1、關于離子交換層析技術第一張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月第一節 基本原理與特點離子交換法：利用溶液中帶電粒子與離子交換劑之間結合力的差異進行物質分離的操作方法。帶電粒子與離子交換劑間的作用力是靜電力。 電荷密度、電荷種類2第二張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月離子交換劑離子交換劑：由惰性的不溶性載體、功能基團和平衡離子組成。陽離子交換劑：平衡離子帶正電荷。陰離子交換劑：平衡離子帶負電荷。R-X+ + Y+ R-Y+ + X+R-表示陽離子交換劑的功能基團和載體；X+ 為平衡離子；Y+為交換離子。 3第三張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月吸附選擇性吸附：調節溶液的

2、pH值，使目的物帶有相當數量的靜電荷，而主要雜質離子帶相反電荷或較弱的電荷。選擇合適的樹脂（如陽離子交換樹脂），便可使目的物被離子交換樹脂吸附，而雜質較少被吸附。 4第四張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月洗脫（1）調節洗脫液的pH值。（2）用高濃度的同性離子將目的物離子取代下來。對陽離子交換樹脂而言，目的物的pI值愈大（愈堿），將其洗脫下來所需溶液的pH值也愈高。 5第五張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月離子交換樹脂吸附和洗脫過程6（1）X+為平衡離子，YH+及Z+為待分離離子；（2）YH+和Z+取代X+而被吸附；（3）加堿后YH+失去正電荷，被洗脫；（4）提高X+的濃度取

3、代出Z+第六張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月第七張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月樹脂的選擇pH大于等電點時，物質帶負電荷，與陰離子交換劑進行交換；pH小于等電點時，物質帶正電荷，可以與陽離子交換劑進行交換。8第八張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月蛋白質等電點與所用交換劑9第九張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月離子交換技術的應用10第十張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月第二節 離子交換樹脂的結構和種類 離子交換樹脂構成：（1）惰性的不溶性高分子固定骨架，稱載體。（2）與載體共價鍵連接的不能移動的活性基團，又稱功能基團。（3）與功能基團以離子鍵

4、連接的可移動的活性離子，亦稱平衡離子。 如聚苯乙烯磺酸型鈉樹脂。11第十一張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月陽離子交換樹脂分類強酸型樹脂：磺酸型樹脂，功能基團為磺酸根(SO3H)及甲基磺酸根(CH2SO3H)，有好的解離能力。中酸性樹脂：磷酸型樹脂（PO3H2 ）弱酸性樹脂：羧酸型樹脂和酚型樹脂（COOH , ） ，在酸性環境中解離度受到抑制。12第十二張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月陰離子交換樹脂強堿型陰離子交換樹脂： 弱堿型陰離子交換樹脂：活性基團為伯、仲、叔胺基。在堿性環境中解離度受到抑制。中強堿性陰離子交換樹脂：兼有以上兩類活性基團。 13第十三張，PPT共一百零

5、七頁，創作于2022年6月離子交換樹脂功能基團的電離常數 14第十四張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月離子交換樹脂的性能 15第十五張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月兩性樹脂： 蛇籠樹脂(snake-cage resins)16第十六張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月離子交換樹脂的命名第十七張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月離子交換樹脂的命名方式： 離子交換產品的型號以三位阿拉伯數字組成，第一位數字代表產品的分類，第二位數字代表骨架的差異，第三位數字為順序號用以區別基因、交聯劑等的差異。表8-1 樹脂型號中的一、二位數字的意義代號：0 1 2 3 4 5

6、 6分類名稱： 強酸性 弱酸性 強堿性 弱堿性 螫合性 兩性-氧化還原性骨架名稱： 苯乙烯系 丙烯酸系 醋酸系 環氧系 乙烯吡啶系 脲醛系 氯乙烯系 101樹脂？D011樹脂？第十八張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月強酸類 1100號；弱酸類 101200；強堿類201300；弱堿類301400；中強酸類401500交聯度：是合成載體骨架時交聯劑重量的百分數，用“”將樹脂編號與交聯度分開。弱酸101 4其交聯度為4。國內常用樹脂命名：724；732(0017)；71719第十九張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月大孔樹脂在型號前加“D”，凝膠型樹脂的交聯度值可在型號后用“”號

