配檢驗點等。轉。Cdc的產物是一些蛋白激酶、磷酸酶等。這些酶活性的變化將直接影響到細胞，，G1期時開始，S期時了的中心體并不分開前期，一對中心體開始分離，，中心體列隊:中心體分離時，負向運動的動力蛋白在來自姐妹中心體的胃管之間搭橋，成熟促進因子（MPF）又稱細胞促進因子或M期促進因子，是由細胞周期蛋白與M期。CDK結合。不同的周期蛋白框識別不同的CDK，組成不同的周期-CDK復合CDK激酶活性。CDK激酶：是細胞周期中的調節分子，但在發揮作用時，必須與細胞周期蛋白結CDK結合不同的周期蛋白形成不同的復合體，通過使用專一靶蛋白磷酸化的方起始點識別復合體：指從酵母細胞到哺乳類細胞中普遍存在的識別DNA起始6個亞單位組成。對細胞核染色質DNA“執照。在M期，細胞核膜破裂，胞質中的執照因子與染色質接觸并與之結合，使后者獲得DNA所必需的執照。細胞通過G1期后進入S期，DNA開始。隨著DNA的進行，執照信號不斷減弱直至。到達G2期，細胞核中不再含有執照信號，DNA結束也就不再起始了。現在已經發現，Mcm蛋白。zygDNA：即偶線期DNA。指減數前的間期，DNA的是不完全的，仍留下有0.1~0.3I的偶線期才合成。而且這部分DNA在偶線期轉錄活躍，故得名。ZygDNA由5000~10000個小片段組成，分散存在于整個組1000~5000bp。細胞周期時間的長短可用脈沖標記DNA和觀察細胞指數的方法來測定。這里以體3H-TdR短期飼養細胞，數分鐘至半小時后，將3H-TdR洗脫，置換新鮮培養液并繼續培養，隨后，定期取樣，做放射自顯影觀察分析，從3H-TdRS期的細胞均被標記，MM期的標記細SM期細胞開始G2期時間（tG2）.從被標記的MM期細胞總（tM50%50%，所經歷的時間為S期（tS。從被標記的M期細胞開始出現并逐漸，到被標記的M期細胞再次出現，所經歷的時間為一個細胞周期的總時間（tC。TCtG2、tMtStG1。M期細胞一段距自每一的極性管蛋白在胞中相每個上都具有紡錘絲的附著點——動粒。一個約400nm長的暗染多蛋白DNA具有微管組織中心。在將要進行有絲的動物細胞中，每個MTOC中具有一MadBubMad2BubMad1Bub1蛋白很快會從動粒上。一側的動粒被微管捕獲，一側的Mad1和Bub1；兩側的動粒都被微管捕獲，兩側的Mad1和Bub1都如果動粒不被微管捕捉，則Mad1和Bub1不從動粒上。因而認為Mad1蛋白和Bub1蛋白與裝配入紡錘體有關。，，，，。，在各種相關因素的共同作用下。紡錘體赤道直徑逐漸收縮，兩極距離拉長逐漸向赤拉力越大，當來自兩極的動力微管的拉力相等時即被穩定在赤道板上。外推假說認為向赤道板方向移動，是由于星體的排斥力將外推的結果距離中心越近，星體對外推力越強，當來自兩極的推力達到平衡時即被穩定在赤道板，，，，。，。胞中平均分配的先決條件列隊不整齊，細胞不能從種氣象后期轉化，兩條染色。成。側成分的外側則為配對的同源。聯會復合體的成分寬約100nm，側成分寬II有 減 前期，無聯會發生，單個存在，前期I，有同源聯會，形成四分體， 中期，每個單獨排列到赤道板中期I，四分體排列到赤道板后期，著絲粒，染色彈體分離后期I，著絲粒不，同源分離結果是子細胞中的數目與親代結果是所得到的子細胞中數目 MPF即卵細胞促成熟因子，或細胞促因子，或M期促進因子20世紀70年代就開始了對MPF的研究。最初觀察到蛙胚胎早期發育時，細胞質中出現生化分析表明，MPF蛋白依賴性激酶`B.CDK的基礎成員是一些通源編碼的34KD的蛋白質，是裂殖酵母cdc2和釀酒母的cdc28產物的同源物。