7、連接阿拉伯數字表示。如D0117，表示大孔強酸性丙烯酸系陽離子交換樹脂，其交聯度為7。 國外一些產品用字母C代表陽離子樹脂（C為cation的第一個字母），A代表陰離子樹脂（A為Anion的第一個字母），如Amberlite的IRC和IRA分別為陽樹脂和陰樹脂，亦分別代表陽樹脂和陰樹脂。 第二十張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月離子交換樹脂的骨架(p126)（一）苯乙烯型離子交換樹脂由苯乙烯與二乙烯苯經過氧苯甲酰催化聚合而成。交聯度21第二十一張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月22第二十二張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月（二）丙烯酸型離子交換樹脂丙烯酸型陽離子交

8、換樹脂：是由丙烯酸甲酯與二乙烯苯經過氧苯甲酰催化聚合而成。23第二十三張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月丙烯酸型陽離子交換樹脂110樹脂：丙烯酸甲酯與二乙烯苯聚合而成。724樹脂：它是由甲基丙烯酸、甲基丙烯酸甲酯和二乙烯苯三元共聚而得 。24第二十四張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月（三）陰離子及其它交換樹脂 蛇籠樹脂：脫鹽 螯形樹脂：金屬離子 吸附樹脂 ：“脫色樹脂” 熱再生離子交換樹脂： 25第二十五張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月常用離子交換樹脂特性表 26第二十六張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月第三節 離子交換(p129)RB+ + A+ R

9、A+ + B+離子交換過程：1、A+從溶液擴散到樹脂表面。2、A+從樹脂顆粒表面擴散到顆粒中心。3、平衡離子A+ 與離子B+交換。4、B+從交換中心擴散到離子表面。5、B+ 再擴散到溶液中。27第二十七張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月粒子擴散 速度： 顆粒孔徑、 顆粒半徑、 樹脂交換容量、 離子A+的半徑與電荷、 平衡離子的性質（電荷、半徑）。28第二十八張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月離子交換速度的影響因素：1、樹脂粒度：樹脂粒度大，交換速度慢。2、攪拌速度3、樹脂交聯度：交聯度大，交換速度低。4、離子半徑和離子價：離子每增加一個電荷，交換速度下降一個數量級。5、溫度

10、。6、離子濃度：交換速度隨離子濃度的上升而加快。29第二十九張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月第四節 離子交換樹脂的性能 一、離子交換對樹脂的基本要求二、影響樹脂性能的幾個因素三、主要理化常數的測定30第三十張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月一、離子交換對樹脂的基本要求*(p126)：1、有盡可能大的交換容量。2、有良好的交換選擇性。3、化學性質穩定。4、化學動力學性能好。5、物理性能好。31第三十一張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月二、影響樹脂性能的幾個因素1、離子交換樹脂具有的功能基團性質和數目，數目是其交換容量的基礎。（pH）2、樹脂的交聯度樹脂強度、交換選

11、擇性、動力學性質。3、樹脂骨架和平衡離子。 32第三十二張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月pH對交換容量的影響33第三十三張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月鈉型樹脂與氫型樹脂偶極離子在離子交換過程中的行為是很特殊的，以氨基酸的交換為例：RSO3-Na+ + H3+NRCOO - RSO3- H3+ NRCOO - +Na+ RSO3- H + + H3+NRCOO - RSO3- H3+ NRCOO H鈉鹽樹脂氫型樹脂，被取代的氫離子為羧基所固定，使被吸附的氨基酸不能形成偶極，與樹脂之磺酸基沒有排斥力。與鈉型樹脂相比，氫型樹脂有較大的有效交換容量。 34第三十四張，PPT共

12、一百零七頁，創作于2022年6月三、主要理化常數的測定1、含水量：常用干燥法和離心法測得。2、膨脹度：膨脹系數K膨脹。3濕真密度樹脂充滿水時的密度。4.交換容量:meq/g 樹脂。35第三十五張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月交換容量測定方法(p128)陽離子交換樹脂（氫型）的測定方法：一定量樹脂中加入NaOH溶液，一天或數天后測定NaOH剩余量，從消耗的堿量求交換容量。陰離子交換樹脂（氯型）的測定方法：一定量樹脂裝柱，用過量Na2SO4溶液進行離子交換，測定流出液中氯離子總量，求交換容量。36第三十六張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月滴定曲線：37第三十七張，PPT共一百

13、零七頁，創作于2022年6月滴定曲線381強酸樹脂Amberlite IR-120；2弱酸樹脂Amberlite IRC-84；3強堿樹脂Amberlite IRA-400；4弱堿樹脂Amberlite IR-45第三十八張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月第五節 離子交換的選擇性 影響離子交換選擇性的因素： 離子價與離子水合半徑 離子價與離子濃度 交換環境 樹脂結構 偶極離子排斥39第三十九張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月一、離子的化合價與水合半徑的影響：相對親和力和相對濃度。電荷效應越強的離子與樹脂的親和力越大，而決定電荷效應的主要因素是價電數和離子半徑。40第四十張，