在酵母細胞周期中僅由一種CDK控制，釀酒酵母為P34cdc2,33~40KDaCDKG1G210MPFB。MPFH1G2/MM、G1→S→G2→McdcDNAMMDNADNADNA損傷即產生信號將細胞周期阻斷在G1期或G2期，誘導修復的轉錄等。如DNA損傷G1SG2期進入M引起的突變和損傷DNA的引起的高頻率重排在哺乳動物中一直有幾種因子在DNA損傷檢驗點起作用，如P53和CDK抑制因子P21等。又如，S期DNA為完成時，復合物內的結構和為的DNA可以發出信號以組織細胞進入M期，已知當細胞從MM極的紡錘斯正確組裝通過動粒附著在紡錘體上、正確附著的不許排列在赤道、（1）G1期，一般認為，在調節細胞生長中，G1期存在一些關鍵事件，特別是與DNA合RNA和蛋白質合成。雖然現在G1DNA合成啟動有關的事件已有部分被揭示。如①在釀酒酵母的細胞周期前進過，Cln1,Cln2和Cln3G1Cdc28蛋白結合形成具有蛋白激酶活性的復合物，相互協調配合，通過影響轉錄水平，作用于G1期向S期推進。當細胞進入S期時，含量也隨之下降②在高等動物，G1期的周期蛋白是cycinD1、D2|、D3，cyclinED1可能使外界信號CDK4CDK6CDKPRBE2F，促進與S期啟動有關的基G1期檢驗點，而后降解。cyclinD2、D3結構與D1D1之CDK4、CDK6CDK2G1期。D2、D3在缺乏生長因子時也可表達。克服細胞在缺乏生長因子時引起的分化或凋亡。cylinDG1期末降解。cyclinC在G1中期合成達，與CDK2結合，參與G1/S轉換。cylclinE在G1中期合成，G1晚期達，與CDK2結合，是G1/S過渡必需的調節者，推動細胞通過G1/S過渡，并SDNA副職，在S期初被降解。P53G1DNA的損傷，使帶有損傷的DNA的細胞停止在G1期，防止損傷的DNA進行和產生突變或重排現象。P53可能是通過刺激編G1DNA損傷被修復。合成，以及新的一套蛋白與DNA包裝為核小體等染色質結構。（SPFcdc28G1期cyclin-Cln1、2、3組成，他們驅動細胞通過“Start”S期。其具體過程是：當細胞進入早G1期時，cdc28-Cln3刺激CLN1和CLN2轉錄，其產物增加，后分別與cdc28結合成復合物，共同促進細胞通過“Start”S期。在釀酒酵母中有兩個MCBMCB結合因子，它可以活化一系列為DNA和托揚核苷酸合成所需要的蛋白的轉錄。另一個是與細胞CCBFCCBFCln1Cln2基因上有活化序列中。因此，CCBFCLN1CLN2的表達密切相關。在高等動物中，表現SPFCDK2-cyclinE和CDK2-cyclinA.RB蛋白、P107E2FRB蛋白磷酸化而釋放出E2FG1期向S期過渡時為合成dNTP和DNA所必需的多種酶蛋白的上游調控序列中含有E2F結合位點所以，E2F的活化可使S期所需的多種酶蛋白轉錄導致DNA和S期進行CDK2-cyclinE激酶活性在G1/S過渡時大峰值，DNA啟動后，CyclinE被降解。而當細胞從G1期向S期轉移時，CyclinACDK2-cyclinA復合物。CDK2-cyclinA也作用于S期，CDK2-cyclinADNAcyclinADNA的合成。在體外，CDK2-cyclinA可使DNA因子RF-A磷酸化而活性增強，因此，CDK2-cyclinA在SSPFG2cyclinAG1/SCDK活性抑制因子的降解過程，只有類似抑制因子被降解后，SCDK才能表現出活性。在釀酒酵母中，cdc34蛋白具有連接泛素特性的酶，ScDKP40sic1S期CDKG1/S的轉換。細胞還存在一系列檢查DNA進程的機制，DNA不完成，細胞周期便不能向下一階段轉移。因為DNA尚未完成時。M期CDK激酶活性就不能表現出來，在非洲爪蟾中發現，在S期，cdc25c的活性比較低，而Weel的活性則較高。WeelCDK1的Thr14和Tyr15Cdc25cCDK1Thr14Tyr15CDK1S期中加過量的cdc25cDNAG2M期轉化。但目前還不知道cdc25cWeel的活性戶和調節的。那么我們可以不難看出，在S期的啟動與行進中需要很多包括酶蛋白在內的多種蛋白質的（3）G2期。這個時期主要與細胞進入MM期的凝集和有絲紡錘體的形成與發揮作用等。微管蛋白合成開始于S期，完成于G2期；cyclinB在SG2P34cdc2結合，在有關酶MPFG2/MM每個時期都發生著特定的事件。M期有雙重任務，既要把一個細胞分成兩個子細胞，又要將兩套準確軍等地進行分配。此期的主要周期蛋白是cyclinB，包括B1、B2和B3，B3B1B2，B1b2A稍晚，含量逐漸增CDK1G2/MCDK1Thr14和Tyr15磷酸cdc25c的作用下被激活后，MPF可使許多蛋白磷酸化，其中包括組蛋白H1、核纖層蛋白A、B、C，核仁蛋白、P60csrc、C-abl等。組蛋白H1磷酸化，促進細胞運轉到中期后，M期周期蛋白迅速降解，CDK1激酶活性喪失，上述被CDK1激酶磷酸化的蛋白去磷酸化，細胞周期便從中期向后期轉化。cyclinAcycliinB的降解是通20S20S蛋白酶復合體為后期促進因子（APC。APC8種成分組成。MCDKAPC活性其調節作用。實驗證明，在體外，APCMCDKAPCMPFAPC則可被磷酸化酶作用所失活。其次發現，cdc20為APC有效的正調控因子。Cdc20主要位于染色體動粒上，為姐妹染色單體分離所必須。APC活性亦受到紡錘體裝配檢驗點的檢控。紡錘體裝配不完全，動粒不能粒微管所捕獲，APC則不能被激活。目前已經知道，在紡錘體裝配完成后，動粒全部粒微管不惑，Mad2從動粒上，對cdc20的抑制作用被解除，促使APC活化，降解Mcyclin,MPF活性喪失，細胞由中期向后期轉化，姐妹染，后期結 ，如果在S期時真核細胞DNA超過一輪，則最后得到的細胞每個有多個拷貝，這DNA開始一輪后DNA的開始為了解釋這一現象，20世紀80年代末由JunlianBlow和RonLaskey通過實驗DNA的執照因子學說，意思是在細胞質中存在一種執照因子，對細胞核染色質DNA“執照。在M期，細胞核膜破裂，胞質中執照因子與染色直接觸并與直結合，是后者獲得DNA所必需的執照。細胞通過G1期進入S期，DNA開始副職。隨著DNA地進行，執照信號不斷減弱直至。到達G2期。細胞核中不再含執照信號，DNA結束也就不再起始了。隨后研究又取得了突破性進展，現已6、7。在細胞中除去任何一種Mcm蛋白，都將使細胞失去DNA起始的功能。除Mcm細胞融合試驗：S期細胞與G1期細胞融合可誘導G1期細胞DNA提職，而G2期細胞與G1期細胞融合則不能誘導G1期細胞DNA提前，使DNA每周期只一次的機理周期蛋白不僅是酵母DNA起始所需的，還是DNA延伸所需的，因為DNA延伸需要DNA聚合酶δ-G1期周期蛋白的去磷酸化作用或通過泛素系統使之破壞將幫助DNA限制到每一個細胞周期一輪。SPFMPF的主要差別是什么？ABB象，早熟，則證明有MPF的存在。G2/MMPF的完全激活。P34cdc2B結合，形成的MPFWeelmiklP34cdc2Tyr15和Thr167磷酸化，MPFCdc25Tyr15位的磷酸脫去，形成MPFM期。由此看來，Tyr15位的磷酸化起抑制作用，Thr167磷酸化起激活作用。1靠近1末期2（靠近21關卡測細胞小和境。