14、PPT共一百零七頁，創作于2022年6月一價陽離子親和力的次序是：H+Li+Na+K+ NH4+ Ag+ 對強堿性樹脂陰離子親和力次序：FOH HCOO ClBrISO4 2-對弱堿性樹脂陰離子親和力次序：FClBr=I=Ac SO4 2- OH。41第四十一張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月離子交換樹脂的性能 42第四十二張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月強酸強堿樹脂對各種離子的選擇系數 H+Li+Na+K+ NH4+ Pb+Cs+Ag+Ti+ 。43第四十三張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月二、離子化合價與離子濃度的影響：設離子平衡后溶液中兩種離子的濃度比是定

15、值P. C1/C2=P在稀溶液(C2較小)中，樹脂吸附高價離子的傾向很大。 44第四十四張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月舉例例如：當k=2 P=1 m1+m2=1 C2=0.1mol/L Z2=1時若Z1=2 則m10.9，m20.1若Z1=3 則m10.97，m20.03在較稀的溶液中，樹脂幾乎僅吸附高價離子。45第四十五張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月三、交換環境的影響1、溶液的pH：解離度、交換容量、選擇性。2、離子強度：交換容量、選擇性、交換速度3、有機溶劑：能降低有機離子的解離程度。46第四十六張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月四、樹脂結構的影響（一

16、）樹脂載體的交聯度：交聯度上升，膨脹度下降，K值增大，樹脂潛在的選擇能力提高。空隙大小的影響，即膨脹度增大，促使樹脂吸附量增加。選擇性的影響，膨脹度增大時，K值減小，促使樹脂吸附量降低；膨脹系數值很小時，空間效應占主要地位。膨脹系數增大到一定值時，選擇性占主要地位。47第四十七張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月圖8.14 用磺酸基樹脂CBC從含有HCl的溶液中，吸附土霉素的量與樹脂膨脹度之間的關系1-0.1N HCl；2-0.25N HCl；3-0.5N HCl；4-1.0 N HCl;原始溶液中士霉素濃度為0.4mg/ml;m-對土霉素吸附量meq/g第四十八張，PPT共一百零七頁

17、，創作于2022年6月膨脹度與選擇性的關系49圖8.12 在甲基丙烯酸丙烯酰胺樹脂，鏈霉素與鈉離子交換等溫線與樹脂膨脹的關系1膨脹系數1.9；2膨脹系數3；3膨脹系數4.5；4膨脹系數5.2；m1樹脂對鏈霉素吸附量，meq/g；m2=mm1；m樹脂的最大交換容量，meq/g；C1，C2溶液中鏈霉素和鈉離子濃度，meq/ml第四十九張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月（二）輔助力：離子交換樹脂與被吸附離子間的作用力除靜電力外，還存在一種輔助力。無機離子交換常數K值多在110之間。有機離子交換時，K值可高達102103。（三）其它結合力：某些樹脂對金屬離子有特殊的親和力。 羧酸型樹脂 50

18、第五十張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月 五、偶極離子排斥作用：偶極離子RSO3-Na+ + H3+NRCOO - RSO3- H3+ NRCOO - +Na+ RSO3- H + + H3+NRCOO - RSO3- H3+ NRCOO H鈉鹽樹脂氫型樹脂與鈉型樹脂相比，氫型樹脂有較大的有效交換容量。 51第五十一張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月氫型與鈉型磺酸基樹脂吸附氨基酸比較 52第五十二張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月第六節 離子交換的操作一、樹脂的選擇(p129)目的物是弱酸性或弱堿性的小分子物質時，宜選用強酸強堿樹脂（氨基酸的分離）。蛋白質、酶和其

19、它生物大分子的分離多采用弱堿或弱酸性樹脂，減少生物大分子的變性，利于洗脫，提高選擇性。 53第五十三張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月 二、樹脂的處理和再生(p130) 1、 外觀特征透明或半透明；顆粒圓整，粒度均勻，強度。2、 樹脂的預處理（1） 物理處理：去雜，過篩。（2） 化學處理：用810倍的1mol/L 鹽酸或氫氧化鈉溶液交替浸泡。 54第五十四張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月氨基酸分離前樹脂的處理55第五十五張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月不同類型樹脂的處理56第五十六張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月樹脂的再生 樹脂再生：使用過的樹脂重