如條件適就會激發DA使控制統向前移動2關卡控制統檢測胞大小狀以及DA是否完在中關卡控制系統測所有是都與紡體相連排于赤道板，檢測F是否活，否則不能進有絲和胞質。將處于期的細胞與處于其他周期階段的細胞融合期的細胞質總是能誘導裂期的細胞中的發生凝劑，這種現象稱為棗樹凝劑。該現象說明M期的細胞中存 C.微管和微絲都被破壞，使細胞不能D.姐妹染色單體分開，但不向兩極移動A.末 B.中期C.后期D.前 E.間A.前期 B.間期C.后期 D.中期 A.G1期B.S期C.G2 D.M當細胞進入M期后下列那些現象不發生？(B B.組蛋白H1脫磷酸化C.核膜、內質網和高爾集體D.紡錘體形成細胞周期的長短取決于（AA.G1期B.S期CG2期D.M晚G1期和早S B.晚G2期和早MC.晚G1期和晚G2 D.晚M期和晚SA.G1 B.S C.G2 D.MG1期B.S期C.G2 D.MCdc2的產物是（細胞周期蛋白 細胞周期蛋白依賴性蛋白激酶細線期B.偶線期 D.雙線如果將一個處于SG1期的細胞融合，那么G1期細胞核將會進入S S期細胞核將會進入G1C.兩個核均進入G2期 減數I前期，同源間發生交換出現在交叉之前減數I中著絲粒未S期，整個DNA（V）在早熟凝集試驗中G1期的呈現細線狀G2期是雙線狀而S期是粉CDK/聯會復合體出現于偶線期，于雙線期真核生物細胞周期分為G1期S期G2期MMPFSPFP34cdc2B組成，P34cdc2與周期蛋白A組成.P34cdc2,APC至少有8種成分組成構成APC各成分在間期表達。M期CDK激酶是APC有效的正調控因子，APC的活性也受到紡錘體裝配檢驗點的第十二 細胞分化與表達調控復習。；基本機制差異表達主要是在轉錄和轉錄后加工水平上實現的。多細胞有機體在其分化的影響；細胞與決定卵細胞質的不均一性對細胞分化的影響；細胞間的相互作用。；相同的（。癌是控制細胞生長和的正常原癌）的一種突變形式，能引起正常細胞癌變，喪失其細胞增值的負調控作用，則導致細胞失控而過渡增殖是一種典型的老年性（。mRNA轉錄物被加工為能翻譯一個能編碼兩個或多個相關蛋白質，產生蛋白質多樣性，這是在RNA加工水平上調節mRNA是否真正得到翻譯，如果能得到mRNAmRNA的細胞質定位，mRNA翻mRNA穩定性的調控等。學概念 組合調控是細胞分化的可能的調控方式即每種類型的細胞分化都是由多種調控但白宮同調控完成的，這樣，如果調控蛋白的種類為n，則其調控的組合在理論上就可以啟動分化的細胞類型為2，從而保證了少量調控蛋白啟動為數眾多的特異細胞類型的分化差別表達指各種細胞各有特定的一組進行表達的現象，這是細胞分化的實質。的差異表達不僅涉及到轉錄水平和轉錄后加工水平上的精確調控而且還涉及到DNA水平，翻譯和翻譯后加工與修飾水平上的復雜而嚴格的調控過程。 決定子指影響細胞想不同方向分化的細胞質成分。現已確定，決定子是RNA性 多能性細胞具有分化出多種細胞的潛能，但此時的細胞已失去了發育成完整的潛成蟲盤果蠅胚胎表皮在一定部位內陷形成一些未分化的細胞群，是成蟲的原基敲除造成內源的敲除是利用DNA同源重組原理進行打靶。最早也是最胚胎干細胞是指從卵開始成4個細胞階段的全功能未分化生殖細胞由于指真核生物組中一組來源相通、結構相似、功能相關的，他們在簇由上相鄰近的一組相同或相關的所組成的結構，也成串連重復基因，如rRNA、組蛋白等。管家對所有類型組織細胞在任何時候都需要其表達的，成為管家或看需的酶，DNA、修錄過程所必需的因子的，還有其他一些分子伴侶的奢侈又稱為組織特異性，指在不同的細胞類型中特異性表達的，其產Hox是含有同源異型框的哺乳動物細胞簇，它與早期胚胎發育和形態同源異型突變又與含有同源異型盒并負責生物體定向發育的發生變化導致原癌指真核生物組中與反轉錄所攜帶的癌相對應的正常，招募因子卵細胞后，其中的隱蔽mRNA很快被激活，蛋白質合成急劇增加。