20、新獲得使用性能的處理過程。 再生過程：（1）去雜，大量水沖洗，除去物理吸附的雜質。（2）用酸、堿處理除去與功能基團結合的雜質。 (3) 轉型：57第五十七張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月三、加樣與洗脫交換：靜態交換 動態交換洗脫：洗脫方式：分靜態洗脫及動態洗脫兩種，pH及離子強度改變。洗脫液：酸、堿、鹽。58第五十八張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月酸、堿洗脫液旨在改變吸附物的電荷或改變樹脂吸附基團的解離狀態，以消除靜電結合力，迫使目的物被釋放出來；鹽類洗脫液是通過高濃度的同種電荷的離子與目的物競爭樹脂上的活性基團，使吸附物解離。 59第五十九張，PPT共一百零七頁，創作

21、于2022年6月洗脫方式動態洗脫： 1、 溶液pH及離子強度不變。 2、分階段改變溶液pH及離子強度。 3、連續改變溶液pH及離子強度。梯度洗脫：自動化的梯度儀60第六十張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月梯度洗脫梯度混合器:A瓶為低濃度鹽溶液 B瓶為高濃度鹽溶液C=CA（CACB）VAA/AB 61第六十一張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月四、離子交換層析的注意事項五、離子交換層析中常見問題的分析第六十二張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月第七節 離子交換層析的應用在制藥工業中的應用(p136)分離純化氨基酸制備無鹽水制備離子交換層析分離鏈霉素(p142)離子交換層

22、析分離慶大霉素63第六十三張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月第七節 應用實例分離純化氨基酸制備無鹽水制備64第六十四張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月氨基酸制備、分離豬血粉水解制備6種氨基酸:65第六十五張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月無鹽水制備無鹽水制備是利用氫型陽離子交換樹脂和羥型陰離子交換樹脂的組合以除去水中所有的離子，其反應式如下：66第六十六張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月無鹽水制備陽離子交換樹脂用強酸性樹脂，陰離子交換樹脂可以用強堿或弱堿樹脂。強酸弱堿 或 強酸強堿；當對水質要求高時，經過一次組合脫鹽，還達不到要求，可采用兩次組合:強酸弱

23、堿強酸強堿；強酸強堿混合床。67第六十七張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月混合床混合床系將陽、陰兩種樹脂混合而成，脫鹽效果好。混合床中所發生的反應:68第六十八張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月混合床無鹽水69圖8.20 混合床的操作(a)為水制備時的情形；(b)為制備結束，用水逆流沖洗。陽、陰樹脂根據比重不同分層，一般陽樹脂較重在下面，陰樹脂在上面；(c)為上部、下部同時通入堿、酸再生，廢液自中間排出；(d)為再生結束，通入空氣，將陽、陰樹脂混合、準備制水 第六十九張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月混合床抗生素脫鹽經過第一柱（陽樹脂）時，溶液變酸，而經過第二柱（

24、陰樹脂）時，溶液又變堿。鏈霉素脫鹽：強酸125和弱堿3114樹脂組成混合床，脫鹽效果較好。70第七十張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月離子交換層析分離鏈霉素(p142)離子交換層析分離慶大霉素第七十一張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月第八節 新型離子交換劑 一、大孔、均孔樹脂（一）大孔型離子交換樹脂（macro porous ,MP）（二）均孔型離子交換樹脂 ( IR )二、多糖基離子交換劑（一）離子交換纖維素（二）葡聚糖凝膠離子交換劑72第七十二張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月大孔型與凝膠型離子交換樹脂物理性質73第七十三張，PPT共一百零七頁，創作于2022

25、年6月（一）大孔型離子交換樹脂的特征 （1）載體骨架交聯度高。（2）孔徑大。（3）表面積大，表面吸附強，對大分子物質的交換容量大。（4）孔隙率大。74第七十四張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月大孔型離子交換樹脂主要特性 75第七十五張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月（二）均孔型離子交換樹脂主要是陰離子交換樹脂。骨架的交聯度比較均勻。代號為IP或IR。交聯度均勻，孔徑大小一致，交換容量都較高，膨脹度、機械強度好。76第七十六張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月二、多糖基離子交換劑 生物大分子對離子交換的要求: 固相載體具有親水性和較大的交換空間; 對其生物活性有穩定作

26、用，并便于洗脫。生物來源穩定的高聚物多糖作載體。多糖基離子交換劑可以分為： 離子交換纖維素 葡聚糖離子交換劑 77第七十七張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月（一）離子交換纖維素特點：(1)開放的長鏈骨架，親水性強，表面積大，易吸附大分子。(2)交換基團稀疏，對大分子的實際交換容量大。 (3)吸附力弱，交換和洗脫條件緩和，不宜變性。(4)分辨率高。78第七十八張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月常用的離子交換纖維素羧甲基纖維素（CM-C）：弱酸性陽離子交換纖維素，pK=3.6 。二乙基氨基乙基纖維素（DEAE-C）：強堿型陰離子交換纖維素，pK=9.1。79第七十九張，PPT共

27、一百零七頁，創作于2022年6月80第八十張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月離子交換纖維素的制備 81第八十一張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月操作注意點可靜態交換，也可動態交換。交換基團密度低、吸附力弱。鹽濃度不宜高（控制在0.0010.02 mol/L）。 82第八十二張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月離子交換纖維素的選擇解離曲線83第八十三張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月離子交換纖維素的解吸 洗脫緩和。升高環境的pH、降低pH或是增加離子強度都能將被吸附物質洗脫下來。 84第八十四張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月離子交換纖維素的處理和

28、再生 酸堿濃度要適當降低，處理時間也從4h縮短為0.31h。以交換緩沖液平衡。注意：不耐酸，用酸處理的濃度和時間須小心控制。85第八十五張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月（二）葡聚糖凝膠離子交換劑是將活性交換基團連接于葡聚糖凝膠上制成的各種交換劑 。命名:交換活性基團-Sephadex C (A)-編號。具有離子交換和分子篩的雙重作用，對生物分子有很高的分辨率。 86第八十六張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月常用的離子交換葡聚糖87第八十七張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月瓊脂糖凝膠離子交換劑瓊脂糖凝膠上引入功能基DEAE sepharose CL-6BCM se

29、pharose CL-6BDEAEToyopearlCMToyopearl88第八十八張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月多糖基離子交換劑應用尿激酶分離純化89第八十九張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月補充離子交換聚焦色譜 色譜聚焦（chromatofocusing）: 是一種高分辨的新型的蛋白質純化技術。是根據蛋白質的等電點，結合離子交換技術的大容量色譜，能分離幾百毫克蛋白質樣品，洗脫峰被聚焦效應濃縮，分辨率高。適用水溶性的兩性分子，如蛋白質、酶、多肽、核酸等。 90第九十張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月一、色譜聚焦的原理（一）自動形成pH梯度。（二）蛋白質的色

30、譜行為（三）聚焦效應 91第九十一張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月PH梯度溶液的形成在聚焦層析中，當洗脫液流進多緩沖交換劑時，由于交換劑帶有緩沖能力的電荷基團，故PH梯度溶液可以自動形成。92第九十二張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月PBE94柱聚焦色譜的pH梯度93（1）柱內每點的PH值從高到低逐漸下降。（2）從層析柱頂部到底部就形成了PH69的梯度。（3）PH梯度會逐漸向下遷移。（4）底部流出液的PH由9逐漸降至6。第九十三張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月蛋白質的色譜行為當柱中PH低于蛋白質的PI時，蛋白質帶正電荷，不與陰離于交換劑結合,隨洗脫液向下移動

31、。當蛋白質移動至環境PH高于其PI時，蛋白質由帶正電荷變為帶負電荷，并與陰離子交換劑結合。由于洗脫劑的通過，蛋白質周圍的環境PH 再次低于PI時，它又帶正電荷，并從交換劑解吸下來而下降 。移至pH大于PI時又重新結合，直至蛋白質從柱下流出。 不同蛋白質具有不同的等電點，在被離子交換劑結合以前，移動距離是不同的，洗脫出來的先后次序是按等電點排列的。94第九十四張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月聚焦效應當一種蛋白質在柱上隨洗脫液下移至等電點處時，移動速度明顯減慢。此時加上相同的第二個樣品，它將以洗脫液移動的速度下降，直至追到正在慢移的第一個樣品（聚焦）。如果加入的第二個樣品的等電點比第一個樣品高，它可以越過第一個樣品區先被洗脫出來。 95第九十五張，PPT共一百零七頁，創作于2022年6月三、多緩沖交換劑 PBE94是以交聯瓊脂糖6B（Sepharose 6B）為載體，并在糖基上通過醚鍵偶合上配基制成的多緩沖交換劑，是陰離子交換