由mRNA形成的情況下發生的，因此人們推測，嵌合體指由兩個或多個具有不同型胚胎合并，并發育成的完整。嵌合體反轉錄子RNADNARNA后，在經反轉錄成為DNA并組的新位點上。經元細和骨骼細胞在體的整生過始保持著定分化狀態而不去分化行黑色細胞在外培養0多代后仍合成色素顆粒因此，分基本上不可逆，育亦是可的。很多植組織或胞甚至生體都已被培成了植。對于哺發育為，可轉化其他類的化細胞，人皮膚底細胞在缺乏維生素AA1）（3）性的mRNA，從而合成了組織特異性蛋白質。大量的研究表明，差異表達主要是在轉轉錄水平調控是現差別達的重環節。方的很，例如在人發育的不階段表不同的蛋白，從而成同的血紅白；在蟲發育的不同段多線上同的帶成巴氏，而展示出特定的表達譜；在用DaeI降解，來自雞細的色質，則使β珠白基因而使卵蛋白被降解說明這種這種不同細中確實在轉錄水平上在著差。發育按順序關機制目前不清楚但有一些線如和雞紅胞中合珠蛋白核酸序列幾全部為基化而在不產珠蛋白細胞中這些是高度基的；在早發育中胚胎肝細胞產血紅蛋，紅蛋白是未基的；而到體時，些基因的DNA列發生甲基化從而展出DNA嘧的甲基化的性有NARNA聚合mNAmRNANADA則合成骨髓的mRNA。從而說明，特異的非組蛋白可能決定著相應的特定轉RNA的轉錄后加工在差異表達中起重要作用。多肽鏈氨基酸序列信息的直DNAhnRNA80%10%mRNA結合。這些都說明不同組織中轉錄的hnRNA是一致的差異表達并不都是由于差別轉表達的鑒定分為兩個水平一是在轉錄水平上對特異mRNA方法有Northern雜交、mRNA差別顯示和mRNA體外翻譯等；二是在翻譯水平上對特異蛋白的鑒定，主要方法WesternMyoDMyoD中，有一種關鍵性調控蛋白稱Ey(果蠅)或Pax（脊椎動物。如果將果蠅的ey轉入早期發育中將在發育成腿的細胞中表達。結果ey的異常表達最終誘導產生構成眼的不同類型細胞的有序三維組合。在腿的中部形成眼。顯然Ey蛋白除了能啟動細胞某種特異的 ，結構紊亂，癌細胞中微管變短，排列紊亂，微絲亦發生結構異常，SrcP60SRC發生擴增或缺失已不呈整倍性，且常出現片斷、雙小等；質膜結，什么是癌，據統計，人類患者中約有15%是由腫瘤引起的。腫瘤中有DNA，也有RNA，研究有一定的，這是由于后有很長的潛伏期，有的甚至，DNA的起始癌蛋白正常細胞調節并不斷發出信號激起表達和越過細胞周期。干細胞可根據形學特征存在位來辨認果蠅的和外周經系統細胞15是點。被其他取代了，如果蠅的同源異型的觸角Antp的突變，導致果蠅的一對觸角同源異型中有一段高度保守的DNA序列稱為同源異型框，最初是通過對果蠅的同源異6060已發現的Hox的產物基本上都是轉錄因子，同源框的蛋白質產物呈螺旋-轉角-螺，Hox大多在上串聯排列成簇之間的距離很近，其線性排列順序可能與各自而位于3’端的Hox在接近頭部體節中表達。，同源異型表達的產物蛋白為同源異型蛋白，由5個結構單元所構成：NMSSLYYXN45個氨基酸殘基；同源框，即位于同源盒N端的保守五肽IY;了植物和動物的體細胞都具有全能性。成紅細胞是一種失去了分化能力的終端分化細胞從細胞水平上說，表達的調節起兩種作用：一是維持細胞的功能，二是導致細細胞質有關，而細胞核對細胞分化似乎沒有能力。應用mRNA差別顯示技術、DNA轉分化往往需經歷去分化和在分化過程。轉分化與再生現象說度分化的細胞中